不同5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶基因型人群叶酸补服效果评价

目的对不同5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因型人群叶酸补服的效果进行评价。方法根据MTHFRC677T基因型将113名健康女性分为CC、CT、TT3组,每组内再随机分为干预组和对照组,干预组给予口服叶酸片400μg/d,服药2个月,对照组不补服叶酸。分别于基线和干预2个月后检测血浆叶酸、红细胞叶酸、血浆同型半胱氨酸(Hcy)水平。结果基线时,TT基因型血浆叶酸低于CC基因型和CT基因型,而TT基因型血浆Hcy高于CC基因型和CT基因型(P<0.05或P<0.01)。补服叶酸2个月后,干预组血浆叶酸水平和红细胞叶酸水平均不同程度的升高,血浆Hcy水平下降。其中,TT基因型的血浆叶酸上升最明显(相较于CC和CT,均P<0.05);其血浆Hcy下降也最显著(相较于CT,P<0.05)。Logistic回归分析显示,MTHFR基因型为TT是血浆Hcy偏高的危险因素,其风险是CC型的8.078倍。结论对于3种MTHFR基因型叶酸干预均可升高血浆叶酸和红细胞叶酸,降低血浆Hcy水平。TT基因型发生叶酸代谢障碍、血浆Hcy偏高的风险最高。尚不能证实小剂量补服叶酸可以降低血浆Hcy偏高的风险。

同型半胱氨酸对人血管平滑肌细胞5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶基因启动子甲基化修饰及mRNA表达的影响

目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)对人血管平滑肌细胞(HVSMCs)5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因启动子甲基化修饰及其mRNA表达的影响。方法正常人脐动脉血管平滑肌细胞体外培养,在培养基中加入临床高Hcy血症相关浓度及极高浓度的Hcy(0、30、100、200、500和1000μmol/L),并孵育72h,以MS-PCR分析MTHFR启动子区域甲基化状态,采用RT-PCR测定MTHFR mRNA的表达水平。结果不同浓度Hcy处理人血管平滑肌细胞后,其MTHFR基因启动子区域出现去甲基化,甲基化水平明显降低。RT-PCR结果显示MTHFR mRNA表达增加。结论Hcy可促进人血管平滑肌细胞MTHFR启动子区域去甲基化,并使MTHFR mRNA表达增加。

5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与结直肠癌易感性关系的Meta分析

目的探讨5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶M(THFR)基因多态性与结直肠癌易感性的关系。方法以结直肠癌组和健康对照组基因型分布的OR值为效应指标,全面检索相关文献,纳入符合入选标准的文献,应用REVMAN4.2软件对各研究结果进行异质性检验和效应值合并,并进行发表偏倚评估和敏感性分析。结果纳入677位点相关文献18篇,1298位点9篇,两位点的各研究结果均无统计学意义,677位点TT/C(T+CC)合并OR值为0.80(95%CI0.74～0.87),1298位点CC/A(C+AA)合并OR值为0.84(95%CI0.72～0.97),两位点均不存在显著发表偏倚,敏感性分析提示,677位点结果较稳定,1298位点结果不稳定。结论MTHFR基因多态性的677TT为结直肠癌的保护因素,1298CC亦可能与结直肠癌危险性降低有关联。

同型半胱氨酸对人血管平滑肌细胞增殖和5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶mRNA表达的影响

目的:探讨同型半胱氨酸(Hcy)对人血管平滑肌细胞(HVSMCs)增殖和5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)mRNA表达的影响,以了解其在动脉粥样硬化发病中的可能作用。方法:正常人脐动脉血管平滑肌细胞体外培养,在培养基中加入临床高Hcy血症相关浓度及极高浓度的Hcy(0、30、100、200、500、1 000μmol/L),并孵育不同时间,用MTT比色试验检测细胞的增殖情况,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定MTHFR mRNA的表达水平。结果:不同浓度和不同时间Hcy干预后,HVSMCs增殖呈浓度和时间依赖性,RT-PCR结果显示Hcy可刺激人血管平滑肌细胞MTHFR mRNA表达增加。结论:Hcy可促进HVSMCs增殖,同时又上调MTHFR mRNA表达,由于MTHFR是促使Hcy转化的关键酶,因此,Hcy使MTHFR mRNA表达增加的效应可能为Hcy诱导动脉粥样硬化发生过程中的一种代偿反应。

5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与砷甲基化代谢的关系

目的:探讨5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(5,10-methylenetetrahydrofolate reductase,MTHFR)基因多态性及其与叶酸联合作用对砷甲基化代谢的影响。方法:在砷中毒流行区选择饮水史清楚、饮水砷含量高于0.05mg/L的43名居民,采集空腹静脉血并收集晨尿,以聚合酶链反应-限制性长度多态性方法分析MTHFR基因C677T位点多态性,采用高效液相色谱-氢化物发生-原子荧光法检测尿中各种形态的砷,采用微生物法测定血清中叶酸水平。比较不同MTHFR基因型及其和叶酸联合作用与尿中砷化物百分构成的关系。结果:和MTHFR原型基因个体相比,MTHFR基因677位突变个体(包括杂合突变和纯合突变)尿中As3+构成增加(r=27.17,P=0.029),而二甲基胂酸百分含量下降(r=26.57,P=0.033);MTHFRC677T基因型和叶酸联合作用未对尿中不同砷化物百分构成产生影响(P>0.05)。结论:MTHFR基因C677T位点多态性可能影响个体砷代谢能力,且这种作用独立于血清叶酸水平。

5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与妊娠期高血压疾病的相关性研究

目的 探究与分析5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）基因多态性与妊娠期高血压疾病的相关性。方法选取2013年6月～2014年6月河北省廊坊市妇幼保健中心收治的60例妊娠期高血压疾病患者作为试验组,另选择同期无妊娠期高血压疾病的孕妇60例作对照组。采用荧光定量PCR技术对两组患者MTHFR C677T及A1298C基因进行检测。结果 试验组MTHFR C677T C/T基因型频率为38.33%,对照组MTHFR C677T C/T基因型频率为21.67%,试验组明显高于对照组,差异有统计学意义（χ2=4.03,P〈0.05）。试验组突变T等位基因频率为24%,对照组突变T等位基因频率为16%,试验组显著高于对照组,差异有统计学意义（χ2=4.26,P〈0.05）。试验组MTHFR A1298C A/A基因型频率为55.00%,对照组MTHFR A1298C A/A基因型频率为60.00%,组间比较差异无统计学意义（χ2=2.71,P〉0.05）。试验组MTHFR A1298C A/C基因型频率为33.33%,对照组MTHFR A1298C A/C基因型频率为26.67%,组间比较差异无统计学意义（χ2=2.66,P〉0.05）。试验组MTHFR A1298C C/C基因型频率为11.67%,对照组MTHFR A1298C C/C基因型频率为13.33%,组间比较差异无统计学意义（χ2=2.26,P〉0.05）。试验组突变A等位基因频率为76.1%,对照组突变A等位基因为79.0%,组间比较差异无统计学意义（χ2=2.09,P〉0.05）。试验组突变C等位基因频率为23.9%,对照组突变C等位基因频率为21.0%,组间比较差异无统计学意义（χ2=2.57,P〉0.05）。结论 MTHFR基因A1298C多态性与妊娠期高血压疾病的发病无明显相关性,而MTHFR基因C677T多态性可作为诱发妊娠期高血压疾病的危险因素,同时可将其作为评价妊娠期高血压疾病预后情况的一项指标,应引起临床工作者的重视。

中国女性人群5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶C677T基因多态性与原因不明复发性流产相关性的Meta分析

目的评价中国女性人群5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(5,10-methylenetetrahydrofolate reductase,MTHFR)C677T基因多态性与原因不明复发性流产(unexplained recurrent spontaneous abortion,URSA)的相关性。方法 PubMed、万方和中国知网数据库中搜索关于MTHFR C677T基因多态性与URSA相关文献,按照既定的筛选标准进行文献筛选并进行质量评价。通过哈迪-温伯格平衡定律(HWE)对纳入文献进行检验,采用Stata MP16软件对纳入文献进行Meta分析。结果 Meta分析共纳入51篇文献,病例组6 824人,对照组8 192人。Meta分析结果:MTHFR C677T多态性与URSA患病风险增加具有相关性。各亚组分析,包括排除不符合HWE研究、将对照组严格限定为有一次成功妊娠史的健康人群后、中国南方和北方地区以及流产次数≥3次,均表明MTHFR C677T基因型与URSA的发病风险增加显著相关,然而并不能明显降低总体Meta分析的异质性。我国南方、北方地区亚组比较差异无统计学意义。Egger's秩和检验结果发现,目前纳入研究无明显发表偏倚。结论在中国女性人群中MTHFR C677T基因型是URSA高风险遗传因素的指标,但仍需更高质量的临床研究进行验证。

贵阳地区孕产妇5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶和甲硫氨酸合成酶还原酶基因多态性研究

目的研究贵阳地区孕产妇5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)和甲硫氨酸合成酶还原酶(MTRR)基因多态性,为叶酸个性化增补方案提供参考依据。方法选取2018年11月至2019年10月于贵州中医药大学附属第一医院建档的3600名健康孕产妇作为研究对象,均进行MTHFR C677T、A1298C位点及MTRR A66G位点突变检测。分析贵阳孕产妇MTHFR和MTRR基因位点多态性分布及贵阳孕产妇叶酸代谢利用能力风险,比较不同地区叶酸代谢基因位点多态性分布。结果贵阳孕产妇MTHFR C677T位点频率分别为CC(37.78%)、CT(47.58%)及TT(14.64%),等位基因频率分别为C(61.57%)和T(38.43%);MTHFR A1298C位点频率分别为AA(62.39%)、AC(33.31%)及CC(4.31%),等位基因频率分别为A(79.04%)和C(20.96%);MTRR A66G位点频率分别为AA(57.67%)、AG(36.39%)及GG(5.94%),等位基因频率分别为A(75.86%)和G(24.14%)。贵阳地区孕产妇MTHFR C677T位点TT纯合突变型频率低于郑州及胶东地区孕产妇,整体叶酸代谢利用水平高于郑州与胶东地区孕产妇,差异有统计学意义(P<0.05)。此外,贵阳地区孕产妇MTHFR C677T位点TT纯合突变型频率低于绍兴地区高同型半胱氨酸(Hcy)水平孕产妇,而MTHFR A1298C位点AC杂合突变型、CC纯合突变型频率高于绍兴地区高Hcy水平孕产妇,差异有统计学意义(P<0.05)。贵阳地区孕产妇与其他地区MTHFR A1298C及MTRR A66G位点突变频率比较差异无统计学意义。结论因不同地区人口遗传结构特征,叶酸代谢相关的MTHFR C667T、MTHFR A1298C、MTRR A66G 3个基因位点频率分布具有明显地域差异,特别是MTHFR C677T位点的地区差异显著,需根据地区基因突变情况实施个性化的叶酸增补方案。

脑梗死患者与其N^(5,10)亚甲基四氢叶酸还原酶基因关系的研究

目的:探讨脑梗死(CI)患者与其N5,10亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因多态性的关系。方法:运用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性技术(PCR-RELP)检测脑梗死患者MTHFR基因多态性。结果:MTHFR基因型有3种,即纯合子(C/C)型、杂合子(T/C)型、纯合子(T/T)型。3种基因型在病例组和对照组研究对象间的分布无显著性差异,但T等位基因在病例组和对照组研究对象间的差异有统计学意义。结论:MTHFR基因C677T突变与脑梗死的发生有关,MTHFR基因可能是脑梗死的易感基因之一。

大理白族自治州5个民族育龄女性叶酸代谢关键酶基因SNPs的分布特征

目的:探讨大理白族自治州汉族、白族、彝族、回族、傈僳族育龄女性5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)C677T、A1298C及甲硫氨酸合成酶还原酶(MTRR)A66G基因多态性的频率特征。方法:以到大理白族自治州妇幼保健院做孕检的7331例女性为研究对象,其中汉族3203人,白族3140人,彝族694人,回族212人,傈僳族82人,提取口腔上皮细胞DNA,采用荧光定量PCR,进行编码基因MTHFR和MTRR的相关多态性位点检测。结果:1)各民族入组对象的基因多态性分布符合遗传平衡定律;2)大理州汉族女性MTHFR 677CC、CT、TT的基因型频率分别为40.0%、45.3%、14.7%,白族女性为43.6%、44.4%、12.0%,彝族女性为45.4%、43.7%、11.0%,回族女性为42.9%、43.4%、13.7%,傈僳族女性为47.6%、37.8%、14.6%,其中汉族与白族、彝族女性的MTHFR C677T基因型和等位基因频率多态性分布差异有统计学意义(P<0.05),回族与傈僳族的MTHFR C677T基因与以上民族比较无统计学差异(P>0.05),汉族与白族的MTHFR A1298C、MTRR A66G基因型分布相比较有统计学差异(P<0.05),其中汉族女性MTHFR 1298AA、AC、CC的基因型频率分别为65.2%、31.6%、3.2%,白族女性为65.8%、29.7%、4.5%,汉族女性MTRR 66AA、AG、GG的基因型频率分别为53.9%、38.1%、8.0%,白族女性为49.1%、41.9%、9.0%,傈僳族女性的MTHFR A1298C基因型频率和等位基因频率分布与汉族、白族、彝族都有统计学差异(P<0.05)。3)两位点连锁情况677CC/1298AA双野生型频率以汉族(19.8%)最低,傈僳族(32.9%)最高;汉族、白族、彝族、回族都以CT/AA基因连锁型出现频率最高,傈僳族CC/AA和CT/AA出现频次一致,且远高于其他基因型。5个民族均未见CT/CC及TT/CC组合,TT/AC组合仅存在于汉族及白族中。结论:大理州各民族育龄女性叶酸代谢关键酶基因位点多态性有其自身特点,具有民族特性,可以有针对性的制定符合当地民族特征的个性化叶酸补服方案。

贵阳市汉族女性5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶、甲硫氨酸合成还原酶基因多态性分布研究

目的分析贵阳市汉族女性5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR) C677T、A1298C及甲硫氨酸合成酶还原酶(MTRR) A66G基因多态性的分布特征,为进一步群体遗传分析奠定基础。方法采用横断面调查研究方法,以贵阳市219例汉族女性为研究对象。采集口腔黏膜上皮细胞,提取基因组DNA,采用Taqman-MGB技术,进行MTHFR和MTRR基因多态性检测。统计分析本地区基因多态性的分布特征,并与已报道地区进行比较。结果贵阳市汉族女性MTHFR C677T的基因型和等位基因频率与已有相关数据报道的银川、莱芜、济源、惠州、南宁和琼海汉族女性比较,差异有统计学意义(均P<0.01)。MTHFR A1298C的基因型和等位基因频率与莱芜、南宁和琼海汉族女性比较,差异有统计学意义(均P<0.01)。MTRR A66G基因型和等位基因频率与琼海汉族女性比较,差异有统计学意义(均P<0.01); MTRR A66G等位基因频率与南宁汉族女性比较,差异有统计学意义(P<0.05)。MTHFR C677T,A1298C和MTRR A66G基因型和等位基因频率,与昆明汉族女性比较,差异无统计学意义(均P>0.05)。结论贵阳市汉族女性的MTHFR、MTRR基因频率分布有自身特点。

5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶基因C677T突变与再发脑梗死的关系

目的探讨5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T突变与再发脑梗死的关系。方法收集脑梗死患者及对照组的血液标本,采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性分析法分析其MTHFR基因C677T突变。结果初发脑梗死组MTHFR基因C677T突变率为68.0%,再发脑梗死组突变率为69.5%,均高于对照组46.3%,差异均有显著性(P<0.05);初发脑梗死组与再发脑梗死组MTHFR基因C677T突变率没有显著性差异(P>0.05)。结论MTHFR基因C677T突变可能与脑梗死的发病有关,但与脑梗死发病的次数无关。

沈阳市汉族与满族女性5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶、甲硫氨酸合成酶还原酶基因的单核苷酸多态性分布特征

目的探讨沈阳市汉族与满族女性中5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)及甲硫氨酸合成酶还原酶(MTRR)基因的单核苷酸多态性分布特征并与其他少数民族做区域比较,为进一步群体遗传分析奠定基础。方法选取2015年4月-2017年7月在沈阳共济爱婴医院进行体检及孕期检查的汉族和满族女性作为研究对象,其中汉族469例,满族67例,检测其MTHFR C677T、A1298C和MTRR A66G基因位点多态性,统计分析该地区基因多态性的分布特征,并与已报道的其他地区少数民族女性数据进行比较。结果沈阳市汉族与满族女性比较,MTHFR C677T、A1298C和MTRR A66G差异无统计学意义(均P>0. 05)。武阳市满族女性和其他地区少数民族女性比较,MTHFR C677T的基因型频率与延边朝鲜族、银川回族、张家界土家族、思南苗族、柳州壮族、三亚黎族女性差异有统计学意义(均P<0. 05);而MTHFR A1298C的基因型频率与柳州壮族和三亚黎族女性差异有统计学意义(均P<0. 05); MTRR A66G的分布上则与乌鲁木齐维吾尔族、三亚黎族女性差异有统计学意义(均P<0. 05)。结论沈阳市汉族女性和满族女性的MTHFR和MTRR基因多态性分布特征差异无统计学意义,可能与两个民族同化和融合有关;沈阳地区满族和汉族女性与其他地区少数民族女性相比差异存在统计学意义。

同型半胱氨酸及5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶C677T多态性与朝鲜族原发性高血压相关性研究

目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)及5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)C677T基因多态性与朝鲜族原发性高血压的相关性。方法PCR-RLFP的方法检测牡丹江地区朝鲜族189例MTHFR C677T基因型和血浆Hcy水平。结果血浆Hcy水平与原发性高血压和正常对照组差异无统计学意义(P>0.05);MTHFR C677T CC、CT、TT基因型分布差异有统计学意义(P<0.05),基因多态性与原发性高血压发病无相关性(P>0.05),朝鲜族MTHFR C677T TT基因型Hcy水平高于其他2个基因型,差异有统计学意义(P<0.05)。结论MTHFR C677T基因多态性与原发性高血压的发生无相关性,但TT基因型与Hcy水平呈正相关。

妊娠期高血压疾病5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与脂代谢的相关性分析

目的探讨妊娠期高血压疾病5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因多态性与脂代谢的相关性,为临床诊治提供参考依据。方法纳入2016年3月-2018年6月在福建医科大学附属漳州市医院诊断为妊娠期高血压疾病患者624例,采集清晨空腹外周静脉血标本,检测血脂指标、尿酸、胱抑素(Cys C)水平。根据血脂水平分为血脂正常组,血脂异常组,再将血脂异常组进一步分为4个亚组:高三酰甘油(TG)血症组(TG≥1. 70 mmol/L),高总胆固醇(TC)血症组(TC≥5. 18 mmol/L),低高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)血症组(HDL-C <1. 04 mmol/L),混合型高脂血症组(TG≥1. 70 mmol/L、TC≥5. 18 mmol/L)。检测各组患者的MTHFR (C677T)基因分型。结果血脂异常组体质指数(BMI)值、尿酸、C反应蛋白(CRP)、尿微量白蛋白与肌肝比值(UACR)、同型半胱氨酸(Hcy)水平明显高于血脂正常组,差异有统计学意义(均P<0. 05)。血脂异常组MTHFR (C677T)基因的C/C基因频率明显低于血脂正常组,T/T基因频率明显高于血脂正常组,差异有统计学意义(均P<0. 05);血脂异常组C等位基因频率明显低于血脂正常组,T等位基因频率明显高于血脂正常组,差异有统计学意义(均P<0. 05)。高TG血症组、低HDL-C血症组、混合型高脂血症组的BMI值明显高于血脂正常组,差异有统计学意义(均P<0. 05);混合型高脂血症组Hcy水平明显高于血脂正常组,差异有统计学意义(均P<0. 05)。低HDL-C血症组和混合型高脂血症组的C/C基因频率明显低于血脂正常组,T/T基因频率明显高于血脂正常组,差异有统计学意义(均P<0. 05);混合型高脂血症组C等位基因频率明显低于血脂正常组,T等位基因频率明显高于血脂正常组,差异有统计学意义(P<0. 05)。Logistic回归分析显示,基因型C/C是妊娠期高血压疾病患者血脂异常的保护因素,基因型T/T以及高BMI、Hcy是血脂异常的独立危险因素。结论妊娠期高血压疾病MTHFR基因多态性与血脂异常明显相关,其中基因型C/C是保护因素,基因型T/T是独立危险因素;同时也应注意BMI、Hcy对患者血脂异常的影响。

准格尔旗汉族和蒙古族女性5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶和甲硫氨酸合成酶还原酶基因多态性分布情况分析

目的针对内蒙古准格尔旗汉族和蒙古族女性开展分子流行病学调查,探讨叶酸代谢关键酶5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)和甲硫氨酸合成酶还原酶(MTRR)的基因多态性分布情况。方法选取2022年1-9月在准格尔旗妇幼保健院进行产检的健康女性521例为研究对象,其中汉族451例、蒙古族70例。采集口腔黏膜细胞,提取人体DNA,采用荧光定量PCR方法检测MTHFR C677T/A1298C和MTRR A66G基因位点,并进行统计学分析比较。结果入组对象的基因多态性分布符合遗传平衡。汉族女性MTHFR 677CC、CT及TT的基因型频率分别为29.9%、47.9%及22.2%,蒙古族女性为40.0%、38.6%及21.4%;汉族女性MTHFR 1298AA、AC及CC的基因型频率分别为68.5%、27.3%及4.2%,蒙古族女性为68.6%、22.9%及8.6%;汉族女性MTRR 66AA、AG及GG的基因型频率分别为53.2%、40.4%及6.4%,蒙古族女性为47.1%、40.0%及12.9%。汉族女性MTHFR C677T的C等位基因频率为53.9%,T等位基因频率为46.1%;MTHFR A1298C的A等位基因频率为82.2%,C等位基因频率为17.8%;MTRR A66G的A等位基因频率为73.4%,G等位基因频率为26.6%。蒙古族女性MTHFR C677T的C等位基因频率为59.3%,T等位基因频率为40.7%;MTHFR A1298C的A等位基因频率为80.0%,C等位基因频率为20.0%;MTRR A66G的A等位基因频率为67.1%,G等位基因频率为32.9%。汉族和蒙古族女性的基因型频率和等位基因频率比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。汉族和蒙古族女性MTHFR C677T与A1298C两位点连锁有6种组合,频率前2位的组合是CT/AA和TT/AA,没有CT/CC、TT/AC及TT/CC组合。汉族、蒙古族女性MTHFR C677T和A1298C单倍型均存在TA、CA及CC 3种组合,汉族中TA(46.2%)、CA(36.0%)、CC(17.8%),两位点间存在完全连锁不平衡(D′=1.0,r^(2)=0.186),蒙古族中TA(40.7%)、CA(39.3%)、CC(20.0%),同时两位点间也存在完全连锁不平衡(D′=1.0,r^(2)=0.172)。结论获取准格尔旗汉族、蒙古族女性MTHFR和MTRR基因多态性的群体遗传学特征。

山东省莱芜市汉族女性5，10-亚甲基四氢叶酸还原酶与甲硫氨酸合成酶还原酶基因多态性研究

目的：探讨莱芜市汉族女性5，10-亚甲基四氢叶酸还原酶（ MTHFR）、甲硫氨酸合成酶还原酶（ MTRR）基因多态性的频率特征。方法以莱芜市559例汉族女性为研究对象，检测MTHFR C677T、A1298C和MTRR A66 G的基因分型。统计分析基因多态性的频率特征，并与已报道的其他地区汉族女性的数据进行比较。结果莱芜市汉族女性的MTHFR C677T位点CC、CT、TT基因型所占比例分别为14．3％、47．6％和38．1％，该位点基因型和等位基因频率，与镇江、武汉、昆明、德阳、惠州、琼海等地差异有统计学意义（ P＜0.05）；MTHFR A1298C位点AA、AC、CC基因型所占比例分别为78.2％、19．7％和2．1％，该位点基因型和等位基因频率，与镇江、武汉、昆明、德阳、惠州、琼海等地差异有统计学意义（ P＜0．05）；MTRR A66G位点AA、AG、GG基因型所占比例分别为53．3％、38．8％和7．9％，该位点等位基因频率，与琼海汉族女性的差异有统计学意义（P＜0．05）。结论莱芜市汉族女性MTHFR、MTRR基因多态性频率分布不同于其他地区，具有地域特异性。

PCR-金磁微粒层析法在叶酸代谢相关基因检测中的应用研究

目的:对PCR-金磁微粒层析法检测人叶酸代谢相关基因进行方法学评价,并初步应用于临床检测。方法:同时应用PCR-金磁微粒层析法和Sanger测序法两种方法分别检测221例临床样本的5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)C677T、A1298C位点及甲硫氨酸合成酶还原酶(MTRR)A66G位点的基因型,并对两种方法检测的结果进行比较,以评估PCR-金磁微粒层析法的准确性、灵敏度及特异性。结果:两种方法检测同一批样本的结果完全一致,准确性达100%。PCR-金磁微粒层析法的灵敏度高,对MTHFR C677T、A1298C位点的最低检测限分别为2.5、1.25 ng·μl^-1,MTRR A66G位点的最低检测限为1.25 ng·μl^-1;特异性强,扩增试剂的扩增反应呈高度专一性。结论:PCR-金磁微粒层析法检测人叶酸代谢相关基因快速、简便,结果准确,适合应用于各级具有PCR实验室资质的医疗机构。

改良PCR-RFLP法检测MTHFR基因C677T 位点多态性

目的建立一种简便、实用、准确的检测5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T位点多态性的方法。方法在分析MTHFR基因C677T多态位点相关序列的基础上,设计1对特异性引物,通过聚合酶链反应扩增1个535bp的靶片段,该靶片段跨越MTHFR基因C677T多态位点,且在多态位点上游163bp处含有一个限制性核酸内切酶HinfI识别位点,该识别位点可作为后续HinfI酶切分型的内对照,PCR产物用HinfI快速消化,再用琼脂糖凝胶电泳分离消化产物,得出相应的限制性酶切图谱用于判别基因型。结果可从限制性酶切图谱中明确判断各样品MTHFR基因C677T位点基因型,CC、CT、TT3种基因型样品的分型结果与基因测序完全吻合。采用本法检测了100例样品,检得MTHFRC677T3种基因型样品即CC、CT、TT的频率分别为0.59、0.35、0.06;C和T等位基因频率分别为0.765和0.235,符合Hardy-Weinberg遗传平衡(χ2=0.0723,P=0.965>0.05)。结论该方法由于PCR产物中含有HinfI酶切内对照序列,能克服传统PCR-RFLP法酶切不完全可能导致基因型误判的缺点,简便、实用、准确,适合一般实验室应用及流行病学调查。

孕妇胎儿神经管缺陷易感性与MTHFR基因C667T位点突变、TYMS基因rs3819102位点突变及血清SAP水平的关系

目的研究孕妇胎儿神经管缺陷易感性与5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C667T位点突变、胸苷酸合成酶(TYMS)基因rs3819102位点突变及血清淀粉样P物质(SAP)水平的关系。方法前瞻性选择2017年12月至2019年12月在四川省雅安市人民医院产检的159例胎儿神经管缺陷的孕妇为观察组,159例胎儿健康的孕妇为对照组,采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测并比较两组血清SAP水平,采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RLFP)法对MTHFR基因C667T位点、TYMS基因rs3819102位点多态性进行检测分析,比较两组各位点的基因型和等位基因分布频率,采用Spearman相关性分析MTHFR基因C667T位点突变、TYMS基因rs3819102位点突变及血清SAP水平与孕妇胎儿神经管缺陷的相关性,采用Logistic回归分析孕妇胎儿神经管缺陷的危险因素。结果观察组血清SAP水平明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组MTHFR基因C667T位点的CC、CT、TT基因型频率及T、C等位基因频率与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);观察组TYMS基因rs3819102位点的AA、GG、AG基因型频率及A、G等位基因频率与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);血清SAP水平与孕妇胎儿神经管缺陷呈负相关关系(r=-0.647,P<0.05);MTHFR基因C667T位点TT基因型频率及T等位基因频率与孕妇胎儿神经管缺陷呈正相关关系(r=0.205,P<0.05);TYMS基因rs3819102位点的GG基因型频率及G等位基因频率与孕妇胎儿神经管缺陷呈正相关关系(r=0.204,P<0.05);血清SAP低水平、MTHFR基因C667T位点T等位基因突变、TYMS基因rs3819102位点G等位基因突变是孕妇胎儿神经管缺陷的危险因素。结论血清SAP低水平、MTHFR基因C667T位点T等位基因突变、TYMS基因rs3819102位点G等位基因突变可能增加孕妇胎儿神经管缺陷易感性。