肝细胞癌组织中DEPDC1B和KIF23的表达及其预后预测价值

目的探究肝细胞癌(HCC)组织中DEP结构域蛋白1B(DEPDC1B)和驱动蛋白家族成员23(KIF23)的表达及其预后预测价值。方法选择2018年3月至2019年3月湖南中医药高等专科学校附属第一医院诊治的126例HCC患者作为研究对象,收集其HCC组织、癌旁组织及临床资料。采用免疫组织化学法检测组织中DEPDC1B和KIF23的蛋白表达情况。分析癌症基因组图谱(TCGA)数据库中HCC组织和癌旁组织中DEPDC1B和KIF23的mRNA表达水平差异。分析HCC组织中DEPDC1B和KIF23的蛋白表达与患者临床病理特征的相关性。采用Kaplan-Meier曲线(Log-rank检验)分析DEPDC1B和KIF23的蛋白表达与患者预后的关系。采用单因素及多因素COX比例风险模型分析HCC患者预后的危险因素。结果TCGA数据分析结果显示,HCC组织中DEPDC1B和KIF23的mRNA相对表达量均显著高于癌旁正常肝组织(1.861±1.271比0.314±0.116,1.652±1.089比0.218±0.157,P均<0.0001)。HCC组织中DEPDC1B阳性表达主要位于细胞质和细胞膜,KIF23阳性表达主要位于细胞质和细胞核。HCC组织中DEPDC1B和KIF23的蛋白表达阳性率均显著高于癌旁组织[71.43%(90/126)比10.32%(13/126),χ^(2)=97.355,P=0.000;75.40%(95/126)比11.90%(15/126),χ^(2)=103.252;P=0.000]。HCC组织中DEPDC1B和KIF23的蛋白表达均与肿瘤分期、组织学分级及有无血管侵犯有关(P均<0.05)。HCC组织中DEPDC1B与KIF23的mRNA表达呈显著正相关(r=0.913,P=0.000),DEPDC1B与KIF23的蛋白表达亦呈显著正相关(Rs=0.811,P=0.000)。DEPDC1B阳性表达组的3年累积生存率显著低于DEPDC1B阴性表达组(χ^(2)=4.433,P=0.035)。KIF23阳性表达组的3年累积生存率显著低于KIF23阴性表达组(χ^(2)=6.125,P=0.013)。肿瘤分期Ⅱ~Ⅲ期、组织学分级Ⅲ级、血管侵犯、DEPDC1B阳性表达及KIF23阳性表达均是HCC患者预后的独立危险因素。结论HCC组织中DEPDC1B和KIF23的表达上调,两者均与肿瘤分期、组织学分级及有无血管侵犯有关,DEPDC1B、KIF23阳性表达均是HCC患者预后的独立危险因素。

肾小管HIF-1α/miR-23a通路在脓毒血症急性肾损伤中的作用机制

目的探讨肾小管低氧诱导因子-1α(HIF-1α)/MicroRNA-23a(miR-23a)通路在脓毒血症急性肾损伤(SA-AKI)中的作用及相关作用机制。方法体外培养人近曲小管上皮细胞(HK-2细胞),采用脂多糖(LPS)处理HK-2细胞构建SA-AKI细胞模型。LPS处理的HK-2细胞分为LPS组、NC siRNA组、HIF-1αsiRNA组、anti-miR-NC组、anti-miR-23a组、HIF-1αsiRNA+miR-NC组、HIF-1αsiRNA+miR-23a组,以正常培养的HK-2细胞作为空白对照组(Control组)。采用qRT-PCR法检测细胞中HIF-1α、miR-23a基因表达;CCK-8法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡;ELISA法检测细胞中炎性因子[白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)]水平;Western blot法检测细胞中HIF-1α蛋白、NF-κB通路蛋白表达。结果与Control组比较,LPS组HK-2细胞中HIF-1α蛋白和mRNA表达水平、miR-23a mRNA表达水平均升高,细胞活力降低,细胞凋亡率、细胞中IL-6、IL-1β和TNF-α水平均升高(P<0.05)。与LPS组比较,HIF-1αsiRNA组HK-2细胞中HIF-1α蛋白和mRNA表达水平、miR-23a mRNA表达水平均降低,细胞活力升高,细胞凋亡率、细胞中IL-6、IL-1β和TNF-α水平均降低(P<0.05)。与LPS组比较,anti-miR-23a组HK-2细胞中miR-23a mRNA表达水平降低,细胞活力升高,细胞凋亡率、细胞中IL-6、IL-1β和TNF-α水平均降低(P<0.05)。与HIF-1αsiRNA组比较,HIF-1αsiRNA+miR-23a组HK-2细胞中miR-23a mRNA表达水平升高,细胞活力降低,细胞凋亡率、细胞中IL-6、IL-1β和TNF-α水平均升高(P<0.05)。与Control组比较,LPS组HK-2细胞p-NF-κB-p65/NF-κB-p65、p-IκBα/IκBα比值均升高(P<0.05)。与LPS组比较,HIF-1αsiRNA组和anti-miR-23a组HK-2细胞p-NF-κB-p65/NF-κB-p65、p-IκBα/IκBα比值均降低(P<0.05)。与HIF-1αsiRNA组比较,HIF-1αsiRNA+miR-23a组HK-2细胞p-NF-κB-p65/NF-κB-p65、p-IκBα/IκBα比值均升高(P<0.05)。结论肾小管HIF-1α通过调控miR-23a表达调节NF-κB信号通路,从而参与LPS诱导的肾小管上皮细胞损伤。

血清MIP-1β、TRACP-5b和FGF-23检测对绝经后骨质疏松患者发生骨折的预测价值

目的探讨血清巨噬细胞炎症蛋白-1β(MIP-1β)、抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)和成纤维细胞生长因子23(FGF-23)检测对绝经后骨质疏松患者发生骨折的预测价值。方法选择2019年1月至2021年12月该院收治的绝经后骨质疏松患者121例纳入骨质疏松组,根据患者是否发生骨折分为骨折组(54例)和非骨折组(67例)。选择同期在该院诊断为骨量下降和骨量正常的绝经后女性分别纳入骨量下降组(82例)和对照组(65例)。比较各组血清MIP-1β、TRACP-5b和FGF-23水平,对骨质疏松患者发生骨折的影响因素进行单因素和多因素分析,评价血清MIP-1β、TRACP-5b和FGF-23检测对绝经后骨质疏松患者发生骨折的预测价值,以及分析血清MIP-1β、TRACP-5b和FGF-23水平与骨折严重程度的关系。结果骨质疏松组血清MIP-1β、TRACP-5b和FGF-23水平明显高于骨量下降组和对照组(P<0.01),骨量下降组血清MIP-1β、TRACP-5b和FGF-23水平明显高于对照组(P<0.01)。骨折组的血清MIP-1β、TRACP-5b、FGF-23水平明显高于非骨折组(P<0.01)。多因素分析发现,血清MIP-1β>719.72 pg/mL、TRACP-5b>6.97 U/L和FGF-23>247.32 pg/mL是绝经后骨质疏松患者发生骨折的危险因素(P<0.01)。血清MIP-1β、TRACP-5b和FGF-23水平在预测骨质疏松患者发生骨折方面具有较高的效能(P<0.01),3项指标联合检测灵敏度为90.7%,特异度为89.4%,曲线下面积(AUC)为0.946,AUC明显高于MIP-1β(Z=3.412,P<0.01)、TRACP-5b(Z=3.811,P<0.01)和FGF-23(Z=3.983,P<0.01)单项指标检测,而单项指标之间的AUC比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论血清MIP-1β、TRACP-5b和FGF-23参与了绝经后骨质疏松的发生、发展过程,其水平检测对预测绝经后骨质疏松患者发生骨折具有较高的价值。

miR-23b对风湿关节炎大鼠滑膜组织转化生长因子β1及破骨细胞的影响

背景:研究表明,miR-23b水平升高与风湿关节炎的发生发展密切相关,故抑制miR-23b的表达可作为治疗该病的一个新靶点。目的:探究miR-23b对风湿关节炎大鼠滑膜组织转化生长因子β1调节及对破骨细胞活性的抑制作用。方法:选取60只SPF级SD雄性大鼠,随机分为正常对照组、模型组、miR-NC组、miR-23b inhibitor组。除正常对照组外,其他3组大鼠采用弗氏完全佐剂法进行风湿关节炎建模,建模成功后,对miR-NC组尾静脉注射20μL 1×10^(8) L^(-1)的miR-NC,miR-23b inhibitor组尾静脉注射20μL 1×10^(8) L^(-1)的miR-23b inhibitor,正常对照组、模型组同期尾静脉注射同体积生理盐水。21 d后,苏木精-伊红染色法检测大鼠关节组织病理形态;Real-time PCR法检测大鼠血清中miR-23b的mRNA相对表达;免疫组化法检测大鼠滑膜组织中转化生长因子β1蛋白表达;抗酒石酸酸性磷酸酶染色法及鬼笔环肽染色法检测破骨细胞活性。结果与结论:①正常对照组大鼠关节滑膜细胞结构正常且排列整齐,模型组、miR-NC组出现明显滑膜细胞增生且排列紊乱,同时可见毛细血管及纤维结缔组织明显增生,且出现大量炎性细胞浸润现象,miR-23b inhibitor组可见滑膜细胞轻度增生及少量炎性细胞浸润,水肿、充血情况明显改善;②与正常对照组比较,模型组大鼠血清中miR-23b相对表达明显升高(P<0.05),模型组与miR-NC组相比无明显差异(P>0.05),miR-23b inhibitor组血清中miR-23b相对表达较miR-NC组明显降低(P<0.05);③与正常对照组比较,模型组大鼠滑膜组织转化生长因子β1蛋白表达显著升高(P<0.05),模型组与miR-NC组相比无明显差异(P>0.05),miR-23b inhibitor组滑膜组织转化生长因子β1蛋白表达较miR-NC组明显降低(P<0.05);④与正常对照组比较,模型组大鼠滑膜成纤维细胞抗酒石酸酸性磷酸酶染色可见大量阳性表达的典型多核破骨细胞(P<0.05),模型组与miR-NC组相比无明显差异(P>0.05),miR-23b inhibitor组破骨细胞体积及数目较miR-NC组明显减少(P<0.05);⑤与正常对照组比较,模型组大鼠破骨细胞鬼笔环肽染色可见明显纤维肌动蛋白环形成(P<0.05),模型组与miR-NC组相比无明显差异(P>0.05),miR-23b inhibitor组纤维肌动蛋白环面积较miR-NC组明显缩小(P<0.05);⑥上述结果说明,降低miR-23b表达可对风湿关节炎起到治疗作用,其可有效抑制大鼠滑膜组织转化生长因子β1表达,降低破骨细胞活性。

肺腺癌c-Src及核仁磷蛋白/B23(NPM1)蛋白的高表达与化疗疗效负相关

目的观察c-Src蛋白及核仁磷蛋白/B23(NPM1)在肺腺癌组织中的表达并探讨与化疗疗效的关系。方法选择2012-10-10/2015-06-30期间怀化市第一人民医院确诊的肺腺癌患者的肿瘤标本共107例,采用免疫组织化学染色方法检测c-Src蛋白和NPM1蛋白的表达情况,分析c-Src蛋白和NPM1蛋白的表达与肺腺癌发生、发展的关系,其中Ⅲ-Ⅳ期患者55例予以吉西他滨联合顺铂方案规则化疗4疗程,探讨c-Src蛋白和NPM1蛋白的表达与化疗疗效的关系。结果 c-Src蛋白和NPM1蛋白在肺腺癌组织中皆为阳性表达,临床分期越高,c-Src蛋白和NPM1蛋白的表达越高,同时c-Src蛋白和NPM1蛋白在肿瘤细胞的表达随分化程度的升高而降低,化疗疗效随c-Src蛋白和NPM1蛋白的表达升高而降低。结论高表达c-Src、NPM1的肺腺癌化疗敏感性较差,高表达c-Src和NPM1可能与肺腺癌低分化有关。

鼻咽癌癌变前后ADAM23、MIMT1、FAM150B、GRIN2A、LRRC4甲基化研究

目的:研究鼻咽癌变前后ADAM23、MIMT1、FAM150B、GRIN2A、LRRC4甲基化特征。方法:12例鼻咽癌10例鼻咽炎作为研究对象,抽提鼻咽组织DNA,以特异识别5-甲基胞嘧啶的抗体免疫沉淀DNA,实时荧光定量PCR分别检测5个基因含量,并设置不用5-甲基胞嘧啶抗体(非MeDIP-qPCR实验)及使用非特异性抗体IgG进行免疫沉淀作为双重对照。结果:无论鼻咽癌还是鼻咽炎患者,5个基因在使用非特异性抗体IgG实验时均未检验到甲基化,非MeDIP-qPCR实验显示5个基因在鼻咽癌及鼻咽炎荧光定量值无明显差异(P>0.05);MeDIP-qPCR实验显示,鼻咽癌5个基因均呈现明显的甲基化,ADAM23、MIMT1、FAM150B、GRIN2A、LRRC45在鼻咽癌校正值分别为:3.39±2.28、6.03±3.93、3.68±1.81、7.12±3.17、3.10±1.94,在鼻咽炎分别为0.00±0.00、0.01±0.01、0.25±0.49、0.20±0.20、0.00±0.00(均P<0.01)。结论:ADAM23、MIMT1、FAM150B、GRIN2A、LRRC4 5个基因甲基化为鼻咽癌变的重要特征。

丁苯酞对缺血性脑卒中老年患者的疗效及其血清高迁移率族蛋白B1、白细胞介素-18和-23的影响

目的观察丁苯酞对缺血性脑卒中老年患者的疗效及其血清高迁移率族蛋白(HMG)B1、白细胞介素(IL)-18和-23的影响。方法缺血性脑卒中的老年患者150例随机分为对照组(75例)应用常规治疗,研究组(75例)在常规治疗基础上加用丁苯酞。应用酶联免疫吸附实验检测两组治疗前、后血清HMG B1、IL-18和IL-23的表达。结果治疗2 w后,研究组美国国立卫生研究院脑卒中量表(NIHSS)评分明显低于对照组,总有效率明显高于对照组;两组治疗后血清HMGB1、IL-18和IL-23的含量均下降,但是研究组下降值明显高于对照组(均P<0.05)。结论缺血性脑卒中患者在常规治疗基础上加用丁苯酞临床疗效明显,丁苯酞可有效下调血清中HMGB1、IL-18和IL-23的表达,阻止脑卒中促进因子的活化。

卵巢上皮性癌中新基因NM23-H1B的表达

目的 研究人类新基因NM 2 3 H1B与卵巢癌的关系。方法 收集 2 0 0 3年 4月～ 2 0 0 4年 2月经病理证实的卵巢癌手术切除标本 2 0例及卵巢交界性肿瘤 4例 (卵巢瘤组 ) ,正常卵巢组织 4例 (对照组 )。采用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)、Northern杂交测定NM 2 3 H1BmRNA的表达。结果 采用RT PCR在所有的标本中均检测到NM 2 3 H1B基因mRNA的表达 ,其在正常卵巢组织中表达较低 ,而所有的卵巢肿瘤中其表达均出现明显上调 ,早期卵巢癌中的表达高于晚期。Northern杂交显示 ,NM 2 3 H1B基因在正常卵巢组织的表达量较低 ,交界性肿瘤中的表达则与正常组织中相似 ,而在卵巢癌组织中表达明显增高 ,早期卵巢癌中的mRNA表达量高于晚期卵巢癌 ,早期卵巢癌中似乎在分化好 (Ⅰ级 )的表达量明显高于分化较差 (Ⅱ、Ⅲ级 )者。结论 NM 2 3

新基因nm23-H1B在卵巢上皮性肿瘤中的表达研究

目的：研究人类新基因nm23-H1B与卵巢肿瘤的关系。方法：收集2003年4月～2004年2月手术切除各种卵巢肿瘤标本48例，正常卵巢组织8倒。采用RT—PCR、Northern杂交、原位杂交检测nm23-H1B mRNA的表达。结果：用RT—PCR在所有的标本中均检测到nm23-H1B基因mRNA的表达，其在正常卵巢组织中表达较低，而在所有的卵巢肿瘤中表达均出现明显上调，在早期卵巢癌中的表达高于晚期。Northern杂交显示nm23-H1B基因在正常卵巢组织的表达量较低，交界性肿瘤中的表达则与正常组织中相似，而在卵巢癌组织中表达明显增高，在早期卵巢癌中在分化好的组织中（Ⅰ级）表达量明显高于分化较差（Ⅱ，Ⅲ级）者。原位杂交显示nm23-H1B基因在正常卵巢组织和交界性肿瘤的表达量极低，而在卵巢癌组织中表达明显增高，mRNA表达产物主要位于细胞质内；早期卵巢癌中的mRNA表达量高于晚期卵巢癌。结论：nm23-H1B基因与卵巢癌有明显的相关性。

circ-RAD23B通过miR-708-5p/CPNE1轴调控膀胱癌细胞增殖、细胞周期、凋亡的机制

目的探讨circ-RAD23B对膀胱癌细胞增殖、细胞周期、凋亡的影响及分子机制。方法选取49例膀胱癌患者癌组织及相应的癌旁组织;培养人正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1和膀胱癌细胞系T24、RT4、UM-UC-3,将T24细胞分为NC组、si-NC组、si-circ-RAD23B组、miR-NC组、miR-708-5p组、si-钙离子依赖性磷脂结合蛋白(CPNE)1组、pcDNA-NC组、pcDNA-CPNE1组、si-circ-RAD23B+pcDNA-NC组、si-circ-RAD23B+pcDNA-CPNE1组。实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测circ-RAD23B、miR-708-5p和CPNE1 mRNA表达水平;Western印迹检测蛋白表达;双荧光素酶报告实验验证circ-RAD23B和miR-708-5p及miR-708-5p和CPNE1之间的靶向关系;噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞周期及凋亡情况。结果与癌旁组织比较,膀胱癌组织中circ-RAD23B表达水平明显升高(P<0.05)。与SV-HUC-1细胞比较,膀胱癌细胞系T24、RT4、UM-UC-3中circ-RAD23B表达水平明显升高,CPNE1 mRNA和蛋白表达水平明显升高,miR-708-5p表达水平明显降低(P<0.05)。circ-RAD23B靶向调控miR-708-5p,miR-708-5p靶向调控CPNE1。circ-RAD23B和CPNE1低表达或miR-708-5p高表达,膀胱癌细胞T24中CyclinD1表达水平明显降低,Cleaved-caspase-3表达水平明显升高,细胞A值明显降低,S期细胞所占比例明显降低,G2/M期细胞所占比例明显升高,细胞凋亡率明显升高(P<0.05)。高表达CPNE1可逆转circ-RAD23B低表达对T24细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响。结论circ-RAD23B低表达可能通过miR-708-5p/CPNE1轴抑制膀胱癌细胞增殖,诱导细胞周期阻滞和细胞凋亡。

老年脑梗死患者血清中高迁移率族蛋白B1、白介素-23表达水平

高迁移率族蛋白B1（HMGB1）是一种晚期炎性因子，可以介导炎症和免疫反应的发生和发展，并可以通过促进巨噬细胞迁移，促进各种炎性因子的释放，进而引起免疫细胞和血管平滑肌细胞在病变组织中聚集，加快粥样斑块的进程。

缺氧缺血性脑病新生儿血清MBP HMGB1 IL-23与IL-17的变化及与预后的相关性

目的探讨缺氧缺血性脑病(HIE)新生儿血清髓鞘碱性蛋白(MBP)、高速泳动族蛋白B1(HMGB1)、白细胞介素23(IL-23)、细胞介素17(IL-17)水平的变化,并分析其与预后相关性。方法选取2021-01—2022-06安阳市人民医院儿科治疗的HIE患儿87例为研究组,根据病情严重程度分为轻度组41例,中度组27例和重度组19例,根据预后情况分为存活组65例和死亡组22例,选取同期健康新生儿87例为对照组。比较各组血清MBP、HMGB1、IL-23、IL-17水平,分析血清MBP、HMGB1、IL-23、IL-17水平对新生儿HIE预后的预测价值。结果研究组血清MBP、HMGB1、IL-23、IL-17水平明显高于对照组(P<0.05)。血清MBP、HMGB1、IL-23、IL-17水平比较,重度组>中度组>轻度组,差异均有统计学意义(P<0.05)。死亡组血清MBP、HMGB1、IL-23、IL-17水平明显高于存活组(P<0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线分析显示,MBP、HMGB1、IL-23、IL-17、四者联合预测新生儿HIE预后的AUC分别为0.800、0.838、0.753、0.778、0.899,最佳截断值分别为1.85、7.95、100、65、4.2414,约登指数分别为0.447、0.604、0.500、0.508、0.755,在最佳截断值对应的敏感度、特异度:MBP分别为95.5%、49.2%,HMGB1分别为72.7%、87.7%,IL-23分别为50%、100%,IL-17分别为100%、50.8%,四者联合分别为90.9%、84.6%。结论HIE患儿血清MBP、HMGB1、IL-23、IL-17水平呈高表达,病情越严重,血清MBP、HMGB1、IL-23、IL-17水平越高。血清MBP、HMGB1、IL-23、IL-17水平联合对HIE患儿死亡具有较好的预测价值。

nm23H1和NF-κBP65在眼睑基底细胞癌中的表达及意义

目的 :检测肿瘤转移抑制基因蛋白nm2 3H1和细胞核因子NF -κBP6 5蛋白在眼睑基底细胞癌中的表达 ,探讨它们与眼睑恶性肿瘤生物学行为的关系。方法 :应用免疫组化SABC法检测nm2 3H1和NF -κBP6 5蛋白在 39例眼睑基底细胞癌中的表达 ,并测定阳性细胞的平均光密度值 (OD值 ) ,用SPSS9.0统计软件进行统计学处理。结果 :nm2 3H1和NF -κBP6 5在正常视网膜及眼睑组织细胞中呈阴性表达 ,在眼睑基底细胞癌中呈阳性表达。在肿瘤组织细胞中与在正常组织细胞中的表达差异有显著性 (P <0 .0 5 )。在眼睑基底细胞癌的原发组与复发组的表达差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论 :nm2 3H1和NF -κBP6 5均参与眼睑基底细胞癌的形成 ,与眼睑基底细胞癌的发生密切相关。

联合检测非小细胞肺癌中nm23-H1和CB的表达及意义

目的探讨转移抑制基因nm23-H1和组织蛋白酶B(CB)在非小细胞肺癌发生及转移中的作用。方法用免疫组织化学法检测手术证实的97例非小细胞肺癌组织及28例良性肺病变中nm23-H1和CB的表达情况,将检测结果与患者临床病理特征进行综合分析。结果 nm23-H1和CB的表达主要定位于细胞质,nm23-H1和CB在非小细胞肺癌中表达的阳性率明显高于良性肺病变。非小细胞肺癌中nm23-H1和CB蛋白的表达与肿瘤分化程度及淋巴结转移无明显相关,但CB阳性表达率在低分化组及有淋巴结转移组有升高趋势。肺癌组织中nm23-H1和CB的表达水平显著相关。结论 nm23-H1和CB在非小细胞肺癌中表达上调,联合检测nm23-H1和CB对肿瘤的诊断和预后判断有一定的临床意义。

黄曲霉素B_1诱致小鼠肝脏癌前病变中的nm23基因表达

应用抗人nm23基因产物／NDPK的多克隆抗体，研究小鼠肝脏癌前病变中un23基因的表达状况。津白2纯系小白鼠随机分成三组：A组、B组和对照组。黄曲霉素Bl容于二甲基亚砜，以5μg／日·只量拌于饲料投食A和B组小鼠，B组另以烟丝30g／日重烟，经半年实验，取肝脏切片行免疫组织化学染色。使用医学图像处理系统检测nm23／NDPK表达强度。结果：三组小鼠肝脏nm23／NDPK表达强度呈A组＞B组＞对照组的趋势，与肝细胞核DNA含量的变化趋势相同，各组间差异均具有显著性意义（P＜0．05）。我们推断：黄曲霉素B1诱导的小鼠肝脏癌前病变中，nm23基因产物／NDPK表达上调可能与细胞增殖有关。

原发性胆囊癌组织中nm23-H1B mRNA表达及意义

目的探讨原发性胆囊癌组织中nm23-H1B mRNA表达及其与患者临床病理参数、预后的关系。方法选择原发性胆囊癌患者20例(胆囊癌组),其中有转移者11例、无转移者9例,慢性胆囊炎患者17例(对照组)。取两组胆囊组织标本,采用RT-PCR技术检测胆囊组织中nm23-H1B mRNA的相对表达量,并分析其表达与原发性胆囊癌患者临床病理参数及预后的关系。结果胆囊癌组及对照组nm23-H1B mRNA的相对表达量分别为12.943±3.241、19.343±2.044;胆囊癌组有转移及无转移者分别为10.592±1.522、15.817±2.271;胆囊癌组nm23-H1B mRNA的相对表达量低于对照组,且胆囊癌组有转移者明显低于无转移者及对照组(P均<0.01)。原发性胆囊癌组织中nm23-H1B mRNA低表达与肿瘤肝脏浸润、肝脏转移、淋巴结转移、胰腺转移、腹膜转移及Nevin分级有关(P均<0.05)。Kaplan Meier生存分析显示,nm23-H1B mRNA低表达者术后3年生存率明显低于nm23-H1B mRNA高表达者(P<0.01)。结论原发性胆囊癌组织中nm23-H1B mRNA表达降低,其表达变化与肿瘤转移程度及患者预后有关。

nm23-H1基因及HMGB1、LC3Ⅱ在ALL早期诊断中的应用及对化疗敏感性的影响

目的分析骨髓单个核细胞(BMMNC)的nm23-H1基因及外周血高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、Ⅱ型微管相关蛋白轻链3(LC3Ⅱ)水平在急性淋巴细胞白血病(ALL)早期诊断中的应用价值及对化疗敏感性的影响。方法选取2017年1月至2018年10月间青海省中医院收治的120例ALL患者作为研究对象,依照患者细胞形态学分为L1、L2、L3组,选择本院同期体检健康者40例作为对照组;检测BMMNC中自噬相关蛋白5(Atg5)、BECLIN基因编码蛋白-1(Beclin-1)、nm23-H1基因编码蛋白-H1(nm23-H1)、转铁蛋白(TfR)、纤黏蛋白(FN)、LC3Ⅱ及甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)的mRNA转录水平,采用Wester blot法检测血清中高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、LC3Ⅱ、血小板源生性生长因子(PDGF)、血管内皮生长因子A(VEGF-A)、血管内皮生长因子受体1(VEGF-R1)、血管内皮生长因子受体2(VEGF-R2)、血管内皮生长因子受体3(VEGF-R3)及GAPDH蛋白表达量;建立白血病细胞株分为K562组、HL-60细胞组、非肿瘤细胞对照组,检测HMGB1及GAPDH的mRNA及蛋白量表达,通过基因转染使白血病细胞高表达HMGB1,用阿毒素(ADM)、长春新碱(VCR)处理细胞并采用四唑盐比色法(MTT)检测细胞存活率。结果L3期患者BMMNC中Atg5、Beclin-1、nm23-H1、TfR、FN及LC3Ⅱ水平均显著高于L2组及L1组,差异具有统计学意义(P<0.05);L3期患者血清中HMGB1、LC3Ⅱ、PDGF、VEGF-A、VEGF-R1、VEGF-R2、VEGF-R3蛋白水平均显著高于L2组及L1组,差异具有统计学意义(P<0.05);Atg5 mRNA、Beclin-1 mRNA、TfR mRNA、FN mRNA、LC3ⅡmRNA、HMGB1及LC3Ⅱ水平是影响BMMNC中nm23-H1基因水平的独立性因素(P<0.05);K562组、HL-60细胞组及非肿瘤细胞组中HMGB1水平存在明显差异,且差异有统计学意义(P<0.05);ADM及VCR干预过表达HMGB1的K562及HL-60细胞细胞存活率显著高于野生型,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论BMMNC的nm23-H1基因及外周血HMGB1、LC3Ⅱ水平在评估患者病情是重要的生物学指标,且高表达HMGB1可能降低化疗敏感性。

MiR23b和Sp1在卵巢子宫内膜异位症中的表达及其意义

目的:检测miR23b和特异蛋白1(specific protein 1,Sp1)在卵巢子宫内膜异位症中的表达和分布情况,探讨二者在卵巢子宫内膜异位症发生发展中的作用及意义。方法:qPCR检测miR23b和Sp1 mRNA在异位内膜、在位内膜、正常内膜中的表达水平;免疫组织化学和Western印迹检测Sp1蛋白在异位内膜、在位内膜、正常内膜的表达和分布情况。结果:MiR23b mRNA在异位内膜、在位内膜、正常内膜组中的表达水平依次增加(P<0.05)。Sp1在子宫内膜间质细胞、腺上皮细胞中均有表达,主要表达在细胞核,少量表达在胞质中;Sp1 mRNA和蛋白在异位内膜、在位内膜、正常内膜中的表达均依次降低(P<0.05)。MiR23b与Sp1 mRNA表达呈负相关(r=–0.526,P<0.05)。结论:MiR23b和Sp1与卵巢子宫内膜异位症的发生发展密切相关,二者可能通过相互拮抗,共同参与异位病灶的形成。

miR-23b通过Smad3信号通路抑制TGF-β1诱导的气道平滑肌细胞增殖的研究

目的探究miR-23b对气道平滑肌细胞(ASMCs)增殖的作用及其分子机制。方法组织块贴壁法分离培养BALB/c小鼠原代ASMCs,并进行传代。对ASMCs转染miR-23b mimic和inhibitor后,转化生长因子-β1(TGF-β1)以10μg/L的浓度干预处理各组转染细胞,评估miR-23b与TGF-β1对ASMCs增殖和凋亡的影响。采用生物信息学方法预测miR-23b靶基因,同时通过RT-PCR和Western blot分析检测miR-23b靶基因Smad3在ASMCs中的表达水平。结果 miR-23b的过表达能够显著抑制TGF-β1诱导的ASMCs增殖,促进细胞凋亡。RT-PCR和Western blot检测显示miR-23b负调控Smad3蛋白在ASMCs中的表达。结论 miR-23b可以通过Smad3信号通路抑制TGF-β1诱导的ASMCs增殖。

miR-23b和notch1在瘢痕疙瘩中的表达关系研究

目的:检测瘢痕疙瘩成纤维细胞中微小RNA-23b(miR-23b)和notch1蛋白的表达量,探究二者间表达关系及对瘢痕疙瘩的作用。方法:收集2017年12月至2019年11月在解放军第一四九医院就诊的瘢痕疙瘩患者130例,同时手术过程中取每位患者瘢痕组织及正常真皮组织。记录瘢痕部位大小,根据瘢痕疙瘩的严重程度将其分为轻度65例、中度43例及重度22例,对瘢痕疙瘩组织及正常真皮组织中成纤维细胞进行提取、培养,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测成纤维细胞中miR-23b水平,利用免疫组化法检测notch1蛋白水平。利用Pearson法评价瘢痕疙瘩组织中miR-23b和notch1表达的相关性。结果:130例瘢痕疙瘩患者共有203个皮损,分别在胸部78(38.42%)个,肩背部59(29.07%)个,四肢40(19.71%)个,耳部13(6.40%)个,腹部8(3.94%)个,腰臀部5(2.46%)个。皮损累积面积为大瘢痕6例(4.61%),中瘢痕57例(43.85%),小瘢痕67例(51.54%)。与正常真皮组织相比,瘢痕疙瘩组织成纤维细胞miR-23b mRNA表达量和notch1阳性表达率明显增加,差异有统计学意义(66.15%vs 40.00%,P<0.05);miR-23b mRNA、notch1在瘢痕疙瘩不同临床分级之间表达差异有统计学意义(P<0.05),且随瘢痕疙瘩病情加重,miR-23b mRNA水平及notch1阳性表达率呈上升趋势;Pearson相关性分析结果显示,瘢痕疙瘩组织成纤维细胞中miR-23b和notch1呈正相关(r=0.529,P<0.05)。结论:miR-23b mRNA和notch1蛋白在瘢痕疙瘩组织中均呈高表达,二者呈正相关关系,可能同时参与瘢痕疙瘩的形成、发展过程。