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口腔白斑和口腔鳞状细胞癌中微管相关蛋白1轻链3和雷帕霉素靶蛋白的表达及临床意义 被引量:5
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作者 董小琳 柳志文 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期613-618,共6页
目的探究自噬相关基因微管相关蛋白1轻链3(LC3)和雷帕霉素靶蛋白(mTOR)在正常口腔黏膜、口腔白斑(OLK)及口腔鳞状细胞癌(OSCC)中的表达情况及相互关系,评估其作为OLK恶变早期诊断指标的临床价值。方法采用免疫组化法检测LC3B和m TOR在2... 目的探究自噬相关基因微管相关蛋白1轻链3(LC3)和雷帕霉素靶蛋白(mTOR)在正常口腔黏膜、口腔白斑(OLK)及口腔鳞状细胞癌(OSCC)中的表达情况及相互关系,评估其作为OLK恶变早期诊断指标的临床价值。方法采用免疫组化法检测LC3B和m TOR在20例正常口腔黏膜组织、120例OLK及30例OSCC组织中的表达,回顾性分析120例OLK患者的临床资料,探讨LC3B和mTOR及其与各临床因素之间的关系。结果正常口腔黏膜、OLK和OSCC组中LC3B阳性率分别为85.0%、65.8%和33.3%(P<0.05),mTOR的阳性率分别为20.0%、48.3%和76.7%(P<0.05)。LC3B与mTOR二者间的表达具有相关性(P<0.05),且其表达都与OLK的临床类型相关(P<0.05)。结论 LC3B和mTOR可作为早期监测口腔OLK恶变的分子生物学指标。 展开更多
关键词 微管相关蛋白1轻链3 雷帕霉素靶蛋白 白斑
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微管相关蛋白1轻链3和雷帕霉素靶蛋白在吸烟与不吸烟口腔白斑患者中的表达及临床意义 被引量:4
2
作者 董小琳 柳志文 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期19-24,共6页
目的研究自噬相关基因微管相关蛋白1轻链3(LC3B)和雷帕霉素靶蛋白(mTOR)在吸烟与不吸烟口腔白斑(OLK)患者中的表达情况及相互关系,探讨吸烟与OLK恶变潜能的关系。方法采用免疫组织化学法检测LC3B和mTOR在120例OLK组织中的表达,回顾性分... 目的研究自噬相关基因微管相关蛋白1轻链3(LC3B)和雷帕霉素靶蛋白(mTOR)在吸烟与不吸烟口腔白斑(OLK)患者中的表达情况及相互关系,探讨吸烟与OLK恶变潜能的关系。方法采用免疫组织化学法检测LC3B和mTOR在120例OLK组织中的表达,回顾性分析吸烟者与不吸烟者的临床资料,探讨吸烟与LC3B和mTOR表达及其与各临床因素之间的关系。结果吸烟与不吸烟OLK患者在性别、年龄、病变部位、病理分型及恶变情况均存在差异,LC3B在不吸烟组中的阳性率高于相应的吸烟组,而mTOR在吸烟组中的阳性率则高于相应的不吸烟组,差异均有统计学意义(P<0.05),吸烟情况与mTOR阳性率呈正相关(P<0.05),与LC3B的表达无明显相关性,LC3B与mTOR阳性表达率随吸烟情况的加重呈负相关(P<0.05)。结论吸烟对OLK的影响可能与自噬相关蛋白的表达有关。 展开更多
关键词 微管相关蛋白1轻链3 雷帕霉素靶蛋白 吸烟 口腔 白斑
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脑缺血再灌注损伤程度与自噬相关基因LC3、mTOR表达的相关性研究 被引量:14
3
作者 李丹丹 肖学进 +1 位作者 秦书俭 包翠芬 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第2期182-186,共5页
目的探讨局灶性脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia reperfusion,CIR)程度与自噬微管相关蛋白轻链3抗体-Ⅱ(Autophagy microtubule associated protein light chain 3 antibody-Ⅱ,LC3-Ⅱ)、雷帕霉素靶蛋白抗体(Rapamycin target ... 目的探讨局灶性脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia reperfusion,CIR)程度与自噬微管相关蛋白轻链3抗体-Ⅱ(Autophagy microtubule associated protein light chain 3 antibody-Ⅱ,LC3-Ⅱ)、雷帕霉素靶蛋白抗体(Rapamycin target protein antibody,m TOR)表达的相关性。方法采用线栓阻断法阻塞大脑中动脉2 h制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型;观察各组间的神经功能缺失评分、TTC梗死体积;应用免疫印迹、免疫荧光法检测大脑顶叶的LC3-Ⅱ、m TOR的表达。结果 TTC染色显示,梗死体积在缺血再灌24 h达高峰。WB、免疫荧光显示,LC3-Ⅱ在IR中表达增加,且在缺血再灌24 h表达最高;m TOR在缺血再灌24 h、48 h表达最低。相关性分析显示,TTC染色梗死体积与LC3-Ⅱ表达水平高度正相关。结论脑缺血再灌注损伤程度可能与LC3、m TOR的表达水平相关。 展开更多
关键词 自噬 局灶性脑缺血再灌注 自噬微管相关蛋白轻链3抗体 雷帕霉素靶蛋白抗体
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Effect of moxibustion on mTOR-mediated autophagy in rotenone-induced Parkinson's disease model rats 被引量:19
4
作者 Shu-ju Wang Qi Wang +3 位作者 Jun Ma Pei-hao Yu Zhong-ming Wang Bin Wang 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2018年第1期112-118,共7页
Defects in autophagy-mediated clearance of α-synuclein may be one of the key factors leading to progressive loss of dopaminergic neurons in the substantia nigra. Moxibustion therapy for Parkinson’s disease has been ... Defects in autophagy-mediated clearance of α-synuclein may be one of the key factors leading to progressive loss of dopaminergic neurons in the substantia nigra. Moxibustion therapy for Parkinson’s disease has been shown to have a positive effect, but the underlying mechanism remains unknown. Based on this, we explored whether moxibustion could protect dopaminergic neurons by promoting autophagy mediated by mammalian target of rapamycin (mTOR), with subsequent elimination of α-syn. A Parkinson’s disease model was induced in rats by subcutaneous injection of rotenone at the back of their necks, and they received moxibustion at Zusanli (ST36), Guanyuan (CV4)and Fengfu (GV16), for 10 minutes at every point, once per day, for 14 consecutive days. Model rats without any treatment were used as a sham control. Compared with the Parkinson’s disease group, the moxibustion group showed significantly greater tyrosine hydroxylase immunoreactivity and expression of light chain 3-II protein in the substantia nigra, and their behavioral score, α-synuclein immunoreactivity,the expression of phosphorylated mTOR and phosphorylated ribosomal protein S6 kinase (p-p70S6K) in the substantia nigra were significantly lower. These results suggest that moxibustion can promote the autophagic clearance of α-syn and improve behavioral performance in Parkinson’s disease model rats. The protective mechanism may be associated with suppression of the mTOR/p70S6K pathway. 展开更多
关键词 nerve regeneration NEURODEGENERATION Parkinson's disease acupuncture MOXIBUSTION ROTENONE ALPHA-SYNUCLEIN AUTOPHAGY phosphorylated mammalian target of rapamycin kinase phosphorylated ribosomal protein S6 kinase light chain 3-II neural regeneration
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自噬在肿瘤耐药中的作用研究进展 被引量:4
5
作者 地里夏提.白克力 伊利夏提.肖开提 李学军 《国际药学研究杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期303-309,337,共8页
自噬是一种通过溶酶体途径分解代谢细胞内组分的过程。在细胞应激状态下,细胞通过自噬清除线粒体等损坏的细胞器和蛋白。在肿瘤发生发展的早期和晚期,自噬发挥的作用是不同的:肿瘤发生早期,自噬降低肿瘤原发性基因不稳定性和蛋白聚集,... 自噬是一种通过溶酶体途径分解代谢细胞内组分的过程。在细胞应激状态下,细胞通过自噬清除线粒体等损坏的细胞器和蛋白。在肿瘤发生发展的早期和晚期,自噬发挥的作用是不同的:肿瘤发生早期,自噬降低肿瘤原发性基因不稳定性和蛋白聚集,以及激发抗肿瘤性免疫应答;在成熟的肿瘤中,细胞通过自噬对营养不足以及细胞过度增殖所致的代谢应激产生抵抗。自噬不仅促进肿瘤细胞存活,在特殊条件下,也可导致肿瘤细胞自噬性细胞死亡。自噬性细胞死亡可增加发生凋亡的肿瘤细胞对辐射治疗的敏感性。因此,肿瘤发生及肿瘤治疗中自噬的作用是双向的,需要更加深入的研究阐明自噬在肿瘤中发挥作用的详细机制。本文对自噬在肿瘤细胞化疗耐药中发挥作用的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 自噬 肿瘤代谢性重编程 人雷帕霉素受体Ⅰ型家族 微管相关蛋白轻链3 肿瘤多药耐药
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项目拉动式数学建模活动探析 被引量:2
6
作者 甘娅丽 《海南师范大学学报(自然科学版)》 CAS 2008年第2期221-224,共4页
从分析数学建模与经济管理类高职高专的专业学科之间的联系入手,阐述经济类高职高专院校项目拉动式数学建模培训的内涵与做法,提出构建高职高专数学建模培训"三级链"目标体系.
关键词 数学建模 目标三级链 项目拉动 教学改革
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雷诺嗪预处理对缺氧/复氧损伤H9C2心肌细胞自噬的调控及对心肌细胞的保护作用
7
作者 赵茜 刘明远 +6 位作者 李萌 栾海艳 杨玉 马春艳 张宝成 赵锦程 杨光远 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期1254-1259,I0008,共7页
目的:探讨雷诺嗪预处理对缺氧/复氧损伤H9C2心肌细胞的保护作用,从自噬调控角度阐明雷诺嗪保护缺血再灌注损伤心肌的作用机制。方法:将H9C2心肌细胞随机分为正常对照组、缺氧/复氧模型组、雷诺嗪预处理组、雷诺嗪+渥曼青霉素组、雷帕霉... 目的:探讨雷诺嗪预处理对缺氧/复氧损伤H9C2心肌细胞的保护作用,从自噬调控角度阐明雷诺嗪保护缺血再灌注损伤心肌的作用机制。方法:将H9C2心肌细胞随机分为正常对照组、缺氧/复氧模型组、雷诺嗪预处理组、雷诺嗪+渥曼青霉素组、雷帕霉素组。正常对照组细胞不做任何处理,其余各组H9C2细胞以相应药物预处理30 min后,行缺氧4 h、复氧3 h处理。采用CCK-8法检测各组H9C2细胞活性,采用乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测各组H9C2细胞中LDH活性,免疫荧光法检测各组H9C2细胞中微管相关蛋白轻链3(LC3)阳性表达率,Western blotting法检测各组H9C2细胞中LC3、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和磷酸化mTOR(p-mTOR)蛋白表达水平,计算LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和p-mTOR/mTOR比值。结果:与缺氧/复氧模型组比较,雷诺嗪预处理组和雷帕霉素组H9C2细胞活性升高(P<0.01),H9C2细胞中LDH活性降低(P<0.01),LC3阳性表达率升高(P<0.05)。Western blotting法检测,与正常对照组比较,缺氧/复氧模型组H9C2细胞中LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值升高(P<0.01),p-mTOR/mTOR比值降低(P<0.01);与缺氧/复氧模型组比较,雷诺嗪预处理组和雷帕霉素组H9C2细胞中LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值升高(P<0.01),p-mTOR/mTOR比值降低(P<0.01)。结论:雷诺嗪预处理对缺氧/复氧损伤H9C2心肌细胞具有保护作用,其作用机制可能与雷诺嗪抑制mTOR蛋白磷酸化从而诱导缺氧/复氧H9C2心肌细胞自噬有关联。 展开更多
关键词 缺氧/复氧 雷诺嗪 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 自噬 微管相关蛋白轻链3
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当归黄芪胶囊对心力衰竭大鼠心肌自噬的影响
8
作者 吴雪 吕欣芳 +2 位作者 支晓东 赵信科 李应东 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期1453-1457,共5页
目的探讨当归黄芪胶囊是否通过磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/西罗莫司靶蛋白(mTOR)信号通路调控心力衰竭大鼠心肌的自噬。方法用2.5 mg·kg^(-1)阿霉素腹腔注射构建心力衰竭大鼠模型,另取8只为空白组。将造模成功的大鼠... 目的探讨当归黄芪胶囊是否通过磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/西罗莫司靶蛋白(mTOR)信号通路调控心力衰竭大鼠心肌的自噬。方法用2.5 mg·kg^(-1)阿霉素腹腔注射构建心力衰竭大鼠模型,另取8只为空白组。将造模成功的大鼠随机分为模型组、对照组和低、中、高剂量实验组。对照组给予腹腔注射30 mg·kg^(-1)的3-甲基腺嘌呤;低、中、高剂量实验组分别灌胃给予150、300、450 mg·kg^(-1)的当归黄芪胶囊;空白组及模型组均灌胃给予等量无菌蒸馏水。6组大鼠每天给药1次,持续6周。用超声多普勒检测心功能,用蛋白印迹法检测心肌组织中PI3K、Akt、mTOR、选择性自噬接头蛋白(P62)、微管相关轻链蛋白3Ⅱ/Ⅰ(LC3Ⅱ/Ⅰ)的表达水平。结果空白组、模型组、对照组和高剂量实验组的左心室射血分数分别为(85.00±3.63)%、(56.75±4.83)%、(75.63±3.70)%和(72.75±4.23)%,PI3K相对表达水平分别为1.00±0、0.28±0.05、0.64±0.08和0.74±0.16,磷酸化Akt/Akt分别为1.00±0、0.49±0.06、0.90±0.16和0.95±0.10,磷酸化mTOR/mTOR分别为1.00±0、0.42±0.09、0.73±0.13和0.83±0.08,P62相对表达水平分别为1.00±0、0.24±0.12、0.57±0.09和0.96±0.10,LC3Ⅱ/Ⅰ相对表达水平分别为1.00±0、4.31±0.75、2.20±0.76和1.59±0.24。与模型组比较,高剂量实验组和对照组的上述指标在统计学上差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论当归黄芪胶囊能通过调控PI3K/Akt/mTOR通路,抑制心力衰竭大鼠心肌的自噬,从而改善大鼠的心功能。 展开更多
关键词 当归黄芪胶囊 心力衰竭 自噬 磷脂酰肌醇3-激酶 蛋白激酶B 西罗莫司靶蛋白 微管相关轻链蛋白3Ⅱ/Ⅰ
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自噬相关哺乳动物雷帕霉素靶蛋白、微管相关蛋白1轻链3—β在肝细胞癌组织中的表达及其临床意义 被引量:4
9
作者 宋孟绮 薛寅凯 +3 位作者 孙运秀 窦东伟 程平 陈立波 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期1108-1110,共3页
目的探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、微管相关蛋白1轻链3-β(LC3-Ⅱ)在肝细胞癌(HCC)中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学方法检测48例肝细胞癌组织及正常肝组织中mTOR、LC3—Ⅱ的表达,并分析其存癌组织中表达的相... 目的探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、微管相关蛋白1轻链3-β(LC3-Ⅱ)在肝细胞癌(HCC)中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学方法检测48例肝细胞癌组织及正常肝组织中mTOR、LC3—Ⅱ的表达,并分析其存癌组织中表达的相关性及与临床病理因素的关系。结果mTOR在HCC中的表达阳性率(54.17%)明显高于正常肝组织(20.00%,P〈0.05),且与分化程度、包膜侵犯明显相关(P〈0.05);LC3-Ⅱ存HCC中的表达阳性率(47.92%)明显低于正常肝组织(83.33%,P〈0.05),且与TNM分期、分化程度相关(P〈0.05);mTOR与LC3-Ⅱ在HCC中的表达呈负相关(r=0.35,P〈0.05)。结论肝细胞癌中的自噬活性或自噬潜能降低,可能参与肝癌的发生、发展。联合检测自噬相关mTOR、LC3-Ⅱ可明显提高肝细胞癌的诊断敏感性。 展开更多
关键词 肝细胞 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 微管相关蛋白1轻链3 自噬 免疫组织化学
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噬菌体展示全人源抗GPC3的单链抗体的筛选及鉴定 被引量:2
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作者 蒋家豪 孙福谋 +4 位作者 韩月 王阳 蔡佳玲 王旻 张娟 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1877-1883,共7页
使用全人源噬菌体单链抗体文库进行筛选,获得特异性靶向磷脂酰肌醇聚糖-3(GPC3)的单链抗体,并对单链抗体的生物学活性和抗原表位进行鉴定。经过4轮"结合-淘洗-洗脱-扩增"后,利用噬菌体ELISA和IMGT数据库分析抗体序列的靶向性... 使用全人源噬菌体单链抗体文库进行筛选,获得特异性靶向磷脂酰肌醇聚糖-3(GPC3)的单链抗体,并对单链抗体的生物学活性和抗原表位进行鉴定。经过4轮"结合-淘洗-洗脱-扩增"后,利用噬菌体ELISA和IMGT数据库分析抗体序列的靶向性和完整性。单链抗体的基因序列与表达载体p ET-22b进行双酶切并连接,重组载体转化大肠杆菌E.coli Rosetta(DE3),抗体表达后经Ni^(2+)柱亲和层析纯化,通过SDS-PAGE和Western blot对单链抗体分子质量进行鉴定。抗体对抗原的亲和力常数通过ELISA和SPR实验获得,流式细胞术分析其与细胞膜受体的结合能力。经筛选获得4个单链抗体(1F7、1D7、1D4和1B10)具有良好的靶向性和亲和力,其中1F7单链抗体的亲和力和结合能力最高。本课题抗GPC3单链抗体为双特性抗体和免疫毒素等新一类免疫治疗药物的开发奠定基础。 展开更多
关键词 噬菌体展示 单链抗体 磷脂酰肌醇聚糖-3 肿瘤靶向
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经利妥昔单抗治疗后复发的皮肤B细胞淋巴瘤出现CD20信使RNA缺失
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作者 Rawal Y.B. Nuovo G.J. +1 位作者 Frambach G.E. 潘华 《世界核心医学期刊文摘(皮肤病学分册)》 2006年第2期19-19,共1页
关键词 Background: RITUXIMAB has been used to TREAT relap
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抑制P13刚Akt/mTOR信号通路对血管性痴呆大鼠海马CA1区自噬相关蛋白表达的影响 被引量:13
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作者 王一超 刘斌 +5 位作者 毛文静 马原源 任伯 邓春颖 贺永贵 吕超男 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期127-132,共6页
目的探讨抑制磷脂酰肌醇3激酶(P13K)/蛋白激酶B(Akt)/雷帕霉素靶蛋白(roTOR)信号通路对血管性痴呆rvD)大鼠海马CA1区自噬相关蛋白表达的影响。方法108只SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、VD组、P13K抑制剂LY294002组(LY294... 目的探讨抑制磷脂酰肌醇3激酶(P13K)/蛋白激酶B(Akt)/雷帕霉素靶蛋白(roTOR)信号通路对血管性痴呆rvD)大鼠海马CA1区自噬相关蛋白表达的影响。方法108只SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、VD组、P13K抑制剂LY294002组(LY294002组1和mTOR抑制剂雷帕霉素组(雷帕霉素组),每组再依据取材时间不同分为1、2、4、8周4个时间点。后3组采用改良Pulsinelli四血管阻断法制备大鼠VD模型,后2组在制备VD模型前侧脑室注射10mmol/L LY294002溶液10μL或8ng/μL雷帕霉素4μL。分别在各时间点采用Westem blotting检测大鼠海马CA1区Beclinl蛋白表达及微管相关蛋白轻链3(LC3)Ⅱ/LC3Ⅰ比值,在4周时间点采用免疫荧光染色检测大鼠海马CA1区LC3表达。结果(11与假手术组比较,VD组各时间点Beclinl蛋白表达及LC3II/LC3I比值均增高,差异均有统计学意义(P〈0.05);与VD组比较,LY294002组和雷帕霉素组各时间点Beclinl蛋白表达及LC3IIFLC3I比值均明显增高,差异均有统计学意义(氏0.05)。(2)免疫荧光染色结果显示:4周时,假手术组神经元胞质内LC3呈散在低表达,VD组LC3表达增多.LY294002组和雷帕霉素组LC3表达明显增多。结论抑制P13K/Akt/mTOR信号通路能促进VD大鼠海马CA1区自噬相关蛋白Beclinl及LC3表达,神经元自噬得到明显增强。 展开更多
关键词 血管性痴呆 磷脂酰肌醇3激酶 蛋白激酶B 雷帕霉素靶蛋白 细胞自噬 BECLIN1 微管相关蛋白轻链3
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柴胡皂甙D通过非mTOR依赖途径诱导HeLa细胞自噬 被引量:2
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作者 袁鹏 金琨琪 +5 位作者 程威 杨志强 施晓晨 史祺云 申凤鸽 于录 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第5期27-29,227,共4页
为了研究柴胡皂甙D能否诱导HeLa细胞发生自噬,并初步探讨其机制,试验采用激光共聚焦显微镜、免疫印记等技术评价经柴胡皂甙D处理后的HeLa细胞的自噬水平。结果表明:经柴胡皂甙D处理后,激光共聚焦显微镜观察到GFP-LC3斑点显著增加;柴胡皂... 为了研究柴胡皂甙D能否诱导HeLa细胞发生自噬,并初步探讨其机制,试验采用激光共聚焦显微镜、免疫印记等技术评价经柴胡皂甙D处理后的HeLa细胞的自噬水平。结果表明:经柴胡皂甙D处理后,激光共聚焦显微镜观察到GFP-LC3斑点显著增加;柴胡皂甙D能显著增加LC3-Ⅱ的表达;但自噬关键蛋白mTOR没有变化。说明柴胡皂甙D能诱导HeLa细胞发生自噬,并通过非mTOR依赖途径。 展开更多
关键词 柴胡皂甙D 自噬 HELA细胞 LC3 MTOR
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丙戊酸钠诱导人结肠癌细胞HT-29自噬及其机制研究 被引量:2
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作者 王洋 师水生 +3 位作者 刘庆彤 谢江柳 马西强 王永翔 《中国临床研究》 CAS 2014年第8期897-900,共4页
目的对丙戊酸钠诱导人结肠癌细胞HT-29发生自噬性死亡的过程进行观察,并初步探讨其可能的机制。方法用不同浓度、不同作用时间的丙戊酸钠处理人结肠癌细胞系HT-29,用细胞计数试剂盒CCK8法观察其对细胞增殖的抑制作用,丹酰戊二胺染色法... 目的对丙戊酸钠诱导人结肠癌细胞HT-29发生自噬性死亡的过程进行观察,并初步探讨其可能的机制。方法用不同浓度、不同作用时间的丙戊酸钠处理人结肠癌细胞系HT-29,用细胞计数试剂盒CCK8法观察其对细胞增殖的抑制作用,丹酰戊二胺染色法观察细胞自噬,荧光测试仪检测自噬水平,荧光定量PCR法检测以下基因表达水平的变化:微管相关蛋白轻链3Ⅱ(LC3-Ⅱ)、自噬相关基因Beclin-1、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)和磷酸化核糖体蛋白S6激酶(p-p70S6K)。结果随着丙戊酸钠处理浓度的递增及作用时间的延长,其对人结肠癌细胞HT-29的增殖抑制率逐渐提高,呈剂量依赖性及时间依赖性(P均﹤0.01);同时,随着药物浓度的增加,细胞中自噬泡数量增多,荧光强度增强,与对照组比较,差异有统计学意义(P均<0.05)。经丙戊酸钠处理后,自2 mmol/L浓度始,人结肠癌细胞系HT-29自噬相关基因LC3-Ⅱ和Beclin-1表达水平明显升高(P均<0.01),而mTOR、p-Akt和p-p70S6K表达水平明显降低(P均<0.01)。结论丙戊酸钠可诱导结肠癌细胞发生自噬,其诱导结肠癌细胞发生自噬的机制可能与阻断mTOR-Akt信号转导通路及激活Beclin-1信号转导通路有关。 展开更多
关键词 结肠肿瘤 丙戊酸钠 自吞噬 增殖抑制率 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 自噬相关基因Beclin-1 磷酸化蛋白激酶B 信号转导通路
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黄芪多糖对肺癌A549细胞自噬的作用及机制研究 被引量:13
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作者 杨琪 段俊颖 +4 位作者 王雪林 梁乾坤 王彦君 陈彦文 明海霞 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期1329-1333,共5页
目的探讨黄芪多糖(APS)对黄嘌呤氧化酶(XOD)诱导的肺癌A549细胞自噬模型及磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路的影响及对自噬相关调节因子表达。方法实验分为6组:正常组、模型组(20 U·L^(... 目的探讨黄芪多糖(APS)对黄嘌呤氧化酶(XOD)诱导的肺癌A549细胞自噬模型及磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路的影响及对自噬相关调节因子表达。方法实验分为6组:正常组、模型组(20 U·L^(-1) XOD处理24 h)、低、中、高3个浓度实验组(在模型组基础上分别使用100,200和400 mg·L^(-1) APS进行处理)及3-MA抑制组(在模型组基础上使用2 mmol·L^(-1)3-甲基腺嘌呤进行处理)。以免疫荧光法检测自噬相关蛋白,以蛋白质印迹法检测PI3K/Akt/mTOR信号通路蛋白,以实时荧光定量聚合酶链反应法检测mRNA的表达水平。结果正常组、模型组、高浓度实验组及3-MA抑制组的微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)的蛋白荧光强度分别为6368.50±17.90,2.57×10^(4)±224.03,7443.00±19.20和8356.50±18.52;抗坏死骨片1(P62)的蛋白荧光强度分别为2.86×10^(4)±194.85,3225.50±12.69,1.04×10^(4)±209.50和1.04×10^(4)±96.78。这4组的PI3K的蛋白相对表达水平分别1.11±0.05,1.93±0.06,1.30±0.04和1.40±0.08;这4组的Akt蛋白表达水平为0.64±0.06,0.27±0.06,0.50±0.09和0.66±0.03;这4组的mTOR蛋白表达水平为1.94±0.06,0.93±0.06,1.28±0.03和0.91±0.04;这4组的Beclin1蛋白表达水平为0.48±0.04,1.03±0.04,0.77±0.09和0.65±0.09。mRNA表达的趋势与蛋白一致。自噬相关调节因子(LC3B、P62、Beclin1)及PI3K、Akt、mTOR信号因子,模型组与正常组相比,或高浓度实验组与模型组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论黄芪多糖防治肺癌的分子机制之一可能是通过调节PI3K/Akt/mTOR信号通路,抑制肺癌A549细胞自噬而发挥作用。 展开更多
关键词 黄芪多糖 自噬 磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路 微管相关蛋白1轻链3B
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环磷腺苷葡胺诱导骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化后对自噬的影响及机制 被引量:5
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作者 李丹 张金国 尉希清 《临床心血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期956-960,共5页
目的:探讨环磷腺苷葡胺(MCA)诱导骨髓间充质干细胞(BMSCs)向心肌细胞分化后对自噬的影响及作用机制。方法:通过全骨髓培养法建立体外培养体系,取P3代细胞通过流式细胞仪鉴定细胞表面抗原的表达。将细胞分为3组:正常组、MCA组、5氮胞苷(5... 目的:探讨环磷腺苷葡胺(MCA)诱导骨髓间充质干细胞(BMSCs)向心肌细胞分化后对自噬的影响及作用机制。方法:通过全骨髓培养法建立体外培养体系,取P3代细胞通过流式细胞仪鉴定细胞表面抗原的表达。将细胞分为3组:正常组、MCA组、5氮胞苷(5-Aza)组,采用western blotting检测心肌特异蛋白表达情况。将诱导后的心肌细胞通过葡萄糖剥夺(GD)建立细胞损伤模型,收集3h、12h、24h细胞,Western blotting法检测自噬蛋白的表达情况。将细胞分为5组:正常组、GD组、MCA预处理组(M+G组)、LY294002+MCA预处理组(M+G+L组)、LY294002组(L组)。利用Western-blotting法检测各组自噬蛋白及相关信号通路蛋白的表达情况。结果:1P3代细胞表面抗原CD44、CD90、CD45的阳性率完全符合BMSCs的标准;2MCA组Ctnt、Cx43蛋白的相对表达量明显高于5-Aza组(P<0.01);3GD处理3h后自噬蛋白Beclin 1、LC3Ⅱ/Ⅰ比值明显升高(P<0.01);4经MCA预处理后自噬蛋白Beclin 1、LC3Ⅱ/Ⅰ比值下降(P<0.01),提高了PI3K的活性,上调了AKT、mTOR磷酸化水平(P<0.01),加入阻断剂后通路蛋白水平下降。结论:MCA可以诱导BMSCs向心肌细胞分化,并在一定程度上抑制了诱导后心肌细胞的自噬,其机制可能与PI3K/AKT/mTOR信号通路相关。 展开更多
关键词 环磷腺苷葡胺 骨髓间充质干细胞 心肌细胞 自噬 微管相关蛋白1轻链3 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 葡萄糖剥夺
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