反相高效液相色谱法同时测定人血浆中磷苯妥英、苯妥英及其主要代谢产物4’-羟苯妥英的浓度

目的建立同时测定人血浆中抗癫痫药物磷苯妥英(FOS)、苯妥英(PHT)及其主要代谢产物4′-羟苯妥英(4′-HPPH)浓度的高效液相色谱法。方法以盐酸普萘洛尔为内标,血浆样品100μL经20%磷酸酸化后以乙酸乙酯1 mL萃取,提取后氮气吹干,加入流动相100μL复溶,取20μL进样测定。色谱柱采用Agilent RX-C8柱(4.6 mm×250 mm,5μm),柱温:40℃;流动相为甲醇-乙腈-0.1%三氟乙酸水溶液(23∶17∶60),流速为1.5 mL·min-1,紫外检测波长210nm。结果血浆内源性杂质和常用合并用药对样品测定无干扰,色谱峰分离良好。FOS、PHT、4′-HPPH的线性范围分别是1～400,0.5～50和0.5～10 mg·L-1,相关系数(r)均大于0.999 1。平均方法回收率为92.79%～107.90%。各组分的日内、日间RSD均小于8%。结论该方法具有良好的准确性、精密性和灵敏性,且操作快速、简便,各组分之间分离良好,适用于临床血药浓度的监测。

4-二甲氨基吡啶催化合成苯妥英钠的研究

苯妥英钠是抗癫痫发作的首选用药。以安息香为原料,经氧化、环缩合、成盐3步反应制得目标化合物。环缩合步骤首次采用4-二甲氨基吡啶为催化剂,在V(正丁醇)∶V(水)=1∶1组成的两相体系中,完成联苯甲酰与尿素的环缩合反应,高效得到苯妥英,然后与10%氢氧化钠乙醇溶液成盐得目标化合物,目标化合物的结构经IR和~1HNMR确证。该合成路线具有操作简单、后处理方便、产品纯度高且产率高等优点,适合工业化生产,总产率为84.96%。

中国汉族人S-美芬妥英4′-羟化代谢的遗传多态性(英文)

目的:研究我国汉族人S-美芬妥英(S-Mep)4′-羟化代谢的遗传多态性。方法:148名互无血缘关系的汉族健康志愿者和5个家族21名成员,口服美芬妥英100mg后,用HPLC法测定0-12h尿中S-Mep 4′-羟化代谢的代谢比值(lg MR)和羟化指数(lg HI)。结果:lg MR和lg HI均呈两态性分布,分型点(antimode)分别为-1.00和1.50,羟化代谢缺陷的频发率为13.5％(20/148)。系谱分析表明S-Mep 4′-羟化代谢缺陷为常染色体隐性遗传。结论:S-Mep 4′-羟化代谢缺陷频发率东方人高于高加索人,遗传方式均为常染色体隐性遗传。

HPLC法测定人尿中苯妥因及其代谢产物4′—羟基苯妥因

本文建立了RH-HPLC 法测定人尿中苯妥因(PHT)及其代谢物4′—羟基苯妥因(HPPH)。用乙醚为提取溶剂,5-对甲苯基-5-苯基乙内酰脲(MPPH)为内标。色谱分析用 Bil-Sll(?)ODS 柱,含40%乙腈的水溶液为流动相。PHT 和 HPPH 的线性测定范围为0.05—2.0μg/ml 和1.0—100μg/ml,相关系数均优于0.99。平均回收率分别为98.9%和99.9%,平均变异系数分别为4.8%和4.7%。应用本法研究了88名健康志愿者 PHT 的遗传代谢多态性。

高原缺氧对血脑屏障中ATP-结合盒转运蛋白表达的影响

目的研究高原缺氧对血脑屏障(BBB)中ATP-结合盒(ABC)转运蛋白表达的影响,并探讨影响其表达的机制。方法将Wistar大鼠分为1500 m组(兰州实地)、4010 m组(模拟,低压氧舱,缺氧3 d)、6000 m组(模拟,低压氧舱,缺氧3 d)、苯妥英钠+1500 m组(在1500 m组基础上给予50 mg·kg^(-1)苯妥英钠)、苯妥英钠+4010 m组(在4010 m组基础上给予50 mg·kg^(-1)苯妥英钠)、苯妥英钠+6000 m组(在6000 m组基础上给予50 mg·kg^(-1)苯妥英钠)和缺氧1 d组、缺氧2 d组、缺氧3 d组、缺氧4 d组(模拟海拔4010 m,低氧氧舱,分别缺氧1、2、3和4 d)。用蛋白质印迹法检测BBB组织蛋白的表达水平,用高效液相色谱联用质谱法检测脑脊液苯妥英钠的浓度。结果1500 m、4010 m、6000 m组的P-糖蛋白(P-gp)蛋白相对表达水平分别为1.00±0.04、1.84±0.02和2.10±0.05,多药耐药相关蛋白-4(MRP4)蛋白相对表达水平分别为1.00±0.05、2.77±0.08和4.42±0.03,苯妥英钠在脑脊液中的浓度为(864.78±348.32)、(1000.22±273.90)和(1214.17±314.09)ng·mL^(-1)。1500 m组、4010 m组上述指标和6000 m组相比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P<0.05)。缺氧1 d组、缺氧2 d组、缺氧3 d组、缺氧4 d组P-gp蛋白相对表达水平分别为1.00±0.03、1.85±0.04、3.10±0.02和2.17±0.05,MRP4蛋白相对表达水平分别为1.00±0.05、1.79±0.10、1.60±0.08和1.31±0.06,缺氧1 d组、缺氧2 d组、缺氧3 d组上述指标和缺氧4 d组比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论不同的高原缺氧环境对BBB中ABC族转运蛋白的表达产生不同的影响,并影响其底物药物在体内的药物浓度。