响应面法对3,5-二硝基水杨酸比色法测定水果中还原糖含量条件的优化

采用3,5-二硝基水杨酸(DNS)比色法测定水果中还原糖的含量,在单因素试验的基础上,采用三因素三水平的响应面分析法(RSM)优化DNS法测定苹果还原糖的最佳条件,同时建立数学模型并验证其可靠性。回归方程失拟项不显著(P=0.133 7),预测值与实际值吻合(R^2=0.957 4);影响DNS法测定还原糖含量的因素主次顺序为:DNS用量﹥反应温度﹥显色时间;DNS法测定还原糖含量的最佳条件为:DNS用量4.0 m L,显色时间5.0 min,反应温度87.0℃,测得还原糖实际浓度为94.66 mg/L,与理论预测值基本相符。按照优化的最佳条件,以苹果、桃、葡萄、哈密瓜、脐橙、菠萝6种代表性水果为对象验证该方法的精密度、重复性和准确度,其标准偏差为0.1%~0.5%,相对标准偏差为2.0%~4.8%,加标回收率为90.6%~104.2%。该方法简便、快速,准确度高,重现性好,适合于苹果及其他水果中还原糖的测定。

3,5-二硝基水杨酸比色法测定废烟草中总糖

对3,5-二硝基水杨酸比色法测定总糖含量的条件进行了研究,结果表明:最佳比色波长为540 nm,显色剂的最佳用量为2.5 mL,沸水浴时间为5 min.对废烟草样品进行测定,试验表明:该方法在2-240μg.mL-1浓度范围内遵循比耳定律,呈线性关系(R=0.999 3),变异系数为0.46%,平均回收率为98.9%,该法的准确性和精密度均较好.与经典的斐林试剂法相比,具有操作简便、快速、测定成本低等特点.尤其适合于低浓度糖样的测定.

3,5-二硝基水杨酸比色法定糖的条件优化

目的优化3,5-二硝基水杨酸比色法定糖条件。方法单因素试验法。结果优化后的参数条件为波长495nm,VDA/V总为1.5/3.5,反应温度90℃,反应时间5-7min。结论改良后的3,5-二硝基水杨酸比色法测定还原糖的结果更高效、准确和稳定。

3,5-二硝基水杨酸比色法测定黄芪多糖的含量

目的:建立黄芪有效部位多糖的含量测定方法。方法:用优化后的3,5-二硝基水杨酸(DNS)比色法测定黄芪有效部位多糖的含量。结果:DNS试剂的用量为2ml,显色温度为100℃,显色时间为5min,在500nm处多糖含量与吸光度有良好的线性关系,平均回收率为100.6%,RSD=1.79%(n=5)。结论:该方法操作简便,测定结果准确,重复性好,可用于测定黄芪多糖的含量。

不同DNS试剂测定木糖含量的研究

对几种不同配制方法配制的DNS(3,5-二硝基水杨酸)试剂测定木糖含量的效果进行研究。结果表明,除DNS3不适合测定木糖含量外,其它3种DNS试剂的测定效果均较好,其中DNS1在精密度、准确度和时间稳定性上均优于其它几种DNS试剂,是DNS法测木糖含量时的首选显色试剂。

不同杨树品系还原糖含量与青杨天牛危害的关系

利用3,5-二硝基水杨酸比色法测定迎春5号、1344、银中杨、小黑14和施×斯韧皮部和木质部的还原糖含量。结果表明:不同杨树品系韧皮部还原糖含量之间的差异性不显著(P>0.05),而木质部还原糖含量在健康和被害两种情况下的差异性都显著(P<0.05)。被害韧皮部的还原糖含量与被害率有较强正相关性。

烤烟叶片还原糖含量测定方法的改进

烤烟叶片还原糖含量是烤烟品质的重要指标之一,现有的测定方法在稳定性、准确度、成本消耗及效率方面尚存在不足之处.该研究在对3,5-二硝基水杨酸(DNS)法与斐林试剂比色法进行比较的基础上,对3,5-二硝基水杨酸(DNS)法提取烤烟叶片还原糖含量进行了优化.结果表明:可将预浸提试剂由酒精改为蒸馏水,浸提时间由10 h缩短为10 min;对于大量样品检测而言,此方法的改进可简化流程,节约成本,提高效率.

基于淀粉酶活性检测的麦芽质量评价方法

目的:建立基于淀粉酶活性检测的麦芽质量评价方法,并对不同产地麦芽药材进行质量评价。方法:采用平衡透析的方法去除麦芽中干扰3,5-二硝基水杨酸(DNS)显色的还原糖,以可见光分光光度法和酶标仪吸收光比色法测定麦芽中淀粉酶水解淀粉所产生的还原糖含量,并据此计算得到淀粉酶的活力。酶促反应最佳pH为5.6,反应时间为5分钟,测定波长为540nm,DNS显色剂用量为2mL,显色时间为15分钟。结果:可见光分光光度法和酶标仪吸收光比色法均有较好的精密度和重复性。不同地区麦芽药材的淀粉酶活性差异较大,最低值和最高值分别为81.14和571.22U.g-1。结论:麦芽的淀粉酶活性测定方法可用于麦芽类药材的质量评价。

“永生源”铁皮石斛中多糖含量测定方法的比较研究

目的:筛选铁皮石斛中多糖含量测定的最佳方法。方法:分别采用苯酚-浓硫酸比色法和3,5-二硝基水杨酸比色法(DNS法)测定铁皮石斛中多糖的含量。结果:苯酚-浓硫酸法测定铁皮石斛中多糖含量偏高。结论:DNS法较为适合铁皮石斛中多糖含量测定,且所建立的方法操作简便、稳定、可重复,可用于铁皮石斛药材及其多糖类保健品的质量控制。

一株海藻多糖降解菌的分离鉴定及产酶条件优化

从大型褐藻藻体分离获得一株具有高效降解琼胶和褐藻胶能力的革兰氏阴性菌菌株ST-6。16S rDNA序列分析结果表明,该菌株与海绵假单胞菌的相似度达到99%,NJ法构建系统进化树也与海绵假单胞菌归为一类,鉴定为海绵假单胞菌Pseudomonas pachastrellae ST-6。在2216E培养基、30℃培养条件下,海绵假单胞菌ST-6的生长曲线表明,接种10~48 h为菌株的指数生长期,48~72 h为生长稳定期。产酶结果表明,菌株ST-6在指数生长期时菌液的胞外琼胶酶相对酶活力较高,在接种48 h时,菌液的琼胶酶相对酶活力最高为249.15 U/m L。此外,发现菌株ST-6的琼胶酶和褐藻胶酶的分泌类型分别为非诱导型和诱导型。采用单因素分析法对其生长和产酶条件进行分析,结果表明,海绵假单胞菌ST-6最适生长条件为:温度25~35℃,33值5~9;最适产琼胶酶条件为:温度30℃,33值为7,琼胶浓度0.3%。最适产褐藻胶酶条件为:温度35℃,33值为9。在温度30℃、339和褐藻酸钠浓度0.15%的培养条件下,海绵假单胞菌ST-6获得最高胞外褐藻胶酶相对酶活力为135.54 U/m L。

两种检测还原糖方法的比较

采用费林试剂滴定法和3,5-二硝基水杨酸比色法测定湘西野生菊芋中还原糖(及总糖)含量,分析比较二者的测定结果及可操作性等。结果表明,费林试剂滴定法平行样检测RSD值为2.00%,精密度为8%~13%;3,5-二硝基水杨酸比色法平行样检测RSD值为1.68%,精密度为2.5%~4.0%;费林试剂滴定法易受终点计量等因素的干扰,特别是对于糖含量低的样品检测误差较大,但较适用于自带颜色产品的检测;3,5-二硝基水杨酸比色法操作简单、快速、适宜批量处理,其显色反应体系在135 min内同一标准点RSD值为0.55%,且显色反应体系相当稳定,客观因素对其低浓度样品影响较小,检测结果准确度较高。

胃乐新片中多糖的含量测定

目的 研究胃乐新片中多糖的含量方法。方法 采用正交实验法优选3，5-二硝基水杨酸法测定胃乐新片中多糖含量的最佳条件。结果 该方法的最优条件为：3，5-二硝基水杨酸试液用量为1．5mL；反应温度为100℃；显色时间为5min。在最佳条件下，在8．5056～64．0448μg·mL^-1多糖含量与吸收度有良好的线性关系，平均回收率为100．02％，RSD=1．41％（n=5）。结论 该方法简单、准确，可作为该制剂的质量控制指标。

DNS法测定玉米须保健饮料中总多糖含量

目的考察供试品溶液制备的最佳条件,测定玉米须保健饮料中多糖含量。方法采用正交实验确定供试品溶液制备的最佳条件,二硝基水杨酸法显色,以葡萄糖为对照品,测定样品中总多糖的含量。结果葡萄糖质量浓度在8~56μg.mL-1范围内与吸收度呈良好的线性关系;平均回收率为101.83%,RSD=1.84%;测得的总多糖平均含量为0.850 0 mg.mL-1。结论对于成分简单的样品,采用二硝基水杨酸法测定玉米须保健饮料中总多糖含量,快速准确,稳定性好,可作为该制剂总多糖含量测定方法。