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榕属植物上9种粉蚧雌成虫的显微特征和28S rRNA分子鉴定
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作者 吴福中 林秀莲 +1 位作者 傅卫民 李惠萍 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2024年第2期515-523,共9页
为明确榕属植物上粉蚧发生危害的种类,本文应用形态学和分子生物学方法,对榕属植物上调查的粉蚧开展鉴定。通过制作粉蚧雌成虫的玻片标本,从触角、刺孔群、盘孔和管腺等部位详细比较了9种粉蚧的主要显微特征,并制作了检索表。通过28S r... 为明确榕属植物上粉蚧发生危害的种类,本文应用形态学和分子生物学方法,对榕属植物上调查的粉蚧开展鉴定。通过制作粉蚧雌成虫的玻片标本,从触角、刺孔群、盘孔和管腺等部位详细比较了9种粉蚧的主要显微特征,并制作了检索表。通过28S rRNA基因片段,扩增出38条序列,并与GenBank数据库进行相似性比对,相似度达到99.35%~100%,构建系统进化树,每种粉蚧与GenBank数据库下载的已知序列单独聚在一支,系统进化树结果与形态学鉴定结果一致,结果表明28S rRNA基因片段鉴定粉蚧具有可行性。该方法为农林业监测预警和精准防治粉蚧类害虫提供科学依据。 展开更多
关键词 榕属植物 粉蚧 显微特征 28s rrna 分子鉴定
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印度尼西亚峇淡岛海域鱾新本尼登虫(Neobenedenia girellae)形态学及28S rRNA分子鉴定
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作者 乔莹 马笑晚 +1 位作者 邵彦翔 陈超 《海洋学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期119-126,共8页
本研究通过结合形态学与DNA分子标记等生物学手段,对印度尼西亚峇淡岛海域海水鱼类养殖中的本尼登虫(Isolate Batam, IB)进行形态学分析和种类鉴定。IB虫株在形态上与鱾新本尼登虫(Neobenedenia girellae)相似,属于新本尼登属。28S rRN... 本研究通过结合形态学与DNA分子标记等生物学手段,对印度尼西亚峇淡岛海域海水鱼类养殖中的本尼登虫(Isolate Batam, IB)进行形态学分析和种类鉴定。IB虫株在形态上与鱾新本尼登虫(Neobenedenia girellae)相似,属于新本尼登属。28S rRNA序列扩增得到序列为394 bp,与其他本尼登虫属比对相似性在85.86%~99.47%之间。进化树构建结果显示IB虫株与其他珻氏新本尼登虫(Neobenedenia melleni)和鱾新本尼登虫构成一簇,而本尼登虫自成一簇。综上所述,本研究结果支持鱾新本尼登虫与珻氏新本尼登虫为同种异名的分类学观点,并将IB虫株定种为鱾新本尼登虫。 展开更多
关键词 新本尼登虫 形态鉴定 28s rrna 印度尼西亚
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中国常见贻贝基于28S rDNA序列的系统发育分析 被引量:2
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作者 郭笳 谢慧盈 +5 位作者 张振 胡利莎 刘玉盟 马培振 王海艳 李翠 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期613-621,共9页
贻贝隶属于软体动物门(Mollusca)、双壳纲(Bivalvia)、翼形亚纲(Pteriomorphia)、贻贝目(Mytilida)、贻贝超科(Mytiloidea),大约有400种贻贝分布在世界各地,可适应淡水、潮间带至深海多种生境。本实验以贻贝科6亚科12属28种中国沿海常... 贻贝隶属于软体动物门(Mollusca)、双壳纲(Bivalvia)、翼形亚纲(Pteriomorphia)、贻贝目(Mytilida)、贻贝超科(Mytiloidea),大约有400种贻贝分布在世界各地,可适应淡水、潮间带至深海多种生境。本实验以贻贝科6亚科12属28种中国沿海常见贻贝的28SrDNA为目的片段,构建系统发育进化树,运用最大似然法和贝叶斯推演法分析了贻贝科的系统发生,并追踪贻贝科物种系统演化历史。结果显示:贻贝亚科Mytilinae、偏顶蛤亚科Modiolinae、石蛏亚科Lithophaginae均非单系群。在属阶元,深海偏顶蛤属Bathymodiolus、贻贝属Mytilus和股贻贝属Perna为单系群。本研究发现应接受将原隔贻贝属Septifer分为Septifer属和Mytilisepta属的分类提议;应接受将原石蛏属Lithophaga中的膜石蛏亚属Leiosolenus提升至属的地位的分类提议。此外,短齿蛤属Brachidontes的单系性不被支持,刻缘短齿蛤Brachidontes setiger并未与短齿蛤属其他物种在系统发育树上聚拢,亲缘关系较远,为不同属物种,建议恢复刻缘短齿蛤原属名Volsella(Dunker,1857)。 展开更多
关键词 贻贝 28s rrna 系统发育
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基于不同靶基因的3种住肉孢子虫PCR检测方法比较 被引量:6
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作者 孙滔 米荣升 +9 位作者 张烨华 张世杰 张晓丽 贾海燕 曾江勇 黄燕 龚海燕 韩先干 陈兆国 赵权 《动物医学进展》 北大核心 2020年第12期1-6,共6页
为筛选敏感、特异的住肉孢子虫(Sarcocystis spp.)PCR检测方法,对以住肉孢子虫18S rRNA、28S rRNA和线粒体细胞色素C氧化酶I基因(cox 1)的部分片段为靶基因设计的3套引物建立的PCR方法进行敏感性和特异性试验,并对田间采集的100份牛源... 为筛选敏感、特异的住肉孢子虫(Sarcocystis spp.)PCR检测方法,对以住肉孢子虫18S rRNA、28S rRNA和线粒体细胞色素C氧化酶I基因(cox 1)的部分片段为靶基因设计的3套引物建立的PCR方法进行敏感性和特异性试验,并对田间采集的100份牛源和猪源肌肉样品进行检测。结果显示,以18S rRNA和28S rRNA为靶基因的PCR检测方法的敏感性相似,DNA最小检出量均为1×10-2 ng/μL;而以cox 1为靶基因的PCR检测方法敏感性相对较低,DNA的最低检出量为1 ng/μL。对7种不同寄生虫DNA进行特异性试验,结果以cox 1基因为靶基因的PCR方法特异性较好,仅能够扩增出枯氏住肉孢子虫(Sarcocystis cruzi)DNA;以18S rRNA为靶基因的PCR法,除枯氏住肉孢子虫外,刚地弓形虫和微小隐孢子虫也有相似扩增条带;以28S rRNA为靶基因的PCR法,除枯氏住肉孢子虫外,刚地弓形虫、微小隐孢子虫和欧猥迭宫绦虫DNA也能扩增出杂带,但大小不符。利用3种方法对100份牦牛和猪肉样品进行扩增,发现以18S rRNA、28S rRNA和cox 1为靶基因的PCR法的阳性率分别为36.00%(36/100)、43.00%(43/100)和38.00%(38/100)。结果表明,以cox 1为靶基因的PCR法有良好的特异性,适合用于田间动物肌肉样品中住肉孢子虫的检测,为开展动物住肉孢子虫病分子流行病学及防控研究提供了依据。 展开更多
关键词 18S rrna基因 28s rrna基因 cox 1基因 PCR方法 住肉孢子虫
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Morphological and phylogenetical analysis reveals that a new tapeworm species (Cestoda: Hymenolepididae) from whooper swan belongs to Cloacotaenia not Hymenolepis
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作者 Zhijun Hou Lei Han +8 位作者 Ying Sun Dongdong Shen Zhiwei Peng Lixin Wang Qian Zhai Yanqiang Zhou Yaxian Lu Liwei Teng Hongliang Chai 《Journal of Forestry Research》 SCIE CAS CSCD 2020年第6期2581-2587,共7页
During a helminthological study of waterfowl in China,a new species(Cloacotaenia cygnimorbus sp.nov.)of hymenolepidid cestodes(tapeworm)was found in the small intestine of whooper swan(Cygnus cygnus,Linnaeus,1758).The... During a helminthological study of waterfowl in China,a new species(Cloacotaenia cygnimorbus sp.nov.)of hymenolepidid cestodes(tapeworm)was found in the small intestine of whooper swan(Cygnus cygnus,Linnaeus,1758).The rudimentary rostellum and four unarmed muscular suckers,proglottids with distinct craspedote and three spherical testes were coincident with the characters of Cloacotaenia or Hymenolepis,but phylogenetic analysis of 28S rRNA and cox1 gene revealed that the new species is Cloacotaenia rather than Hymenolepis.Its morphology was also clearly diff erentiated from C.megalops in the arrangement of its testes in a triangle instead of in line and the cirrus unarmed rather than spined.Compared with C.megalops,the new species has more elongated neck,much larger mature proglottids and much smaller testes,cirrus sac,ovary,vitellarium and uterine proglottid.In addition,it infected the host intestine not the cloacae.Phylogenetic analysis of cox1 gene of the new species shows that it had a level of sequence variation(10.52–23.06%)with the sequences of C.megalops.The considerable morphological and molecular diff erences between those two parasites support C.cygnimorbus sp.nov.as a new species. 展开更多
关键词 Cloacotaenia Hymenolepididae HYMENOLEPIS Whooper swan 28s rrna cox1
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致死粒线虫重组酶聚合酶扩增检测方法的建立
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作者 林宇 刘娟 +5 位作者 俞禄珍 李兰 姜一 贺艳 王金成 魏亚东 《植物检疫》 2024年第5期31-35,共5页
致死粒线虫是一种传播扩散风险较高的外来有害生物,对畜牧业生产具有严重危害。为实现致死粒线虫的高效准确鉴定,本研究根据致死粒线虫核糖体28S rRNA基因D2/D3片段的保守区域设计特异引物,建立了致死粒线虫的RPA检测方法。结果表明:建... 致死粒线虫是一种传播扩散风险较高的外来有害生物,对畜牧业生产具有严重危害。为实现致死粒线虫的高效准确鉴定,本研究根据致死粒线虫核糖体28S rRNA基因D2/D3片段的保守区域设计特异引物,建立了致死粒线虫的RPA检测方法。结果表明:建立的RPA检测方法对致死粒线虫具有好的特异性,扩增出230 bp的特异性目标片段,检测灵敏度可达1/160条线虫。该方法检测时间短、特异性好、灵敏度高,适用于致死粒线虫的快速检测。 展开更多
关键词 致死粒线虫 重组酶聚合酶扩增 28s rrna基因 鉴定
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3种色型仿刺参线粒体和核糖体序列片段遗传结构比较研究 被引量:1
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作者 郭战胜 王振 +1 位作者 侯旭光 张海涛 《山东大学学报(理学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期1-7,共7页
仿刺参作为我国重要的海水养殖物种,良种选育是目前研究的重点,其中体色是重要的考虑因素之一。为了比较3种不同体色仿刺参的遗传结构,采用PCR扩增与测序技术对我国3种体色(青色、白色和紫色)仿刺参线粒体16S rRNA和COⅠ与核糖体18S rRN... 仿刺参作为我国重要的海水养殖物种,良种选育是目前研究的重点,其中体色是重要的考虑因素之一。为了比较3种不同体色仿刺参的遗传结构,采用PCR扩增与测序技术对我国3种体色(青色、白色和紫色)仿刺参线粒体16S rRNA和COⅠ与核糖体18S rRNA-ITS-28S rRNA序列片段进行分析,揭示其遗传结构差异及系统发育关系。结果表明,16S rRNA、COⅠ和18S rRNA-ITS-28S rRNA序列长度分别为812~830 bp、877~915 bp、1536~1572 bp。16S rRNA、COⅠ和18S rRNA-ITS-28S rRNA序列在青色、紫色和白色仿刺参中分别检测到单倍型个数分别为4/5/5、5/3/4和4/4/3,COⅠ序列多态性位点数目所比例最大,16S rRNA序列最小。3种色型仿刺参16S rRNA、COⅠ和18S rRNA-ITS-28S rRNA序列遗传距离数值均比较小,范围分别为0~0.0147、0~0.0212和0~0.0103,没有达到种的分化水平。以紫海胆为外群,基于COⅠ序列构建系统发育树,结果表明白刺参单独聚为一支,但是紫色和青色仿刺参不同个体间相互交叉聚集,无法通过发育树区分。 展开更多
关键词 仿刺参 体色 16S rrna COⅠ 18S rrna-ITS-28s rrna 遗传结构
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四种短体线虫的形态和分子生物学鉴定 被引量:8
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作者 杜宇 邓宗汉 +4 位作者 丁元明 刘冰洋 李旻 雷屈文 林萌 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期28-39,共12页
采用形态学和分子生物学方法对来自荷兰的藏橐吾和铃兰、泰国的高山榕、缅甸的香蕉等种苗(球)分别鉴定出玻利维亚短体线虫Pratylenchus bolivianus、铃兰短体线虫P.convallariae、咖啡短体线虫P.coffeae和斯佩奇短体线虫P.speijeri。对... 采用形态学和分子生物学方法对来自荷兰的藏橐吾和铃兰、泰国的高山榕、缅甸的香蕉等种苗(球)分别鉴定出玻利维亚短体线虫Pratylenchus bolivianus、铃兰短体线虫P.convallariae、咖啡短体线虫P.coffeae和斯佩奇短体线虫P.speijeri。对这4种线虫的形态特征进行较为详细的描述后,认为头环、口针、侧区、生殖系统和尾形等形态特征是种类鉴定的重要依据;进一步利用引物28S-D2A/28S-D3Br扩增测序得到上述4种线虫的28S rRNA基因D2/D3区序列,序列分析发现玻利维亚短体线虫从欧洲到美洲的不同种群之间的遗传距离变异较小,仅为0~0.007;铃兰短体线虫同一种群不同个体之间的遗传变异较大,为0.006~0.029;咖啡短体线虫不同种群之间的平均遗传距离为0.013;斯佩奇短体线虫不同种群之间的平均遗传距离为0.010;咖啡短体线虫P.coffeae和斯佩奇短体线虫P.speijeri亲缘关系很近,二者种间平均遗传距离仅为0.026。本研究再次证明线虫28S rRNA基因D2/D3区基因序列可作为短体线虫种间鉴定的依据。 展开更多
关键词 短体线虫 形态特征 28s rrna 系统进化树 鉴定
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Identifying the ‘unidentified’ fungi: a global-scale long-read third-generation sequencing approach 被引量:4
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作者 Leho Tedersoo Sten Anslan +2 位作者 Mohammad Bahram Urmas Kõljalg Kessy Abarenkov 《Fungal Diversity》 SCIE 2020年第4期273-293,共21页
Molecular identification methods,in particular high-throughput sequencing tools,have greatly improved our knowledge about fungal diversity and biogeography,but many of the recovered taxa from natural environments cann... Molecular identification methods,in particular high-throughput sequencing tools,have greatly improved our knowledge about fungal diversity and biogeography,but many of the recovered taxa from natural environments cannot be identified to species or even higher taxonomic levels.This study addresses the phylogenetic placement of previously unrecognized fungal groups by using two complementary approaches:(i)third-generation amplicon sequencing analysis of DNA from global soil samples,screening out ITS reads of<90%similarity to other available Sanger sequences,and(ii)analysis of common fungal taxa that were previously indicated to be enigmatic in terms of taxonomic placement based on the ITS sequences alone(so-called top50 sequences).For the global soil samples,we chose to amplify the full rRNA gene operon using four partly overlapping amplicons and multiple newly developed primers or primer combinations that cover nearly all fungi and a vast majority of non-fungal eukaryotes.We extracted the rRNA 18S(SSU)and 28S(LSU)genes and performed phylogenetic analyses against carefully selected reference material.Both SSU and LSU analyses placed most soil sequences and top50 sequences to known orders and classes,but tens of monophyletic groups and single sequences remained outside described taxa.Furthermore,the LSU analyses recovered a few small groups of sequences that may potentially represent novel phyla.We conclude that rRNA genes-based phylogenetic analyses are efficient tools for determining phylogenetic relationships of fungal taxa that cannot be placed to any order or class using ITS sequences alone.However,in many instances,longer rRNA gene sequences and availability of both SSU and LSU reads are needed to improve taxonomic resolution.By leveraging third-generation sequencing from global soil samples,we successfully provided phylogenetic placement for many previously unidentified sequences and broadened our view on the fungal tree of life,with 10-20%new order-level taxa.In addition,the PacBio sequence data greatly extends fungal class-level information in reference databases. 展开更多
关键词 Soil fungi Top 50 most wanted fungi Phylogenetic diversity PacBio sequencing 18S rrna gene(small subunit) 28s rrna gene(large subunit)
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