增液汤合六磨汤加减对糖尿病合并便秘患者血清5-HT、胃动素、血管活性肠肽水平的影响

目的探讨增液汤合六磨汤加减对糖尿病合并便秘患者血清胃动素(motilin,MTL)、血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)、5-羟色胺(5-Hydroxytry Ptamine,5-HT)水平的影响。方法选择92例糖尿病合并便秘患者为研究对象,按随机数字表法分为对照组和研究组各46例。分别给予比沙可啶肠溶片治疗及增液汤合六磨汤加减治疗。观察治疗前、后两组中医证候积分、排便频率、排便时间、粪便性状、MTL、VIP、5-HT、生活质量,统计疗效。结果治疗前,两组欲便不畅、排便时间延长、大便干结、便下艰难、食少纳呆、腹胀不适、口干、排便频率、排便时间、粪便性状分型、MTL、VIP、5-HT、心理、生理、满意度、担忧评分比较(P>0.05);治疗后,两组欲便不畅、排便时间延长、大便干结、便下艰难、食少纳呆、腹胀不适、口干、排便频率、排便时间、粪便性状分型、MTL、VIP、5-HT、心理、生理、满意度、担忧评分均较治疗前改善,与对照组相比,研究组疗效、欲便不畅、排便时间延长、大便干结、便下艰难、食少纳呆、腹胀不适、口干、排便频率、排便时间、粪便性状分型、MTL、VIP、5-HT、心理、生理、满意度、担忧评分改善更明显(P<0.05)。结论增液汤合六磨汤加减能够有效调节糖尿病合并便秘患者血清5-HT、胃动素、血管活性肠肽水平,这可能是其治疗糖尿病合并便秘的机制。

基于5-HT及其受体的中医药干预消化系统疾病研究进展

5羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)是一种重要的单胺类神经递质,具有广泛的生物学效应。血清和胃肠道中的5-HT含量可占人体5-HT总量的95%以上,血液循环中的5-HT也主要来源于肠道。5-HT在消化系统疾病发生发展中的作用历来受到关注。此文从5-HT特征、5-HT受体以及基于5-HT及其受体探讨中医药对消化系统疾病的干预作用进行了概述,以期进一步为消化系统疾病的防治、临床与基础研究提供新思路。

四神丸对腹泻型肠易激综合征大鼠5-HT信号通路表达的影响

目的通过研究四神丸对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)模型大鼠5-羟色胺(5-HT)信号通路表达的影响,进一步揭示其治疗IBS-D的内脏敏感机制。方法SD大鼠32只,随机分为正常组、模型组、四神丸组和得舒特组,采用番泻叶灌胃联合避水应激法制备IBS-D大鼠模型,给药14d后进行Bristol粪便性状量表评分,依据腹壁撤退反射评定内脏疼痛阈值,ELISA法检测血清5-HT、SERT含量,免疫组化法检测结肠组织5-HT的阳性表达,Westernblotting法检测结肠组织5-HT4R的蛋白表达。结果与正常组比较,模型组大鼠Bristol粪便性状量表评分升高,内脏疼痛阈值降低,血清中5-HT含量增加、SERT含量减少,结肠组织中5-HT的阳性表达升高、5-HT4R的蛋白表达降低(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,四神丸组大鼠Bristol粪便性状量表评分降低、内脏疼痛阈值升高,血清5-HT含量减少,SERT含量增加,结肠组织5-HT的阳性表达降低、5-HT4R的蛋白表达升高(P<0.05或P<0.01),且对5-HT、5-HT4R表达的影响四神丸组优于得舒特组(P<0.05)。结论四神丸治疗IBS-D的内脏敏感机制可能与调节5-HT信号通路的表达有关。

清化饮对脾胃湿热证抑郁大鼠血清5-HT与海马组织的影响

目的探究清化饮对脾胃湿热证抑郁大鼠血清5-羟色胺(5-HT)与海马组织的影响。方法取30只SPF级SD雄性大鼠,随机选择其中5只作为空白组,其余25只采用高脂高糖饮食和慢性不可预知温和应激方法建立脾胃湿热证抑郁模型,将造模成功的大鼠随机分为模型组6只、清化饮组6只、舍曲林组6只、清化饮+舍曲林组7只。清化饮组给予清化饮27.5 g/kg灌胃,舍曲林组给予舍曲林片5.21 mg/kg灌胃,清化饮+舍曲林组给予清化饮27.5 g/kg和舍曲林片5.21 mg/kg灌胃,模型组给予等体积的生理盐水灌胃,均1次/d,连续灌胃28 d。末次灌胃结束后,应用强迫游泳实验评价大鼠的抑郁状态,记录大鼠灌胃前后的体重,ELISA法检测血清5-HT水平,HE染色观察海马组织病理形态。结果模型组大鼠的强迫游泳静止时间明显长于空白组(P<0.05),清化饮组、舍曲林组、清化饮+舍曲林组均明显短于模型组(P均<0.05);各组间大鼠体重比较差异无统计学意义(P>0.05),但清化饮组大鼠体重变化量明显低于舍曲林组(P<0.05);模型组大鼠血清5-HT水平与空白组比较差异无统计学意义(P>0.05),舍曲林组和清化饮+舍曲林组均明显高于模型组(P均<0.05),清化饮+舍曲林组明显高于清化饮组(P<0.05)。模型组大鼠海马体积减小,CA2~CA3区神经元细胞减少,沟回带厚度变薄;各药物组大鼠海马组织CA1~CA3区神经元细胞紧密排列,细胞形态未见异常,沟回带厚度较模型组厚;其中清化饮组、清化饮+舍曲林组海马组织CA1~CA3区神经元细胞紧密均匀排列优于舍曲林组。结论清化饮可改善脾胃湿热证大鼠抑郁样行为,其机制可能与提高血清5-HT水平,恢复海马组织病理形态有关。

5-HT受体在瘙痒中的作用研究进展

由组胺介导的经典瘙痒信号通路以及非组胺介导的其他瘙痒信号通路对于瘙痒的产生和感知具有重要作用。5-羟色胺(5-hydroxytrptamine,5-HT)又称血清素,是一种神经递质和血管活性胺类物质,可以引起明显的瘙痒行为。大量研究揭示了5-HT及其多种受体在急性和慢性瘙痒发生中的重要性,然而介导5-HT能瘙痒的信号机制尚不完全清楚。本文对5-HT及其受体家族在瘙痒中的作用及其相关信号机制进行简要梳理总结,为瘙痒相关疾病的临床诊疗或药物开发提供一定的参考。

RVM致炎细胞因子上调导致5-HT释放参与调控慢性术后疼痛

【目的】探讨延髓头端腹内侧部(RVM)内致炎细胞因子肿瘤坏死因子α(TNFα)和白介素-1β(IL-1β)释放增多导致5-羟色胺(5-HT)向脊髓释放增多在慢性术后疼痛(CPSP)模型中的作用。【方法】按照随机方式将SD大鼠进行如下分组:对照组、皮肤/肌肉切开和牵拉(SMIR)(1d,7d)组、SMIR+RVM内注射TNFα或IL-1β中和性抗体组、SMIR+RVM内注射TNFα或IL-1β组、SMIR+RVM内注射溶剂组,用up-down方法测量大鼠50%机械刺激撤足阈值,免疫组化检测RVM内TNFα或IL-1β表达情况,酶联免疫吸附测定法(ELISA)方法观察RVM及脊髓背角内5-HT含量的变化。【结果】SMIR可引起大鼠机械痛敏,表现为50%机械刺激撤足阈值下降,持续至少3周。SMIR后,RVM内神经元和星形胶质细胞中的TNFα和IL-1β表达上调。TNFα或IL-1β中和抗体(每天一次行SMIR术前30 min给予,共4次))微量注射入RVM可阻断SMIR引起的50%机械刺激撤足阈值下降,并可降低RVM及脊髓背角5-HT的含量。正常动物RVM内注射TNFα和IL-1β也可导致50%机械刺激撤足阈值下降,且引起RVM及脊髓内5-HT含量增加。【结论】RVM中致炎细胞因子增多可能通过引起5-HT释放增多参与调控SMIR后慢性术后疼痛的发生发展。

养荣润肠舒合剂对慢性传输型便秘SD大鼠结肠5-HT、VIP的影响

目的探讨慢性传输型便秘大鼠结肠黏膜5-羟色(5-hydroxytryptophan,5-HT)、血管活性肠多肽(vasoactive intestinal polypeptide,VIP)的含量,以明确中药制剂养荣润肠舒合剂对大鼠结肠5-HT、VIP表达的调节作用。方法将60只健康的SD大鼠随机分为空白组10只,造模组50只(模型组10只、莫沙必利组10只、养荣润肠舒合剂高、中、低剂量组各10只)。应用复方地芬诺酯灌胃(2 mL/200 g体质量)以复制慢性传输型便秘大鼠模型(每天1次,连续10 d)。期间记录大鼠首次排便时间,并收集粪便、测量粪便剂量、含水量以判断造模是否成功。复制模型成功后进行药物治疗,每天1次,连续10 d。然后采用间接酶联免疫吸附试验(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)观测大鼠结肠5-HT、VIP的光密度(optical density,OD)值。结果①与空白组比较,模型组SD大鼠的首次排便时间延后,且新鲜粪便的剂量、含水量减少,差异有显著统计学意义(P<0.01)。②与模型组比较,莫沙必利组和养荣润肠合剂低、中、高剂量组治疗后大鼠的首次排便时间均提前,且粪便的含水率、重量除使用养荣润肠低组外均有所增长(P<0.01)。③与莫沙必利组比较,养荣润肠舒合剂中组剂量组大鼠的一般状况最好,首次排便时间最接近莫沙必利组且较短于莫沙必利组,差异无统计学意义(P>0.05),新鲜粪便剂量最接近莫沙必利组且较重于莫沙必利组,差异无统计学意义(P>0.05),含水量明显优于莫沙必利组,差异有统计学意义(P<0.05);养荣润肠舒合剂高剂量组大鼠排便状况与莫沙必利组相差不大,差异无统计学意义(P>0.05);莫沙必利组大鼠排便状况明显优于养荣润肠舒合剂低剂量组,差异有显著统计学意义(P<0.01)。④养荣润肠舒合剂中剂量组的大鼠一般状况更佳,而低剂量组的大鼠状况较差,新鲜粪便的剂量、含水量较小。⑤与空白组比较,模型组大鼠近端结肠组织5-HT、VIP的含量显著降低,OD值缩小(P<0.01)。⑥治疗后与模型组比较,莫沙必利组及养荣润肠舒合剂低、中、高剂量SD大鼠结肠5-HT、VIP含量显著升高,OD值增加,差异有明显统计学意义(P<0.01)。⑦治疗后与莫沙必利组比较,养荣润肠舒合剂中剂量大鼠结肠的5-HT、VIP含量及OD值增加,最接近莫沙必利组且较高于莫沙必利组,差异无统计学意义(P>0.05);养荣润肠舒合剂高剂量组大鼠状况及大鼠结肠5-HT、VIP含量与莫沙必利组相差不大,差异无统计学意义(P>0.05)。⑧与养荣润肠舒合剂高剂量组比较,养荣润肠舒合剂中剂量组大鼠结肠5-HT、VIP含量更高,OD值差异无统计学意义(P>0.05),而养荣润肠舒合剂低剂量组大鼠结肠的5-HT、VIP含量相对较低,与养荣润肠舒合剂中剂量组相比OD值也较低,具有统计学意义(P<0.01)。结论5-HT作为脑—肠轴的关键神经递质,VIP作为存在于中枢神经和肠神经系统中的神经递质,在慢性传输型便秘的发病中起着重要的作用;中药方剂养荣润肠舒合剂能有效提高慢性传输型便秘大鼠结肠5-HT、VIP含量,增强5-HT、VIP的表达有关;因此,作者认为养荣润肠舒合剂可能是通过这一机制改善慢性传输型便秘的临床症状,从而达到“以补治秘”的目的。

芳香化浊调气法对功能性腹泻大鼠AQP3、5-HT水平及血管活性肠肽表达的影响

目的 探究芳香化浊调气法对功能性腹泻大鼠水通道蛋白(AQP)3、5-羟色胺(HT)及血管活性肠肽的影响。方法 将大鼠随机分为正常组、模型组、药物1组、药物2组、药物3组和对照组,每组10只。检测各组一般状态;检测粪便性状指标(BSS评分、稀便率、腹泻指数);检测血清及组织中血管活性肠肽(VIP)含量;检测肠道组织中5-HT含量;免疫荧光检测结肠组织中AQP3表达。结果 造模后大鼠出现活动减少,精神萎靡,呈缩肩拱背样,体质量下降,毛色无泽,粪便湿软或不成形;药物干预后各组一般状态得到明显改善。与正常组相比,模型组BSS评分、稀便率和腹泻指数均显著增加(P<0.05);与模型组相比,药物1组、药物2组和药物3组均不同程度降低,且药物3组降低最为显著(P<0.05)。模型组血清及胃窦、十二指肠、结肠、下丘脑组织中VIP含量较正常组显著降低(P<0.05);和模型组相比,药物1组、药物2组和药物3组均显著升高,且药物3组变化最显著(P<0.05)。与正常组相比,模型组回肠和结肠组织中5-HT含量均显著升高,结肠组织中AQP3水平明显降低(P<0.05);与模型组相比,药物1组、药物2组和药物3组回肠和结肠组织中5-HT含量均显著降低,结肠组织中AQP3水平明显升高,且呈浓度依赖(P<0.05)。结论 芳香化浊调气法可增加功能性腹泻大鼠AQP3水平和血管活性肠肽水平,减少5-HT水平,对肠道水液吸收功能和运动功能进行改善,进而改善腹泻。

血清GABA、BDNF、5-HT、DA及NE在胃食管反流病中的表达及临床意义

目的探讨血清γ-氨基丁酸(GABA)、脑源性营养因子(BDNF)、5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)及多巴胺(DA)在胃食管反流病(GERD)中的表达及临床意义。方法选取100例GERD患者作为GERD组、40例同期健康体检者为对照组,GERD组患者给予药物治疗8周,根据治疗效果分为效果良好组和效果不良组;对照组于体检时、GERD组于治疗前、治疗后(8周时)取外周静脉血,检测血清GABA、BDNF、5-HT、DA、NE、胃动素(MTL)、胃泌素(GAS)、胆囊收缩素(CCK)水平;采用匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)、汉密尔顿抑郁量表(HAMD)、焦虑自评量表(SAS)、日常生活能力量表(ADL)评分评估GERD组治疗前后、对照组体检时的睡眠质量、抑郁程度、焦虑状态、日常生活能力;比较GERD患者治疗前后、效果良好及效果不良组食管括约压力、立位返流时间比、卧位反流时间比、总反流时间;采用Pearson分析GERD患者治疗前GABA、BDNF、5-HT、NE及DA水平与患者食管括约肌压力、立位返流时间比、卧位返流时间比、总返流时间比、MTL、GAS、CCK的相关性。结果GERD组治疗后血清GABA、BDNF、5-HT、NE、DA、MTL、GAS水平高于治疗前、但低于对照组,血清CCK水平及各量表评分均低于治疗前、但高于对照组(P<0.05);GERD组患者治疗后食管括约压力高于治疗前,立位返流时间比、卧位反流时间比、总反流时间均低于治疗前(P<0.05);30例疗效不良组GERD患者血清GABA、BDNF、5-HT、NE、DA、MTL、GAS水平及食管括约肌压力均低于70例疗效良好组,血清CCK水平、各量表评分、立位返流时间比、卧位反流时间比、总反流时间比均高于疗效良好组(P<0.05);GERD患者治疗前血清BDNF、5-HT、DA水平与MTL、GAS、食管括约肌压力呈正相关,与立位返流时间比、卧位反流时间比、总反流时间比、CCK呈负相关,GABA、NE与MTL、GAS、食管括约肌压力呈正相关,NE与立位返流时间比、CCK呈负相关性,GABA与立位返流时间比、总反流时间比、CCK呈负相关,差异有统计学意义(P<0.05)。结论GABA、BDNF、5-HT、NE及DA水平与胃内激素MTL、GAS、CCK的合成分泌及胃动力相关指标关系密切,这些神经递质可能参与GERD的发生和发展过程。

射干止咳胶囊镇咳作用及对RARs受体、HA、5-HT的影响

目的探讨射干止咳胶囊镇咳作用部位及潜在的作用机制。方法采用浓氨水诱发小鼠咳嗽模型,观察射干止咳胶囊镇咳作用的量效关系;采用电刺激豚鼠喉上神经引咳模型,观察射干止咳胶囊中枢性镇咳作用;采用机械刺激致辣椒素脱敏豚鼠咳嗽模型,观察射干止咳胶囊外周性镇咳作用;采用烟熏建立豚鼠慢性支气管炎模型,观察射干止咳胶囊对血管活性胺类物质组胺(HA)和5-羟色胺(5-HT)的影响。结果射干止咳胶囊在43.00、86.00、172.00 mg提取物·kg^(-1)剂量下具有降低小鼠咳嗽次数的作用(P<0.05或P<0.01)。射干止咳胶囊低、中、高剂量组在给药后30 min、60 min时,均无明显抑制电刺激豚鼠喉上神经引咳作用。射干止咳胶囊低剂量组在给药60 min,中剂量组在给药30 min,高剂量组在给药30 min、60 min时可显著抑制机械刺激所致的辣椒素脱敏豚鼠咳嗽(P<0.05)。与模型对照组比较,射干止咳胶囊低、中、高剂量组豚鼠血清中HA含量明显减少(P<0.05或P<0.01);射干止咳胶囊高剂量组豚鼠血清5-HT含量明显减少(P<0.05)。结论射干止咳胶囊的镇咳作用部位不在中枢,其外周性镇咳作用与抑制RARs受体有关,同时HA、5-HT等血管活性胺类物质也参与其中。

自拟安神方对心肾不交证失眠大鼠皮质区和海马区5-HT和DA信号通路影响

目的探索自拟安神方(简称安神方)对大鼠不同脑区5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)和多巴胺(dopamine,DA)信号通路的影响,揭示安神方抗大鼠心肾不交证失眠的机制。方法将SD雄性大鼠随机分为正常组,模型组,阳性对照组,安神方高、中、低剂量组,每组10只。除正常组外,其他各组采用多因素方法制备改良的心肾不交证失眠大鼠模型,灌胃治疗2周。HE染色观察大鼠脑组织形态结构。高效液相色谱-电化学法(HPLC-ECD)检测大鼠皮质区和海马区DA和5-HT的含量。免疫蛋白印迹法检测5-HT信号通路上5-HT_(1A)受体、5-HT_(2A)受体、磷酸腺苷反应元件结合蛋白(cAMP-response element binding protein,CREB)、蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)和DA信号通路上D_(1)R_(1)在皮质区和海马区的蛋白表达。结果HE染色显示模型组皮质区神经元有少量的凋亡,海马结构区变化不明显;安神方组皮质区神经元凋亡有所减轻。HPLC-ECD结果显示,与正常组比较,模型组皮质区和海马区DA含量均升高(P<0.05),5-HT含量均显著下降(P<0.05);与模型组比较,安神方组皮质区和海马区DA含量显著降低(P<0.05),同时海马区5-HT含量有所提高(P<0.05)。免疫印迹结果显示,与正常组比较,模型组皮质区5-HT_(1A)和CREB蛋白表达降低(P<0.05),海马区D_(1)R_(1)蛋白表达升高(P<0.05);与模型组比较,安神方组皮质区5-HT_(1A)和信号通路上关键蛋白CREB的蛋白表达上调(P<0.05),并且海马区D_(1)R_(1)的蛋白表达下调(P<0.05),其信号通路上CREB蛋白表达差异虽无统计学意义,但各给药组仍有上调趋势。结论安神方抗心肾不交证失眠的机制可能与抑制皮质区神经元凋亡,并促进皮质区和海马区5-HT通路功能、抑制DA通路功能有关。

棉铃虫5-HT1和5-HT2基因的克隆及表达模式分析

5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)是昆虫体内一种重要的生物胺,其通过结合特异性的G蛋白偶联受体在昆虫体内发挥不同的神经调控作用。本研究基于转录组测序数据结合RT-PCR技术鉴定克隆了棉铃虫5-HT受体基因5-HT1和5-HT2,采用生物信息学方法分析其序列特征,利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术检测了其在幼虫和成虫不同组织内的表达特征。结果显示,棉铃虫体内分别表达5-HT的2类受体基因:5-HT1A、5-HT1B、5-HT2A和5-HT2B。系统进化树分析表明,棉铃虫5-HT受体基因分为3个不同分支,而5-HT1和5-HT2可明显分别分成2个不同分支,各分支均与家蚕和烟草天蛾5-HT相应受体基因具有较高的同源性。RT-qPCR结果显示,在幼虫期,4种5-HT受体基因都在头部显著高表达,成虫期除在脑部高表达外,在触角或腹部也有高表达。其中5-HT1A和5-HT1B在雌成虫触角表达量显著高于雄成虫触角,5-HT1A和5-HT2B在雌成虫腹部表达量显著高于雄成虫腹部,而5-HT1B在雄成虫腹部表达量显著高于雌成虫腹部。以上结果表明5-HT1和5-HT2可能参与棉铃虫脑部神经调控,触角嗅觉感受及生殖发育等活动。该结果为进一步明确棉铃虫5-HT受体的功能奠定了基础。

白芍总苷对腹泻型肠易激综合征大鼠5-HT信号通路的影响

目的:探讨白芍总苷对腹泻型肠易激综合征(diarrhea predominant irritable-bowel syndrome,IBS-D)大鼠5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)信号通路的影响。方法:选无特定病原体健康成年Wistar大鼠68只,雌雄各半,随机分为正常组13只和造模组55只。造模采用束缚联合慢性不可预见性刺激建立IBS-D大鼠模型,正常组大鼠正常饲养。将造模成功的52只大鼠随机分为模型组、匹维溴铵组及白芍总苷低、高剂量组,每组13只。模型组、正常组分别给予蒸馏水灌胃;匹维溴铵组给予匹维溴铵混悬液灌胃;白芍总苷低、高剂量组分别给予对应剂量白芍总苷溶液灌胃。各组大鼠均给药14天。检测比较各组大鼠粪便含水量,不同压力下腹壁撤退反射(abdominal withdrawal reflex,AWR)评分,结肠组织5-HT阳性细胞数及色氨酸羟化酶1(Tryptophan hydroxylase1,TPH-1)、5-羟色胺受体3(5-HT3 receptors,5-HT3R)、5-羟色胺转运蛋白(serotonin transporter,SERT)表达水平。结果:与模型组比较,各组大鼠粪便含水量较低,40 mm Hg(1 mm Hg≈0.133 kpa)、60 mm Hg压力下AWR评分较低,结肠组织5-HT阳性细胞数及TPH-1、5-HT3R表达水平较低,且白芍总苷低剂量组>白芍总苷高剂量组和匹维溴铵组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与模型组比较,各组大鼠结肠组织SERT表达水平较高,且白芍总苷低剂量组<白芍总苷高剂量组和匹维溴铵组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:白芍总苷能剂量依赖性地改善IBS-D大鼠腹泻症状,降低肠道敏感性,抑制结肠组织5-HT表达,其作用可能与调节5-HT信号通路中的TPH-1、5-HT3R、SERT表达有关。

P2X3受体介导电针调节肠易激综合征内脏痛大鼠结肠5-HT、SERT的作用研究

目的探讨嘌呤能配体门控离子通路3(purinergicligand-gatedionchannel 3,P2X3)受体介导电针对肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)内脏痛大鼠结肠5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、5-HT再摄取转运蛋白(serotonnin transporter,SERT)的调节作用。方法选取SPF级SD雄性大鼠,随机分为正常组、模型组、电针组、P2X3受体激动剂组、P2X3受体激动剂+电针组,通过三硝基苯磺酸(trinitrobrnzen sulfonic acid,TNBS)灌肠液灌肠制备IBS内脏痛大鼠模型。模型制备3周后运用电针、髓鞘内注射、电针和髓鞘内注射相结合等方法进行干预。采用结肠组织病理染色、腹部回撤反射(abdominal withdrawal reflex,AWR)评分观察IBS内脏痛模型是否制作成功,运用AWR评分、酶联免疫吸附法、蛋白质印迹法、实时荧光定量PCR等方法检测IBS大鼠内脏痛敏的变化及IBS大鼠结肠5-HT、SERT的表达变化。结果(1)电针能降低IBS大鼠在40、80 mmHg压力结直肠扩张(colorectal distention,CRD)刺激下的AWR评分(P<0.05,P<0.01);(2)电针能够下调IBS大鼠结肠5-HT的表达(P<0.01),上调结肠SERT蛋白和mRNA的表达(P<0.01);(3)P2X3受体被激活后,电针能够下调IBS大鼠结肠5-HT的表达(P<0.05),上调结肠SERT蛋白和mRNA的表达(P>0.05)。结论P2X3受体介导电针调节IBS内脏痛大鼠结肠中5-HT、SERT蛋白及mRNA的异常表达,可能是电针缓解IBS大鼠内脏痛外周敏化的机制之一。

附子-肉桂对慢传输型便秘大鼠5-HT信号通路及c-Kit表达的影响

目的研究不同比例附子-肉桂配伍通过调控STC大鼠5-HT信号通路及c-Kit表达改善肠道动力的作用机制。方法运用盐酸洛哌丁胺灌胃建立STC大鼠模型,随机分为空白组、模型对照组、附子-肉桂(2∶1)组,附子-肉桂(1∶2)组、附子-肉桂(1∶1)组、莫沙必利组。各组按照对应药物或蒸馏水灌胃14天。观察大鼠一般情况,计算大鼠粪便粒数、肠道推进率,HE观察大鼠结肠病理改变,ELISA法测定大鼠血清、结肠5-HT含量,免疫荧光染色检测结肠CgA阳性表达,免疫组化法检测结肠5-HT3R/5-HT4R、c-Kit表达情况,RT-PCR法检测5-HT3R/5-HT4R mRNA表达水平。结果各组大鼠结肠无明显病理改变,与空白组相比,模型对照组大鼠粪便含水率、肠道推进率显著降低(P<0.01),5-HT含量明显下调,CgA、5-HT3R/5-HT4R蛋白与基因表达水平均显著下降(P<0.01),c-Kit表达减少。与模型组相比,附子-肉桂(2∶1)组、附子-肉桂(1∶1)组、莫沙必利组粪便粒数、肠道推进率、5-HT含量、c-Kit、CgA阳性表达显著增加(P<0.01),5-HT3R/5-HT4R蛋白与基因表达水平显著上调(P<0.01)。结论附子-肉桂2∶1及1∶1比例配伍能明显增加粪便粒数,提高肠推进率,其作用可能与通过调节结肠c-Kit、CgA表达,增加Cajal间质细胞数及5-HT含量,从而上调5-HT3R/5-HT4R表达有关。

“大推天河水”不同操作时长对发热幼兔的退热效果及下丘脑5-HT、NE的影响

目的:观察“大推天河水”不同操作时长对内毒素致热幼兔的退热效果及下丘脑中5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)的影响,探究推拿操作时长与退热疗效的效应关系。方法:将40只新西兰幼兔随机分为正常组、模型组、大推天河水5 min组、大推天河水10 min组和布洛芬组,每组8只。模型组、大推天河水5 min组、大推天河水10 min组和布洛芬组通过耳缘静脉注射大肠杆菌内毒素(LPS,200 ng/mL),1 mL/kg,建立发热模型。大推天河水5 min组在造模后1.5 h于幼兔左前肢掌面正中行“大推天河水”手法,时长为5 min,频率为50~100次/min;大推天河水10 min组分别在造模后1.5、2.5 h行“大推天河水”手法,每次时长为5 min,累计时长为10 min,频率为50~100次/min;布洛芬组在造模后1.5 h予布洛芬混悬液(0.01 g/mL)灌胃,1 mL/kg。观测幼兔造模后体温动态变化,比较各组幼兔体温降至正常范围的时间,并应用酶联免疫吸附法(ELISA)测定下丘脑中5-HT及NE的含量。结果:大推天河水5 min组幼兔造模后2.0~3.0 h的体温上升高度明显低于模型组(P<0.01);大推天河水10 min组幼兔造模后1.5~3.5 h的体温上升高度低于模型组(P<0.05);布洛芬组幼兔造模后2.0~3.5 h、5.0~5.5 h的体温上升高度低于模型组(P<0.01);大推天河水10 min组幼兔在造模后2.5~4.0 h的体温上升高度明显低于大推天河水5 min组(P<0.01);布洛芬组幼兔在造模后3.0~4.0 h、5.5~6.0 h的体温上升高度低于大推天河水5 min组(P<0.05);布洛芬组幼兔造模后5.5~6.0 h的体温上升高度低于大推天河水10 min组(P<0.05)。大推天河水10 min组及布洛芬组幼兔退热时间明显短于模型组及大推天河水5 min组(P<0.01)。模型组幼兔下丘脑中5-HT含量低于正常组(P<0.01),NE含量高于正常组(P<0.01);大推天河水10 min组及布洛芬组幼兔下丘脑中5-HT含量高于模型组(P<0.01),NE含量低于模型组(P<0.01);大推天河水5 min组幼兔下丘脑中5-HT、NE含量与模型组比较,差异无统计学意义(P>0.05);大推天河水10 min组及布洛芬组幼兔下丘脑中5-HT含量高于大推天河水5 min组,NE含量均低于大推天河水5 min组(P<0.01);布洛芬组幼兔下丘脑中NE含量低于大推天河水10 min组(P<0.01)。结论:“大推天河水”手法对发热幼兔具有显著退热作用,且叠加操作时间与疗效相关,其退热效应可能与调节下丘脑中5-HT、NE的平衡相关。

丁苯酞联合舍曲林对帕金森病合并抑郁症患者认知功能及血清NT-3、BDNF、5-HT水平的影响

目的分析丁苯酞联合舍曲林对帕金森病合并抑郁症患者认知功能及血清神经营养因子-3(NT-3)、脑源性神经营养因子(BDNF)、5-羟色胺(5-HT)水平的影响。方法158例帕金森病合并抑郁症患者均分为联合组(79例,丁苯酞联合舍曲林口服)和舍曲林组(79例,盐酸舍曲林口服),均治疗12周;于治疗前及治疗12周时,检测2组患者血清NT-3、BDNF及5-HT水平,采用帕金森病统一评分量表(UPDRS)、39项帕金森病调查表(PDQ-39)、汉密尔顿抑郁量表(HAMD)、汉密尔顿焦虑量表(HAMA)评价治疗效果;于治疗前、治疗第4及12周时,采用简易智能状态检查量表(MMSE)评估两组患者的认知功能。结果治疗12周时,联合组患者总有效率(94.94%)高于舍曲林组(81.01%,P<0.05),UPDRS、PDQ-39、HAMD及HAMA评分低于治疗前,且联合组低于舍曲林组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗前、治疗4、12周时,2组患者MMSE评分逐渐升高,且治疗4和12周时联合组高于舍曲林组,差异有统计学意义(P<0.05);2组患者治疗12周时的血清NT-3、BDNF、5-HT水平高于治疗前,联合组高于舍曲林组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论丁苯酞联合舍曲林可改善帕金森病合并抑郁症患者帕金森、抑郁、焦虑症状及认知功能,其机制可能与联合治疗提高患者血清NT-3、BDNF、5-HT水平有关。

增液八珍汤对慢传输型便秘大鼠模型结肠肌5-HT、AchE、SP及VIP的影响

目的:观察增液八珍汤对慢传输型便秘大鼠结肠肌间神经丛中5-HT、AchE、VIP、SP的影响。方法:将72只SPF级大鼠随机分为空白对照组、模型组、麻仁软胶囊组、增液八珍汤低剂量组、增液八珍汤中剂量组和增液八珍汤高剂量组各12只。麻仁软胶囊组给予麻仁软胶囊内容物6.2 mL/(kg·d)灌胃,增液八珍汤低、中、高剂量组分别给予17、34、68 g/(kg·d)增液八珍汤灌胃,共给药14 d,空白对照组和模型组给等量的生理盐水。大鼠结肠组织给予HE染色及免疫组化染色,并对染色组化结果进行半定量积分分析。结果:与模型组比较,增液八珍汤各剂量组及麻仁软胶囊组结肠肌间神经丛神经元阳性表达和5-HT、AchE、VIP、SP定量分析显著增加(P<0.05);与麻仁软胶囊组比较,增液八珍汤各剂量组及麻仁软胶囊组结肠肌间神经丛神经元阳性表达和5-HT、AchE、VIP、SP定量分析显著增加(P<0.05),增液八珍汤中、高剂量组对结肠肌间神经丛5-HT、AchE、VIP、SP神经元增加的量均优于麻仁软胶囊组(P<0.05)。结论:增液八珍汤可通过增加便秘大鼠结肠中5-HT、AchE、VIP、SP表达神经细胞含量,刺激结肠收缩,增加结肠动力,加快结肠传导速度。

血管球瘤的临床组织病理特点及其5-HT、TNF-α和TRPM8的表达

目的:分析45例血管球瘤患者的临床组织病理特征及5-羟色胺(5-HT)、肿瘤坏死因子(TNF)-α和瞬时受体电位离子通道(TRPM)8在其中的表达。方法:分析血管球瘤患者的临床及组织病理特点。检测5-HT、TNF-α及TRPM8在血管球瘤中的表达,分析其在血管球瘤中的作用。结果:血管球瘤女性患者居多,发病年龄多在21~40岁,病程中位数5年,多发生于甲下。瘤体长径0.1~3.3cm,大小与部位无关。指(趾)部的瘤体更易表现出疼痛。组织病理可见实体型和球血管型,分型与部位无关。5-HT及TNF-α在血管球瘤中均高表达,TRPM8在部分血管球瘤中呈弱阳性表达。5-HT和TNF-α的表达强度高于TRPM8(P<0.0005),5-HT和TNF-α的表达强度差异无统计学意义(P=0.340)。结论:血管球瘤具有独特的临床及组织病理特点。5-HT及TNF-α可能在血管球瘤的生发过程中具有一定作用。

荷叶中的生物碱及其对5-HT 2A和5-HT 2C受体的激动作用研究

对荷叶中的生物碱进行了分离、鉴定和调脂减肥活性研究。本研究结合传统酸提碱沉法与现代高效液相色谱制备技术,从荷叶中分离、纯化到11个生物碱,分别被鉴定为N-氧基原荷叶碱(1)、原荷叶碱(2)、莲碱(3)、降氧化北美黄连次碱(4)、荜茇宁(5)、巴婆碱(6)、O-去甲基荷叶碱(7)、N-去甲基荷叶碱(8)、荷叶碱(9)、衡州乌药碱(10)和亚美罂粟碱(11),其中,化合物1、4和5为首次从荷叶中分得。测试所得化合物对5-HT_(2A)和5-HT_(2C)受体的激动作用,结果表明11个生物碱对5-HT_(2A)受体均具有一定的激动作用,进一步揭示了荷叶调脂减肥的可能药效基础和作用机理。