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口蹄疫病毒2C′3AB基因重组杆状病毒的构建及其表达 被引量:4
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作者 张小丽 卢曾军 +6 位作者 田美娜 孙普 曹轶梅 付元芳 马小军 刘在新 谢庆阁 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期483-488,共6页
将含有口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白2C部分基因编码区及3AB完整基因编码区的基因片段2C′3AB重组于杆状病毒穿梭质粒pMelBac-B,经PCR、酶切及序列分析鉴定正确后,命名为pMel-2C′3AB。将重组穿梭质粒pMel-2C′3AB与杆状病毒骨架共转染Sf... 将含有口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白2C部分基因编码区及3AB完整基因编码区的基因片段2C′3AB重组于杆状病毒穿梭质粒pMelBac-B,经PCR、酶切及序列分析鉴定正确后,命名为pMel-2C′3AB。将重组穿梭质粒pMel-2C′3AB与杆状病毒骨架共转染Sf9昆虫细胞,通过噬斑筛选及PCR鉴定,构建了含有目的基因的重组杆状病毒。用该病毒感染High Five细胞,细胞裂解液的SDS-PAGE电泳结果显示,出现一约为43ku的蛋白带,与预期大小一致;Western-blotting结果表明,该表达产物能被FMDV阳性血清及2C′3AB单克隆抗体识别;间接ELISA结果显示,表达的目的蛋白能与牛、羊、猪的O型FMDV阳性血清发生特异性反应。证实,FMDV 2C′3AB基因在昆虫细胞中得到了表达,且表达产物具有良好的反应活性。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 2c′3ab基因 重组杆状病毒 表达
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二代基因测序技术检测急性髓系白血病患者CRLF2、FLT3及C-KIT突变的价值 被引量:1
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作者 常渊媛 杨亚锋 《临床医学研究与实践》 2023年第7期97-100,共4页
目的探讨二代基因测序技术检测急性髓系白血病患者细胞因子受体样因子2(CRLF2)、FMS样酪氨酸激酶3(FLT3)及C-KIT突变的价值。方法选择2017年1月至2020年1月在我院接受治疗的78例急性髓系白血病患者为研究对象,采用二代基因测序技术检测C... 目的探讨二代基因测序技术检测急性髓系白血病患者细胞因子受体样因子2(CRLF2)、FMS样酪氨酸激酶3(FLT3)及C-KIT突变的价值。方法选择2017年1月至2020年1月在我院接受治疗的78例急性髓系白血病患者为研究对象,采用二代基因测序技术检测CRLF2、FLT3及C-KIT突变情况。比较CRLF2、FLT3及C-KIT不同突变类型患者的临床参数;比较CRLF2、FLT3及C-KIT不同突变类型患者治疗≤2个疗程的完全缓解率和复发率。结果78例患者中CRLF2突变11例,突变率为14.10%,正常核型突变率高于异常核型,差异具有统计学意义(P<0.05);FLT3突变9例,突变率为11.54%,正常核型突变率高于异常核型,差异具有统计学意义(P<0.05);C-KIT突变6例,突变率为7.69%,正常核型突变率低于异常核型,差异具有统计学意义(P<0.05)。CRLF2不同突变类型患者的年龄、白细胞计数、血小板计数比较,差异具有统计学意义(P<0.05);FLT3不同突变类型患者的白细胞计数比较,差异具有统计学意义(P<0.05);C-KIT不同突变类型患者的血红蛋白水平比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。开展随访跟踪共计76例患者可评价干预效果,CRLF2不同突变类型患者治疗≤2个疗程的完全缓解率和复发率比较,差异无统计学意义(P>0.05);FLT3突变阳性患者治疗≤2个疗程的完全缓解率低于突变阴性患者,复发率高于突变阴性患者,差异具有统计学意义(P<0.05);C-KIT不同突变类型患者治疗≤2个疗程的完全缓解率比较,差异无统计学意义(P>0.05);C-KIT突变阳性患者复发率高于突变阴性患者,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论急性髓系白血病患者CRLF2、FLT3及C-KIT突变较为常见,利用二代基因测序技术开展上述基因突变检测有助于指导临床治疗及预后评估。 展开更多
关键词 二代基因测序技术 急性髓系白血病 细胞因子受体样因子2 FMS样酪氨酸激酶3 c-KIT
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口蹄疫病毒2C3AB基因的原核表达及ELISA方法的建立
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作者 王幸 周国辉 +1 位作者 刘云 于力 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期543-547,共5页
口蹄疫病毒(FMDV)的2C蛋白中存在对自然感染和灭活疫苗免疫动物具有鉴别诊断意义的抗原表位。为建立一种敏感的血清学鉴别诊断方法,本研究截取FMDV 2C蛋白的C端B细胞表位较为富集的区域与全长3AB基因组合,经原核表达获得分子量约为44 k... 口蹄疫病毒(FMDV)的2C蛋白中存在对自然感染和灭活疫苗免疫动物具有鉴别诊断意义的抗原表位。为建立一种敏感的血清学鉴别诊断方法,本研究截取FMDV 2C蛋白的C端B细胞表位较为富集的区域与全长3AB基因组合,经原核表达获得分子量约为44 ku的目的蛋白。Western blot分析表明,表达产物2C3AB与FMDV感染动物的阳性血清呈特异性反应。以纯化的目的蛋白作为包被抗原建立间接ELISA方法,敏感性检测表明该方法比3ABC-ELISA具有更高的敏感性;同时检测猪圆环病毒、猪繁殖和呼吸障碍综合征病毒、猪瘟病毒标准阳性血清均无交叉反应。批内和批间重复性试验显示,OD450nm值的变异系数小于9%。采用该方法检测不同背景的临床样品,并与3ABC-ELISA及进口试剂盒比较,总符合率分别为98.5%和90%。结果表明,该ELISA检测方法具有更高的敏感性和良好的特异性、重复性。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 2c3ab基因 原核表达 间接ELISA
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RNA干扰C-erbB-2对肺腺癌细胞calu-3增殖的影响 被引量:8
4
作者 任淑华 张伟 +3 位作者 曲平 刘义 王井伟 张林 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第10期1173-1178,共6页
背景与目的:C-erbB-2基因在人乳腺癌、卵巢癌、肺癌中扩增及过量表达,与肿瘤恶性程度增高、转移能力增强、化疗抵抗密切相关,且与预后不良有关。RNA干扰(RNA interfering,RNAi)是一种新的基因治疗技术,能有效、特异性地抑制细胞内基因... 背景与目的:C-erbB-2基因在人乳腺癌、卵巢癌、肺癌中扩增及过量表达,与肿瘤恶性程度增高、转移能力增强、化疗抵抗密切相关,且与预后不良有关。RNA干扰(RNA interfering,RNAi)是一种新的基因治疗技术,能有效、特异性地抑制细胞内基因表达。本实验研究靶向C-erbB-2基因的siRNA(small interferingRNA)对C-erbB-2过表达的肺腺癌细胞calu-3增殖的影响。方法:化学合成的靶向C-erbB-2基因siRNA在脂质体的介导下转染calu-3细胞,观察转染前后细胞表型的改变;通过逆转录聚合酶链反应(reversetranscription-polymerasechainreaction,RT-PCR)和流式细胞术检测转染前后细胞中C-erbB-2mRNA和蛋白水平的变化,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法评价对calu-3细胞增殖的抑制作用,流式细胞术检测细胞周期的变化和细胞凋亡情况。结果:靶向C-erbB-2基因siRNA降低了calu-3细胞中C-erbB-2mRNA和蛋白的表达,转染C-erbB-2siRNA48h后calu-3细胞出现C-erbB-2蛋白表达下调。C-erbB-2蛋白阳性率为(25.04±1.56)%,与未转染对照组、空载体组、非特异性siRNA组比较[(98.24±2.23)%、(95.67±1.98)%和(94.79±0.87)%]有显著性差异(P<0.01)。同时C-erbB-2siRNA对calu细胞增殖有抑制作用,使细胞周期阻滞于G0/G1期[C-erbB-2siRNA组(56.6±3.6)%,未转染对照组(45.5±3.2)%,P<0.01],并能诱导细胞凋亡。结论:化学合成的靶向C-erbB-2基因siRNA能有效抑制C-erbB-2基因在calu-3细胞中的表达,并对calu-3细胞增殖有抑制作用。 展开更多
关键词 肺肿瘤 基因治疗 RNA干扰 c-ERBB-2 SIRNA calu-3细胞
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VP-16诱导PC-3细胞凋亡和bcl-2及c-myc基因表达的研究
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作者 李登欣 董素芹 +2 位作者 张建业 张莲英 何维敬 《潍坊医学院学报》 2000年第3期174-176,共3页
目的 研究 VP- 1 6诱导 PC- 3细胞凋亡和癌基因 bcl- 2及 C- myc表达的关系。方法 用末端标记法(TUNEL )和流式细胞术 (FCM)研究 PC- 3细胞凋亡 ,以免疫组化方法研究 bcl- 2及 C- myc蛋白的表达。结果  TUNEL和FCM检测表明 ,PC- 3细... 目的 研究 VP- 1 6诱导 PC- 3细胞凋亡和癌基因 bcl- 2及 C- myc表达的关系。方法 用末端标记法(TUNEL )和流式细胞术 (FCM)研究 PC- 3细胞凋亡 ,以免疫组化方法研究 bcl- 2及 C- myc蛋白的表达。结果  TUNEL和FCM检测表明 ,PC- 3细胞的凋亡率随 VP- 1 6作用浓度增加和作用时间延长而升高 ;免疫组化结果显示 :bcl- 2和 c- myc基因表达的阳性百分率随 VP- 1 6作用浓度增加和作用时间延长而降低。结论 VP- 1 6能够诱导 PC- 3细胞凋亡和抑制其bcl- 2和 c- myc基因的表达 ,且具有作用浓度和作用时间依赖性。 展开更多
关键词 细胞凋亡 Pc-3细胞 BcL-2基因 前列腺癌
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内皮抑素重组腺相关病毒对宫颈癌裸鼠Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白表达的影响 被引量:2
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作者 荣赟 尹利荣 +1 位作者 马洪达 杨维娜 《天津医药》 CAS 北大核心 2011年第3期256-259,共4页
目的:探讨内皮抑素重组腺相关病毒(rAAV-ES)对人宫颈癌HeLa细胞裸鼠移植瘤的生长抑制作用及其机制。方法:采用左腋皮下接种法,建立人宫颈癌裸鼠模型共60只。造模1周后,随机分为rAAV-ES实验组、空病毒组和磷酸盐缓冲液(PBS)对照组,每组2... 目的:探讨内皮抑素重组腺相关病毒(rAAV-ES)对人宫颈癌HeLa细胞裸鼠移植瘤的生长抑制作用及其机制。方法:采用左腋皮下接种法,建立人宫颈癌裸鼠模型共60只。造模1周后,随机分为rAAV-ES实验组、空病毒组和磷酸盐缓冲液(PBS)对照组,每组20只。观察裸鼠皮下移植瘤的生长情况,计算肿瘤体积。治疗3周后颈椎脱臼处死裸鼠,完整剥离肿瘤,称瘤质量并计算抑瘤率。HE染色观察肿瘤细胞形态,免疫组织化学技术检测各组肿瘤组织中Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白的表达情况。结果:成功建立宫颈癌裸鼠模型。实验组治疗后肿瘤生长速度较对照组和空病毒组明显减慢(P<0.01),抑瘤率为62.55%。Bcl-2在实验组的阳性率低于空病毒组和PBS对照组(均P<0.01);各组Bax阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05);Caspase-3在实验组的阳性率高于空病毒组和PBS对照组(均P<0.01)。Bcl-2与Caspase-3的表达呈负相关(rs=-0.653,P<0.01)。结论:rAAV-ES可抑制宫颈癌移植瘤的生长,其机制可能与通过下调Bcl-2蛋白、激活下游的Caspase-3诱导细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 内皮抑素类 基因 BcL-2 BcL-2相关X蛋白质 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 宫颈肿瘤 疾病模型 动物 小鼠 近交BALB c
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Calculation of interaction of AlCl, AlCl_2 and AlCl_3 on Al_4C_3(001) Al_4CO_4(001) and Al_2CO(001) planes
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作者 段少飞 陈秀敏 +3 位作者 杨斌 郁青春 徐宝强 刘大春 《Journal of Central South University》 SCIE EI CAS CSCD 2015年第1期43-58,共16页
To make sure the intermediate products of the carbothermic reduction of Al2O3 process, such as Al4CO4, Al2CO and Al4C3,and the interaction of AlCl, AlCl2, AlCl3 with Al4CO4, Al2CO and Al4C3, respectively, thermodynami... To make sure the intermediate products of the carbothermic reduction of Al2O3 process, such as Al4CO4, Al2CO and Al4C3,and the interaction of AlCl, AlCl2, AlCl3 with Al4CO4, Al2CO and Al4C3, respectively, thermodynamic analyses were used to study the chloride reaction production of them under the vacuum situation. The stable structures and electronic properties of AlCl, AlCl2 and AlCl3 adsorbed on Al4CO4, Al2CO and Al4C3 were calculated by first-principles calculations by the CASTEP module in the Materials Studio program. The results show that the AlCl3 and AlCl2 molecules have decomposed on the plane of Al4C3(001), while there are no obvious decomposition of AlCl3 and AlCl2 on Al4CO4(001) and Al2CO(001) planes. The adsorption of AlCl on the Al4CO4(001)and Al2CO(001) planes is stronger than that on the Al4C3(001) plane. The interaction strength of AlCl3, as well as AlCl2, with Al4CO4,Al2CO and Al4C3 is in the sequence of Al4CO4Al2CO〉Al4C3. 展开更多
关键词 ab initio chloride reaction carbothermic reduction Al4c3 Al4cO4 Al2cO
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不饱和类碳烯H_2C═CLiBr的DFT研究 被引量:5
8
作者 刘奉岭 《分子科学学报》 CAS CSCD 2002年第3期151-155,共5页
采用量子化学计算方法 ,在B3LYP/ 6-3 1 1G 水平上全优化得到了不饱和类碳烯H2 CCLiBr的平衡结构 .结果表明 ,不饱和类碳烯H2 CCLiBr只有两种平衡结构 .对这两种平衡结构之间相互转化的过渡态进行计算 ,求得了转化势垒 .根据计算得到的... 采用量子化学计算方法 ,在B3LYP/ 6-3 1 1G 水平上全优化得到了不饱和类碳烯H2 CCLiBr的平衡结构 .结果表明 ,不饱和类碳烯H2 CCLiBr只有两种平衡结构 .对这两种平衡结构之间相互转化的过渡态进行计算 ,求得了转化势垒 .根据计算得到的微观性质 ,采用统计热力学方法 ,研究了两种平衡结构之间相互转化的热力学性质 ,进而讨论了两种平衡结构在不同温度下的稳定性问题 .在计算得到振动频率及强度的基础上 ,模拟了稳定平衡结构的红外光谱图 . 展开更多
关键词 DFT 不饱和类碳烯 H2c=cLiBr ab INITIO B3LYP/6-311G^* 热力学函数 过渡态 量子化学 平衡结构
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Metabolic and Endocrine Responses of Desert-Adapted Mice Reproductive System to Increased Salinity
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作者 Elena Bukovetzky Fuad Fares Abraham Haim 《Journal of Life Sciences》 2012年第10期1082-1093,共12页
From an evolutionary point of view, reproduction timing is an important adaptation which enables the transfer of genetic properties, thus enabling species continuation. Rodents inhabiting arid environments need reliab... From an evolutionary point of view, reproduction timing is an important adaptation which enables the transfer of genetic properties, thus enabling species continuation. Rodents inhabiting arid environments need reliable cues for triggering their reproduction. Results of previous studies showed that increased dietary salinity plays an important role as an ultimate regulator for desert adapted rodents' reproductive system. The authors aimed discovering pathways by which high salinity can affect the reproductive system and metabolic status of desert adapted common spiny mice, Acomys cahirinus. Mice were challenged with osmotic stress, water source salinity increased gradually from 0.9% - 5% NaCI under short days (SD) and long days (LD). The authors assessed leptin and free fatty acid (FFA) levels using ELISA while, SYBR green technology was used for relative receptor expression (RQ) of target genes. Results revealed that serum levels of the hormone leptin were significantly (P 〈 0.05) reduced in salinity treated (ST) mice. Levels of FFA were significantly (P 〈 0.05) increased in LD- and SD-ST-males. In ST-SD females a significant increase (P 〈 0.05) in expression levels of leptin (Ob-Rt) mRNA receptor gene, in ovaries was noted. Aldosteron (Nr3c2) and vasopressin (AVP) mRNA receptor expression genes levels were significantly (P 〈 0.05) increased in both LD- and SD- ST- males. 展开更多
关键词 Acomys cahirinus SALINITY desert-adapted AVP Nr3c2 Ob-Rt receptor genes leptin FFA.
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FMDV非结构蛋白2C主要表位区与3AB基因的组合表达与活性分析 被引量:2
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作者 张小丽 田美娜 +4 位作者 卢曾军 付元芳 马小军 刘在新 谢庆阁 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期10-15,共6页
近年的研究表明,口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白(NSP)2C在区分灭活疫苗免疫动物与自然感染动物方面具有潜在的价值,为了建立敏感性更高的鉴别诊断方法,将截取了2C蛋白N-端和C-端的主要B细胞表位区和完整3AB蛋白基因组合后,进行了原核表达,... 近年的研究表明,口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白(NSP)2C在区分灭活疫苗免疫动物与自然感染动物方面具有潜在的价值,为了建立敏感性更高的鉴别诊断方法,将截取了2C蛋白N-端和C-端的主要B细胞表位区和完整3AB蛋白基因组合后,进行了原核表达,得到了分子量约为47.6kD的目的蛋白2C′3AB。通过Westernblotting分析证明,表达产物能被FMDV感染动物阳性血清识别,具有很好的反应性。以通过电泳纯化的目的蛋白作抗原进行间接ELISA检测不同来源的动物血清,结果表明,该抗原仅与感染动物血清具有很好的反应活性,而与健康动物与免疫动物血清无反应,说明重组蛋白2C′3AB可作为区分灭活疫苗免疫动物与感染动物的鉴别诊断抗原。用2C′3AB和3ABC为抗原进行间接ELISA,对比检测田间血清样品,结果显示2C′3AB-ELISA敏感性比3ABC-ELISA高。说明以重组蛋白2C′3AB作为鉴别诊断抗原,能进一步提高对临界值血清的检出率,这对区分灭活疫苗免疫动物与FMDV隐性感染动物与带毒动物具有非常重要的意义。 展开更多
关键词 FMDV 非结构蛋白 2c3 ab 原核表达 活性分析
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MnSOD模拟化合物通过线粒体途径诱导K562/ADM细胞凋亡 被引量:8
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作者 范临兰 魏虎来 +1 位作者 窦伟 刘伟生 《第四军医大学学报》 北大核心 2008年第24期2248-2251,共4页
目的:观察锰超氧化物岐化酶模拟化合物(Mn-SODm)对人白血病K562/ADM耐药细胞凋亡诱导作用,并探讨其分子机制.方法:采用AnnexinV/PI双标记和细胞形态学法检测K562/ADM细胞凋亡;流式细胞术(FCM)检测细胞Bcl-2,Bax蛋白表达水平、线粒体跨... 目的:观察锰超氧化物岐化酶模拟化合物(Mn-SODm)对人白血病K562/ADM耐药细胞凋亡诱导作用,并探讨其分子机制.方法:采用AnnexinV/PI双标记和细胞形态学法检测K562/ADM细胞凋亡;流式细胞术(FCM)检测细胞Bcl-2,Bax蛋白表达水平、线粒体跨膜电位(Δψm),细胞色素C(Cytc)含量和释放Caspase-3活性变化.结果:10,50mg/LMnSODm处理K562/ADM细胞后,AnnexinV/PI染色显示凋亡细胞明显增多,凋亡率分别为85.1%,96.8%;光学显微镜和透射电镜观察呈现典型的凋亡形态改变;FCM检测发现Bcl-2蛋白表达下调32%~73%,Bax蛋白表达增高4~10倍;线粒体Δψm释放降低35%~52%;Cytc含量增高28%~75%;Caspase-3活性增强5.1~6.4倍.结论:MnSODmke可抑制Bcl-2蛋白表达,促进Bax蛋白表达,并通过线粒体途径诱发K562/ADM耐药细胞凋亡. 展开更多
关键词 锰超氧化物岐化酶模拟化合物 K562/ADM细胞 细胞凋亡 基因 bcl-2 bax 膜电位 细胞色素c 半胱氨酶天冬氨酸蛋白酶
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AB型改性PPTA新单体的合成与表征 被引量:1
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作者 蔡丽霞 金宁人 +2 位作者 赵德明 张建庭 金婷婷 《浙江工业大学学报》 CAS 2012年第2期137-142,共6页
针对聚对苯二甲酰对苯二胺(PPTA)聚合及硫酸中纺丝的不足,提出以增加酰胺类有机溶剂的溶解度,从合成改性基团―CH3在聚合物的分子链中均匀且完全有序排列的改性PPTA(M-PPTA)出发,创新研究了AB型M-PPTA新单体4-(4-氨基-2-甲基苯胺羰基)... 针对聚对苯二甲酰对苯二胺(PPTA)聚合及硫酸中纺丝的不足,提出以增加酰胺类有机溶剂的溶解度,从合成改性基团―CH3在聚合物的分子链中均匀且完全有序排列的改性PPTA(M-PPTA)出发,创新研究了AB型M-PPTA新单体4-(4-氨基-2-甲基苯胺羰基)苯甲酸甲酯(MACB)的合成,考察了溶剂、反应时间、还原剂等对反应的影响,结果表明:采用以4-氨基-2′,3-二甲基偶氮苯(C.I.11160)和对甲氧羰基苯甲酰氯(MBC)为原料,先缩合合成中间体MDCB,后经铁粉还原工艺合成出的黄色结晶MACB,精制后的纯度和总收率分别达99%和70%以上,并经FT-IR、13 CNMR和MS等定性分析确认.合成过程已呈现工艺简练、操作安全以及原料价廉易得等特点. 展开更多
关键词 4-(4-氨基-2-甲基苯胺羰基)苯甲酸甲酯(MAcB) ab型M-PPTA新单体 4-氨基-2 3-二甲基偶氮甲苯(c.I.11160) 4-(2 3-二甲基偶氮苯-4-胺基羰基)苯甲酸甲酯(MDcB) 合成与表征
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基于口蹄疫病毒非结构蛋白3AB/2C的ELISA鉴别检测试剂盒的研制与应用 被引量:3
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作者 董林 王金良 +4 位作者 王艳萍 王洪梅 李金林 沈志强 何洪彬 《畜牧与兽医》 北大核心 2016年第11期71-76,共6页
基于口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白3AB/2C,研制快速鉴别口蹄疫自然感染和疫苗接种的ELISA检测试剂盒。诱导表达3AB/2C蛋白,His亲和层析纯化目的蛋白;以纯化的3AB/2C蛋白为包被抗原,建立间接ELISA方法,优化ELISA反应条件;标准化ELISA操... 基于口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白3AB/2C,研制快速鉴别口蹄疫自然感染和疫苗接种的ELISA检测试剂盒。诱导表达3AB/2C蛋白,His亲和层析纯化目的蛋白;以纯化的3AB/2C蛋白为包被抗原,建立间接ELISA方法,优化ELISA反应条件;标准化ELISA操作规程和试剂盒组分,组装ELISA试剂盒,进行特异性、敏感性、符合率、重复性、血清交叉反应、保存期等性能评价;分离临床牛血清进行应用性检测,评价ELISA试剂盒适用性。结果获得了大小约51 ku可溶性表达3AB/2C蛋白,亲和层析纯化后纯度可达90%以上;确定最适抗原包被浓度为3.25μg/m L,血清稀释度1∶80,封闭液为2%乳清蛋白,封闭条件为37℃1 h 4℃10 h;试剂盒敏感性97.5%、特异性98.3%,批内、批间变异系数分别为3.40%~6.71%和5.20%~8.44%;与3种商品化试剂盒符合率分别为98.90%、98.02%和96.72%;试剂盒4℃条件下保存期可达12个月;1 457份临床样品检测,FMDV感染阳性率6.41%~30.35%。本研究研制的鉴别ELISA试剂盒检测结果可靠、稳定性好,能有效鉴别FMDV自然感染和疫苗免疫,可为FMD综合防控提供技术支撑。 展开更多
关键词 口蹄疫 3ab/2c 鉴别检测 ELISA试剂盒
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JAK3 mediates c-myc gene expression induced by interleukin-2 被引量:1
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作者 Zhu Jinfang Lu Linrong +3 位作者 Ji Hongbin Zheng Zhongcheng J. Thèze Liu Xinyuan 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 1998年第4期308-311,共4页
C myc gene expression can be rapidly induced by IL 2 through intracellular signal transduction which is triggered by the interaction between IL 2 and its receptor (IL 2R). JAK3 which associates to the intracellular ... C myc gene expression can be rapidly induced by IL 2 through intracellular signal transduction which is triggered by the interaction between IL 2 and its receptor (IL 2R). JAK3 which associates to the intracellular domain of IL2R γ may play a critical role in this process. To reveal the action of JAK3 in c myc induction, a chimeric receptor gene IL2R α/γ/Δ NJAK3 is constructed which consists of extracellular domain derived from IL 2R α subunit (IL2R α), the transmembrane sequence derived from IL2R γ and the cytoplasmic domain derived from the catalytic domain of JAK3 (Δ NJAK3), and then transfected this chimeric gene into mouse fibroblast cell line L929 β which had been transfected with IL2R β gene and stably expressed IL2R β in high level. In the transfectants coexpressing IL2R β and α/γ/Δ NJAK3, the stimulation of IL2 could intensively induce c myc gene expression. Because the whole cytoplasmic domain of IL2R γ which could recruit signaling molecules was replaced by JAK3 and the c myc could be still induced by IL2 in this situation, the results here gave the direct evidence demonstrating that JAK3 plays an important role in c myc gene expression induced by IL2. 展开更多
关键词 INTERLEUKIN 2(IL 2) JAK3(Janus KINASE 3) c MYc gene signal transduction.
全文增补中
β-酮硫解酶缺乏症3例患儿的临床及遗传学分析
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作者 吴雪 李园 +5 位作者 陈琼 毋盛楠 苏畅 李东晓 陈永兴 卫海燕 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 2024年第3期289-293,共5页
目的探讨3例β-酮硫解酶缺乏症(BKTD)患儿的临床特征和基因变异。方法回顾性分析河南省儿童医院2018年1月至2022年10月诊治的3例BKTD患儿的临床表现、实验室检查及基因检测资料,分析其临床和基因变异特点。结果3例患儿均为男性,年龄为7... 目的探讨3例β-酮硫解酶缺乏症(BKTD)患儿的临床特征和基因变异。方法回顾性分析河南省儿童医院2018年1月至2022年10月诊治的3例BKTD患儿的临床表现、实验室检查及基因检测资料,分析其临床和基因变异特点。结果3例患儿均为男性,年龄为7~11个月,表现为外伤应激、感染后出现精神差、气促、呕吐、抽搐等,均存在重度代谢性酸中毒、血和尿中酮体升高、低血糖、血异戊烯酰肉碱和3-羟基异戊酰肉碱升高、尿2-甲基-3-羟基丁酸和甲基巴豆酰甘氨酸增多。基因检测提示患儿1的ACAT1基因存在c.1183G>T杂合变异与1个涉及ACAT1基因的大片段缺失(chr11:102980303_110501515),患儿2的ACAT1基因存在c.121-3C>G与c.826+5_826+9delGTGTT复合杂合变异,患儿3的ACAT1基因存在c.928G>C与c.1142T>C复合杂合变异。患儿2与患儿3的4种变异均为已知的致病性或可能致病性变异。根据美国医学遗传学与基因组学学会变异相关指南,患儿1的c.1183G>T被评级为意义不明变异(PM2_Supporting+PP3+PP4),11q22.3-11q23.1大片段缺失查询DGV正常人群拷贝数变异数据库未见收录,被评级为致病性拷贝数变异。结论ACAT1基因的变异考虑为3例BKTD患儿的遗传学病因。 展开更多
关键词 乙酰coA c-酰基转移酶 β-酮硫解酶缺乏症 低血糖 酮症酸中毒 2-甲基-3羟基丁酸 AcAT1基因
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红花醌苷对心肌缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡的影响 被引量:5
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作者 石小燕 邓丽 薛瑞璐 《精准医学杂志》 2018年第1期67-70,共4页
目的探讨红花醌苷对心肌缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡的影响及其作用机制。方法选取SD大鼠50只,采用冠状动脉结扎再灌注法建立大鼠心肌缺血再灌注模型,并随机分为假手术组、模型组及红花醌苷低、中、高剂量组,其中假手术组大鼠不结扎处... 目的探讨红花醌苷对心肌缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡的影响及其作用机制。方法选取SD大鼠50只,采用冠状动脉结扎再灌注法建立大鼠心肌缺血再灌注模型,并随机分为假手术组、模型组及红花醌苷低、中、高剂量组,其中假手术组大鼠不结扎处理。大鼠建模成功后,红花醌苷低、中、高剂量组大鼠分别给予25、50以及100mg/kg的红花醌苷腹腔注射,假手术组和模型组大鼠给予等体积的生理盐水注射,连续7d。采用Western Blot方法与RT-qPCR方法检测给药前后大鼠心肌组织中B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)蛋白、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase 3)蛋白及其mRNA的表达水平,采用TUNEL方法检测大鼠心肌细胞的凋亡水平。结果与假手术组比较,模型组及红花醌苷低、中、高剂量组大鼠心肌组织中细胞凋亡水平及Bax、Caspase 3表达水平显著上升,Bcl-2表达水平显著下降(P<0.05);与模型组比较,红花醌苷低、中、高剂量组大鼠心肌细胞凋亡水平及Bax、Caspase 3表达水平显著下降,Bcl-2表达水平显著升高(P<0.05),且红花醌苷组大鼠各项指标的变化呈剂量依赖性。结论红花醌苷可能通过激活机体抗凋亡通路,降低缺血再灌注损伤造成的细胞凋亡水平,改善心功能。 展开更多
关键词 红花醌苷 心肌再灌注损伤 心肌缺血 细胞凋亡 原癌基因蛋白质c-BcL-2 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 大鼠 Sprague Dawley
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加味四君子汤含药血清对胃癌细胞SGC-7901凋亡相关因子表达的影响 被引量:20
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作者 聂闪闪 李洵 +1 位作者 赵玉航 王东生 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期25-30,共6页
目的:研究加味四君子汤含药血清对胃癌细胞SGC-7901凋亡相关因子表达的影响,进一步探讨其具体抗肿瘤作用机制。方法:40只SD大鼠随机分为加味四君子汤低、中、高剂量组(0.213,0.426,0.853 g·kg^(-1)),空白组,每组10只,空白组给予等... 目的:研究加味四君子汤含药血清对胃癌细胞SGC-7901凋亡相关因子表达的影响,进一步探讨其具体抗肿瘤作用机制。方法:40只SD大鼠随机分为加味四君子汤低、中、高剂量组(0.213,0.426,0.853 g·kg^(-1)),空白组,每组10只,空白组给予等体积的生理盐水灌胃,各组连续灌胃10 d,末次给药1.5 h后,水合氯醛腹腔麻醉,心脏采血,分离血清,56℃灭菌,0.22μm过滤,制备加味四君子汤高、中、低剂量组含药血清,各剂量组含药血清孵育胃癌细胞SGC-7901,运用流式细胞仪检测细胞早期和晚期凋亡情况,运用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)技术检测肿瘤抑制基因p53,c-核蛋白类基因(c-Myc),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3),凋亡相关基因B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)mRNA的表达,运用细胞免疫荧光技术检测p53,c-Myc,Caspase-3,Bcl-2蛋白的相对表达量情况。结果:与空白组比较,加味四君子汤含药血清高剂量组细胞凋亡比率显著升高(P<0.01),且可使胃癌细胞SGC-7901早期+晚期凋亡率达到22.58%(P<0.01)。Real-time PCR结果显示加味四君子汤中剂量组能显著促进Caspase-3 mRNA表达(P<0.01),加味四君子汤高剂量组能显著上调p53及c-Myc mRNA表达量(P<0.01),加味四君子汤高剂量组显著抑制Bcl-2 mRNA表达(P<0.01)。免疫荧光结果显示加味加味四君子汤高剂量组能使c-Myc,Caspase-3,p53蛋白表达水平显著升高(P<0.01),而Bcl-2蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论:加味四君子汤含药血清能抑制抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,促进凋亡相关分子p53,c-Myc,Caspase-3的表达,发挥抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 加味四君子汤含药血清 胃癌细胞SGc-7901 细胞凋亡 肿瘤抑制基因P53 c-核蛋白类基因(c-Myc) 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3) 凋亡相关基因B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)
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