新疆7地区馕用酸面团微生物多样性分析

新疆少数民族主食以馕为主,主要以传统酸面团(酵头)制作而成,然而酸面团中微生物组成直接影响到馕的品质及营养价值。为明确馕用酸面团中微生物组成,筛选出其中所含微生物,该文从新疆哈密、库尔勒、昌吉、伊犁、阿克苏、喀什、阿拉尔7个地区采集12个样品。应用传统分离培养方法对不同地区发酵酸面团中细菌及真菌进行分离、纯化得到真菌229株,共鉴定出7个属9个种,其中酿酒酵母129株,克鲁维毕赤酵母19株,异常威克汉姆酵母18株,奥默柯达菌17株,假丝酵母12株,扣囊复膜酵母11株,库德里阿兹威毕赤酵母10株,近平滑假丝酵母7株及胶红酵母6株;乳酸菌80株,共鉴定出4个属7个种,分别为戊糖乳杆菌46株,副干酪乳杆菌10株,干酪乳杆菌9株,类食品乳杆菌7株,戊糖片球菌5株,食窦魏斯氏菌2株及嗜柠檬酸明串珠菌1株;其他细菌17株,分别为马洛姆西杆菌11株,表皮葡萄球菌3株及暹罗芽孢杆菌3株。地区优势菌为酿酒酵母和戊糖乳杆菌,分别占真菌的56.3%和细菌的57.5%。

猕猴桃生香酵母筛选鉴定及其发酵特性

从多年野生猕猴桃树叶、枝干、果皮及树下土壤中分离猕猴桃生香酵母,研究其发酵特性,旨在开发猕猴桃酒发酵菌株。通过CO2失重比较、香气嗅闻、猕猴桃果汁发酵等分离出1株生香酵母,经形态观察、生理生化试验和26S rDNA基因序列同源性分析,鉴定为葡萄园有孢汉逊酵母(Hanseniaspora vineae),命名为X-5。随后进行SO_(2)、酒精和糖耐受性试验及发酵试验。结果显示,X-5菌株生香能力强,可耐受12%的酒精度、300 g/L的糖和0.20 g/L SO_(2),发酵后酒液澄清透明,色泽微黄带绿,酒香浓郁,酒精度9.6%,维生素C含量可达0.3277 g/L,感官品质高,可作为猕猴桃果酒发酵的专用菌种或选育驯化的出发菌株。

马蜂内生酵母种群结构分析及Metschnikowia pulcherrima的分离和鉴定

本文以新疆石河子西公园的马蜂Vespa velutina为研究对象,结合基于26S rDNA的高通量测序技术和稀释平板分离的方法,研究马蜂内生酵母物种组成及其多样性。结果显示,马蜂体内包含Cutaneotrichosporon、Torulaspora、Pichia等10个属内生酵母;含有Cutaneotrichosporon cutaneum、Torulaspora delbrueckii、Sporidiobolales sp.等10种内生酵母。Shannon指数、Simpson指数、ACE指数和Chao1指数分别为0.619215、0.681265、84.38456和76。利用稀释平板分离方法分离获得一株内生酵母,结合菌落和细胞形态观察、生理生化检测以及26S rDNA分子鉴定等方法,该酵母菌株为美极梅奇酵母Metschnikowia pulcherrima。本研究可为后续的内生酵母菌功能研究及酵母菌资源开发与利用奠定基础。

山楂叶悬钩子枯枝病病原菌形态学及分子鉴定

在东北林业大学校园内的山楂叶悬钩子(Rubus crataegifolius Bge.)上发现了1种枯枝病,对其病原菌进行分离纯化,通过PDA菌丝体对健康的山楂叶悬钩子进行柯赫氏证病法验证,20 d后烧伤处理接种病原菌的山楂叶悬钩子枝条上出现典型症状;结合形态学鉴定以及rDNA-ITS、26S rDNA D1/D2、EF-1a序列的比对分析,确认引起山楂叶悬钩子枯枝病的病原菌为火炬树暗葡腔菌(Phaeobotryon rhois),该病害为山楂叶悬钩子的国内新病害。

传统虾酱中酵母菌分离鉴定及碳源利用特性

以传统虾酱为研究对象,分离鉴定虾酱中的酵母菌,并对其碳源利用特性进行评价。采用梯度稀释涂布平板法分离纯化虾酱中的酵母菌,扩增其26S rDNA序列,确定酵母菌种属,结果显示,虾酱中共含有4种酵母菌,分别属于胶红酵母、近平滑假丝酵母、丝孢酵母和汉逊德巴利酵母。通过碳源同化试验,对所分离酵母菌的碳源利用特性进行评价,结果表明,碳源利用程度由强至弱依次为葡萄糖=蔗糖>氨基葡萄糖>山梨糖醇>甘油>甘露醇>柠檬酸>乳糖>壳聚糖。其中,葡萄糖和蔗糖可支持所有酵母菌生长,其余碳源不同程度地支持酵母菌生长。本研究结果可为挖掘虾酱中的微生物资源提供参考。

贵州黔南地区泡制酸菜中酵母菌的分离与鉴定

目的 研究黔南地区非盐渍泡制酸菜中酵母菌的种类。方法 采用纯培养的方法从黔南地区20份自然发酵非盐渍泡制酸菜中分离酵母菌,根据WL培养基上的菌落特征,结合显微细胞形态及生理生化特性,对酵母菌进行聚类分析后,从每种类型中挑选一株进行26S rDNA D1/D2区序列测定,通过序列分析及构建系统发育树,进行种属鉴定。结果 从20份样品中分离得到115株酵母菌,共聚为17种类型,分属于11个属,其中30.43%为Kazachstania酵母属、26.96%为毕赤酵母属(Pichia)、17.39%为地霉属(Geotrichum)、4.35%为假丝酵母属(Candida)、3.48%为耶罗威亚酵母属(Yarrowia)、3.48%为丝孢酵母属(Trichosporon)、3.48%为Meyerozyma酵母属、2.61%为有孢汉逊酵母属(Hanseniaspora)、2.61%为Wickerhamomyces酵母属、2.61%为Apiotrichum酵母属、2.61%为棒孢酵母属(Clavispora)。结论 黔南地区非盐渍泡制酸菜中酵母菌的种类丰富,但主要以Kazachstania酵母属、毕赤酵母属、地霉属为主。

皇藏峪国家森林公园及其周边可培养酵母资源的调查

依据酵母单细胞特性和细胞大小范围,采用改进的酵母菌分离方法对皇藏峪国家森林公园及其周边区域的酵母菌进行分离,基于26S rDNA D1/D2区序列对获得的酵母菌进行初步分类鉴定,调查可培养的酵母菌种资源.结果表明:增加滤膜过滤步骤能够减少丝状真菌和细菌的干扰,有利于酵母菌的分离;同一采样点不同寄生树种分离的酵母菌种类差异较大,菌种资源调查时要注意树种对调查结果的影响;鉴定的216株酵母菌株归属于37个属,68个种,其中子囊菌酵母25种,担子菌酵母43种;潜在新种11个,分属于子囊菌的Metschnikowia属和Wickerhamomyces属,担子菌的Cryptococcus属、Tremella属、Cystofilobasidium属、Rhodotorula属、Fibulobasidium属、Vishniacozyma属、Colacogloea属及Hamamotoa属.

半夏曲炮制过程中优势微生物的鉴定

研究半夏曲不同发酵时间点的微生物种类、数量变化以及优势菌种的分离鉴定,为探讨半夏曲炮制机制奠定基础。用选择性培养基对半夏曲发酵过程中5个时间点(0,18,36,54,72 h)样品中的细菌、霉菌、酵母菌分别进行培养、菌落计数、分离纯化优势菌种;采用16S rDNA,26S rDNA序列分别对优势细菌、优势真菌进行鉴定。结果表明,半夏曲发酵过程中细菌数量少、变化平缓,而酵母菌和霉菌数量发酵至54 h时迅速增加,至发酵结束时达1×10~7CFU·mL^(-1)以上;通过NCBI同源性比对及构建系统发育树,鉴定出半夏曲炮制过程中的优势细菌为Streptomyces sp.,Bacillus pumilus,B.subtilis,B.aryabhattai,Bacillus sp.;优势酵母菌为Meyerozyma guilliermondii;优势霉菌为Paecilomyces variotii,Byssochlamys spectabilis,Aspergillus niger。提示半夏曲的发酵过程涉及多种微生物共同参与,其中以酵母菌和霉菌为主。M.guilliermondii,P.variotii,P.variotii,A.niger和Bacillus sp.等优势菌种可能在半夏曲炮制中起重要作用。