联合检测外周血TIRAP、FOXO3a、HBP预测脓毒症患者近期预后的价值及意义

目的探讨联合检测外周血TOLL/白介素-1受体相关蛋白(TIRAP)、叉头蛋白转录因子3a(FOXO3a)、肝素结合蛋白(HBP)对脓毒症患者近期预后的预测价值。方法回顾性收集2020年1月—2022年12月本院205例脓毒症患者的临床资料,根据28 d生存情况分为生存组157例、死亡组48例。统计两组外周血TIRAP、FOXO3a、HBP及急性生理功能和慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)、序贯器官衰竭评估(SOFA)评分。分析TIRAP、FOXO3a、HBP与APACHEⅡ、SOFA评分的相关性。采用Logistic回归方程分析TIRAP、FOXO3a、HBP交互作用对脓毒症近期预后的影响。评价TIRAP、FOXO3a、HBP联合预测脓毒症近期预后的价值。结果死亡组入院第1、3、7天外周血TIRAP、HBP水平及APACHEⅡ、SOFA评分高于生存组,FOXO3a水平低于生存组(P<0.05);入院第1天,脓毒症死亡患者TIRAP、HBP水平与APACHEⅡ、SOFA评分呈正相关,FOXO3a与APACHEⅡ、SOFA评分呈负相关(P<0.05);TIRAP×FOXO3a×HBP在脓毒症近期预后中存在交互作用(P<0.05);入院第1天外周血TIRAP+FOXO3a+HBP联合预测预后的曲线下面积(AUC)大于TIRAP+FOXO3a、TIRAP+HBP、FOXO3a+HBP,预测效能更佳(P<0.05)。结论脓毒症预后不良患者外周血TIRAP、HBP水平升高,FOXO3a水平降低,其水平变化与病情严重程度、近期预后有关,联合检测其水平可提高近期预后的预测效能。

膜蛋白ATAD3A在线粒体质量控制中的作用

线粒体质量控制对于线粒体网络的稳态和线粒体功能的正常发挥具有重要意义。三磷酸腺苷酶家族蛋白3A(ATAD3A)是同时参与调节线粒体结构功能、线粒体动力学和线粒体自噬等重要生物学过程的线粒体膜蛋白之一。近期研究表明,ATAD3A既可与Mic60/Mitofilin和线粒体转录因子A(TFAM)等因子相互作用以维持线粒体嵴的形态和氧化磷酸化功能,又能与发动蛋白相关蛋白1(Drp1)结合而正性/负性调节线粒体分裂,还可作为线粒体外膜转位酶(TOM)复合物和线粒体内膜转位酶(TIM)复合物之间的桥接因子而介导PTEN诱导激酶(PINK1)输入线粒体进行加工,显示出促自噬或抗自噬活性。本文对ATAD3A在调控线粒体质量控制中的作用及其机制进行了综述。

转BtCry3A基因杨树毒蛋白表达及对桑天牛抗性的研究

为探索转抗虫基因(BtCry3A)741杨对鞘翅目昆虫的抗虫性,以7个转基因株系为检测对象,从分子生物学检测、毒蛋白的表达以及抗虫性检测等方面对转抗虫基因(BtCry3A)741杨株系进行了比较分析。7个转基因株系的DNA经PCR扩增显示,已转入BtCry3A基因。不同时期测定转基因株系不同部位叶片的毒蛋白含量不同,5月份测定的毒蛋白含量在当年生枝条不同部位叶片中未表现出明显的差异,至9月份封顶前,毒蛋白含量明显降低,且顶部叶片含量显著高于中下部叶片。在枝条的木质部中,毒蛋白的相对含量明显高于韧皮部。转基因株系对桑天牛幼虫的致死率很低,但对幼虫的发育具有明显的抑制作用。

3A蛋白间接ELISA试验检测猪口蹄疫感染抗体的研究

用表达的口蹄疫3A蛋白作为包被抗原,建立了间接ELISA试验,对口蹄疫病毒感染血清、免疫血清 和其它非口蹄疫病毒血清进行了检测研究。结果表明,3A蛋白间接ELISA试验对口蹄疫具有较好的特异性,可 以区分感染口蹄疫病毒的猪血清和疫苗免疫猪血清。

宫颈癌组织APOBEC3A蛋白的表达与高危型HPV感染的相关性研究

目的:探讨宫颈癌组织中载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样蛋白3A(APOBEC3A)表达与高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染的关系。方法:采用免疫组化法检测26例宫颈癌、27例宫颈上皮内瘤变(CIN)I～III和22例正常宫颈组织APOBEC3A蛋白的表达,同时使用凯普分型检测试剂盒对3组样品分别进行高危HPV16/HPV18分型检测。以脂质体法转染APOBEC3A质粒进入HeLa细胞,RT-qPCR与Western blotting验证APOBEC3A对高危型HPV18 E6 mRNA以及蛋白表达的影响。结果:宫颈癌组织、CIN组织以及正常宫颈组织中APOBEC3A蛋白表达的阳性率分别为46.2%、92.6%和86.4%,宫颈癌组织中APOBEC3A蛋白表达较正常宫颈组织明显下降(P<0.01)。宫颈癌组织、CIN及正常宫颈组织中HPV16感染阳性率分别为92.3%、77.8%和54.5%;HPV18感染阳性率分别为80.8%、51.8%和68.2%;APOBEC3A蛋白表达与HPV18感染阳性率呈负相关(P<0.05)。增加HeLa细胞中APOBEC3A的表达明显降低了HPV18 E6 mRNA以及蛋白的表达。结论:在宫颈癌组织中APOBEC3A高表达可以对抗HPV18感染,并抑制HPV18 E6的转录和表达。

人IFN-β启动子基因报告质粒的构建及SARS-CoV3a和7a蛋白对IFN-β诱生作用的初步研究

3a蛋白和7a蛋白是SARS-CoV的非结构蛋白,分别主要由SARS基因组中ORF3a和ORF7a所编码。在体内和体外感染病毒的细胞中均发现了有3a蛋白的表达。首先将pGL3-Control载体进行了改构,除去了SV40启动子基因,获得了pGL3-Enhancer载体,将获得的IFN-β启动子基因连入载体中,构建了带有人IFN-β启动子基因的荧光素酶报告质粒IP-21,并且通过实验证明所构建的质粒在干扰素的诱导剂NDV的作用下能够表达荧光素酶活性,照度计检测荧光素酶活性增强,从而验证了所构建的重组质粒的有效性。为了观察SARS-CoV非结构蛋白3a和7a对干扰素诱生途径的影响,将IP-21瞬转入稳定表达有3a和7a蛋白的CHO细胞,通过荧光素酶的信号强弱对3a和7a的作用进行分析,结果表明SARS-CoV的3a和7a蛋白能够刺激荧光素酶的表达,即在体外的细胞实验中,3a和7a能有效地激活IFN-β的启动子部分。此结果对进一步研究3a和7a的功能以及对SARS-CoV的致病机制的进一步研究有一定意义。

微小RNA靶向胰岛再生源蛋白3A对肺上皮细胞增殖和凋亡的影响

目的检测重症肺炎患儿血清中可能靶向抑制胰岛再生源蛋白3A(REG3A)的miRNA表达情况,并探究miR-137与miR-342-3p对肺上皮细胞增殖和凋亡的影响及机制。方法qRT-PCR检测重症肺炎患儿和健康儿童血清样本中相关miRNA和REG3A mRNA表达;将肺上皮细胞A549随机分为空白对照组、miR-137 NC组、miR-137 mimic组、miR-342-3p NC组、miR-342-3p mimic组,qRT-PCR检测miR-137、miR-342-3p和REG3A mRNA表达,Western blot检测REG3A、Caspase-3、Bcl-2、Bax和p53蛋白表达,双荧光素酶报告基因实验检测荧光活性,CCK-8法和EdU染色检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡。结果重症肺炎患儿血清中miR-425-5p、miR-137、miR-325-3p、miR-342-3p、miR-203a-3p及miR-9-3p相对表达量均高于健康儿童,而REG3A mRNA相对表达量低于健康儿童(P<0.05);miR-137、miR-342-3p均与REG3A 3′-UTR存在碱基互补现象,并靶向调控其表达(P<0.05);miR-137过表达和miR-342-3p过表达均能够使A549细胞增殖活性和EdU阳性细胞率降低、细胞凋亡率升高,Caspase-3、Bax和p53蛋白表达增加而Bcl-2蛋白表达减少(P<0.05)。结论miR-137和miR-342-3p可能通过靶向REG3A抑制肺上皮细胞增殖,并促进细胞凋亡。

口蹄疫病毒O/Laos/00株非结构蛋白3A基因特征分析

经反转录聚合酶链式反应(RT_PCR)技术扩增得到口蹄疫病毒O/Laos/00株的非结构蛋白3A基因核苷酸序列,与其他8株代表性参考毒株的3A基因进行比较,分析口蹄疫病毒3A基因的特征。结果表明:O/Laos/00株3A基因含有429核苷酸,编码143氨基酸残基。9株病毒3A氨基酸序列相比较,可分成3种不同的类型:一类是具有全长3A的毒株,一类是具有133～143位氨基酸缺失的毒株,这两类毒株均来源于牛体,核苷酸差异小(<15%);另一类是具有93～102位氨基酸缺失的毒株,毒株相互之间核苷酸差异较大(7.25%～22.2%)。

铅对大鼠脑区POU蛋白Brn-3a的mRNA转录水平的影响

目的探讨铅对大鼠中枢神经系统神经细胞内转录因子Brn-3a基因mRNA转录水平的影响。方法雌性大鼠经围产期饮水染铅(对照组蒸馏水、低铅组0.5g/L、中铅组1.0g/L、高铅组2.0g/L)后,对其21日龄仔鼠不同脑区的Brn-3a mRNA基因转录水平进行了观察,采用逆转录酶-聚合酶链反应(RT-PCR)和组织原位杂交半定量检测Brn-3a的mRNA水平。结果RT-PCR凝胶成像系统结果显示,各染铅剂量组脑组织海马区扩增产物的电泳条带密度与对照组相比差异有显著性(P<0.05),皮层及小脑部位与对照组相比差异无显著性。原位杂交检测Brn-3a的mRNA图像分析结果显示,高铅组与对照组相比,在大脑皮层和海马部位可见平均灰度值升高(P<0.05),表明mRNA的表达量减弱,而小脑部位未见明显变化。在海马部位还可见阳性面积比显著下降(P<0.01)。结论结果表明,仔鼠大脑海马区Brn-3a基因转录水平有所下降,Brn-3a作为转录调节因子参与了铅对学习记忆损害的神经毒性过程。

孕鼠铅暴露对仔鼠脑组织POU域蛋白Brn-3a基因转录及蛋白表达的影响

目的探讨铅对中枢神经系统神经细胞内转录因子Brn-3a表达的影响。方法雌性大鼠在围产期经饮水染铅(对照组蒸馏水、染铅组低0.5g/L、中1.0g/L、高2.0g/L),观察21日龄仔鼠脑组织,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量检测Brn-3a的mRNA转录水平,采用免疫组织化学方法检测Brn-3a蛋白表达水平。结果RT-PCR凝胶成像系统结果分析表明,各染铅剂量组脑组织海马区扩增产物的电泳条带密度与对照组相比其差异有显著性(P<0.05),表明mRNA的表达量减弱。免疫组织化学图像分析表明,各染铅组脑组织皮层、海马及小脑的Brn-3a蛋白表达的阳性面积比[Aa(%)]、平均灰度与对照组相比其差异有不同程度的显著性(P<0.05或P<0.01),并呈剂量-依赖性的变化。染铅组Brn-3a表达低于对照组。结论本研究的铅暴露动物模型脑组织观察到,大鼠脑组织基因转录水平和蛋白表达水平有所下降,表明铅干扰了Brn-3a蛋白的正常表达模式,因此干扰了神经细胞的正常分化。

抑制脑信号蛋白3A对糖尿病肾病大鼠的影响及作用机制研究

目的研究抑制脑信号蛋白3A对糖尿病肾病大鼠的影响及作用机制。方法选取40只SD健康大鼠,其中10只作为正常组,剩余30只大鼠建立糖尿病肾病模型,建模成功后分为模型组、上调组、下调组,每组10只。进行细胞转染建立稳定转染的脑信号蛋白3A上调组、脑信号蛋白3A下调组。检测4组大鼠肾损伤情况,尿素氮(BUN)、血清肌酐(Scr)、尿酸(UA)水平、血糖、糖化血红蛋白、24 h尿微蛋白、血脂水平、氧化抗氧化酶水平、肾小球结构指标以及肾组织TGF-β1/Smad6/BMP7、α-SMA、E-Cadherin蛋白表达量,并作组间比较。结果下调组大鼠BUN、Scr、UA、血糖、糖化血红蛋白、24 h尿微蛋白、TG、TC、LDL-C、HDL-C、肾小球基底膜厚度、足突宽度以及肾组织中TGF-β1、α-SMA蛋白表达量均低于模型组,且GSH-Px、GSH、CAT水平以及Smad6、BMP7、E-Cadherin蛋白表达量高于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);下调组大鼠BUN、Scr、UA、血糖、糖化血红蛋白、24 h尿微蛋白、TG、TC、LDL-C、HDL-C、肾小球基底膜厚度、足突宽度以及肾组织中TGF-β1、α-SMA蛋白表达量均低于上调组,且GSH-Px、GSH、CAT水平以及Smad6、BMP7、E-Cadherin蛋白表达量高于上调组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论抑制脑信号蛋白3A能够减少糖尿病肾病,减少肾小球内皮细胞和足突细胞的损伤,降低对肾小球基膜的损害,其作用机制可能与调控TGF-β1/Smad6/BMP7信号通路有关。

基因工程血管抑素3A蛋白的分离纯化

在8mol/mL尿素溶液中,以二硫苏糖醇(DTT)为还原剂,对基因工程血管抑素3A包涵体进行溶解实验。结果发现:1.5h后溶解的上清液蛋白浓度达26.2mg/mL。SDS-PAGE电泳扫描结果显示,3A蛋白经过SephadexG75分离后PAGE电泳纯达到100%,该步收率达85.82%,相对分子质量为10ku。采用分步稀释法对其进行复性,所获复性3A蛋白经MTT法检测表明:3A蛋白浓度为0.1μg/mL时,对内皮细胞的生长抑制率为93.4%。

玉泉丸对糖尿病肾病大鼠AMPK/FOXO3a通路及肾损伤的影响

目的:探究玉泉丸对糖尿病肾病(DN)大鼠肾损伤及腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/叉头框转录因子3a(FoxO3a)通路的影响。方法:90只大鼠随机选取12只为空白组,其余大鼠采用高脂高糖膳食辅以链脲佐菌素腹腔注射构建DN模型。筛选模型成功大鼠60只分为DN组、二甲双胍组(0.045 g/kg),玉泉丸高、中、低剂量组(8.64、4.32、2.16 g/kg),每组12只。各给药组分别灌胃给予相应的药物,1次/d,连续给药8周。检测大鼠24 h尿微量白蛋白(U-mAlb)水平;血糖仪检测空腹血糖(FBG)水平;计算肾脏指数;并检测血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)水平和肾组织匀浆中活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)含量;HE染色观察肾脏组织形态变化;荧光显微镜观察肾脏组织凋亡情况;Western blot检测肾脏AMPK、FOXO3a及其磷酸化蛋白表达。结果:与空白组相比,DN组大鼠肾小管上皮细胞损伤严重,大鼠FBG、U-mAlb、血清Scr、BUN、肾脏指数、肾脏组织ROS、MDA、肾小管上皮细胞凋亡数量显著升高(P<0.05),体重、肾脏组织SOD、CAT、p-AMPK/AMPK、p-FOXO3a/FOXO3a蛋白表达显著降低(P<0.05);与DN组相比,二甲双胍组和玉泉丸高、中剂量组大鼠肾脏组织病理损伤明显减轻,FBG、U-mAlb、血清Scr、BUN水平、肾脏指数、肾脏组织ROS、MDA、肾小管上皮细胞凋亡数量明显下降(P<0.05),体重、肾脏组织SOD、CAT含量、p-AMPK/AMPK、p-FOXO3a/FOXO3a蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论:玉泉丸可能通过激活AMPK/FOXO3a通路抑制DN大鼠氧化应激反应和肾脏细胞凋亡,减轻肾损伤。

铅暴露母体的仔鼠脑组织Brn-3a mRNA转录水平变化

目的研究铅暴露母体的仔鼠脑组织中POU域蛋白Brn-3a mRNA转录的情况。方法雌性大鼠自妊娠第15天开始经饮水染铅(2.0 g/L,对照组饮蒸馏水)至仔鼠出生后21 d断乳为止。随机取各组仔鼠断头,制作冰冻切片,采用原位杂交检测Brn-3a mRNA水平。结果与对照组相比,大脑皮层和海马部位可见Brn-3a mRNA平均灰度值升高(P<0.05),表明mRNA的表达量减弱,而小脑部位未见明显变化(P>0.05)。海马部位还可见阳性面积比下降有显著性(P<0.01)。结论不同脑区,Brn-3a基因转录水平有不同程度的下降,提示铅可能干扰了Brn-3a的正常表达模式,并由此影响神经元的正常分化。

GAP-43和Sema3A蛋白在戊四氮点燃慢性癫痫大鼠海马的表达

目的:探讨神经生长相关蛋白43(growth-associated protein 43,GAP-43)和semaphorin3A(Sema3A)蛋白在慢性癫痫模型大鼠海马的表达。方法:将成年雄性SD大鼠41只随机分为正常对照组和癫痫组,通过腹腔注射戊四氮(40 mg/kg)诱导慢性癫痫模型,取大脑海马组织,应用免疫组织化学和蛋白免疫印迹分析(Western Blot)方法,观察GAP-43蛋白及Sema3A蛋白在大鼠海马各区的表达变化。结果:免疫组织化学结果显示:GAP-43免疫阳性颗粒主要位于阳性细胞的胞浆和细胞膜表面,胞浆和突起被染成深棕色,靠近轴突一侧的胞浆染色较深;Sema3A免疫阳性颗粒主要位于阳性细胞的胞浆中,分布比较均匀,胞浆被染为棕黄色,染色较浅。在海马的齿状回及CA3区,癫痫组大鼠GAP-43蛋白的表达高于对照组大鼠,而Sema3A蛋白的表达则低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);在海马的CA1区,癫痫组大鼠GAP-43和Sema3A蛋白的表达均显著高于对照组大鼠,差异具有统计学意义(P<0.01)。Western Blot结果显示:在整个海马组织内GAP-43蛋白在癫痫组的表达为0.45±0.21,明显高于对照组(0.28±0.23),差异具有统计学意义(P<0.05);Sema3A蛋白在癫痫组和对照组的表达分别为1.18±0.55和1.55±1.96,虽有差异,但并无统计学意义(P>0.05)。结论:GAP-43蛋白在癫痫大鼠海马中表达升高,Sema3A在癫痫大鼠海马中具有区域性差异表达;这两种蛋白的表达变化可能参与了癫痫的发病机制。

高蛋白香稻不育系绵香3A的选育与利用

绵香3A是绵阳市农业科学研究所以新香A为母本、大粒B香/改B的F2代优良单株为父本测交,经多代择优回交转育而成的野败不育胞质高蛋白三系香稻不育系。该不育系育性稳定,农艺性状优良,蛋白质含量高达15.5%,配合力强,所配组合产量高、米饭香味浓郁。绵香3A于2003年8月通过四川省技术鉴定,配制的组合绵香3优725于2005年3月通过陕西省农作物品种审定委员会审定。

新蛋白C7orf42促进大鼠肝细胞BRL-3A增殖

目的探讨未知功能蛋白C7orf42对体外培养的大鼠肝细胞BRL-3A增殖的影响。方法基因干涉下调C7orf42表达后,用MTT、Ed U掺入法检测C7orf42对BRL-3A细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞周期进程以及Reat-time PCR和Western blotting检测细胞增殖相关基因表达。结果 MTT法检测表明,转染C7orf42干涉片段后48h,干涉组比阴性对照组细胞活力降低11%(P<0.05);Ed U掺入法检测表明,实验组的Ed U阳性细胞比率比对照组降低了13%(P<0.05);流式细胞术检测表明,干涉组比阴性对照组S+G2/M期的细胞数降低12%(P<0.05);Reat-time PCR检测表明,干涉C7orf42表达后细胞增殖相关基因JUN、CCND1、MYC和CCNA2的表达分别下调26%、31%、37%和14%(P<0.05);Western blotting检测表明,干涉C7orf42表达后细胞增殖相关蛋白JUN、CCND1、MYC和CCNA2的表达分别下调59%、54%、18%和27%(P<0.05)。结论 C7orf42可能通过上调细胞增殖相关蛋白JUN、CCND1、MYC和CCNA2的表达,促进体外培养的大鼠肝细胞BRL-3A增殖。

雌鼠围产期染铅对仔鼠脑组织Brn-3a基因转录及蛋白表达的影响

[目的]探讨雌鼠围产期染铅对仔鼠中枢神经系统神经细胞内Brn-3a基因转录及蛋白的影响。[方法]雌性大鼠在围产期经饮水染铅,分为低(0.5g/L)、中(1.0g/L)、高(2.0g/L)3个染铅组,对照组饮用蒸馏水。取21日龄仔鼠脑组织进行观察,采用组织原位杂交半定量方法检测Brn-3a基因mRNA转录水平,采用免疫组织化学方法检测Brn-3a蛋白表达水平。[结果]原位杂交检测Brn-3a基因mRNA图像分析结果表明,高铅组与对照组相比,大脑皮质和海马部位平均灰度值升高(P<0.05),表明mRNA的表达量减弱,海马部位阳性面积比明显下降(P<0.01)。免疫组织化学图像分析表明,与对照组相比,各染铅组大脑皮质、海马及小脑的Brn-3a蛋白表达的阳性面积比[Aa(%)]、平均灰度的差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),并呈剂量依赖性关系。染铅组Brn-3a蛋白表达低于对照组。[结论]大鼠脑组织基因转录水平和蛋白表达水平有所下降,提示在本实验染毒剂量下,铅干扰了Brn-3a蛋白的正常表达模式。

直肠癌患者血清TEM1、Sema3A水平与临床病理特征和预后的关系分析

目的 探讨直肠癌患者血清内皮唾液酸蛋白(TEM1)、信号素3A(Sema3A)水平与临床病理特征及预后的关系。方法 选取2018年2月至2019年2月于该院行直肠癌根治术的104例直肠癌患者作为研究组,以同期于该院体检的60例体检健康者为对照组。采用酶联免疫吸附试验检测血清TEM1、Sema3A水平,分析血清TEM1、Sema3A水平与直肠癌临床病理特征的关系,采用Kaplan-Meier生存曲线分析血清TEM1、Sema3A水平对直肠癌患者预后的影响,采用单因素及多因素Cox回归分析直肠癌患者预后的影响因素。结果 研究组血清TEM1、Sema3A水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);直肠癌患者术前血清TEM1、Sema3A水平与肿瘤分化程度、TNM分期及淋巴结转移有关(P<0.05);TEM1高表达患者的中位生存时间低于TEM1低表达患者,差异有统计学意义(P<0.05),Sema3A高表达患者的中位生存时间低于Sema3A低表达患者,差异有统计学意义(P<0.05);TNM分期Ⅲ期、肿瘤低分化、淋巴结转移、TEM1高表达、Sema3A高表达是影响直肠癌患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论 直肠癌患者血清TEM1、Sema3A水平升高,二者水平与TNM分期、肿瘤分化程度及淋巴结转移有关,是影响直肠癌患者预后的独立危险因素。

噬菌体展示技术筛选人肠道病毒71型3A蛋白相互作用蛋白

目的利用T7噬菌体展示技术筛选与人肠道病毒71型3A蛋白相互作用的蛋白。方法构建3A蛋白的原核表达载体,表达并纯化3A蛋白,以3A蛋白为靶蛋白,应用T7噬菌体展示技术对人肝细胞cDNA文库进行筛选,对筛选到产物进行DNA序列分析及同源性研究。结果表达并纯化了3A蛋白,经过4轮筛选后,选择37个阳性克隆,采用T7特异性引物扩增插入片段,将PCR产物送公司进行测序。经过同源性分析,确定了2个与人肠道病毒3A蛋白相互作用蛋白。结论通过T7噬菌体展示技术可以得到与3A蛋白相互作用蛋白,通过研究此蛋白的功能就可以初步推测出3A蛋白可能的功能,为进一步研究人肠道病毒的致病机制鉴定了基础。