促性腺激素释放激素激动剂通过ERK MAPK途径调控大鼠睾丸间质细胞3β-HSD mRNA表达

目的:促性腺激素释放激素(GnRH)是下丘脑分泌的10肽激素,通过刺激促性腺激素释放激素的合成和分泌,调节性激素的合成。GnRH对睾丸间质细胞也具有直接的刺激作用。文中研究GnRH激动剂(GnRHa)对大鼠睾丸间质细胞ERK MAPK信号通路和3β-HSD mRNA表达的影响。方法:原代培养大鼠睾丸间质细胞48 h后,血清饥饿2 h。GnRHa(10-7mol/L)和ERK抑制剂PD98059(50μmol/L)刺激细胞后Western blot检测磷酸化ERK(p-ERK)、总ERK(t-ERK)的蛋白表达,荧光实时定量PCR检测3β-HSD mRNA表达。结果:结果显示GnRHa刺激间质细胞0、5、10、30、60和90 min后,p-ERK水平在5 min时达到最高,与对照组比较升高了约3.5倍(P<0.05);10 min时开始下降,但与对照组相比较仍显著升高2.2倍(P<0.05);90 min时恢复到正常水平。加入ERK选择性抑制剂PD98059后,p-ERK水平显著下降50%(P<0.05);再用GnRHa刺激细胞5 min,p-ERK水平仍无法恢复正常水平。用PD98059处理细胞后,再加入GnRHa培养24 h,3β-HSD mRNA水平也显著下降(与GnRHa组相比,P<0.05)。结论:GnRH激动剂可能通过ERKMAPK信号通路来调控大鼠睾丸间质细胞3β-HSD mRNA的表达,进而调控睾酮的分泌。

促性腺激素释放激素激动剂对大鼠睾丸间质细胞annexin 5和3β-HSD的表达影响

目的:探讨阿拉瑞林(GnRHa)对大鼠睾丸间质细胞中膜联蛋白V(annexin5)和3β-羟类固醇脱氢酶(3β-HSD)的表达的影响.方法:建立体外分离、纯化和培养大鼠睾丸间质细胞原代培养技术,采用3β-HSD免疫细胞化学方法对间质细胞进行鉴定,同时用不同终浓度的GnRHa(分别为1×10-5,1×10-6,1×10-7mol/L)作用于间质细胞24h后,通过Western Blot检测间质细胞中annexin5和3β-HSD的表达变化情况.结果:间质细胞经GnRHa处理后,Western Blot结果显示,与对照组相比,当GnRHa终浓度为1×10-5mol/L时,anenxin5的表达量显著升高了69.2%(P<0.01),3β-HSD的表达量也升高了25.2%(P<0.05);当GnRHa的终浓度为1×10-6mol/L和1×10-7mol/L时,anenxin5的表达量分别升高了61.5%(P<0.05)和16.64%(P>0.05),3β-HSD的表达量则无显著性变化,分别升高了7.7%(P>0.05)和2.22%(P>0.05).结论:GnRHa在原代培养的睾丸间质细胞中,对annexin5,3β-HSD的表达具有调节作用.

新金分枝杆菌3β-脱氢酶(3β-HSD)的多基因控制机制

目的分枝杆菌中类固醇3β位脱氢酶(3β-HSD)及其同工酶是植物甾醇降解过程中的关键限速步骤,本文作者在基因水平上确证其组成和生物学功能。方法以结核分枝杆菌中功能明确的Rv1106c基因序列为模板在新金分枝杆菌基因组中进行序列比对,对基因片段进行体外表达验证其活性,再通过基因敲除验证其在类固醇代谢中的生理功能。结果在新金分枝杆菌基因组中筛选获得4条类固醇3位脱氢酶基因同源序列,具有3β羟基氧化功能,敲除突变菌株对植物甾醇代谢只减慢约10%。结论证实了新金分枝杆菌中有多个3β位脱氢酶基因参与类固醇的代谢。

从江香猪附睾3β-HSD的年龄依赖性表达模式

选取从江香猪附睾组织作为试验对象,运用免疫组织化学检测结合Western blot分析3β-羟基甾脱氢酶(3β-HSD)在初情期前、初情期、初情期后、性成熟期4个发育时期从江香猪附睾中的表达情况,探究3β-HSD在哺乳动物附睾中发挥的生理作用.免疫组织化学检测显示,从江香猪附睾3β-HSD在4个发育时期均有分布,其表达主要集中在附睾管上皮周围的平滑肌和管腔微绒毛上.Western blot分析显示,初情期3β-HSD的表达量极显著高于初情期前、初情期后、性成熟期(P<0.01),而初情期前、初情期后、性成熟期的表达量两两之间并无统计学差异(P>0.05).以上结果表明,3β-HSD主要定位于从江香猪附睾平滑肌和微绒毛上,且呈年龄依赖性表达,初情期的表达量最高,推测3β-HSD参与了初情期附睾功能的调节.

壳聚糖硒抗ZEA对仔猪肝肾抗氧化功能、血清E2含量和肝脏3β-HSD活性的影响

为研究壳聚糖硒拮抗玉米赤霉烯酮对仔猪肝肾抗氧化功能、血清雌二醇(E2)含量和3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)活性的影响,本试验将24头断奶仔猪随机均分为4组:对照组(C组)饲喂基础日粮;玉米赤霉烯酮攻毒组(ZEA组)饲喂基础日粮+2.0 mg/(kg·bw) ZEA;壳聚糖硒解毒组(ZEA-Se组)饲喂基础日粮+2.0 mg/(kg·bw) ZEA+0.3 mg/(kg·bw)壳聚糖硒(以硒计);壳聚糖硒组(Se组)饲喂基础日粮+0.3 mg/(kg·bw)壳聚糖硒(以硒计),42 d后测定每头仔猪的肝肾抗氧化功能、血清E2含量和肝脏3β-HSD活性。结果表明:ZEA可显著增加肝脏丙二醛(MDA)含量(P<0.05),ZEA组的肝肾总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(T-SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著或极显著低于C组(P<0.05或P<0.01),ZEA-Se组和Se组MDA含量、T-AOC和T-SOD与C组无显著差异(P>0.05);ZEA组的血清E2含量极显著低于C组(P<0.01),ZEA组肝脏3β-HSD活性显著高于C组(P<0.05),ZEA-Se组和Se组的血清E2含量和肝脏3β-HSD活性与C组无显著差异(P>0.05)。结果表明壳聚糖硒可拮抗ZEA引起的肝肾氧化损伤,发挥抗氧化作用;壳聚糖硒可拮抗ZEA增加血清E2含量并降低仔猪肝脏3β-HSD活性,缓解ZEA对仔猪的毒性作用。

3β-HSD基因在福建牡蛎性类固醇激素合成机制中的表达研究

3β-羟化类固醇脱氢酶(3β-HSD)能够催化生成不同类型的类固醇激素,而关于贝类中类固醇激素合成相关酶的基因信息十分有限。本实验利用分子克隆的方法获得了福建牡蛎(Crassostrea angulata)性类固醇激素合成相关酶基因3β-HSD的全长序列,总长为1 444 bp,编码356个氨基酸。利用qRT-PCR和原位杂交技术检测了该基因在福建牡蛎中的时空表达特征,该基因在牡蛎大多数组织(外套膜、鳃、性腺、闭壳肌和内脏团)中均有表达,但在性腺中表达量最高(P<0.05)。原位杂交结果显示该基因表达在卵巢里富有分泌作用的滤泡细胞中。本文讨论了3β-HSD在牡蛎性类固醇激素合成过程中的作用,为阐明牡蛎具有内源性类固醇激素的合成能力奠定基础,为进一步研究牡蛎生殖内分泌机理提供参考。

膜联蛋白5对大鼠睾丸间质细胞睾酮分泌及3β-羟基类固醇脱氢酶表达的影响

目的先前研究发现促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)刺激Leydig细胞后,膜联蛋白5(annexin 5)及睾酮水平同时增加,推测annexin 5和睾酮之间可能存在某种内在的联系,3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)是间质细胞的标记酶。文中旨在研究annexin 5对大鼠睾丸间质细胞睾酮分泌及3β-HSD表达的影响。方法原代培养大鼠睾丸间质细胞,用不同浓度的annexin 5(0、10-10、10-9、10-8mol/L)处理间质细胞24h和用10-9mol/L的annexin 5处理细胞不同时间(6、12、24、36h),收集培养液,用化学发光法测定培养液中的睾酮含量;Western blotting方法分析睾丸间质细胞中3β-HSD的表达变化。结果不同浓度的annexin 5处理间质细胞24h后,与对照组比较,终浓度为10-10mol/L和10-9mol/L时,睾酮水平分别升高了18%[(14.38±0.30)nmol/Lvs(12.12±0.74)nmol/L](P<0.01)和26%[(15.25±0.47)nmol/Lvs(12.12±0.74)nmol/L](P<0.01);浓度为10-8mol/L时,睾酮水平虽也有升高趋势,但无显著性差异;而Western blotting结果显示,浓度为10-9mol/L时,3β-HSD表达量升高了63%(2.19±1.00vs1.34±0.19,P<0.05),浓度为10-10mol/L和10-8mol/L时,3β-HSD表达量无显著性差异;睾酮分泌与3β-HSD的表达呈显著正相关(r=0.430,P<0.05)。10-9mol/L的an-nexin5处理细胞不同时间,与对照组相比,6h和12h后睾酮的分泌虽有升高,但无统计学意义(P>0.05);24h后睾酮的分泌量显著升高了18%[(12.59±0.41)nmol/Lvs(10.70±0.09)nmol/L](P<0.01);而处理36h后,睾酮分泌量下降了21%[(14.44±1.65)nmol/Lvs(17.46±0.31)nmol/L](P<0.01)。结论在大鼠睾丸间质细胞中,annexin 5对睾酮分泌具有调节功能且呈剂量和时间依赖性;3β-HSD是该调节过程中的关键酶之一。

显示3β-羟基甾体脱氢酶活性的组织化学方法及应用

应用组化方法,对36例早孕期人工流产、13例羊膜腔内注射利凡诺中期引产胎盘、28例正常周期育龄妇女黄体,及假孕家免经口给予炔诺酮肟4mg/(kg·d)×3d 后的黄体组织进行3β-羟基甾体脱氢酶(3β-HSD)活性分布测定。发现:早孕期人流胎盘3β-HSD 活性主要存在于合体细胞滋养层中,酶活性从孕7周逐渐增强。利凡诺中期引产胎盘绒毛3β-HSD 活性明显受抑制。正常育龄妇女不同时期卵巢黄体3β-HSD 活性变化与正常月经周期孕酮生理变化一致。假孕家免卵巢黄体细胞3β-HSD活性在药物影响下明显受抑制。本文对酶活性分布、受抑意义及方法、注意事项进行了讨论。

L-酪氨酸对大鼠黄体细胞3β-羟-甾体脱氢酶活性的影响

目的 :研究L 酪氨酸对离体培养大鼠黄体细胞 3β HSD活性的影响。 方法 :运用细胞培养技术和放射免疫分析法 ,观察不同剂量L 酪氨酸对大鼠黄体细胞 3β HSD活性的影响和L 酪氨酸及其类似物酪氨酰肼在拮抗hCG诱导孕酮生成作用中 ,3β HSD活性的变化。 结果 :① 0 .2mmol-1和 2 .0mmol-1的L 酪氨酸明显抑制 3β HSD的活性 ,相同浓度的L 苯丙氨酸及L 多巴胺对此酶活性无影响 ;②在底物浓度较低时 ,L 酪氨酸可显著增强 3β HSD活性 ,随着底物浓度的增加 ,L 酪氨酸的作用逐渐减弱并转为抑制作用。③L 酪氨酸及酪氨酰肼对hCG诱导的 3β HSD活性有明显的抑制作用。结论 :L 酪氨酸可明显影响大鼠黄体细胞 3β HSD活性 ,其作用性质与底物浓度密切相关。L 酪氨酸及酪氨酰肼抑制hCG诱导的 3β HSD活性。

丝氨酸对离体培养大鼠黄体细胞3β-羟-甾体脱氢酶活性的影响

本实验采用放射免疫分析法观察了Ｌ丝氨酸对未成年大鼠离体培养黄体细胞３β羟甾体脱氢酶（３βＨＳＤ）活性的影响，同时也观察了Ｌ丝氨酸在拮抗人绒毛膜促性腺激素（ｈＣＧ）诱导孕酮生成作用中，３βＨＳＤ活性的变化。结果表明１．三种浓度Ｌ丝氨酸对３βＨＳＤ活性具有明显增强作用，并且在不同底物浓度下，０２ｍｍｏｌ／ＬＬ丝氨酸均可显著提高此酶活性。２．在Ｌ丝氨酸拮抗ｈＣＧ致黄体细胞孕酮生成作用中，３βＨＳＤ活性明显降低。以上结果提示：Ｌ丝氨酸可能通过对３βＨＳＤ活性的作用而影响孕酮的合成和分泌，其在不同条件下作用效果的不同可能因其作用环节不同而造成。

miR-148a-3p靶向PPARγ基因抑制鹅颗粒细胞孕酮的合成

旨在探究miR-148a-3p是否通过靶基因PPARγ调节鹅卵泡颗粒细胞中类固醇激素的合成。本研究选用12只健康的处于产蛋高峰期的天府肉鹅母系母鹅分别用于组织样品采集和颗粒细胞培养。利用qPCR检测miR-148a-3p在鹅不同阶段卵泡颗粒层中的表达;通过MEGA 7软件分析miR-148a-3p在不同物种的保守性,预测miR-148a-3p的靶基因,采用双荧光素酶报告试验验证miR-148a-3p与靶基因的靶标关系;在鹅颗粒细胞中转染miR-148a-3p mimics和inhibitor,qPCR检测miR-148a-3p对靶基因及其下游基因表达水平的影响;同时利用ELISA技术检测激素含量的变化。结果表明,miR-148a-3p在不同物种中高度保守;在鹅卵泡发育过程中,miR-148a-3p的表达量随卵泡直径的增加呈先升高后下降的趋势。在鹅卵泡颗粒细胞体外培养过程中,miR-148a-3p mimics能显著下调3β-HSD的表达(P<0.05),抑制孕酮的合成(P<0.05);而miR-148a-3p inhibitor的作用则相反(P<0.05)。生物信息学分析和双荧光素酶报告试验证实,PPARγ为miR-148a-3p的靶基因。在颗粒细胞中,miR-148a-3p mimics能显著降低PPARγ的表达(P<0.05),而miR-148a-3p inhibitor能显著上调PPARγ的表达(P<0.05)。当干扰PPARγ后,3β-HSD的表达量显著降低(P<0.05),孕酮的含量也降低。这些结果表明,在鹅等级卵泡颗粒细胞中,miR-148a-3p可靶向结合PPARγ来抑制3β-HSD的表达,从而降低颗粒细胞孕酮的合成。

苏氨酸对离体培养大鼠黄体细胞3β-羟-甾体脱氢酶活性的影响

用体外细胞培养的方法及放射免疫分析技术，观察Ｌ－苏氨酸对大鼠黄体细胞３β－羟－甾体脱氢酶（３β－ＨＳＤ）活性的影响。结果显示，Ｌ－苏氨酸可明显抑制黄体细胞３β－ＨＳＤ活性，而且在Ｌ－苏氨酸拮抗ｈＣＧ致孕酮生成作用中，３β－ＨＳＤ活性显著降低，提示Ｌ－苏氨酸可通过对３β－ＨＳＤ活性的作用而影响卵巢黄体孕酮生成。

大鼠睾丸间质细胞的原代培养、鉴定与功能监测

目的:采用改良方法对大鼠睾丸间质细胞进行分离、纯化和原代培养,以得到更高纯度和稳定的间质细胞原代培养体系。方法:采用酶消化法分离大鼠睾丸间质细胞,再用Percoll连续密度梯度离心除去生精细胞、支持细胞等杂细胞,实现进一步纯化;用3β-HSD特异性染色法鉴定间质细胞,同时采用放射免疫法测定间质细胞睾酮分泌活性。结果:培养的间质细胞纯度达到95%以上,每个睾丸可获取间质细胞约1×106个;通过3β-HSD特异性染色鉴定,该间质细胞胞质呈蓝黑色,而且细胞具有分泌睾酮的活性。结论:酶消化后以Percoll连续密度梯度离心可分离得到高纯度且具有睾酮分泌活性的间质细胞,操作简单易行,实验方法稳定。

Cox7a2对睾酮合成及StAR、P450scc和3β-HSD蛋白表达影响研究

目的研究Cox7a2在TM3小鼠睾丸Leyidg细胞中过农达对LH诱导的睾酮合成及对StAR(睾酮合成调节关键蛋白),P450scc(胆同醇侧链裂解酶),3β—HSD(3β-羟基甾脱氢酶)蛋白表达的影响。方法构建Cox7a2荧光表达载体,转染TM3小鼠睾丸Leydig细胞,融合蛋白表达及LH诱导刺激后,ELISA测定细胞上清液中睾酮含量,Western blot检测StAR蛋白、P450scc和3β-HSD酶的表达变化。结果Cox7a2在TM3小鼠睾丸Leydig细胞中过表达抑制LH诱导的睾酮合成,降低StAR蛋白的表达,对P450scc和3β-HSD的蛋白表达没有明显影响。结论在TM3小鼠睾丸Leydig细胞中,Cox7a2至少通过抑制类固醇快速调节蛋白StAR的表达,进而抑制LH诱导的睾酮合成。

大鼠睾丸间质细胞中促性腺激素释放激素激动剂调控睾酮合成的机制

目的:研究促性腺激素释放激素(GnRH)激动剂(GnRHa)对大鼠睾丸间质细胞睾酮合成的调控机制。方法:原代培养大鼠睾丸间质细胞,GnRHa(10-7 mol/L)分别处理间质细胞6、12、24、36、48 h后,Western blot方法分析3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)蛋白的变化;MEK1/2抑制剂PD98059(50μmol/L)和GnRHa共作用于间质细胞后,分析3β-HSD蛋白表达和睾酮水平的变化。结果:GnRHa处理间质细胞不同时间后,结果显示3β-HSD蛋白的表达对GnRHa的刺激具有时间依赖性。GnRHa处理12 h后,3β-HSD蛋白表达与对照组相比显著上升45%(P<0.05),24 h达到最高水平,升高1.0倍(P<0.05);48 h后3β-HSD恢复至正常水平。加入PD98059后,显著抑制了GnRHa对3β-HSD的刺激作用,3β-HSD水平下降了61%(与GnRHa组相比,P<0.05),睾酮水平也随之显著下降45%(与GnRHa组相比,P<0.05)。结论:GnRHa可能通过细胞外信号调节激酶(ERK1/2)途径调控大鼠睾丸间质细胞3β-HSD的表达,进而促进睾酮的合成。

恐惧应激对雄性大鼠生殖相关参数的影响

目的观察比较恐惧应激状态下不同应激时间段大鼠体重、睾丸和附睾重量、精子数目、3β-羟类固醇脱氢酶(3β-HSD)蛋白表达的变化。方法建立SD大鼠的恐惧应激模型,分别取急性应激和慢性应激状态下SD大鼠睾丸、附睾称重,并对附睾尾精子计数,HE染色观察睾丸结构,免疫组织化学和western blotting分析3β-HSD表达,比较各实验组和对照组间上述指标的变化。结果急性应激组与对照组相比,大鼠体重、睾丸重量、附睾重量、精子数量没有明显变化(P>0.05),HE染色显示睾丸结构无明显变化,免疫组化显示3β-HSD表达降低,western blotting分析3β-HSD降低了7%;慢性应激组与对照组相比,大鼠体重、睾丸重量、附睾重量、精子数量都有显著差异,P<0.05。HE染色显示睾丸内生精小管细小,管腔内生精细胞稀少,免疫组化显示3β-HSD表达降低,western blotting分析3β-HSD降低了19.8%。结论急性应激没有破坏雄性大鼠机体内稳态的调节能力,对生殖的影响仅见于睾丸功能的改变,睾丸组织结构未发生变化;而长期处于应激状态下的雄性大鼠,超出机体内稳态的调节能力,对生殖的影响不仅表现在3β-HSD的表达下降,而且睾丸组织结构发生变化。提示应激是影响大鼠生殖功能的一个因素。

邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯对原代培养小鼠胚胎睾丸Leydig细胞功能影响研究

目的探讨邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯[D i(2-ethylhexyl)phthalate,DEHP]对体外培养的小鼠胚胎睾丸间质细胞(Leyd ig细胞)3β-羟基类固醇脱氢酶(3-βHSD)活性及睾酮合成的影响。方法小鼠胚胎Leyd ig细胞原代培养。DE-HP染毒剂量分别为25、50、100、200 mg/L,通过检测睾酮合成关键酶3β-HSD活性、放免法测定培养液中睾酮浓度,研究DEHP对Leyd ig细胞功能影响。结果小鼠胚胎Leyd ig细胞分离培养后,纯度和存活率分别达(81.17±2.32)%、(80.88±2.80)%。DEHP(25 mg/L)处理12 h,或DEHP(50 mg/L)处理6 h后,实验组与对照组比较3β-HSD酶活性明显降低(P<0.05),随着时间延长和药物浓度增加差异更显著(P<0.01)。DEHP50、100 mg/L实验组,在12、24 h的睾酮水平明显低于对照组(P<0.05)或(P<0.01),存在时间-效应关系;DEHP 200 mg/L实验组在6、12、24 h与对照组比较均有非常显著差异(P<0.01),并可观察到Leyd ig细胞明显的形态学改变。结论DEHP能影响原代培养小鼠胚胎Leyd ig细胞3β-羟基类固醇脱氢酶活性,并抑制睾酮合成,存在时间-效应和剂量-效应关系。

EGF对大鼠卵巢颗粒细胞增殖与分化影响的研究

许多研究发现,表皮生长因子(EGF)对生殖功能有重要的调节作用。本文用体外细胞培养的方法,研究了EGF对大鼠卵巢颗粒细胞增殖与分化的影响及其作用方式。结果如下:EGF可以明显抑制颗粒细胞DNA的合成,但促进孕酮的生成,后者是因为EGF能显著提高细胞内3β-羟甾脱氨酶(3β-HSD)的活性。放射受体分析表明,颗粒细胞上存在EGF的特异性受体,其K_d为1.83±0.3×10^(-8)mol/L,B_(max)为1.75±0.29×10~4个位点/细胞。卵巢免疫组化结果未发现颗粒细胞有EGF样免疫染色,而卵泡膜、黄体及间质内等均有阳性染色。以上结果提示,EGF可能通过旁分泌机制作用于颗粒细胞的EGF受体,从而调节细胞的生长和性激素的分泌,这对于颗粒细胞的成熟及卵泡的发育有着重要意义。

北冬虫夏草子实体对大鼠睾丸功能的影响

为研究人工栽培的冬虫夏草子实体对生殖系统的作用 ,将 37只 10周龄SD大鼠随机分为A、B、C、D、E 5组 ,A组为正常对照组 ,按常规饲养 ;B、C、D 3组在饲料中加入腺嘌呤 ( 30 0mg/kg·d- 1 )造成大鼠睾丸功能障碍 ,其中C、D两组同时给予北冬虫夏草子实体细粉、复合粉 (虫草素、虫草酸含量较高 )模拟治疗 ;E组在与A组同法饲养的基础上 ,加用北冬虫夏草子实体复合粉。 30d后 ,处死全部实验动物 ,并以组织学及组织化学定量的方法观察动物睾丸的结构变化及与激素合成有关酶 (SDH、3β -HSD)的活性。结果 :与A组相比 ,B组大鼠睾丸生精细胞数与精子数明显减少 ,SDH、3β -HSD活性下降 ;C、D2组酶活性增强 ,精细胞数与精子数接近正常 ,其中D组优于C组 ;E组动物上述两项指标优于A组 ,但无统计学差异。提示 :北冬虫夏草子实体能增强睾丸的生精与内分泌功能 ,对腺嘌呤引起睾丸功能障碍大鼠的作用尤为明显。

雷公藤多甙对大鼠生精细胞及其酶活性的影响

本文连续观察了雄性大鼠服用雷公藤多甙(GTW)30至80d 后睾丸、附睾细胞形态学改变及睾丸 ACP、ALP、3β-HSD、睾丸和附睾生精细胞 LDH-C_4活性的变化;同时注意了药物抗生育作用的可逆性。结果表明:附睾精子先于睾丸生精细胞发生质和量的变化;支持细胞 ACP 活性有增强趋势;睾丸 ALP,LDH-C_4酶活性相对减弱,为生精细胞损伤的结果;用药80d 时,3β-HSD 活性则明显减弱。结果还提示 GTW 引起的不育似有恢复的可能。