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芝麻热胁迫响应基因SiHsfB-2b的克隆及表达特性分析
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作者 田媛 苏小雨 +7 位作者 王东勇 李丰 张鹏钰 付锦州 戎亚思 王龙 高桐梅 吴寅 《山东农业科学》 北大核心 2024年第7期8-15,共8页
为探究B类热激转录因子(HSFs)在芝麻耐热性中的分子功能,基于前期转录组分析鉴定到的编码B类HSF家族蛋白HsfB2b的基因序列,以郑太芝3号耐热白芝麻品种为材料,采用同源克隆方法克隆了芝麻SiHsfB-2b基因,对其进行生物信息学分析,同时分析... 为探究B类热激转录因子(HSFs)在芝麻耐热性中的分子功能,基于前期转录组分析鉴定到的编码B类HSF家族蛋白HsfB2b的基因序列,以郑太芝3号耐热白芝麻品种为材料,采用同源克隆方法克隆了芝麻SiHsfB-2b基因,对其进行生物信息学分析,同时分析其在芝麻不同器官和热胁迫下的表达特性,并对其进行亚细胞定位。结果表明:SiHsfB-2b基因CDS序列全长为936 bp,编码311个氨基酸;系统进化树分析表明SiHsfB-2b与松蒿、独脚金和锈鳞木樨榄的同源蛋白关系较近,含保守DNA结合结构域;亚细胞定位于细胞核内;SiHsfB-2b基因启动子区域含有13类顺式作用元件,其中与胁迫响应和激素响应相关的各有3类。RT-qPCR分析结果显示,热胁迫可诱导SiHsfB-2b在芝麻根、茎和叶中上调表达,叶中相对表达量最高;在持续高温胁迫下,SiHsfB-2b在芝麻茎和叶中的表达量呈上升趋势,且在胁迫后期的叶中表现出显著上调,而根中的表达量呈现出先上升后下降趋势。综上推测,SiHsfB-2b基因可能通过介导胁迫和激素信号等通路积极响应热胁迫,这可为后期深入研究芝麻耐热性的分子机制奠定理论基础。 展开更多
关键词 芝麻 耐热性 SiHsfB-2b基因 基因克隆 定量表达分析 亚细胞定位
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ADRA2B gene insertion/deletion polymorphism and artery compliance
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作者 ZHANG Hai-feng LI Xin-li +7 位作者 XIE Si-feng ZHU Jian WANG Zhen-zhen LIANG Li-rong CAO Ke-jiang DE Wei YUAN Li HUANG Jun 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2005年第21期1797-1802,共6页
Background The ADRA2B gene insertion/deletion (I/D) polymorphism is associated with various cardiovascular and metabolic phenotypes. Large (C1) and small (C2) artery compliance, assessed by pulse wave analysis, ... Background The ADRA2B gene insertion/deletion (I/D) polymorphism is associated with various cardiovascular and metabolic phenotypes. Large (C1) and small (C2) artery compliance, assessed by pulse wave analysis, is considered as sensitive markers or risk factors for cardiovascular disease. Therefore whether the ADRA2B I/D polymorphism is associated with CI and C2 need to be investigated. Methods A total of 227 men and 243 women were enrolled in a Chinese family-based study. C1 and C2 were measured by pulse wave analysis. ADRA2B genotypes were determined by polymerase chain reaction. Statistical methods included generalized estimation equations and quantitative transmission disequilibrium test. Results The II (31.9%), ID (46.8%) and DD (21.3%) genotype frequencies were in Hardy-Weinberg equilibrium (P = 0. 73 ). The covariates selected by stepwise regression for C1 and C2 were age, systolic pressure and gender. The population based association analysis showed that C1 and C2 were not associated with ADRA2B genotype both before (C1 : P =0. 28; C2: P =0. 27) and after (C1 : P =0. 58; C2: P =0. 18) the adjustment. The family-based analyses of 128 informative offspring showed that transmission of the D-allele was not associated with C1 orC2, both before (CI: P=0.42; C2: P=0.85) and after (CI: P=0.31; C2: P= 0. 82) the adjustment. Conclusion The study do not support that the ADRA2B gene I/D polymorphism has a major gene effect on C1 or C2 in the Chinese population of current sample size. 展开更多
关键词 large artery compliance small artery compliance ADRA2b gene
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我国不同CMV分离物2b基因片段的RT-PCR扩增及其序列比较 被引量:11
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作者 庄木 王晓武 +3 位作者 谢丙炎 郑文光 冯兰香 方智远 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期146-150,共5页
本研究根据黄瓜花叶病毒2b基因的保守序列设计引物,利用一步RT-PCR技术对多个不同寄主和不同地理来源的黄瓜花叶病毒分离物的2b基因片段进行扩增,获得了含该基因全长约90%的cDNA片段(300bp)。序列测定与比较分析结果表明,国内不同CMV... 本研究根据黄瓜花叶病毒2b基因的保守序列设计引物,利用一步RT-PCR技术对多个不同寄主和不同地理来源的黄瓜花叶病毒分离物的2b基因片段进行扩增,获得了含该基因全长约90%的cDNA片段(300bp)。序列测定与比较分析结果表明,国内不同CMV分离物2b基因片段核酸序列同源性达93%以上,推测的氨基酸序列同源性超过90%,且均属于亚组Ⅰ。 展开更多
关键词 CMV分离物 2b基因 基因片段 RT-PCR扩增 黄瓜 花叶病毒 氨基酸 序列同源性
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短发夹结构RNA对口蹄疫病毒2B基因瞬时表达的抑制 被引量:8
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作者 崔丽瑾 王兴龙 +6 位作者 任林柱 伍晓慧 郎需龙 张辉 梅英武 李晓燕 卜朝阳 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期532-535,共4页
为探讨siRNA在哺乳动物细胞中对口蹄疫病毒(FMDV)2B基因的抑制作用,针对WFL株FMDV的2B基因,设计了4个siRNA,并将shRNA表达模板插入pSilencer1.0-U6载体,构建shRNA表达质粒,将其与含绿色荧光蛋白报告基因的pEGFP+2B融合表达质粒瞬时共转... 为探讨siRNA在哺乳动物细胞中对口蹄疫病毒(FMDV)2B基因的抑制作用,针对WFL株FMDV的2B基因,设计了4个siRNA,并将shRNA表达模板插入pSilencer1.0-U6载体,构建shRNA表达质粒,将其与含绿色荧光蛋白报告基因的pEGFP+2B融合表达质粒瞬时共转染BHK-21细胞,以荧光显微镜和流式细胞仪检测荧光表达量的变化,以实时定量RT-PCR法检测对2B基因mRNA的抑制作用。结果表明,本试验所构建的针对2B基因的shRNA表达载体可以在BHK-21细胞中抑制2B基因的瞬时表达。 展开更多
关键词 FMDV RNA干扰 2b基因
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黄瓜花叶病毒反义2b基因构建及其转基因初步研究 被引量:3
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作者 庄木 王晓武 +4 位作者 谢丙炎 杨宝军 方智远 黄和艳 郭淑华 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期811-813,共3页
研究构建了CMV反义2b基因的植物表达载体pZM6.2,通过农杆菌侵染的叶盘转化法导入烟草,分子检测证实获得了转反义2b基因的SR1烟草转基因植株,初步的CMV攻毒试验表明反义2b基因可介导对CMV的抗性。在此基础上,将pZM6.2转化番茄品种‘红玛... 研究构建了CMV反义2b基因的植物表达载体pZM6.2,通过农杆菌侵染的叶盘转化法导入烟草,分子检测证实获得了转反义2b基因的SR1烟草转基因植株,初步的CMV攻毒试验表明反义2b基因可介导对CMV的抗性。在此基础上,将pZM6.2转化番茄品种‘红玛瑙213’,获得了卡那霉素抗性苗,PCR检测表明得到了PCR阳性转化株。 展开更多
关键词 黄瓜花叶病毒 反义2b基因 转基因番茄
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侵染广东辣椒的黄瓜花叶病毒的CP及2b基因序列分析 被引量:3
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作者 许东林 周国辉 宋晓兵 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期51-54,共4页
对侵染广东省阳西县田间辣椒的黄瓜花叶病毒(cucumber mosaic wirus,CMV)的CP及2b基因进行序列分析,结果表明其CP基因与CMV亚组Ⅰ、亚组Ⅱ各株系之间的核苷酸同源率分别为90.9%~93.8%和76.1%~76.9%。氨基酸同源率分别为92.... 对侵染广东省阳西县田间辣椒的黄瓜花叶病毒(cucumber mosaic wirus,CMV)的CP及2b基因进行序列分析,结果表明其CP基因与CMV亚组Ⅰ、亚组Ⅱ各株系之间的核苷酸同源率分别为90.9%~93.8%和76.1%~76.9%。氨基酸同源率分别为92.7%~97.7%和72.4%~78.1%;其2b基因与CMV亚组Ⅰ、亚组Ⅱ之间的核苷酸同源率分别为83.9%~90.2%和64.0%~67.7%,氨基酸同源率分别为79.3%~85.7%和50.5%~53.5%,由此确认该CMV分离物属于亚组Ⅰ成员.此外,CMV亚组Ⅰ成员的CP及2b基因中分别具有一段长为102bp及54bp的高度保守序列,这为转基因诱导寄主转录后基因沉默(post-transcriptional gene silencing,PTGS)CMV育种研究提供了参考. 展开更多
关键词 辣椒 黄瓜花叶病毒 CP基因 2b基因 序列分析
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妊娠糖尿病患者血糖、血脂水平与CDKN2A/2B基因多态性的相关性 被引量:7
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作者 刘杰 王淑贞 +2 位作者 王巧莲 杜建国 王贝贝 《标记免疫分析与临床》 CAS 2018年第9期1360-1363,共4页
目的探讨妊娠糖尿病患者血糖、血脂水平与CDKN2A/2B基因多态性的相关性。方法选取2015年1月至2017年1月我院内分泌科、产科收治的妊娠期糖尿病患者120例(GDM组),同时选取同期在我院产科门诊检查糖耐量试验正常的孕妇120例作为对照。检... 目的探讨妊娠糖尿病患者血糖、血脂水平与CDKN2A/2B基因多态性的相关性。方法选取2015年1月至2017年1月我院内分泌科、产科收治的妊娠期糖尿病患者120例(GDM组),同时选取同期在我院产科门诊检查糖耐量试验正常的孕妇120例作为对照。检测两组孕妇CDKN2A/2B基因多态性,并对妊娠期糖尿病患者血糖、血脂水平与CDKN2A/2B基因多态性的相关性进行分析。结果妊娠期糖尿病患者TT、TC基因型的总胆固醇(TC)、空腹血糖(FBG)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)高于CC基因型,差异有统计学意义(P<0.05);TT、TC基因型的高密度脂蛋白(HDL)低于CC基因型,差异有统计学意义(P<0.05);两组孕妇CDKN2A/2B基因TT、TC、CC 3种基因型分布差异有统计学意义(P<0.05);GDM组危险等位基因T分布频率显著高于健康对照组(P <0.05)。结论 CDKN2A/2B基因可能是妊娠糖尿病的易感基因之一,TC、TG、LDL、HDL、FBG与CDKN2A/2B基因多态性具有相关性。 展开更多
关键词 妊娠糖尿病 CDKN2A/2b基因多态性 血糖 血脂
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Construction of Recombinant Adenovirus Vector Containing CEVB2L Gene 被引量:2
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作者 邵洪泽 毛文智 +4 位作者 宋阳 李琳 程荣华 孙健 孙强 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2010年第3期94-97,共4页
[Objective] Sheep contagious ecthyma virus B2L gene recombinant adenovirus was built by adenovirus vector system.[Method] Genome DNA extracted from sheep contagious ecthyma virus strain JLSY04 as a template,Gene fragm... [Objective] Sheep contagious ecthyma virus B2L gene recombinant adenovirus was built by adenovirus vector system.[Method] Genome DNA extracted from sheep contagious ecthyma virus strain JLSY04 as a template,Gene fragments obtained from B2L by PCR amplification;B2L gene cloning was cloned into PDNR-CMD vector,screening positive clones and plasmid CTC572-6 was obtained;CTC572-6 plasmid for homologous was recombined with the adenoviral vector.Screening positive clones and bacilli PCR,digestion and sequencing and so on were identified.[Result] After identified by enzyme digestion and gene sequencing,recombinant adenovirus vector CTC572Ade-30 of carrying sheep contagious ecthyma virus B2L gene was constructed successfully.[Conclusion] Which laid the foundation for sheep contagious ecthyma genetically engineered vaccine. 展开更多
关键词 CEV B2L gene Adenovirus vector
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口蹄疫病毒2B基因绿色荧光蛋白融合表达质粒的构建及表达 被引量:1
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作者 崔丽瑾 王兴龙 +6 位作者 梅英武 任林柱 闫广谋 张辉 郎需龙 段小宇 路浩 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2008年第9期756-758,共3页
目的构建口蹄疫病毒(FMDV)2B基因绿色荧光蛋白(GFP)融合表达质粒,并在BHK-21细胞中表达。方法RT-PCR扩增O型口蹄疫病毒WFL株的2B基因,克隆入表达载体pEGFP-C1,并进行双酶切、PCR及测序鉴定。将阳性重组质粒转染BHK-21细胞,检测绿色荧光... 目的构建口蹄疫病毒(FMDV)2B基因绿色荧光蛋白(GFP)融合表达质粒,并在BHK-21细胞中表达。方法RT-PCR扩增O型口蹄疫病毒WFL株的2B基因,克隆入表达载体pEGFP-C1,并进行双酶切、PCR及测序鉴定。将阳性重组质粒转染BHK-21细胞,检测绿色荧光蛋白的表达和2B基因转录水平。结果经双酶切及PCR鉴定,目的基因片段大小与预期相符,测序结果与WFL株相应序列一致。荧光显微镜和流式细胞仪均检测到细胞内绿色荧光蛋白的表达,荧光定量PCR检测到细胞内有2B基因的转录。结论已成功构建了FMDV2B基因GFP融合表达质粒,并在BHK-21细胞中获得了表达。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 2b基因 绿色荧光蛋白 融合表达
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人乳头瘤病毒E7与人干扰素α-2b融合基因在中国仓鼠卵巢细胞中的表达 被引量:1
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作者 相文忠 王飞 +4 位作者 王群 刘丰 张兆松 苏川 毕志刚 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期430-432,共3页
目的:构建人乳头瘤病毒(HPV)11-E7及人干扰素(IFN)α-2b的真核表达载体,并在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中表达。方法:同时用KpnⅠ、EcoRⅠ酶切pET-32a-IFNα-2b-linker-HPV11-E7及pcDNA3.1,将酶切产物纯化回收,两者的回收产物进行连接反应... 目的:构建人乳头瘤病毒(HPV)11-E7及人干扰素(IFN)α-2b的真核表达载体,并在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中表达。方法:同时用KpnⅠ、EcoRⅠ酶切pET-32a-IFNα-2b-linker-HPV11-E7及pcDNA3.1,将酶切产物纯化回收,两者的回收产物进行连接反应。连接产物转化大肠杆菌感受态细胞DH5α,随机挑选阳性克隆并提取质粒酶切鉴定;用脂质体法转染CHO细胞,用免疫荧光法检测融合基因的表达。结果:DNA测序结果显示,成功地将IFN-α-2b-linker-HPV11-E7装入pcDNA3.1的KpnⅠ、EcoRⅠ酶切位点之间,且其序列与设计完全一致;激光扫描共聚焦显微镜观察可见目的蛋白的表达。结论:成功地构建了HPV11-E7及IFNα-2b的真核表达载体,并在CHO细胞中表达,为提高DNA疫苗免疫效果的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 E7基因 干扰素Α-2b 融合基因
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重组黄瓜花叶病毒2b基因PVX侵染性载体的稳定性分析 被引量:1
11
作者 庄木 王晓武 +1 位作者 方智远 谢丙炎 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期420-425,共6页
本研究利用北京甘蓝CMV分离物(CMV-BG)全长2b基因,构建了含其正义和反义序列的PVX侵染性载体pVX2bS和pVX2bAS,并进行了它们与PVX侵染性载体间的共侵染稳定性实验。结果表明:pVX2bS和pVX2bAS能侵染本氏烟、SR1、Sam sun NN烟草、Shepody... 本研究利用北京甘蓝CMV分离物(CMV-BG)全长2b基因,构建了含其正义和反义序列的PVX侵染性载体pVX2bS和pVX2bAS,并进行了它们与PVX侵染性载体间的共侵染稳定性实验。结果表明:pVX2bS和pVX2bAS能侵染本氏烟、SR1、Sam sun NN烟草、Shepody马铃薯和中蔬5号番茄,与pSfinx相比,表现不同程度的症状延迟效应;pVX2bS和pVX2bAS在22℃/16℃(昼/夜温度)条件下,接种SR1烟草45d仍可检测到重组载体的存在;pVX2bS和pVX2bAS菌液混合接种15d后只能检测到正义或反义一种载体的随机表达,二者交互接种,后接种的一方不能表达。 展开更多
关键词 黄瓜花叶病毒 2b基因 PVX侵染性载体 侵染稳定性
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赫赛汀联合IFNα-2b对肾癌细胞耐药性的影响 被引量:1
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作者 王家菁 胡志全 叶章群 《山东医药》 CAS 北大核心 2005年第15期23-25,共3页
目的了解赫赛汀联合干扰能α-2b(IFNα-2b)对肾癌细胞系在体外的杀伤抑制作用,同时检测肾癌细胞在药物作用前后人类表皮生长因子受体2(HER2)、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)的表达情况。方法肾癌细胞系通过细胞培养技术进行培养,用... 目的了解赫赛汀联合干扰能α-2b(IFNα-2b)对肾癌细胞系在体外的杀伤抑制作用,同时检测肾癌细胞在药物作用前后人类表皮生长因子受体2(HER2)、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)的表达情况。方法肾癌细胞系通过细胞培养技术进行培养,用四唑比色法观察赫赛汀联合干扰能对该细胞系的抑制杀伤效果,应用链霉抗生物素—过氧化物酶免疫组织化学(SP)法测定HER2、γ-GCS表达情况。结果赫赛汀联合IFNα-2b对肾癌细胞的生长抑制及耐药性呈时间和剂量依赖性。经药物处理后,HER2、γ-GCS表达明显下降(P<0.05)。结论赫赛汀能有效抑制肾癌细胞的生长,对瘤细胞的耐药性也有一定的抑制作用。 展开更多
关键词 肾细胞癌 赫赛汀 干扰能α-2b 基因表达 耐药性 肿瘤细胞
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CDKN2A/2B基因单核苷酸多态性与妊娠期糖尿病的相关性 被引量:2
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作者 刘念 于祥远 +2 位作者 秦林原 张军 余红平 《广西医学》 CAS 2019年第13期1673-1677,共5页
目的探讨细胞周期素依赖性蛋白激酶抑制因子2A/2B(CDKN2A/2B)基因单核苷酸多态性(SNP)与妊娠期糖尿病(GDM)发生风险的关系。方法选择459例GDM患者为病例组,571例正常妊娠者为对照组。通过相关数据库及文献筛选CDKN2A/2B基因的7个候选SN... 目的探讨细胞周期素依赖性蛋白激酶抑制因子2A/2B(CDKN2A/2B)基因单核苷酸多态性(SNP)与妊娠期糖尿病(GDM)发生风险的关系。方法选择459例GDM患者为病例组,571例正常妊娠者为对照组。通过相关数据库及文献筛选CDKN2A/2B基因的7个候选SNP位点,并对其进行基因分型。采用多因素Logistic回归模型评估候选SNP位点与GDM的相关性,采用多因子降维法评估候选SNP位点的单独或联合作用对妊娠期女性发生GDM的影响。结果多因素回归分析结果显示,与携带CDKN2A/2B基因rs10811661位点CC基因型的孕妇比较,携带TC或TT基因型的孕妇GDM患病风险升高(均P<0.05);在显性遗传模型下,与CC基因型携带者比较,携带TC/TT基因型的孕妇发生GDM的风险升高(P<0.05)。多因子降维分析结果显示,最优单位点模型为rs10811661位点(P<0.05);SNP-SNP联合作用与GDM发病存在关联,rs10811661-rs7036656-rs1063192-rs3217986位点的交互作用可增加GDM发病风险(P<0.05)。结论 CDKN2A/2B基因rs10811661位点多态性与GDM发生有关,SNP单独和联合作用均可影响妊娠期女性对GDM的易感性。 展开更多
关键词 妊娠期糖尿病 细胞周期素依赖性蛋白激酶抑制因子2A/2b基因 单核苷酸多态性 rs10811661位点 发病风险
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沉默抑制子CMV 2b基因的克隆及其反向重复植物表达载体的构建 被引量:1
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作者 宋培培 李爽 +3 位作者 檀根甲 贾琳 丁菲 江彤 《激光生物学报》 CAS CSCD 2010年第3期347-352,共6页
从安徽亳州采集表现明显CMV症状的烟草样本,取ELISA检测阳性反应最强的样本提取总RNA。设计特异性引物扩增CMV RNA2部分片段,克隆并测序。其中包含的2b基因全长336个核苷酸,编码111个氨基酸。将来源于安徽烟草的CMV 2b基因与其它CMV 2b... 从安徽亳州采集表现明显CMV症状的烟草样本,取ELISA检测阳性反应最强的样本提取总RNA。设计特异性引物扩增CMV RNA2部分片段,克隆并测序。其中包含的2b基因全长336个核苷酸,编码111个氨基酸。将来源于安徽烟草的CMV 2b基因与其它CMV 2b基因进行序列比对,结果表明,来源于安徽烟草的CMV2b基因与来源于韩国的2b基因AF033667的核苷酸序列相似性最高,达98.8%。构建2b基因系统关系树,也表明来源于安徽烟草的CMV 2b基因与AF033667亲缘关系最近。以安徽CMV 2b为模板,分别扩增大小约为300 bp的正向片段CMV 2b(r)和反向片段CMV 2b(i)。先后将反向片段CMV 2b(i)和正向片段CMV 2b(r)分别插入载体pSK-In所含intron两侧,获得重组质粒pSK-2b(r)-In-2b(i)。再将含intron的正反向片段插入pBIN438,最终得到含CMV 2b部分序列反向重复的植物表达载体pBIN-2b(r)-In-2b(i)。 展开更多
关键词 CMV 2b基因 沉默抑制子 反向重复表达载体 构建
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p16基因与干扰素α-2b对黑色素瘤细胞A375生长的影响 被引量:6
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作者 金宛宛 马新华 +2 位作者 赵明 陈仕胜 高宇 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2013年第19期3122-3124,共3页
目的:探讨p16基因与干扰素(IFN)-α-2b对黑色素瘤A375细胞生长的影响。方法 :将pDC312CMV-p16质粒转染进黑色素瘤A375细胞;检测细胞内源性和外源性p16基因mRNA表达差异;予转染组与非转染组A375细胞不同浓度IFN-α-2b,光镜下观察细胞形... 目的:探讨p16基因与干扰素(IFN)-α-2b对黑色素瘤A375细胞生长的影响。方法 :将pDC312CMV-p16质粒转染进黑色素瘤A375细胞;检测细胞内源性和外源性p16基因mRNA表达差异;予转染组与非转染组A375细胞不同浓度IFN-α-2b,光镜下观察细胞形态变化;MTT检测IFN-α-2b对细胞生长的抑制作用。结果:未转染组无p16基因表达,转染组表达p16基因;转染组较非转染组细胞抑制率高,且差异有显著性(P<0.05)。光镜下,转染组及IFN-α-2b处理后A375细胞均呈凋亡状态。IFN-α-2b可抑制A375细胞增殖,抑制作用随浓度增加而增强(P<0.05);转染与给药存在交互效应(P<0.05)。结论:p16基因和IFN-α-2b均能抑制黑色素瘤A375细胞增殖,且存在交互作用。 展开更多
关键词 黑色素瘤 P16 干扰素Α-2b 转染
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胸腺素α1/干扰素α-2b融合基因表达载体的构建与表达 被引量:1
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作者 王景林 侯世勇 康琳 《生命科学研究》 CAS CSCD 2004年第3期242-244,共3页
通过PCR人工合成模板的方法获得牛Tα1基因,与含IFNα-2b基因的pAG-IFN重组质粒,构建Tα1/IFNα-2b融合基因重组质粒pUC18-Tα1/IFN,经序列分析证实,融合基因Tα1和IFNα-2b与GenBank登录基因的序列一致性分别为100%和98.5%,仅IFNα-2b... 通过PCR人工合成模板的方法获得牛Tα1基因,与含IFNα-2b基因的pAG-IFN重组质粒,构建Tα1/IFNα-2b融合基因重组质粒pUC18-Tα1/IFN,经序列分析证实,融合基因Tα1和IFNα-2b与GenBank登录基因的序列一致性分别为100%和98.5%,仅IFNα-2b有两处碱基发生无义突变.再将融合基因亚克隆入pBV220,构建融合表达载体pBV220-Tα1/IFN,转化到E.coliM15经IPTG诱导,实现了Tα1-IFNα-2b融合蛋白的高表达,约占菌体总蛋白的24.5%,为包涵体形式.这为研制Tα1-IFNα-2b双重活性的融合蛋白奠定了基础. 展开更多
关键词 胸腺素a1 干扰素A-2b 融合基因 表达
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人α-干扰素2b基因转化番茄、番木瓜的研究(Ⅰ)──—人α-干扰素2b基因植物表达载体构建方法的研究 被引量:4
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作者 周鹏 赵志英 郑学勤 《热带作物学报》 CSCD 1998年第1期52-57,共6页
以PBV889(α-IFN-2b)为基因供体,利用EcoRⅠ/PstⅠ双酶切分离出基因α-IFN-2b,再利用现有的植物表达质粒ROKⅡ(带PRV-CP基因,35Spromoter/NPTⅡ),用XbaⅠ/SacⅠ双酶切分离出大片段(E6)作为基因受体,采用定向连接法... 以PBV889(α-IFN-2b)为基因供体,利用EcoRⅠ/PstⅠ双酶切分离出基因α-IFN-2b,再利用现有的植物表达质粒ROKⅡ(带PRV-CP基因,35Spromoter/NPTⅡ),用XbaⅠ/SacⅠ双酶切分离出大片段(E6)作为基因受体,采用定向连接法将α-IFN-2b拼接在E6上,完成植物表达载体构建。采用DNAdotblot、RNAdotblot对重组子进行筛选验证。 展开更多
关键词 转基因蔬菜 α干扰素2b 表达载体 重组子筛选
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SH3PXD2b基因突变与颅颌面畸形和中耳炎 被引量:1
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作者 杨彬 张志光 《国际口腔医学杂志》 CAS 2013年第6期795-798,共4页
先天性颅颌面畸形作为口腔颌面外科的常见病,多由基因突变引起。先天性颅颌面畸形在影响患者颅颌面形态和功能的同时,多伴随有咽鼓管功能障碍和中耳炎的发生,引起听觉障碍。SH3PXD2b作为新发现的伪足受体蛋白基因,对细胞表面伪足形成、... 先天性颅颌面畸形作为口腔颌面外科的常见病,多由基因突变引起。先天性颅颌面畸形在影响患者颅颌面形态和功能的同时,多伴随有咽鼓管功能障碍和中耳炎的发生,引起听觉障碍。SH3PXD2b作为新发现的伪足受体蛋白基因,对细胞表面伪足形成、细胞外基质改建与重塑、颅颌面器官的发生有重要的意义。本文就SH3PXD2b基因、SH3PXD2b基因突变、颅颌面畸形与咽鼓管功能障碍和中耳炎等研究进展作一综述。 展开更多
关键词 SH3PXD2b基因 基因突变 颅颌面畸形 咽鼓管功能障碍 中耳炎
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RET原癌基因突变致多发性内分泌腺瘤病2b型临床诊治 被引量:3
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作者 黄培颖 陈宁 +5 位作者 宋海曲 王彩虹 张惠杰 李小英 李学军 林明珠 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期229-232,共4页
多发性内分泌腺瘤病(MEN)2b型是RET基因突变引起的常染色体显性遗传病,常见临床表型为甲状腺髓样癌(MTC)、嗜铬细胞瘤、多发性黏膜神经瘤和类马凡体型,各表型可同时或先后发生,易漏诊。本文分析了1例MEN2b型患者病史、诊断、治疗及随访... 多发性内分泌腺瘤病(MEN)2b型是RET基因突变引起的常染色体显性遗传病,常见临床表型为甲状腺髓样癌(MTC)、嗜铬细胞瘤、多发性黏膜神经瘤和类马凡体型,各表型可同时或先后发生,易漏诊。本文分析了1例MEN2b型患者病史、诊断、治疗及随访资料。本例患者1995年无诱因出现颈部增粗,诊断为"右甲状腺腺瘤";1999年发现"左侧甲状腺占位";2000年发现舌、唇黏膜增厚并突起小肿物,肿物渐增大;2009年及2010年分别行左、右肾上腺肿物切除,术后病理示:嗜铬细胞瘤。本次入院行下唇内侧局部小突起切除和双侧甲状腺次全切除术,术后病理示:舌黏膜神经瘤、MTC。患者基因测序发现RET基因第16号外显子918密码子突变(M918T),患者父母、兄均未出现MEN2b表型特征,基因检测无异常发现。患者MTC术后1年降钙素水平仍高于参考值,结合肺部CT检查结果,考虑MTC肺部转移可能性较大。 展开更多
关键词 多发性内分泌腺瘤病2b 甲状腺肿瘤 嗜铬细胞瘤 RET基因 突变
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消减杂交筛选2BS细胞衰老过程中差异表达基因 被引量:1
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作者 赵亮 童坦君 张宗玉 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期311-318,共8页
细胞的复制性衰老最终导致不可逆的G1 期阻滞 ,研究此过程中差异表达基因对于阐明衰老发生机制有重要意义 .分别构建年轻和衰老 2BS细胞高表达基因的消减文库 ,经点杂交筛选后共得5 3个差异表达基因 .对其中部分基因的VirtualNorthern... 细胞的复制性衰老最终导致不可逆的G1 期阻滞 ,研究此过程中差异表达基因对于阐明衰老发生机制有重要意义 .分别构建年轻和衰老 2BS细胞高表达基因的消减文库 ,经点杂交筛选后共得5 3个差异表达基因 .对其中部分基因的VirtualNorthern印迹分析证实差异表达确实存在 .选择Y1 1 4和S1 1 1片段 ,以Northern印迹分析确证其表达变化 ;并通过对新生儿和老年人白细胞中二者的表达分析 ,显示二者在体内也存在与体外衰老过程相一致的随增龄表达变化 .结果在一定程度上体现了 2BS细胞衰老过程中基因表达谱的变化 ;首次报道了TSSC3(tumorsuppressingsubtransferablecandidate 3)、hnRNPK (heterogeneousnuclearribonucleoproteinK)等基因在成纤维细胞衰老时发生差异表达 ;通过对Y1 1 4和S1 1 1在体内衰老时的表达分析 。 展开更多
关键词 复制性衰老 2bS 消减杂交 差异表达基因
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