3T3中性红试验在化妆品光毒检测中的应用

目的研究3T3成纤维细胞中性红摄取试验(3T3 NRU PT)在化妆品安全性评价中取代动物光毒性试验的可行性。方法选用20种国产特殊用途化妆品,作用丁3T3细胞后,暴露或不暴露于紫外线下,测量540 nm处经化学物质和紫外线照射联合作用细胞的吸光度,分析其平均光效应强度(MPE)、光刺激因子(PIF),细胞存活率,以判断待测物质是否具有光毒性,并与整体动物皮肤光毒性结果进行比较。结果3T3 NRU PT试验测得20种化妆品的PIF值均<5,MPE值均<0.1,按该试验阈值分类方法,均呈光毒性阴性;动物试验结果表明,未出现皮肤反应≥2分的动物,结果也均为光毒性阴性。3T3 NRU PT试验与动物光毒性结果经校正χ2检验比较,差异无统计学意义,其灵敏度、特异度、阳性预测价值、阴性预测价值均为1。结论3T3 NRU PT试验和豚鼠皮肤光毒性试验的结果一致,该方法可取代化妆品终产品的动物光毒性试验。

BALB/c 3T3细胞中性红摄取试验预测化合物急性毒性的验证研究

目的探讨BALB/c 3T3细胞中性红摄取试验预测化合物急性毒性的可行性,为建立细胞毒性试验预测急性毒性试验平台,开展化合物急性毒性筛查提供理论依据。方法选取11种受试物,开展BALB/c 3T3中性红摄取试验,以IC50结果与急性毒性试验LD50进行线性回归,将拟合的曲线与RC模型曲线进行比较。同时,将受试物的IC50值代入RC模型方程获得急性毒性LD50的预测值,依据GHS急性毒性分级法进行分级,与急性毒性试验的LD50和分级进行比较,同时对结果进行相关性分析。结果阳性对照十二烷基硫酸钠的结果符合试验质量控制的要求。受试物拟合曲线与RC模型曲线几乎平行,11种受试物中,LD50预测值与急性经口毒性试验分级一致的有9种。BALB/c 3T3细胞中性红摄取试验IC50值与急性毒性试验LD50值存在相关性(Pearson r=0.997,P<0.01)。受试物分级结果与实际分级具有等级相关性(Spearman r=0.905,P<0.01)。结论在本试验体系下,BALB/c 3T3细胞中性红摄取试验能够较好地预测急性毒性。既可以作为化合物急性毒性的快速初筛,又可为动物试验起始剂量的选择提供依据。

体外3T3细胞光毒性中性红摄取法评价化妆品的光毒性作用

采用体外3T3细胞光毒性中性红摄取法,评价化妆品引起皮肤光毒反应的可能性。首先用不同质量浓度的5种标准品作用于3T3细胞,通过照射UVA与不照射UVA测试结果相比,建立了光毒性检测评价方法,并对24种化妆品样品(其中7种防晒化妆品和17中美白祛斑化妆品)进行检测和评价。结果表明,有2款化妆品具有比较强的光毒性。