4NQO饮水法诱发小鼠舌癌前病变模型建立的研究

目的:建立与人口腔癌前病变相似的动物模型.方法:采用0.001% 4-硝基喹啉1-氧化物(4NQO)饮水法对Balb/c近交系小鼠进行诱发实验.16周和20周时处死小鼠,观察病变情况.结果:舌背黏膜癌前病变的总发病率为100%.16周时以轻度和中度异常增生为主;20周时以中度和重度异常增生为主.结论:4NQO饮水法的致病过程和组织病理学特征与人相似;0.001% 4NQO饮用16～20周是舌癌前病变动物模型建立的理想时间.

16种中药的抗4NQO致突变作用

用Ｅ．ｃｏｌｉ ＣＭ８９１ 菌株的正向突变（ＳＭｒ－ ５） 和回复突变（ＴｒＰ＋） 双重指标，以细胞内抗突变作用的模式检测了１６ 种中药水提取物的抗４ ＮＱＯ 的致突变活性。结果显示：诃子、首乌、女贞子和带蒂菱壳具有拮抗４ ＮＱＯ 诱发的正向突变和回复突变的作用；带蒂菱壳还具有抗自发正向和回复突变的作用。白芍具有促进４ ＮＱＯ

4NQO诱发大鼠舌癌变细胞分化异常的超微结构观察

目的 探讨 4 硝基喹啉 1 氧化物 (4NQO)诱发大鼠舌癌变细胞分化异常的超微结构及其变化规律。方法 口服 4NQO诱发大鼠舌粘膜癌变 ,透射电镜动态观察癌变过程中细胞的超微结构变化。结果 随大鼠舌癌变进展 ,鳞状上皮细胞浆、核、细胞间连接、基底膜等发生规律性变化。其中张力原纤维、桥粒、角质颗粒呈逐渐减少趋势 ,线粒体则逐渐增多 ;部分重度异常增生上皮已发生基底膜断裂 ,原位癌细胞有个别已突破基底膜。结论 口腔癌变是一个渐变过程 ,鳞状上皮分化异常主要表现为合成产物减少和增殖代谢活跃细胞器增多。电镜观察基底膜可以早期发现癌变。

4－硝基喹啉－1－氧化物（4NQO）对大麦损伤效应的研究

４ＮＱＯ对大麦Ｍ１的出苗率、苗高、根长、根数、Ｍ１根尖细胞的染色体畸变率较之对照都有较明显的影响。试验结果表明，４ＮＱＯ对大麦具有明显的损伤效应。

4NQO对蚕豆损伤效应的研究

使用4NQO(4-硝基喹啉-1-氧化物)作为诱变剂处理蚕豆种子,研究其诱变效应。试验结果表明:4NQO对蚕豆M_1发芽率和苗高有较强影响,对M_1根尖细胞染色体有较强的致畸作用,4NQO是一种可用于植物的有效化学诱变剂。

4NQO、^(137)Cs γ射线复合处理对大豆的遗传效应

本试验用4NQO(4-硝基喹啉-1-氧化物)、^(137)Csγ射线单因子及其复因子处理大豆风干种子。结果表明,单因子处理均能降低大豆的苗高、成苗率,增加不孕率及染色体畸变频率和过氧化物酶活力,改变过氧化物酶同工酶谱。复因子处理较单因子处理的效应更强。~3H-TdR 掺入试验结果表明,单因子处理均可使 DNA 造成损伤,复因子处理可使 DNA 损伤程度加重。

4NQO诱导大鼠口腔黏膜癌变过程中Bcl-2、BaxmRNA和蛋白的表达

目的：探讨Bcl-2、Bax mRNA和蛋白在4-硝基喹啉-1-氧化物（4-nitro-quinoline-1-oxide,4NQO）诱导大鼠口腔黏膜癌变过程中的表达及意义.方法：0.5％ 4NQO涂抹SD大鼠腭部黏膜,每周3次,持续18 ～ 26周,诱导大鼠口腔黏膜癌变,分别用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和免疫组化SABC法检测50例大鼠口腔黏膜癌变过程中Bcl-2、Bax mRNA和蛋白的表达.结果：Bcl-2 mRNA在正常（n=16）、异常增生（n=13）、鳞癌组织（n=21）中的相对值分别为0.31 ±0.02、0.56±0.09、1.03 ±0.13（P ＜0.05）,Bcl-2蛋白表达阳性例数分别是1/16、6/13、16/21 （P ＜0.05）.BaxmRNA在正常、异常增生、鳞癌组织中的相对值分别为0.62 ±0.05、0.68 ±0.04、0.28±0.14（P ＜0.05）,Bax蛋白表达阳性例数分别是5/16、4/13、3/21（P＜0.05）.结论：Bcl-2、Bax mRNA和蛋白异常表达与大鼠口腔黏膜癌变相关.

4NQO对蚕豆诱变效应的研究

本试验利用４ＮＱＯ为诱变剂处理蚕豆种子，研究其诱变效应。结果表明；４ＮＱＯ对蚕豆Ｍ１的发芽率、苗高及染色体有较强的影响，可诱发蚕豆Ｍ１细胞染色体畸变。畸变类型以微核为主，是一种有效的诱变剂。

4NQO诱导小鼠舌癌前病变模型的研究

目的使用4NQO诱导并建立C57BL/6J小鼠舌癌前病变模型。方法 46只6～8周龄C57BL/6J小鼠,随机取16只作为阴性对照,不做任何处理,分别于8、12、16周末处死。实验组30只饮用50μg/ml 4NQO水溶液,分别于8、12、16周末处死。处死前2小时腹腔注射BrdU(50mg/kg),肉眼及组织病理学观察病变情况,免疫组织化学检测BrdU染色,并进行统计学分析。结果实验组8、12、16周小鼠,肉眼观察舌背黏膜逐渐粗糙发白,呈白斑样改变;HE染色显示,实验组8、12、16周轻中度异常增生灶数分别为0.20±0.45、1.60±1.14、2.60±0.82;随着病变程度的加重BrdU染色阳性细胞增加,与阴性对照组比较有显著差异。结论 50μg/ml 4NQO水溶液8～16周可以诱发小鼠舌癌前病变。

4NQO诱导大鼠腭黏膜癌模型建立的实验研究

目的:建立与人腭黏膜癌及癌前病变发生相似的动物模型。方法:体积分数为0.5%的四硝基喹啉-1-氧化物(4-nitroquinoline 1-oxide,4NQO)水溶液涂抹Wistar大鼠腭部黏膜至28周,肉眼及组织学观察癌变全过程。结果:随4NQO作用时间的延长,小鼠腭黏膜相继出现白色斑块、红白相间斑块、乳头状新生物和浸润性肿块等改变,组织学上经历了单纯性上皮增生、异常增生、原位癌、浸润性癌的病理过程,用药16、20、24、28周时腭癌的发生率分别为0、11.1%、44.4%、100%,未见远处转移。结论:4NQO涂抹法诱发大鼠腭癌模型建立方法简单、靶器官代表性强、病变典型,癌变时间稳定集中,且与人类口腔癌病变过程相似,是研究口腔癌的理想动物模型。

4NQO饮水法诱发小鼠舌癌动物模型建立的研究

目的：建立与人口腔癌发生相似的口腔癌动物模型。方法：0．001％四硝基喹啉-1-氧化物（4-nitroquinoline 1-oxide。4NQO）饮水喂养Balb／c小鼠16～28周，肉眼及组织学观察癌变全过程。结果：随4NQO作用时间和观察时间的延长，小鼠舌背后部黏膜相继出现白色斑块、红白相间斑块、乳头状新生物等改变。16周后50．0％小鼠舌背黏膜表现为轻度异常增生，45．0％为中度异常增生，5．0％为重度异常增生；20周后5．0％为轻度异常增生，60．0％为中度异常增生，30．0％为重度异常增生，5．0％为原位癌；24周后50．0％为中度异常增生，40．0％为重度异常增生，10．0％为原位癌；28周后30．0％为中度异常增生，50．0％为重度异常增生，10．0％为原位癌，10．0％为早期浸润性癌。用药16、20、24、28周停药观察至48周时，舌癌的发生率分别为0、14．3％、18．2％、28％，未见远处转移。结论：4NQO饮水诱发小鼠舌癌生长缓慢、潜伏期长，致癌过程和组织病理学特征与人相似，方法简便，靶器官代表性强；0．001％浓度4NQO饮用16～20周是舌癌前病变动物模型建立的理想时间，要在一定时间内建立发癌率更高的舌癌动物模型，用药的浓度需要加大。

两种浓度4NQO饮水法诱发小鼠舌癌及癌前病变动物模型的比较

目的：快速、准确的建立与人舌癌及癌前病变发生相似的动物模型。方法：0．001％和0．002％四硝基喹啉-1-氧化物（4-nitroquinoline 1-oxide，4NQO）饮水喂养Balb／c小鼠16-28周，肉眼及组织学观察癌变全过程。结果：随4NQO作用时间和观察时间的延长，小鼠舌黏膜相继出现白色斑块、红白相间斑块、乳头状新生物、溃疡等改变。饮用0．001％4NQO 16周后的小鼠50．0％小鼠舌背黏膜表现为轻度异常增生，45．0％为中度异常增生，5．0％为重度异常增生；20周后5．0％为轻度异常增生，60．0％为中度异常增生，30．0％为重度异常增生，5．0％为原位癌124周后50．0％为中度异常增生，40．0％为重度异常增生，10．0％为原位癌；饮用0．002％4NQO16、20、24、28周停药观察至40周的小鼠，舌癌的发生率分别为10％、25％、37．5％、45．5％，未见远处转移。结论：4NQO饮水法诱发小鼠舌癌及癌前病变生长缓慢、潜伏期长，致癌过程和组织病理学特征与人相似，方法简便；0．001％是诱发小鼠舌癌前病变的理想浓度，0．002％是诱发小鼠舌癌的理想浓度。

不同潮气量机械通气对4NQO饲养大鼠的肺损伤研究

目的:探讨不同潮气量机械通气对4-硝基喹啉-1-氧化物(4NQO)饮水法饲养的大鼠肺组织的影响。方法:30只4周龄雄性SD大鼠采用4NQO饮水法饲养12周后,随机分为对照组(A组)、常规潮气量组(B组)和肺保护性通气组(C组),每组10只,通气4 h处死大鼠。酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中的白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的浓度变化,BCA法测定BALF中的总蛋白浓度及肺水含量;苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠舌头和肺组织病理切片,统计Smith评分,TUNEL法测定肺泡上皮细胞凋亡指数(AI)。结果:与A组相比,B组和C组的IL-6、TNF-α、总蛋白浓度及Smith评分、AI水平显著升高(P<0.05);与B组相比,C组的上述各项指标均明显降低(P<0.05)。结论:肺保护性通气策略(LPVS)可以减轻4NQO饮水法饲养大鼠的肺组织损伤。

4NQO诱导大鼠舌黏膜癌变过程中波形蛋白的表达研究

目的研究舌黏膜癌变过程各阶段中波形蛋白的表达,探讨其在舌鳞状细胞癌(TSCC)发生、发展中的意义。方法采用4-硝基喹啉-1-氧化物(4NQO)饮水法诱导大鼠TSCC的发生,收集发生过程中正常舌黏膜、上皮单纯增生、轻度上皮异常增生、中度上皮异常增生、重度上皮异常增生及TSCC组织标本共56例。采用免疫组织化学法检测波形蛋白的表达情况,并采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测各组织的波形蛋白mRNA表达量。结果免疫组织化学中,随着大鼠舌黏膜异常增生程度的增加,波形蛋白表达阳性率明显上升,各组间差异有统计学意义(χ2=10.685,P<0.05)。病变各组与正常舌黏膜组比较,mRNA表达差异均具有统计学意义(P<0.05);轻度、中重度上皮异常增生组、鳞癌组与上皮单纯增生组进行比较,鳞癌组差异有统计学意义(P<0.05)。上皮单纯增生、轻度、中重度上皮异常增生组、鳞癌组波形蛋白mRNA表达量分别是正常舌黏膜组的1.22、1.28、1.29、1.42倍。结论在4NQO诱导大鼠舌黏膜癌变过程中,波形蛋白随病变程度的增加表达增高,这与肿瘤的侵袭密切相关,有可能作为舌黏膜上皮癌变的预测指标。

牙龈卟啉单胞菌促进4NQO诱导C57BL/6鼠食管鳞癌发生

目的明确4-硝基喹啉-1-氧化物(4-nitroquinoline 1-oxide,4NQO)诱导C57BL/6鼠食管鳞癌模型中牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)对食管鳞癌发生的促进作用。方法120只C57BL/6鼠随机分为对照组、1,2-丙二醇溶剂对照组、4NQO组和4NQO联合P.gingivalis牙周炎组,每组各30只。4NQO诱导食管鳞癌模型中,50μg·mL^-1的4NQO处理8周后,鼠口腔上颌第二磨牙丝线结扎、P.gingivalis口腔持续感染。结果22周时,4NQO组和4NQO联合P.gingivalis组鼠食管黏膜上皮开始发生病变,肉眼观为黏膜表面粗糙,灶性颗粒状或乳头状增生;镜下为食管黏膜基底细胞增生,26周时4NQO联合P.gingivalis组出现不典型增生,36周实验终止时联合组出现癌变。与4NQO单纯处理组比较,P.gingivalis感染组小鼠食管黏膜病变面积明显增大,基底细胞增生和不典型增生发生时间提前。结论P.gingivalis能够促进4NQO诱导C57BL/6鼠食管鳞癌的发生。

4NQO饮水诱发大鼠舌癌模型的建立

目的 建立与人口腔环境相近的大鼠舌癌模型。方法 0 0 0 2 % 4 硝基喹啉 1 氧化物( 4NQO)饮水喂养SD大鼠 9～ 3 2周 ,肉眼及组织学观察癌变全过程。结果 随致癌剂作用时间延长 ,大鼠舌背后部粘膜相继出现白色斑块、溃疡、糜烂、乳头状增生等改变。 9周后 80 0 %大鼠舌背粘膜表现为单纯性上皮增生 ,2 0 0 %为轻中度异常增生 ;13周后 66 6%为轻中度异常增生 ,3 3 3 %为重度异常增生 ;16周后 5 5 5 %为重度异常增生 ,4 4 4 %为原位癌 ;3 2周后 12 5 %为重度异常增生 ,12 5 %原位癌 ,75 0 %为侵袭性高分化鳞癌 ;用药 9、13、16周 ,停药后观察到 3 2周时 ,舌癌发生率分别为5 0 0 %、62 5 %、77 8%。未见远处转移。结论 4NQO饮水诱发大鼠舌癌生长缓慢、潜伏期较长 ,致癌过程和组织病理学特征与人口腔癌相似 ,方法简便 ,靶器官代表性强 ,为口腔癌的发生机制研究和防治药物筛选提供了较理想的动物模型。

4NQO诱发C57BL/6小鼠舌癌及食管鳞状细胞癌模型的建立

目的为探讨化学诱导舌癌和食管癌的作用及可能机制,利用化学致癌剂4硝基喹啉1氧化物(4NQO)建立C57BL/6小鼠的舌癌和食管癌模型。方法 100μg/ml、50μg/ml、10μg/ml的4NQO通过饮水法作用于C57BL/6小鼠,实验期间通过肉眼和组织学观察病变过程。结果随着摄入4NQO浓度的增加,小鼠在同一时期的发病率也随之增加,病变加重,同时随着服用时间的延长,病情逐渐加剧。在实验过程中,可以观察到舌和食管的病变经历了单纯性上皮增生—异常增生—原位癌—浸润性癌这样一个经典的鳞状上皮细胞癌的病变过程。当服用100μg/ml4NQO16周,到第28周时可观察到浸润性癌的病理症状。结论采用4NQO饮水法成功建立了C57BL/6小鼠舌癌和食管癌动物模型,为研究口腔鳞状上皮细胞癌和食管鳞状上皮细胞癌提供了有价值的动物模型。

4NQO诱发两种品系大鼠舌癌过程中p53蛋白的表达特点

目的 了解Dark Agouti (DA)和Wistar/Furth (WF)两种品系的大鼠舌粘膜上皮在 4 硝基喹啉 1 氧化物 (4 nitroquinoline 1 oxide ,4NQO)诱导舌癌过程中p5 3蛋白表达的动态变化。方法 实验动物的饮水中加入 4NQO(0 0 0 1% ) ,观察第 2、4、8、12、16和 2 6周时实验大鼠舌粘膜对p5 3的免疫组化表达。结果 p5 3的阳性反应在DA大鼠舌粘膜中出现早 ,且随着实验的推移 ,舌粘膜内的p5 3阳性细胞簇数目趋于增加 ,特别在实验后期尤为显著 ;WF大鼠各实验组间p5 3表达的水平较低 ,且变化不大。结论 p5 3蛋白的表达水平反应了DA和WF大鼠对

丝胶肽对4NQO诱导肝组织损伤的保护作用

以家蚕丝胶为原料,采用Alcalase碱性蛋白酶水解和超滤技术制备丝胶肽段P4。通过4NQO诱导建立肝组织氧化损伤模型;加入丝胶肽P4,考察其对肝组织羟基自由基清除活性、MDA水平、GSH水平和抗氧化酶系水平的影响,探讨丝胶肽P4对4NQO诱导的肝组织损伤的保护作用。结果表明:丝胶肽段P4能够显著降低MDA水平,显著提高羟基自由基的清除活性,GSH水平,抗氧化酶SOD、CAT水平,说明P4对4NQO诱导的肝组织损伤具有良好的保护作用。这为开发丝胶抗氧化肽功能产品提供了理论依据。

启膈散对食管癌小鼠生存质量及免疫调节的影响

目的观察启膈散对4NQO诱导食管癌小鼠生存质量、体重、脏器重量和指数、食管组织病理形态、细胞因子及淋巴细胞亚群的干预作用。方法 0.1mg·ml^(-1)4NQO水诱导小鼠食管癌模型,16周后撤除干预因素,观察进食及饮水并称重,32周后处死称重脏器并计算脏器指数,观察食管组织,检测外周血中IL-10、TNF、IFN-γ、MCP-1、IL-6、IL-12p70等细胞因子,检测外周血中淋巴细胞亚群(CD3^+/CD19^+,CD4^+/CD8^+)。结果启膈散组小鼠形体、活动度正常,体重接近正常组;脾、肝重量高于模型组(P<0.05),肾、心、肺、肝指数降低(P<0.05);镜下观食管基底细胞层有轻度增生,角质层液化基本消失,其它均正常;与模型组比可上调IL-10细胞因子(P<0.05),降低CD3^+、CD19^+、CD3^+/CD19^+、CD8^+,提高CD4^+/CD8^+(P<0.05)。结论启膈散能改善生存质量、保护脏器、保护组织病理损害;通过提高IL-10细胞因子水平提升免疫功能,提高CD3^+、CD19^+、CD8^+淋巴细胞,纠正CD4^+/CD8^+比例降低而改善免疫功能失衡及免疫抑制状态。