^3H-thymidine渗入法测定Urocortin对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

目的探讨Urocortin(UCN)对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响。方法分离、培养大鼠血管平滑肌细胞,分别加入不同浓度的UCN以及UCN+Astressin,UCN+Glybenclamide培养,采用3H-thymidine掺入法,观察不同浓度UCN对血管平滑肌细胞增殖的影响,及其相关作用机制。结果随着Urocortin浓度的增高,VSMC对3H-thymidine摄取率呈下降趋势,而该作用不受Astressin或Glybenclamide的影响。结论Urocortin具有抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖的作用,其作用不是通过CRF受体或KATP通道。

用~3H-TdR研究混合重金属对鲫鱼DNA合成的影响

应用3 H 胸腺嘧啶核苷 ( 3 H TdR)示踪法研究混合重金属对鲫鱼 (Carassiusaura tus)遗传毒性的影响。结果表明 ,最佳取样时间为注射3 H TdR后 6h。鱼体各组织对混合重金属的毒性反应呈现双向效应 ,即低浓度时 ,表现出损伤、修复作用 ;高浓度时 ,DNA合成受到抑制。鱼卵、鱼鳃对重金属最敏感 ,损伤浓度为 0 0 773mg L ;而大脑对混合重金属耐受性最强。DNA损伤修复作用和DNA合成作用都存在剂量效应 ,随着暴露时间的延长 ,毒性作用增大。鱼体各组织对重金属的毒性反应可由DNA损伤修复变成合成抑制。经过 72h暴露后 ,3 H TdR在肝脏、鱼鳃、鱼卵中掺入量约低于对照的 5 0 %。

^3H-TdR对骨髓间充质干细胞代谢的量效关系研究

目的:研究不同剂量的3H-TdR对骨髓间充质干细胞生长代谢的影响,以确定安全的3H标记剂量。方法:在骨髓间充质干细胞培养瓶加入不同浓度的3H-TdR,描绘各细胞生长曲线,用Hochest染色观察细胞凋亡情况及用流式细胞仪检测细胞周期和骨髓间充质干细胞特有细胞表面标志物CD29、CD166、CD44、CD45的变化,观察对干细胞SOD、MDA的影响。结果:研究发现以4μCi/2ml浓度的3H-TdR标记干细胞时干细胞生长受到抑制,3μCi/2ml以上的浓度细胞均有不同程度的凋亡,流式细胞仪发现高浓度的核素能使干细胞被阻滞在S期及G2-M期,而且其细胞内的SOD下降及MDA升高,上述变化都有随核素剂量变化而变化的趋势;而用1μCi/2ml和正常组差异无统计学意义(P>0.05),标记过的骨髓间充质干细胞连续传代培养其增殖能力不受影响。结论:较高浓度的3H-TdR对干细胞的培养、示踪有影响,而1μCi/2ml的3H-TdR进行示踪研究是安全的。

胎肝细胞裂解产物对肿瘤患者外周血淋巴细胞~3H-TdR掺入率和α—醋酸萘酚酶活性的影响

对３５例肿瘤患者放、化疗同时应用胎肝细胞裂解产物治疗，观察其外周血淋巴细胞＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入率和α－醋酸萘酚酶活性的变化，说明ＦＬＳ对免疫功能的增强效应，并对其机璋进行探讨。

使用~3H-TdR和^(14)C—uR双标记研究恶性肿瘤患者细胞免疫功能

恶性肿瘤患者细胞免疫功能出现障碍已有文献报道,但使用~3H-TdR(~3氢—胸腺嘧啶核苷)和^(11)C-uR(^(11)碳—尿嘧啶核苷)双标记研究恶性肿瘤患者细胞免疫功能的报告较少,本文使用~3H-TdR和^(11)

^3H-TdR掺入法检测镉致鲫外周血单个核细胞的增殖抑制

以Cd2+浓度1.25、2.503、.75 mg.kg-1腹腔注射染鲫后,用3H-胸腺嘧啶脱氧核苷掺入法研究镉对鲫外周血单个核细胞(PBMC)增殖的影响.检测鲫PBMC的增殖.结果显示:1.25 mg.kg-1组与对照组在不同时间放射性活度(dpm)的差异均无显著性;0d和3d时各染镉组与对照组dpm的差异均无显著性;5d时2.50 mg.kg-1及3.75 mg.kg-1组与对照组及1.25 mg.kg-1组dpm的差异有显著性且呈剂量效应,7d和10d时dpm与5d时基本相同;14d时3.75 mg.kg-1组与其余组dpm的差异有显著性,但已出现缩小的趋势.因此低浓度Cd2+对鲫PBMC增殖的影响不大,高浓度Cd2+则能诱导鲫PBMC增殖抑制.

_3H-TdR掺入率对骨髓造血细胞低温保存效果的评价

利用~3H-TdR掺入率液体闪烁测定法结合台盼蓝拒染率和单层琼脂CFU-GM培养对骨髓造血细胞低温保存后的活力进行了研究。观察了骨髓MNC的不同细胞浓度和孵育时间、不同保存温度(新鲜,4℃,-80℃,液氮)和保存时间(30分,7天,28天,90天)的~3H-TdR掺入年,并与台盼蓝拒染率、单层琼脂CFU-GM培养进行了对比,表明~3H-TdR掺入率是评价低温保存后骨髓造血细胞活力的一项敏感可靠的指标,周期短,并可较准确的反映细胞中处于DAN合成期(S期)的细胞含量。

大鼠呼吸道上皮细胞~3H-TdR标记指数

本文利用~3H-TdR 掺入技术研究大鼠呼吸道上皮细胞的标记类型和数量。大鼠腹腔注射7.4×10~4Bq/g(体重)~3H-TdR6小时后,制片计数气管和支气管上皮标记及非标记的基底细胞和粘液细胞,计算出标记指数。结果表明,气管及支气管基底细胞标记指数分别为0.0052和0.0198,粘液细胞标记指数分别为0.0014和0.0047,说明两类细胞都是具有分裂能力的癌形成相关细胞。

用原子示踪法研究Raji癌细胞在氩离子激光照射下对~3H-TdR掺入量的影响

原子示踪技术是核医学的一个组成部分。近年来,由于示踪技术的不断发展,使生物化学由细胞水平进入分子水平。如细胞膜受体,遗传密码,RNA-DNA逆转录等,使人类对基本生命现象的认识开辟了新的途径。在医学上,示踪技术对肿瘤、针麻原理、中药药理等的深入研究,已从多方面显示广阔的前景。

^3H-TdR涂层支架转移细胞内照射预防兔骼动脉支架后再狭窄的实验研究

目的:探讨3H-TdR探讨涂层支架置入对涂层支架预防兔骼动脉支架后再狭窄的预防作用。方法:12只新西兰大白兔,按支架放射性活度分为三组,每组4只,能量分别为:2.12、6.21、8.22MBq,于每只动物一侧骼动脉内置入不同活度的3H-TdR.支架,对侧骼动脉内置入非放射性支架作对照。高脂饲养28 d后进行骼动脉血管造影和组织病理学分析,放射性自显影检测,观察治疗效果,同时检测外周血及组织中放射量。结果:组织病理学分析显示不同剂量3H-TdR支架组新生内膜狭窄百分比均明显低于对照组,支架内细胞增生厚度明显低于对照组,内膜光滑,少血栓形成。放射性自显影显示大量平滑肌细胞核内有显像颗粒,内层到外逐渐递减,中层以外很少。血液及外周组织检测未见放射性物质。结论:3H-TdR支架能明显抑制支架置入后兔骼动脉新生内膜增生和支架后再狭窄的发生,外周血及组织中无明显放射性物质检出。

以淋巴母细胞为靶细胞的~3H-TdR后标法细胞毒试验检测EHF病毒诱生的细胞毒因子

流行性出血热(Epidemic Hemorrha-gic Fever,EHF)患者的细胞免疫功能普遍受抑制,其原因尚未明了。我们在 EHF的发病机理研究中发现,EHF 病毒感染的小鼠脾脏匀浆液(Spleen homog(?)atefrom EHFV infected mice(?) VISH)中存在一种具有细胞毒活性的细胞因子,它至少可通过三条途径抑制细胞介导的免疫反应:1.杀伤正常小鼠的免疫细胞;2.体内外对淋巴母细胞转化能力均有明显的抑制作用;3.对 ConA 转化的淋巴母细胞有强烈的杀伤作用。因此 EHF

^3H—TdR参入裸鼠移植瘤作为抗癌药物筛选方法的初步研究

将~3H-TdR参入裸鼠移植瘤内,用液体闪烁计数技术测量其中氚的含量。结果表明:不同的市售抗癌药无论对可移植性人脑胶质瘤还是对患者手术标本移植在裸小鼠皮下的肿瘤都有不同的抑制~3H-TdR参入作用。初步提示,此法可用于筛选抗癌药物。

流式细胞术法与^3H—TdR掺入法观察细胞增殖的相关性研究

目的:研究3H TdR掺入法和流式细胞术法研究指标的相关性, 探讨用流式细胞术法来替代3H-TdR掺入法的数据依据。方法: 用3H -TdR掺入法和流式细胞术法对细胞DNA合成和有丝分裂进行检测。结果: 流式细胞仪指标与3H-TdR掺入实验指标呈高度的正相关关系, 相关系数分别为: PI与cpm相关系数为r=0. 964;SPF与3H TdR,掺入的相关悉数r=0. 876,且经检验有统计学意义 (P<0. 01 )。结论:主动脉平滑肌细胞增殖指数、S期细胞分数与3H TdR掺入值密切相关。

17β-雌二醇对人成骨样细胞OS-732增殖和分化的影响

采用绘制生长曲线３Ｈ－ＴＤＲ掺入、ＡＬＰ、ＢＧＰ的定量测定、免疫组化、原位杂交等和光镜等方法，探讨了１７β－雌二醇对ＯＳ－７３２细胞增殖和分化的影响及对骨粘连蛋白（ＯＮ）ｍＲＮＡ表达的影响。结果显示：１７β－雌二醇以剂量依赖性促进ＯＳ－７３２细胞的增殖，其中以１０－８ｍｏｌ／Ｌ浓度作用最强；１７β－雌二醇可以轻度降低ＡＬＰ的活性和ＢＧＰ的分泌，对ＯＳ－７３２细胞分化有轻微抑制作用。免疫组化实验结果表明ＯＳ－７３２细胞上存在ＥＲ受体，且给药后核内ＥＲ增多，为雌激素直接作用于成骨样细胞提供了一个例证。原位杂交结果表明ＯＳ－７３２上存在（ＯＮ）ｍＲＮＡ的表达，而给药后无明显变化。

A549肺腺癌多细胞球体^(32)P内照射和高能X线外照射后放射生物学效应

目的 探讨A5 4 9肺腺癌多细胞球体内照射合适的3 2 P吸收剂量 ,以便临床对肺癌实体瘤作间质治疗选择核素内照射吸收剂量时给予参考。方法 96孔盘每孔一个球体 ,15Gy3 2 P内照射 2 4h后当天用直线加速器产生的 6MV高能X线作另外一组球体的连续 15Gy外照射 ,剂量率 2Gy/min。照射结束后第 8和第 15d用3 H 脱氧葡萄糖 (3 H DG)和3 H胸腺嘧啶核苷 (3 H TdR)摄取实验 ,流式细胞仪、光镜和电镜观察。结果 ① 15Gy内、外照射结束 8d后3 H DG摄取明显低于对照组 (P <0 .0 5 ) ,外照射组低于内照射组 (P <0 .0 5 ) ;3 H Tdr摄取低于对照组 (P <0 .0 1) ,内、外照射组比较P =0 .736 ;15d后 ,内、外照射组和对照组3 H DG摄取比较P >0 .0 5 ,照射组的3 H Tdr摄取低于对照组 (P <0 .0 5 ) ,照射组之间无显著差异 (P =0 .995 )。②内、外照射结束 1周后 ,外照射组的G2 M %和凋亡率高于内照射组 ,2周后比较两者差别不大。③内照射后球体未明显生长 ,外照射组略大于内照射组 ;电镜观察到坏死和凋亡 ,外照射多于内照射。结论 同等剂量照射时外照射的杀伤力更大 ,为3 2

用^3H—TdR掺入法检测小鼠LAK细胞活性

本文用~3H-TdR掺入法检测小鼠淋巴因子活化性杀伤细胞(LAK细胞)的活性。结果表明它对4种肿瘤细胞均呈现极高的细胞毒活性,对正常细胞却不表现细胞毒。淋巴器官中脾脏LAK细胞活性最高,淋巴结次之,胸腺则不表现活性。比较3种不同品系小鼠的LAK细胞,它们的活性也不一致,存在明显差异。

四生汤对紫外线诱发淋巴细胞非合成期^3H—TdR掺入指数的影响

四生汤对紫外线诱发淋巴细胞非合成期３Ｈ－ＴｄＲ掺入指数的影响＊凌昌全１高虹２陈哲１黄血强１张红武１（１第二军医大学附属长海医院中医科２００４３３）（２上海市龙华医院中医肿瘤科２０００３２）切除修复是人类ＤＮＡ损伤后的主要修复方式，它在特异的核酸酶参与...

中药木回春对QGY—7703人肝癌细胞DNA合成的影响

目的 中药木回春全外抗肝癌作用研究。方法 采用^3H-TdR掺入法检测木回春对QGY-7703人肝癌细胞DNA合成的影响。结果 实验组QGY-7703细胞DNA合成量较对照组皆有明显减少。差异显著（P<0.001)。且DNA合成量随药物浓度增加呈减少趋势，ED50浓度为270.968ug/ml。结论 木回春可能成为治疗肝癌的理想药物。

改进的^3H—TdR释放试验检测LAK细胞溶瘤活性

检测LAK细胞溶瘤活性一般采用51Cr标记的细胞毒释放试验,但由于51Cr的半衰期短,不同批号和同一批号存放不同时间均易对实验结果产生影响。且国内生产的51Cr质量尚不稳定,每批产品所获得的结果很不一致。国外产品价格昂贵,运输不便。而3H-TdR国内产品质量可靠,有价格低、半衰期长等优点。国内已有用3H-TdR标记法检测NK细胞活性方法的报道。