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TRPM7通道过表达细胞株的建立、鉴定及其功能的初步研究
1
作者
肖楚瑶
陈少锐
+3 位作者
余洋
章艳
刘培庆
蒋建敏
《中国药科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第5期462-466,共5页
通过瞬时转染TRPM7-eGFP质粒至人胚胎肾细胞HEK293T细胞建立瞬时受体电位Melastatin的7型通道(TRPM7通道)过表达体系并利用此体系对通道特性进行研究。经荧光显微镜观察,转染率可达30%~40%,RT-PCR及Western印迹结果显示转染后的细胞在...
通过瞬时转染TRPM7-eGFP质粒至人胚胎肾细胞HEK293T细胞建立瞬时受体电位Melastatin的7型通道(TRPM7通道)过表达体系并利用此体系对通道特性进行研究。经荧光显微镜观察,转染率可达30%~40%,RT-PCR及Western印迹结果显示转染后的细胞在相应的基因及蛋白水平上均有明显的表达。膜片钳结果显示转染后全细胞电流可达2 800 pA,pH 7.4至pH 4.0时通道内向电流显著增加,200μmol/L二苯硼酸-2-氨基乙酯(2-APB)显著抑制通道外向电流。结果表明瞬时转染HEK293T细胞的TRPM7过表达体系成功构建,细胞外酸性条件及TRPM7通道抑制剂2-APB对通道电流有不同影响,提示该通道功能可受到多种因素的影响。
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关键词
瞬时转染
TRPM7-eGFP质粒
TRPM7通道
膜片钳
二苯硼酸
2
-氨基乙酯
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职称材料
题名
TRPM7通道过表达细胞株的建立、鉴定及其功能的初步研究
1
作者
肖楚瑶
陈少锐
余洋
章艳
刘培庆
蒋建敏
机构
中山大学药学院药理与毒理学实验室
出处
《中国药科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第5期462-466,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.30670837)
中加(NSFC-CIHR)健康研究合作计划资助项目(No.30811120434)~~
文摘
通过瞬时转染TRPM7-eGFP质粒至人胚胎肾细胞HEK293T细胞建立瞬时受体电位Melastatin的7型通道(TRPM7通道)过表达体系并利用此体系对通道特性进行研究。经荧光显微镜观察,转染率可达30%~40%,RT-PCR及Western印迹结果显示转染后的细胞在相应的基因及蛋白水平上均有明显的表达。膜片钳结果显示转染后全细胞电流可达2 800 pA,pH 7.4至pH 4.0时通道内向电流显著增加,200μmol/L二苯硼酸-2-氨基乙酯(2-APB)显著抑制通道外向电流。结果表明瞬时转染HEK293T细胞的TRPM7过表达体系成功构建,细胞外酸性条件及TRPM7通道抑制剂2-APB对通道电流有不同影响,提示该通道功能可受到多种因素的影响。
关键词
瞬时转染
TRPM7-eGFP质粒
TRPM7通道
膜片钳
二苯硼酸
2
-氨基乙酯
Keywords
transient transfection
TRPM7-eGFP plasmid
TRPM7 channel
patch clamp
2-aminoethyl dipheny] borate
分类号
R363 [医药卫生—病理学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
TRPM7通道过表达细胞株的建立、鉴定及其功能的初步研究
肖楚瑶
陈少锐
余洋
章艳
刘培庆
蒋建敏
《中国药科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
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