浅谈复方中草药制剂对Th1-Th2细胞平衡的影响

结合Th1-Th2细胞平衡的理论,中医药领域开展了相关的试验研究,并已取得了一定的成果。本文在综述前人研究成果基础上,提出了加强中草药免疫药理学机理研究的必要性,中草药复方制剂对免疫平衡影响的研究可能是开发出困扰养殖业持续快速发展疾病的中草药复方制剂的突破口。

针灸对IL2-IFN-NKC调节网与其相关网络MΦ-IL1-Th的效应——针灸并施对荷瘤(S_(37))小鼠相关网络的效应

目的 以荷瘤 (S37)小鼠为模型 ,进一步验证针灸并施的抗肿瘤和对IL2 IFN NKC调节网的相关网络MΦ IL1 Th的效应。方法 针灸荷瘤 (S37)小鼠的大椎、后海二穴后 ,取样 ,以吞噬中性红比色分析法 ,MTT比色分析法和单抗SPA Ig花环法等观察针灸对MΦ、IL1、Th及S37肉瘤的影响。结果 荷瘤针灸并施组、荷瘤艾灸组、荷瘤针刺组的小鼠腹腔MΦ吞噬功能、IL1含量及Th细胞 (L3T4)百分率均较荷瘤对照组显著增高 ;除针刺组外 ,其余两实验组均对S37肉瘤有明显抑制作用。另外 ,针灸组和艾灸组IL1含量均较针刺组显著增高 ;针灸组Th细胞(L3T4)较针刺组显著增高。结论 针灸荷瘤小鼠大椎、后海二穴 ,具有正向调节IL2 IFN NKC网的相关网络MΦ IL1 Th和抑瘤 (S37)作用。艾灸也显示出相似的效果。

RAI1脱敏干预影响变应性鼻炎大鼠模型ECP表达和Th1-Th2分化的机制

目的探究探针RAI1脱敏干预影响变应性鼻炎大鼠模型ECP表达和Th1-Th2分化的机制方法卵白蛋白(OVA)诱导雌性Sprague-dawley大鼠构建过敏性鼻炎(AR)模型。并进行构建沉默RAI1 mRNA质粒载体,脑内注射至AR模型大鼠体内。通过蛋白质印迹法检测Th1-Th2相关因子的蛋白表达情况;通过qRT-PCR分析各组大鼠中维甲酸诱导蛋白RAI1的mRNA表达情况;通过记录大鼠鼻炎行为评估变应性鼻炎症状;通过酶联免疫吸附试验检测各组大鼠血清中ECP、IgE含量。结果大鼠搔鼻挠嘴、打喷嚏行为AR模型组较对照组、RAI1干预组频繁(P<0.05),说明AR模型建立成功。RAI1干预组(1.02±0.01)较AR模型组(2.85±0.25)、对照组(2.69±0.11)相比,RAI1 mRNA表达降低(P<0.05),说明病毒载体构建成功,RAI1蛋白表达受到抑制。Th1相关因子IL-2、IFN-γ的蛋白表达AR模型组较对照组、RAI1干预组低(P<0.05)。Th2相关因子IL-4、IL-5的蛋白表达AR模型组较对照组、RAI1干预组高(P<0.05)。经酶联免疫吸附检测ECP、IgE含量,AR模型组(3.11±0.23、29.51±3.64)较对照组(1.62±0.18、13.72±2.68)、RAI1干预组(1.85±0.14、17.66±2.16)升高(P<0.05)。结论RAI1脱敏干预会降低ECP蛋白表达,平衡Th1-Th2生物功能,对变应性鼻炎具有治疗效果,减轻鼻炎症状。

淫羊藿总黄酮(EF)对老龄大鼠Th1、Th2、Th3细胞的调节作用

目的:探讨淫羊藿总黄酮(EF)对衰老大鼠脾淋巴细胞Th1、Th2、Th3各类细胞因子的调节作用。方法:采用流式细胞仪,监测比较老龄大鼠脾脏淋巴细胞凋亡率;采用Th1、Th2、Th3 cDNA芯片,分别检测正常青年组(YC)、老龄大鼠组(OM)、EF组、NF-KB阻断剂组(PDTC)、PDTC+EF组的Th1、Th2、Th3,各类细胞因子信号差异表达。结果:①老龄大鼠普遍存在淋巴细胞过度凋亡现象,EF可显著抑制这种过度凋亡状态。②YC组,Th1、Th2、Th3类细胞因子之间处于平衡状态(P>0.05);OM组Th1、Th2、Th3类细胞因子表达比YC组增高,呈Th2、Th3类细胞因子优势应答(P<0.05)。③EF组Th1、Th2、Th3类细胞因子均较OM组明显降低(P<0.05),其趋势与YC组近似,并且Th1、Th2、Th3类细胞恢复平衡。④NFKB通路抑制后(PDTC组),Th1、Th2、Th3类细胞因子平衡失调,Th2优势更加明显(P<0.05);而PDTC+EF组,Th1、Th2、Th3各组表达值则较PDTC组下调,其组内Th1和Th2也重新达到一种相对平衡状态。结论:老龄大鼠脾淋巴细胞过度凋亡,Th1、Th2、Th3类细胞因子分泌增高,Th2、Th3类细胞因子优势应答;EF可以抑制淋巴细胞过度凋亡,校正老龄大鼠Th1、Th2、Th3类细胞因子之间的比例失衡,重塑Th1-Th2-Th3细胞免疫调节网络的良性平衡。

支气管哮喘患者外周血Th1、Th2与Th17细胞表达水平及临床意义

目的探讨外周血Th1、Th2与Th17细胞在支气管哮喘患者中的表达水平及临床意义。方法选取2015年1月—2016年2月诊治的支气管哮喘40例,均为急性发作期,治疗1周后为缓解期,选取同期健康人40例作为对照组。检测支气管哮喘急性发作期、缓解期和对照组外周血Th1、Th2与Th17细胞水平,观察外周血中干扰素(IFN)-γ、白介素(IL)-4及IL-17的表达情况。结果支气管哮喘组急性发作期和缓解期Th1、Th1/Th2、IFN-γ的表达水平低于对照组,且急性发作期低于缓解期(P<0.05);支气管哮喘组急性发作期和缓解期Th2、Th17、IL-4、IL-17表达水平高于对照组,且急性发作期高于缓解期(P<0.05)。结论支气管哮喘患者外周血Th1、Th2与Th17细胞表达水平失衡,导致IFN-γ、IL-4及IL-17异常分泌,可能参与支气管哮喘的发病。

紫草素对特应性皮炎小鼠TSLP/OX40L通路及Th1/Th2平衡的影响

目的探究紫草素对特应性皮炎(AD)小鼠胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)/OX40配体(OX40L)通路及辅助性T细胞(Th)1/Th2平衡的影响。方法采用局部外涂2,4-二硝基氟苯(DNFB)法制备AD小鼠模型。采用随机数字表法将模型小鼠分为模型组,紫草素低(20 mg/kg)、中(30 mg/kg)、高(40 mg/kg)剂量组和阳性对照组(泼尼松龙,10 mg/kg),每组15只;另取15只作为正常对照组。各给药组大鼠按10 mL/kg灌胃相应药物,模型组和正常对照组灌胃等体积溶剂,每日1次,连续15 d。分别于给药后第5、10和15天观察小鼠搔抓行为;于给药后第7、15天评价小鼠皮损状况;末次给药结束后,HE染色观察小鼠皮损组织病理学变化;流式细胞术检测小鼠外周血中Th1/Th2比例;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠血清中TSLP、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-4和干扰素(IFN)-γ水平;Western blot法检测小鼠皮损组织TSLP和OX40L蛋白表达水平。结果与正常对照组相比,模型组小鼠搔抓行为增加,皮肤炎性损伤加重;皮损组织中表皮和真皮区域均有密集的炎性细胞浸润,表皮增厚;外周血Th2细胞、TSLP、TNF-α和IL-4水平以及皮损组织TSLP和OX40L蛋白表达水平显著升高(P<0.05),外周血Th1细胞、Th1/Th2比例和IFN-γ水平显著下降(P<0.05)。与模型组相比,紫草素低、中、高剂量组小鼠第5、10、15天的搔抓行为减少,第7、15天皮肤炎性损伤依次减轻(P<0.05);小鼠表皮和真皮区域炎性细胞浸润和表皮增厚依次减轻,外周血Th2细胞、TSLP、TNF-α和IL-4水平以及皮损组织TSLP和OX40L蛋白表达水平依次降低(P<0.05),Th1细胞、Th1/Th2比例和IFN-γ水平依次升高(P<0.05)。结论紫草素可能通过抑制TSLP/OX40L通路维持AD小鼠外周血中Th1/Th2平衡,改善皮肤炎性损伤。

新生儿低氧缺血性脑病Th_2细胞功能的检测

①目的 了解低氧缺血性脑病 (HIE)新生儿Th2 细胞功能变化及其与HIE间的关系。②方法 采用ELISA法和单克隆抗体间接免疫荧光法 ,检测 4 6例HIE病儿不同病期血浆和外周血单个核细胞 (PBMC)体外产生白细胞介素 (IL) 6 ,IL 8,IL 10水平和T细胞IL 2受体 (IL 2R)表达率 ,并与正常足月新生儿脐血检测结果进行对照。③结果 HIE病程第 1天 (D1)血浆及PBMC体外产生IL 6 ,IL 8和IL 10水平明显高于正常对照组 (z =4 .6 5 3～ 5 .85 6 ,P <0 .0 1) ;中重度及并发多器官功能障碍综合征 (MODS)的HIE病儿血浆及PBMC体外产生IL 6 ,IL 8水平分别高于轻度及无MODS病儿 (z =2 .2 2 8～ 2 .70 1,P <0 .0 5 ;z =2 .877～ 4 .187,P <0 .0 1) ,而IL 10水平无显著性差异 (z =0 .4 5 0～ 1.85 0 ,P >0 .0 5 ) ;T细胞IL 2R表达率明显低于正常对照组 (t=3.5 6 1,P <0 .0 1) ,中重度HIE病儿尤著 (t′ =4 .194 ,P <0 .0 1)。血浆IL 6 ,IL 8,IL 10水平间呈显著正相关 (r =0 .6 2 9～ 0 .74 6 ,P <0 .0 1) ;血浆及PBMC体外产生IL 6 ,IL 8水平与血清脑型磷酸激酶水平呈显著正相关 (r =0 .4 89～ 0 .6 91,P <0 .0 5 ,0 .0 1) ,与T细胞IL 2R表达率呈显著负相关 (r=- 0 .394～ - 0 .4 5 1,P <0 .0 5 ,0 .0 1)。病程第 3天 (D3)

敲除H2-eb1基因建立的变应性鼻炎模型小鼠

背景:HLA-DRB1与变应性鼻炎发病发病有关,构建HLA-DRB1基因敲除动物模型,不仅为阐明变应性鼻炎发病机制、同时也为相关疾病发病机制的阐明提供了良好的途径,然而未查阅到利用H2-eb1基因敲除小鼠进行相关研究的报道。目的:构建HLA-DRB1基因敲除动物模型。方法:经杂合子小鼠近亲繁殖,获得纯合子、野生型和杂合子小鼠。经基因及蛋白鉴定确认,采用随机数字表法选取8周龄雌性野生型(H2-eb1+/+)小鼠12只和H2-eb1-/-小鼠12只,将12只H2-eb1+/+小鼠和12只H2-eb1-/-小鼠以卵清蛋白致敏激发,建立小鼠变应性鼻炎模型。将另12只H2-eb1+/+小鼠以PBS代替卵清蛋白激发作为对照。结果与结论:与对照小鼠相比,变应性鼻炎模型小鼠血清中卵清蛋白IgE、白细胞介素4水平明显升高,γ-干扰素水平明显降低;而与基因敲除野生型小鼠(H2-eb1+/+)相比,基因敲除H2-eb1-/-变应性鼻炎小鼠IgE、白细胞介素4水平较低,γ-干扰素水平较高。提示H2-eb1基因在变应性鼻炎的发病机制中的Th1/Th2失衡有重要调节作用。

扶正抗癌方联合调强放疗干预老年性食管癌的临床疗效及对辅助性T细胞1、辅助性T细胞2细胞因子的影响

目的观察扶正抗癌方联合调强放疗干预老年性食管癌的临床疗效及对辅助性T细胞(Th)1、Th2细胞因子的影响。方法将76例老年性食管癌患者按照随机数字表法分为2组。对照组38例予调强放疗;治疗组38例在对照组治疗基础上加用扶正抗癌方口服,疗程6周。评价2组近期疗效,比较2组治疗前后血清肿瘤标志物[糖类抗原125(CA125)、糖类抗原19-9(CA19-9)、癌胚抗原(CEA)、鳞状上皮细胞癌抗原(SCC-Ag)]、Th1和Th2细胞因子[白细胞介素2(IL-2)、干扰素γ(IFN-γ)、IL-4、IL-10]水平变化,记录2组毒副作用发生情况。结果治疗组近期有效率78.95%,对照组近期有效率60.53%,治疗组近期疗效优于对照组(P<0.05)。2组治疗后血清肿瘤标志物CA125、CA19-9、CEA、SCC-Ag水平均降低(P<0.05),且治疗组治疗后CA125、CA19-9、CEA、SCC-Ag水平均低于对照组(P<0.05)。治疗组治疗后IL-2、IFN-γ水平升高(P<0.05),IL-4、IL-10水平降低(P<0.05);对照组治疗后IL-2、IFN-γ水平降低(P<0.05),IL-4、IL-10水平升高(P<0.05)。治疗组治疗后Th1/Th2细胞因子免疫失衡状态改善优于对照组(P<0.05)。治疗组白细胞计数减少、血小板计数减少、呕吐、放射性肺炎、放射性食管炎、肝肾功能损害发生率均低于对照组(P<0.05)。结论扶正抗癌方联合调强放疗干预老年性食管癌患者的抗癌疗效确切,利于降低肿瘤标志物的水平,纠正Th1/Th2细胞因子免疫失衡状态,毒副作用发生率较低,值得临床推广。

肝细胞癌患者肝动脉化疗栓塞术后外周血长链非编码RNA TINCR水平与Th1/Th2平衡及预后的相关性分析

目的探讨分析外周血长链非编码RNA(lncRNA)TINCR表达水平与肝细胞癌(HCC)患者行肝动脉化疗栓塞术(TACE)术后辅助性T淋巴细胞1(Th1)/Th2平衡及预后的相关性。方法回顾性选取2015年3月—2017年3月在湖北省武汉市金银潭医院行TACE治疗的HCC患者85例,并随机抽取在本院体检的健康志愿者30例作为对照组。检测HCC患者TACE完成后7 d及对照组外周血lncRNA TINCR表达情况、Th1/Th2细胞因子表达情况。计量资料组间比较采用t检验,计数资料组间比较采用χ2检验,等级资料组间比较采用Kruskal-Wallis H检验。lncRNA TINCR相对表达量与Th1/Th2细胞因子的相关性采用Spearman相关性分析。lncRNA TINCR相对表达量对生存情况的影响采用Kaplan-Meier生存曲线分析,生存曲线比较采用log-rank检验。结果HCC组患者外周血lncRN TINCR相对表达量(1.784±0.429)高于对照组(0.926±0.263),差异有统计学意义(t=10.277,P<0.05)。lncRNA TINCR相对表达与HCC患者血管侵犯、肿瘤大小、肿瘤分期及血清AFP水平有关(t值分别为3.958、4.499、3.361、4.949,P值分别为<0.001、<0.001、0.001、<0.001)。HCC组患者血清IFNγ、IL-2水平明显低于对照组[(13.48±5.20)pg/ml vs(27.49±7.21)pg/ml、(21.89±6.45)pg/ml vs(32.05±7.89)pg/ml,t值分别为11.408、6.986,P值均<0.05],而IL-4、IL-10水平明显高于对照组[(13.73±3.35)pg/ml vs(9.36±2.73)pg/ml、(12.75±2.74)pg/ml vs(8.93±2.16)pg/ml,t值分别为6.426、6.909,P值均<0.05]。HCC患者外周血lncRNA TINCR相对表达量与血清IFNγ、IL-2水平呈负相关(r值分别为-3.164、-3.270,P值均<0.001),与患者血清IL-4、IL-10呈正相关(r值分别为2.963、3.044,P值分别为0.007、<0.001)。以lncRNA TINCR相对表达量≥1.700作为高表达,85例HCC患者中lncRNA TINCR高表达患者47例,低表达患者38例。log-rank检验结果显示,lncRNA TINCR低表达患者生存情况明显优于高表达患者(χ2=4.182,P<0.05)。结论HCC患者行TACE后外周血lncRNA TINCR表达明显高于健康人群,lncRNA TINCR表达与患者病理特征及Th1/Th2免疫平衡有密切联系,可作为患者生存预后的潜在预测指标之一。

灭荨汤联合窄谱中波紫外线照射对血虚风燥型慢性荨麻疹患者皮损症状、血液流变学及辅助性T细胞1/2平衡的影响

目的观察灭荨汤联合窄谱中波紫外线照射对血虚风燥型慢性荨麻疹患者皮损症状、血液流变学及辅助性T细胞1/辅助性T细胞2(Th1/Th2)平衡的影响。方法将112例血虚风燥型慢性荨麻疹患者按照随机数字表法分为2组。对照组56例予窄谱中波紫外线照射,治疗组56例在对照组治疗基础上联合灭荨汤治疗。2组均治疗1个月。比较2组治疗前及治疗2周、1个月症状与体征评分、血液流变学指标[全血黏度(高切)(HSV)、全血黏度(低切)(LSV)、红细胞沉降率(ESR)、纤维蛋白原(FIB)]、血清Th1/Th2细胞因子[白细胞介素10(IL-10)、IL-18、IL-4、干扰素γ(IFN-γ)]水平,并统计疗效及不良反应发生情况。结果治疗组总有效率92.86%(52/56),对照组总有效率76.79%(43/56),治疗组疗效优于对照组(P<0.05)。治疗2周、1个月2组各症状、体征评分及总分均较本组治疗前降低(P<0.05),治疗1个月均较本组治疗2周降低(P<0.05),且治疗2周、1个月治疗组均低于对照组同期(P<0.05)。治疗2周、1个月后治疗组HSV、LSV、ESR、FIB水平均较本组治疗前降低(P<0.05),治疗1个月均较本组治疗2周降低(P<0.05),且治疗2周、1个月治疗组均低于对照组同期(P<0.05)。治疗2周、1个月2组血清IL-10、IL-4水平均较本组治疗前降低(P<0.05),IL-18、IFN-γ水平均升高(P<0.05),治疗1个月2组血清IL-10、IL-4水平均较本组治疗2周降低(P<0.05),IL-18、IFN-γ水平均较本组治疗2周升高(P<0.05),且治疗2周、1个月治疗组血清IL-10、IL-4水平均低于对照组同期(P<0.05),IL-18、IFN-γ水平均高于对照组同期(P<0.05)。2组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论灭荨汤联合窄谱中波紫外线照射治疗血虚风燥型慢性荨麻疹可减轻皮损及瘙痒症状,改善血液流变学,调节Th1/Th2细胞平衡,提高疗效,且安全性好。

白细胞介素12对耐药结核大鼠模型的影响

目的观察、评价白细胞介素12(IL-12)对耐药结核大鼠模型的脏器菌落变化和细胞因子水平的影响。方法将60只SD雌性大鼠经尾静脉感染结核分枝杆菌耐利福平株,每只10~6 CFU,制成耐药结核大鼠模型,随机分为对照组和IL-12组,每组30只。给予PBS或IL-12治疗7 d,ELISA法检测血清IFN-γ水平、流式细胞术行T细胞亚群检测和平板计数法测定器官菌落计数,观察治疗后生存率。结果 IL-12组大鼠1只死亡,肺、肝、脾菌落数分别为(254±98)×10~5、(5±2)×10~5和(16±4)×10~5 CFU/ml,IFN-γ(1125±378)pg/ml;PBS组10只死亡,肺、肝、脾菌落数分别为(682±304)×10~5、(28±17)×10~5和(108±35)×10~5 CFU/ml,IFN-γ(532±198)pg/ml,两组比较差异有显著性。淋巴细胞亚群测定显示IL-12促进Th1细胞反应,改变了Th1/Th2平衡,两组比较差异有显著性。结论 IL-12诱导IFN-γ产生,促进Th1细胞反应,改变了Th1/Th2平衡,对结核分枝杆菌感染大鼠产生保护效应。

疏肝养心针刺法对选择性5-羟色胺再摄取抑制剂治疗抑郁症的增效作用及其对炎性细胞因子的影响研究

目的探讨疏肝养心针刺法对选择性5-羟色胺再摄取抑制剂(SSRIs)治疗抑郁症的增效作用以及其对血清5-羟色胺(5-HT)及辅助性T1细胞(Th1细胞)/辅助性T2细胞(Th2细胞)分泌的炎性细胞因子的影响。方法选取2013年1—12月杭州市第七人民医院精神科住院的抑郁症患者120例为研究对象,采用随机数字表法分为药物组60例和针药组60例,另选取同时期体检健康者60例为正常组。药物组和针药组患者分别于治疗前及治疗后1、2、4、6周评定蒙哥马利抑郁评定量表(MADRS)评分,治疗后1、2、4、6周评定抗抑郁药副反应量表(SERS)评分,评估临床疗效及不良反应情况,正常组、药物组和针药组分别于治疗前、治疗后6周检测血清5-HT及白介素(IL)-1β、IL-6、IL-4、IL-10水平。结果治疗前,药物组与针药组患者MADRS评分比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后1、2、4、6周,针药组MADRS评分较药物组降低(P<0.05)。治疗后1、2、4、6周,针药组SERS评分较药物组降低(P<0.05)。治疗前,药物组和针药组血清5-HT、IL-4、IL-10水平较正常组降低,IL-1β、IL-6水平较正常组升高(P<0.05);药物组与针药组血清5-HT、IL-1β、IL-6、IL-4、IL-10水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,针药组血清5-HT、IL-4、IL-10水平较药物组升高,血清IL-6水平较药物组降低(P<0.05)。结论疏肝养心针刺法能够快速、有效地增强SSRIs治疗抑郁症的临床疗效、减轻其不良反应,并能有效调节血清5-HT及Th1细胞/Th2细胞分泌的炎性细胞因子的失衡。

匹多莫德治疗过敏性鼻炎临床观察

目的探讨匹多莫德对过敏性鼻炎患者外周血清中Th1/Th2细胞因子表达的影响及其疗效。方法选取2012年3月—2014年7月收治的过敏性鼻炎140例,随机分为观察组和对照组,每组70例。两组均给予基础治疗加鼻腔冲洗,观察组在此基础上给予口服匹多莫德治疗。观察两组治疗前后外周血清中Th1/Th2细胞因子表达变化情况及临床疗效。结果两组治疗后血清白介素-4(IL-4)、IL-5浓度低于治疗前,且观察组低于对照组(P<0.05,P<0.01);两组治疗后血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-12浓度高于治疗前,且观察组高于对照组(P<0.05,P<0.01)。两组治疗后临床症状及体征评分低于治疗前,且观察组低于对照组,观察组伴随症状恢复时间明显短于对照组(P<0.05,P<0.01)。观察组总有效率高于对照组(P<0.01)。两组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论在基础治疗的同时给予口服匹多莫德能进一步改善过敏性鼻炎患者的Th1/Th2细胞因子失衡,并能提高临床疗效,缩短伴随症状恢复时间。

地塞米松调节T细胞免疫应答保护小鼠急性炎性肝损伤的作用

背景:在小鼠急性炎性肝损伤中,地塞米松(Dex)可通过抑制天然免疫细胞功能抑制肝损伤进展,然而T细胞是否参与此保护作用尚少见报道。目的:探讨Dex在急性炎性肝损伤中对T细胞免疫应答的调节效应。方法:6只雄性C57BL/6J小鼠随机分为实验组和模型组,在以脂多糖诱导急性炎性肝损伤模型前1 h,两组分别腹腔注射Dex5 mg/kg和等体积PBS。建模12 h后处死小鼠,行临床评分并检测肝功能;分离脾脏单个核细胞,分析T细胞活化情况以及各T细胞亚群的细胞因子表达、分泌和转录因子表达。结果:实验组小鼠临床评分和血清转氨酶水平均明显低于模型组,脾脏CD44+CD62L-T细胞(活化或记忆性T细胞)比率显著降低,Th1型细胞因子IFN-γ表达、分泌减少,Th2型细胞因子IL-4表达、分泌增加,调节性T细胞(Treg细胞)比率、Th2/Th1、Treg/Th1比值增加;同时,Th1细胞特异性转录因子表达下调,Th2、Treg细胞特异性转录因子表达上调。结论:Dex通过抑制T细胞活化并调节T细胞亚群分化(抑制Th1细胞分化,促进Th2、Treg细胞分化),在急性炎性肝损伤中起一定保护作用。

粪菌移植对不同溃疡性结肠炎小鼠的疗效及其中药性味研究

背景溃疡性结肠炎被世界卫生组织列为现代难治性疾病之一。目前治疗技术均有相应的不足之处,粪菌移植(FMT)治疗溃疡性结肠炎的有效性已被证实,但疗效参差不齐。目的比较FMT治疗小鼠普通型溃疡性结肠炎模型(CUCM)与湿热型溃疡性结肠炎模型(DUCM)的效果及FMT(新金汁)的中药性味。方法于2019年12月9—28日,将35只雄性SPF级C57BL/6小鼠分为7组,分别为正常对照组(Control组)、CUCM组、CUCM+FMT组、CUCM+5-氨基水杨酸(5-ASA)组、DUCM组、DUCM+FMT组、DUCM+5-ASA组,每组各5只小鼠。Control组不做任何干预处理;CUCM组和DUCM组根据造模需求分别制备模型;CUCM+FMT组和DUCM+FMT组于造模成功后,给予制备的粪菌液0.2 ml对小鼠进行灌肠;CUCM+5-ASA组和DUCM+5-ASA组于造模成功后,给予0.0195 g/ml 5-ASA对小鼠进行灌肠。通过HE染色观察各组肠组织的变化,透射电镜观察组织的超微结构变化,流式细胞检测辅助性T细胞1(Th1)、Th2细胞含量,血常规检测血液中白细胞计数(WBC)、红细胞计数(RBC)、血小板计数(PLT)和血红蛋白(HGB),尼莫地平法评估干预前后疗效指数,16S rRNA高通量测序技术检测肠内容物中的菌群分布。结果各组小鼠均造模成功。肠组织HE染色显示:CUCM组与DUCM组肠黏膜表面出现不同程度的缺损或脱落坏死;CUCM+FMT组、CUCM+5-ASA组、DUCM+FMT组、DUCM+5-ASA组肠黏膜基本完整;并且DUCM+FMT组与CUCM+FMT组相比,前者腺体较后者排列整齐并紧密。肠组织透射电镜超微结构显示:CUCM组与DUCM组上皮细胞表面微绒毛稀疏,杯状细胞减少;CUCM+FMT组、CUCM+5-ASA组、DUCM+FMT组、DUCM+5-ASA组微绒毛较为致密,杯状细胞数目较多;并且DUCM+FMT组与CUCM+FMT组相比,前者微绒毛较后者紧密,杯状细胞也较后者多。各组小鼠Th1、Th2细胞含量、WBC、RBC、PLT、HGB比较,差异均有统计学意义(P<0.001)。CUCM+5-ASA组、DUCM+FMT组、DUCM+5-ASA组疗效指数高于CUCM+FMT组(P<0.05)。菌群分析显示CUCM组与DUCM组中丰度显著降低的属是Ruminococcus,显著升高的属是Akkermansia,经过FMT治疗后,CUCM+FMT组、DUCM+FMT组有逐步向Control组靠拢的趋势,表明肠道菌群正在改善。结论FMT可治疗溃疡性结肠炎模型小鼠,且针对DUCM疗效更佳,FMT(新金汁)的中药性味苦寒,推测其发挥功效的途径可能是通过调节肠道菌群进而改善Th1/Th2细胞平衡,达到治疗的目的。

吸烟对溃疡性结肠炎发病和免疫功能的影响

溃疡性结肠炎(UC)是一种病因尚不十分清楚的慢性非特异性肠道炎症性疾病,其发病与遗传、环境、免疫等因素密切相关。流行病学资料表明UC在戒烟者和从不吸烟者中更为多见,目前吸烟者UC患病率较低且临床症状较轻。研究显示吸烟可能通过调节T细胞和单核巨噬细胞功能以及Th1/Th2免疫平衡,起到改善UC肠道炎症的作用。本文就吸烟对UC发病以及患者免疫功能的影响作一综述。

HBV相关原发性肝癌患者循环血miR-155水平与相关免疫细胞因子、HBV-DNA载量的关系及意义

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)相关原发性肝癌(PHC)患者循环血miR-155水平与相关免疫细胞因子、HBV-DNA载量的关系及临床意义。方法收集2019年1月—2020年3月我院180例HBV感染者的血样,其中包括HBV相关PHC患者(PHC组)75例,乙型肝炎肝硬化患者(HBV-LC组)45例,慢性乙型肝炎患者(CHB组)30例,无症状慢性HBV携带者(HBV组)30例,同时收集健康人群血样50例。分别检测所有受检者血浆中miR-155表达水平及血清中Th1类细胞因子[白细胞介素-12(IL-12)、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)]和Th2类细胞因子(IL-4、IL-6、IL-10)的水平。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,并计算曲线下面积(AUC),得出miR-155诊断HBV相关PHC的灵敏度和特异度。结果PHC组患者血浆中miR-155水平明显高于其他组(F=9.147,P<0.01),且血浆中miR-155水平与血清中IL-4、IL-6、IL-10水平和HBV-DNA载量、甲胎蛋白水平均呈正相关(r=0.285~0.714,P<0.05),与血清中IL-12、IFN-γ呈负相关(r=-0.595、-0.478,P<0.05)。PHC患者肝功能越差、肿瘤分化程度越高、肿瘤直径越大,血浆中miR-155表达水平越高(t=3.218~5.187,P<0.05)。ROC曲线分析显示,血浆中miR-155对HBV相关性PHC诊断的灵敏度为94.5%,特异度为68.5%,AUC为0.892(95%CI=0.810~0.942)。结论miR-155在HBV相关性PHC患者血液中表达量升高,并且与HBV-DNA载量以及Th1/Th2免疫失衡密切相关,miR-155的检测对临床HBV相关PHC的早期诊断和筛查具有一定的价值。

Faecalibacterium prausnitzii基因组DNA上调外周血单个核细胞Th1型免疫应答增强对人结肠癌LoVo细胞的杀伤活性

背景:Faecalibacterium prausnitzii(Fp)是一种具有抗炎和免疫调节作用的肠道共生菌,研究发现结直肠癌患者肠道内Fp数量明显减少,可能与肿瘤发生有关。目的:探讨Fp及其基因组DNA(fD NA)干预对外周血单个核细胞(PBMCs)对人结肠癌LoV o细胞杀伤活性的影响及其免疫学机制。方法:将Fp、fD NA或酶解fD NA(d-fD NA)与分离自健康成人的PBMCs体外共培养,MTT实验检测PBMCs对LoV o细胞的杀伤活性,ELISA法检测PBMCs培养上清液中的Th1、Th2型细胞因子干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)含量,real-time PCR检测PBMCs Th1、Th2特异性转录因子T-bet、GATA3表达。结果:与未予干预的PBMCs相比,fD NA干预能显著增强PBMCs对LoV o细胞的杀伤活性(P<0.05),同时促进PBMCs的IFN-γ分泌和T-bet mRNA表达(P<0.05),抑制IL-4分泌和GATA3mRNA表达(P<0.05)。Fp和d-fD NA均未显示出上述作用。结论:fD NA能增强PBMCs对人结肠癌细胞的杀伤活性,其机制可能与上调Th1型免疫应答有关。