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鼠伤寒沙门菌5'-nucleotidase基因缺失对小鼠盲肠菌群影响的研究 被引量:2
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作者 钱满 路思阳 +7 位作者 张梦珂 李静 陈松彪 尚珂 丁轲 程相朝 张春杰 廖成水 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期339-345,共7页
为探究5'-nucleotidase基因对鼠伤寒沙门菌感染小鼠盲肠菌群的影响,本研究将15只6周龄BALB/c雌鼠随机平均分为对照组、野生株SL1344组和缺失株SL1344Δ5'-nucleotidase组,对照组小鼠灌胃200μL无菌PBS,SL1344组和SL1344Δ5'... 为探究5'-nucleotidase基因对鼠伤寒沙门菌感染小鼠盲肠菌群的影响,本研究将15只6周龄BALB/c雌鼠随机平均分为对照组、野生株SL1344组和缺失株SL1344Δ5'-nucleotidase组,对照组小鼠灌胃200μL无菌PBS,SL1344组和SL1344Δ5'-nucleotidase组分别灌胃200μL含1.0×10^(6) cfu的菌液。灌胃72 h后剖杀各组小鼠,收集盲肠内容物,采用Illumina Hiseq测序技术测定各组小鼠盲肠样品微生物16S rRNA V3-V4区序列,并比较分析其微生物群落结构、多样性和信号通路富集。结果显示,与对照组相比,SL1344和SL1344Δ5'-nucleotidase组操作分类单元(OTU)以及Alpha多样性指数Chao1和Observed species均下降,Beta多样性分析显示SL1344组部分样品分布偏远,表明SL1344和SL1344Δ5'-nucleotidase感染使小鼠盲肠微生物数目减少,且SL1344对盲肠菌群影响较大。门、纲和属水平微生物种群分析结果显示,与SL1344组相比,SL1344Δ5'-nucleotidase组产短链脂肪酸的有益菌增多而条件致病菌减少,且主要富集在细胞过程、环境信息处理和新陈代谢等信号通路。上述结果首次表明5'-nucleotidase作为毒力基因在鼠伤寒沙门菌导致盲肠菌群失调过程中具有重要作用,本研究为开发更加安全有效的基因工程减毒疫苗奠定基础。 展开更多
关键词 5'-nucleotidase基因 鼠伤寒沙门菌 16S rRNA 盲肠菌群
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旋毛虫5′-nucleotidase基因特征与克隆表达 被引量:1
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作者 廖成水 王晓利 +7 位作者 杜付玉 郁川 余祖华 张春杰 李银聚 吴庭才 刘明远 程相朝 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期971-976,共6页
目的研究旋毛虫5′-nucleotidase基因的序列结构特征及其蛋白克隆表达。方法从旋毛虫获得5′-nucleotidase基因的序列,利用生物信息学方法进行系统性分析,并进行原核表达。结果旋毛虫5′-nucleotidase基因大小为1 653bp,编码550个氨基酸... 目的研究旋毛虫5′-nucleotidase基因的序列结构特征及其蛋白克隆表达。方法从旋毛虫获得5′-nucleotidase基因的序列,利用生物信息学方法进行系统性分析,并进行原核表达。结果旋毛虫5′-nucleotidase基因大小为1 653bp,编码550个氨基酸,119个氨基酸残基组成,理论相对分子质量(Mr)为62kD,分子式为C_(2800)H_(4358)N_(742)O_(803)S_(23),等电点为6.13,属于稳定存在的亲水蛋白质。该蛋白含有21个氨基酸组成的信号肽,同时具有跨膜区域,此外还含有3个N-糖基化位点、2个O-糖基化位点、20个磷酸化位点、28个B细胞线性结合位点和13个T细胞结合位点。二级结构中,α-螺旋占43.27%(238个),伸展链占22.73%(125个),β-折叠占7.82%(43个),无规则卷曲占26.18%(144个)。SDS-PAGE显示,5′-nucleotidase基因在原核表达系统中呈可溶性形式表达,重组蛋白大小约为74kD。结论成功克隆了旋毛虫5′-nucleotidase基因,对其进行序列分析和原核表达,为进一步探究5′-nucleotidase蛋白在旋毛虫感染过程中的作用奠定基础。 展开更多
关键词 旋毛虫 5′-nucleotidase 克隆 原核表达 生物信息学
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鼠伤寒沙门菌5'-nucleotidase基因的序列特征及其蛋白核酸酶活性分析
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作者 张梦珂 廖成水 +5 位作者 毛福超 王晓利 李银聚 吴庭才 张春杰 程相朝 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期675-679,共5页
为研究鼠伤寒沙门菌5'-nucleotidase基因的序列特征,本研究应用PCR扩增得到鼠伤寒沙门菌SL1344株的5'-nucleotidase基因片段,利用在线网站和DNAMAN 6.0.3.48软件进行其核苷酸和氨基酸序列的同源性分析。然后将目的基因亚克隆至... 为研究鼠伤寒沙门菌5'-nucleotidase基因的序列特征,本研究应用PCR扩增得到鼠伤寒沙门菌SL1344株的5'-nucleotidase基因片段,利用在线网站和DNAMAN 6.0.3.48软件进行其核苷酸和氨基酸序列的同源性分析。然后将目的基因亚克隆至原核表达载体p ET32a构建重组表达质粒(pET32a-5'-nucleotidase),转入大肠杆菌Rosetta中经IPTG诱导表达,亲和层析法纯化后采用SDS-PAGE和western blot进行分析。采用酶切活性试验分析重组蛋白的核酸酶活性。结果显示,鼠伤寒沙门菌SL1344株5'-nucleotidase基因为1 482 bp,5'-nucleotidase核苷酸序列与其它22种微生物的5'-nucleotidase及其类似物的同源性较低,最高仅为52.8%。理论上蛋白的分子量为57.18 ku,编码523个氨基酸。SDS-PAGE和western blot结果显示5'-nucleotidase重组蛋白约72 ku,且以可溶性和包涵体两种形式表达。同时,酶切活性试验结果显示重组5'-nucleotidase蛋白具有降解DNA的能力。本实验克隆了鼠伤寒沙门菌5'-nucleotidase基因,并表达得到了具有核酸酶活性的重组蛋白,为进一步研究5'-nucleotidase基因在鼠伤寒沙门菌感染中的作用奠定基础。 展开更多
关键词 鼠伤寒沙门菌 5'-nucleotidase基因 克隆 序列分析 原核表达
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Potential role of ecto-5'-nucleotidase in morphine-induced uridine release and neurobehavioral changes 被引量:1
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作者 CHE Xiao-hang LIU Ping +8 位作者 WU Chun-fu SONG Wu AN Ni-na YU Li-sha BAI Yi-jun XING Zheng CAI Jia-ling WANG Xiao-min YANG Jing-yu 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期722-722,共1页
OBJECTIVE There is growing evidence that uridine may act as an endogenous neuromodulator with a potential signaling role in the central nervous system in addition to its function in pyrimidine metabolism.We previously... OBJECTIVE There is growing evidence that uridine may act as an endogenous neuromodulator with a potential signaling role in the central nervous system in addition to its function in pyrimidine metabolism.We previously found that acute morphine treatment significantly increased uridine release in the dorsal striatum of mice,while the mechanism involved in morphine-induced uridine release and the role of uridine in morphine-induced neurobehavioral changes have not been understood.METHODS Uridine release in the dorsal striatum of mice was assessed by in vivo microdialysis coupled with high performance liquid chromatography(HPLC) after morphine treatment.Western blotting and immunofluorescence were used to evaluate the expression of uridine-related proteins.Morphine-induced neurobehavioral changes were assessed by locomotor activity,behavioral sensitization and conditioned place preference(CPP)test.The expression of NT5E,an extracellular enzyme involved in formation of nucleosides,including uridine,was specifically knocked down in the dorsal striatum of mice using adeno-associated virus(AAV)-mediated short hairpin RNA(shRNA).RESULTS Both acute and chronic morphine administration significantly increased uridine release in the dorsal striatum,and this was associated with upregulation of NT5E but not other uridine-related proteins.Inhibition of NT5E with APCP or shRNA markedly inhibited morphine-induced uridine release in the dorsal striatum and related neurobehavioral changes,including hyperlocomotor activity,behavioral sensitization and CPP.CONCLUSION The present study increases our understanding of the contribution of NT5E in regulating morphine-induced neurobehavioral changes,at least as related to uridine,and suggests that NT5E may be a novel therapeutic target to manage morphine abuse. 展开更多
关键词 ecto-5'-nucleotidases URIDINE MORPHINE NEUROBEHAVIORAL CHANGES
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血清TRF、AFU及5'-NT表达与原发性肝癌患者预后的关系分析
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作者 吕亚敏 陈慧玲 《临床医学工程》 2024年第9期1087-1088,共2页
目的分析血清转铁蛋白(TRF)、α-L-岩藻糖苷酶(AFU)及5-核苷酸酶(5'-NT)表达与原发性肝癌患者预后的关系。方法选取我院2021年3月至2022年12月收治的60例原发性肝癌患者作为观察组,另选取同期我院60例健康体检者作为对照组。观察组... 目的分析血清转铁蛋白(TRF)、α-L-岩藻糖苷酶(AFU)及5-核苷酸酶(5'-NT)表达与原发性肝癌患者预后的关系。方法选取我院2021年3月至2022年12月收治的60例原发性肝癌患者作为观察组,另选取同期我院60例健康体检者作为对照组。观察组治疗后随访1年,根据其预后情况分为预后不良组(n=20)和预后良好组(n=40),对比观察组和对照组、预后不良组和预后良好组的血清TRF、AFU及5'-NT水平,采用Logistic回归分析血清TRF、AFU及5'-NT水平对原发性肝癌患者预后情况的预测价值。结果观察组血清TRF水平低于对照组,血清AFU、5'-NT水平高于对照组(P<0.05)。预后不良组血清TRF水平低于预后良好组,血清AFU、5'-NT水平高于预后良好组(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,血清TRF水平降低、血清AFU及5'-NT水平升高是原发性肝癌预后不良的独立影响因素(P<0.05)。结论原发性肝癌患者血清TRF、AFU及5'-NT表达与其预后存在关联,血清TRF水平异常降低、血清AFU及5'-NT水平异常升高可能预测原发性肝癌患者预后不良。 展开更多
关键词 转铁蛋白 Α-L-岩藻糖苷酶 5-核苷酸酶 原发性肝癌 预后
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血清FGF1、NT5E、25(OH)D在T2DM伴骨质疏松患者中的表达及与糖脂代谢、骨代谢的关系
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作者 史双伟 解丽然 +1 位作者 方一凡 饶小娟 《河南医学研究》 CAS 2024年第18期3299-3303,共5页
目的探讨血清碱性成纤维细胞生长因子1(FGF1)、人胞外5’-核苷酸酶(NT5E)、25-羟维生素D[25(OH)D]在2型糖尿病(T2DM)伴骨质疏松患者中的表达,并分析其与糖脂代谢、骨代谢的关系。方法选取2021年1月至2023年6月郑州大学第五附属医院收治... 目的探讨血清碱性成纤维细胞生长因子1(FGF1)、人胞外5’-核苷酸酶(NT5E)、25-羟维生素D[25(OH)D]在2型糖尿病(T2DM)伴骨质疏松患者中的表达,并分析其与糖脂代谢、骨代谢的关系。方法选取2021年1月至2023年6月郑州大学第五附属医院收治的94例T2DM伴骨质疏松患者,另选取同期94例未伴骨质疏松T2DM患者,分别纳入伴骨质疏松组、未伴骨质疏松组。比较两组血清FGF1、NT5E、25(OH)D水平及糖脂代谢、骨代谢相关指标水平[糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、总胆固醇(TC)、稳态模型测算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、骨碱性磷酸酶(B-ALP)、骨钙素N-端中分子片段(N-MID)、Ⅰ型胶原羧基端肽β-胶原特殊序列(β-CTX)、骨钙素(OCN)、抗酒石酸盐酸性磷酸酶异构体5b(TRACP-5b)、Ⅰ型前胶原氨基端前肽(PⅠNP)];比较不同骨质疏松程度患者血清FGF1、NT5E、25(OH)D水平,分析三项指标与糖脂代谢、骨代谢及骨质疏松程度的相关性,并评估其诊断效能。结果伴骨质疏松组血清FGF1、NT5E、HbA1c、HOMA-IR、TC、N-MID、β-CTX、OCN、TRACP-5b水平高于未伴骨质疏松组,25(OH)D、B-ALP、PⅠNP低于未伴骨质疏松组(P<0.05);不同骨质疏松程度患者血清FGF1、NT5E水平比较,3度患者低于2度患者,2度患者低于1度患者,25(OH)D水平比较,3度患者高于2度患者,2度患者高于1度患者(P<0.05);血清FGF1、NT5E与HbA1c、HOMA-IR、TC、N-MID、β-CTX、OCN、TRACP-5b呈正相关,与B-ALP、PⅠNP及骨质疏松程度呈负相关,血清25(OH)D与HbA1c、HOMA-IR、TC、N-MID、β-CTX、OCN、TRACP-5b呈负相关,与B-ALP、PⅠNP及骨质疏松程度呈正相关,且各指标联合诊断骨质疏松的曲线下面积(AUC)为0.923,大于三指标单独诊断(P<0.05)。结论FGF1、NT5E在T2DM伴骨质疏松患者血清中表达上调,25(OH)D表达下调,各指标水平与糖脂代谢、骨代谢及骨质疏松程度均具有一定相关性,联合检测对骨质疏松具有一定诊断价值,可作为临床诊断疾病的辅助指标。 展开更多
关键词 碱性成纤维细胞生长因子1 人胞外5’-核苷酸酶 25-羟维生素D 2型糖尿病 骨质疏松 糖脂代谢 骨代谢
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Study the effect of kidney stones on serum xanthine oxidase, ecto-5'-nucleotidase activity and E3 SUMO-protein ligase NSE2(NSMCE2) in Malaysian individuals
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作者 Faridah Yusof Atheer Awad Mehde +2 位作者 Wesen Adel Mehdi Hamid Ghazali Azlina Abd Rahman 《Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine》 SCIE CAS 2015年第8期665-668,共4页
Objective: To verify possible relations between 5'-nucleotidase, xanthine oxidase to E3 small ubiquitin-like modifier-protein ligase non structural maintenance of chromosomes elements 2 in sera patients with kidne... Objective: To verify possible relations between 5'-nucleotidase, xanthine oxidase to E3 small ubiquitin-like modifier-protein ligase non structural maintenance of chromosomes elements 2 in sera patients with kidney stones and to evaluate the possibility of a new biomarker for the evaluation of kidney damage. Methods: A sixty patients with known kidney stones who appeared the government health clinics in Kuantan–Pahang and fifty apparently healthy were taken as control group. The 5'-nucleotidase,xanthine oxidase and other biochemical parameters were measured by colorimetric tests. The serum NSMCE2 were measured by enzyme linked immunosorbent assay.Results: The mean serum xanthine oxidase [(39.98±19.70) IU/L] and ecto-5'-nucleotidase activity(40.03±9.53 IU/L) were significantly higher than the controls' levels of(18.04 ±6.26) and(16.06 ±4.61) IU/L respectively. There were 85.00% and 83.33%, of patients with kidney stones who had abnormal ecto-5'-nucleotidase activity and uric acid respectively while xanthine oxidase activity was less sensitive 58.33%.Conclusions: The present study suggests that the increase in serum of xanthine oxidase,ecto-5'-nucleotidase activities E3 small ubiquitin-like modifier-protein ligase NSE2 concentration can be used as biomarkers for diagnosis of kidney damage in patients with kidney stone,also in developments of change DNA damage and inflammation disorders in these patients. 展开更多
关键词 Kidney stones XANTHINE OXIDASE Ecto-5’-nucleotidase E3 SUMO-protein LIGASE NSE2
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腺苷脱氨酶、5′-核苷酸酶及谷胱甘肽还原酶联合检测在评估乙型肝炎患者肝损伤中的临床价值
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作者 黄倩 郭守俊 《延边大学医学学报》 CAS 2024年第2期152-154,共3页
[目的]探讨腺苷脱氨酶(ADA)、5′-核苷酸酶(5′-NT)及谷胱甘肽还原酶(GR)联合检测在评估乙型肝炎(CHB)患者肝损伤中的临床价值.[方法]选择2020年1月—2024年6月间就诊的72例CHB患者列入实验组,按照肝损伤不同程度分为轻度组(n=39)、中度... [目的]探讨腺苷脱氨酶(ADA)、5′-核苷酸酶(5′-NT)及谷胱甘肽还原酶(GR)联合检测在评估乙型肝炎(CHB)患者肝损伤中的临床价值.[方法]选择2020年1月—2024年6月间就诊的72例CHB患者列入实验组,按照肝损伤不同程度分为轻度组(n=39)、中度组(n=25)、重度组(n=8),另选择同期健康体格检查的72例健康者列入对照组.采集所有研究对象血液样本,检测并比较各组血清ADA、5′-NT、GR水平.[结果]实验组血清ADA、5′-NT、GR水平均明显高于对照组(P<0.05);肝损伤重度组患者的血清ADA、5′-NT、GR水平明显高于中度组、轻度组,中度组血清ADA、5′-NT、GR水平明显高于轻度组,相比较差异均有统计学意义(P<0.05).[结论]血清ADA、5′-NT、GR联合检测可应用于CHB临床辅助诊断及肝损伤程度评估中,为临床诊断与治疗方案制定提供依据. 展开更多
关键词 乙型肝炎 肝损伤 腺苷脱氨酶 5′-核苷酸酶 谷胱甘肽还原酶
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The location of 5′-nucleotidase in seedling cells in Yunnan rice varieties and the change of enzyme activity after chilling injury
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作者 CHEN Shanna ZOU Xiaoju LIANG Bin Dept of Biology,Yunnan Univ,Kunming 650091,China 《Chinese Rice Research Newsletter》 1998年第3期4-5,共2页
The seedlings of three rice varieties (Damagu,Ligeng 2, and Xiuzinuo) were cultivated at 25 ±1℃. After chilling injury (at 2~C), blacksediments of lead phosphate appeared on plas-
关键词 nucleotidase in seedling cells in Yunnan rice varieties and the change of enzyme activity after chilling injury The location of 5
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早期肝细胞癌患者血清GGT、AFU、5'-NT水平及诊断价值分析 被引量:1
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作者 乐玮 周艳琴 雷玲溢 《中国血液流变学杂志》 CAS 2023年第2期277-280,共4页
目的探讨早期肝细胞癌患者血清γ-谷氨酰转肽酶(GGT)、α-L-岩藻糖苷酶(AFU)、5'-核苷酸酶(5'-NT)水平检测意义。方法选取2019年3月—2023年3月收治的80例早期肝癌患者(经病理确诊)作为观察组,并选取同期入院诊治的80例肝硬化... 目的探讨早期肝细胞癌患者血清γ-谷氨酰转肽酶(GGT)、α-L-岩藻糖苷酶(AFU)、5'-核苷酸酶(5'-NT)水平检测意义。方法选取2019年3月—2023年3月收治的80例早期肝癌患者(经病理确诊)作为观察组,并选取同期入院诊治的80例肝硬化患者作为对照A组,80名健康体检人群作为对照B组。采集三组受试者空腹静脉血,分离血清,检测并对比三组的血清甲胎蛋白(AFP)、GGT、AFU、5'-NT水平。采用ROC曲线评价血清GGT、AFU、5'-NT以及AFP水平单项及多项联合对早期肝细胞癌的诊断价值。结果观察组血清GGT、AFU、5'-NT以及AFP均高于对照A组和对照B组(P<0.05),对照A组血清GGT、AFU、5'-NT以及AFP均高于对照B组(P<0.05)。血清GGT、AFU、5'-NT以及AFP对早期肝细胞癌均有诊断价值(AUC=0.848,0.808,0.632,0.883,P<0.05)。采用Logistic回归分析法分析血清GGT、AFU、5'-NT以及AFP多项指标联合诊断价值,ROC曲线分析显示,指标联合诊断早期肝细胞癌的AUC为0.967,敏感度为91.20%,均高于单项指标检测。结论血清GGT、AFU、5'-NT对早期肝细胞癌有诊断价值,且与AFP进行联合诊断,可以提高临床对早期肝细胞癌的诊断价值。 展开更多
关键词 早期肝细胞癌 Γ-谷氨酰转肽酶 Α-L-岩藻糖苷酶 5'-核苷酸酶 诊断价值
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血清α-L-岩藻糖苷酶、单胺氧化酶、5-核苷酸酶联合检测对原发性肝癌的诊断价值 被引量:1
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作者 赵鹏 王龙龙 +2 位作者 林小平 孙艺娟 党浩男 《癌症进展》 2023年第7期771-773,806,共4页
目的探讨血清α-L-岩藻糖苷酶(AFU)、单胺氧化酶(MAO)、5-核苷酸酶(5-NT)联合检测对原发性肝癌的诊断价值。方法选取150例原发性肝癌患者、150例良性肝病患者及150例健康体检者,分别作为原发性肝癌组、良性肝病组及对照组。比较3组研究... 目的探讨血清α-L-岩藻糖苷酶(AFU)、单胺氧化酶(MAO)、5-核苷酸酶(5-NT)联合检测对原发性肝癌的诊断价值。方法选取150例原发性肝癌患者、150例良性肝病患者及150例健康体检者,分别作为原发性肝癌组、良性肝病组及对照组。比较3组研究对象的血清AFU、MAO、5-NT水平,分析血清AFU、MAO、5-NT单独及联合检测对原发性肝癌的诊断价值。结果原发性肝癌组患者的血清AFU、MAO、5-NT水平均高于良性肝病组和对照组,良性肝病组患者的血清AFU、MAO、5-NT水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。血清AFU、MAO、5-NT联合检测诊断原发性肝癌的灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值和阴性预测值均高于各指标单独检测。结论原发性肝癌患者的血清AFU、MAO、5-NT水平均较高,上述指标联合检测可为原发性肝癌的诊断提供依据。 展开更多
关键词 原发性肝癌 Α-L-岩藻糖苷酶 单胺氧化酶 5-核苷酸酶 诊断价值
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孔雀绿比色法测定5′-核苷酸酶的活性 被引量:4
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作者 左凤琼 李虹 +4 位作者 吴艳红 吴兆锋 邓如伟 李颖 李明远 《华西药学杂志》 CAS CSCD 2004年第6期435-436,共2页
目的 建立测定细胞膜标志酶活性的方法。方法 采用孔雀绿比色法测定。结果 孔雀绿比色法可测出 0 1μg的磷 ,重复性好 ,RSD =1 95 % ,回收率为 97 5 2 % ,显色稳定 ,操作简便 ,可灵敏地反映 5′ -核苷酸酶的活性。 5′ -核苷酸酶的... 目的 建立测定细胞膜标志酶活性的方法。方法 采用孔雀绿比色法测定。结果 孔雀绿比色法可测出 0 1μg的磷 ,重复性好 ,RSD =1 95 % ,回收率为 97 5 2 % ,显色稳定 ,操作简便 ,可灵敏地反映 5′ -核苷酸酶的活性。 5′ -核苷酸酶的活性的高低可反映细胞膜的纯度。结论 通过对酶反应时间和浓度以及重复性和回收率的考察 ,建立了检测 5′ -核苷酸酶的最佳条件。 展开更多
关键词 核苷酸 孔雀绿 比色法测定 酶活性 细胞膜 RSD 灵敏 浓度 纯度 回收率
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白唇竹叶青蛇毒5′-核苷酸酶的分离纯化及性质 被引量:6
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作者 陈夏 余晓东 +4 位作者 邓敏 李卉 林亦心 和七一 柳建平 《Zoological Research》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期399-404,共6页
用DEAE-SephadexA-25、Sephadex-G-100和CM-SephadexC-50三步柱层析分离法,从白唇竹叶青(Trimeresurus albolabris)蛇毒中分离纯化出具有5′-核苷酸酶活性的组分。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定其分子量为48.03kDa,HPLC柱层析图谱为单一... 用DEAE-SephadexA-25、Sephadex-G-100和CM-SephadexC-50三步柱层析分离法,从白唇竹叶青(Trimeresurus albolabris)蛇毒中分离纯化出具有5′-核苷酸酶活性的组分。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定其分子量为48.03kDa,HPLC柱层析图谱为单一峰。该组分是一个糖蛋白,以一磷酸腺苷(AMP)为底物时,其酶活力为330.33μg Pi/(min·mg);而以二磷酸腺苷(ADP)为底物时,其酶活力为123.56μg Pi/(min·mg)。金属离子Zn2+、Fe3+和Cu2+对5′-核苷酸酶活性有显著的抑制作用,EDTA可完全抑制其酶活性。该酶的最适pH为9,最适温度为50℃。该组分还具有抑制由ADP诱导的血小板聚集的生物功能。 展开更多
关键词 白唇竹叶青蛇毒 5'-核苷酸酶 分离纯化
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微域环境及外源物质对苹果果实5'-核苷酸酶活性的影响 被引量:4
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作者 张建光 邸葆 +3 位作者 李英丽 张健强 孙建设 刘玉芳 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期191-196,共6页
果实所处的微域环境对果皮组织中5-核苷酸酶活性有很大影响。无论套袋与否,均以树冠西南方位果实的酶活性最高。由于套袋提高了微域环境温度,果实5-核苷酸酶活性均显著高于不套袋处理。不同类型果袋所形成的微域环境不同,对果实5-核苷... 果实所处的微域环境对果皮组织中5-核苷酸酶活性有很大影响。无论套袋与否,均以树冠西南方位果实的酶活性最高。由于套袋提高了微域环境温度,果实5-核苷酸酶活性均显著高于不套袋处理。不同类型果袋所形成的微域环境不同,对果实5-核苷酸酶活性影响的效应有异。在一定范围内,缓慢持续升温或起伏升温都有利于果实5-核苷酸酶活性的提高,但如果升温时间太短,或温差变化太大,则不利于酶活性的提高。果实在35℃、40℃或48℃处理温度下,高湿状态均有利于果实5-核苷酸酶活性的提高。4种外源活性氧处理均使果实5-核苷酸酶活性显著下降,而外源CaCl2处理果实酶活性比对照提高了55.39%。 展开更多
关键词 苹果 微域环境 外源物质 果实 5’-核苷酸酶 酶活性
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白唇竹叶青蛇毒5′-核苷酸酶对血小板聚集的影响及其机制研究 被引量:4
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作者 李恒 和七一 +4 位作者 余晓东 柳建平 宋锡迅 文浩平 邓疆渝 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期77-81,共5页
目的研究白唇竹叶青蛇毒5′-核苷酸酶对血小板聚集的影响,探讨其作用机制。方法采用比浊法测定白唇竹叶青蛇毒5′-核甘酸酶对二磷酸腺苷(ADP)、花生四烯酸(AA)、血小板活化因子(PAF)诱导血小板聚集的影响。结果白唇竹叶青蛇毒5′-核甘... 目的研究白唇竹叶青蛇毒5′-核苷酸酶对血小板聚集的影响,探讨其作用机制。方法采用比浊法测定白唇竹叶青蛇毒5′-核甘酸酶对二磷酸腺苷(ADP)、花生四烯酸(AA)、血小板活化因子(PAF)诱导血小板聚集的影响。结果白唇竹叶青蛇毒5′-核甘酸酶能抑制ADP、AA、PAF诱导的血小板聚集,且其抑制率与剂量增加成正比;抑制血小板聚集作用与ADP的水解和腺苷的积累有关。结论白唇竹叶青蛇毒5′-核甘酸酶能抑制血小板聚集,抑制作用主要通过水解ADP和积累腺苷,可能与阻断TXA2的生成有关。 展开更多
关键词 白唇竹叶青蛇 5′-核苷酸酶 蛇毒 血小板聚集
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胞浆-5'-核苷酸酶-Ⅱ在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义 被引量:4
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作者 曲莉莉 刘晓晴 +6 位作者 王伟霞 汤传昊 李俭杰 李晓燕 高红军 李晓兵 刘广贤 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期56-60,共5页
目的:胞浆-5'-核苷酸酶-Ⅱ(CN-Ⅱ)是一种核苷酸酶,具有水解酶及磷酸转移酶的活性,其异常表达可能与多种核苷类药物耐药有一定相关性。本研究旨在探讨CN-Ⅱ在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达及其与临床... 目的:胞浆-5'-核苷酸酶-Ⅱ(CN-Ⅱ)是一种核苷酸酶,具有水解酶及磷酸转移酶的活性,其异常表达可能与多种核苷类药物耐药有一定相关性。本研究旨在探讨CN-Ⅱ在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达及其与临床病理因素的关系。方法:应用免疫组织化学方法检测116例NSCLC原发及转移病灶中CN-Ⅱ的表达并分析其中67例曾接受过吉西他滨方案化疗的患者其CN-Ⅱ表达与吉西他滨近期疗效及生存的相关性,采用χ2检验及Fisher精确检验分析其表达水平与临床病理因素的相关性,采用Kaplan-Meier方法分析TTP及OS(overall survival,OS),采用对数秩和检验比较不同CN-Ⅱ表达情况之间的差异。结果:116例NSCLC标本中CN-Ⅱ阳性表达率为53.4%,其表达水平与患者的年龄、性别、KPS评分、临床分期、肿瘤病理类型及分化程度等均无显著相关性。NSCLC原发病灶与淋巴结等转移病灶中CN-Ⅱ的表达水平亦无显著性差异。对67例接受含吉西他滨方案化疗NSCLC患者肿瘤组织标本的检测发现,吉西他滨化疗有效组(CR+PR)、疾病控制组(CR+PR+SD)及无效组(PD)的CN-Ⅱ阳性表达率分别为30.4%、36.7%及57.6%,前两者与后者相比均有显著性差异(CR+PR vs.PD组,P=0.008;CR+PR+SD vs.PD组,P=0.013);28例CN-Ⅱ阳性及39例阴性患者中位肿瘤进展时间(progeression free survival,PFS)分别为4.0个月及5.5个月,有显著性差异(95%CI:4.452-6.148,P=0.041),两组患者中位OS分别为9.5个月及11.0个月,无显著性差异(95%CI:8.667-13.333,P=0.282)。结论:CN-Ⅱ异常表达与吉西他滨治疗疗效有一定相关性,有可能成为潜在的疗效预测因子。 展开更多
关键词 5′-核苷酸酶 吉西他滨 耐药性 非小细胞肺癌
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ADA、5’-NT、TRF、TBA、LAP和PA在肝病诊断中的临床评价 被引量:10
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作者 朱月蓉 邱红 +4 位作者 王冰 楼小伟 何玉杰 朱康正 王志浩 《安徽医药》 CAS 2011年第6期728-730,共3页
目的探讨腺苷脱氨酶(ADA)、5’-核苷酸酶(5’-NT)、转铁蛋白(TRF)、总胆汁酸(TBA)、亮氨酸氨基肽酶(LAP)、前白蛋白(PA)6项指标在肝病诊断和治疗中的价值。方法使用日立7600全自动生化分析仪测定41例急性肝炎、78例慢性肝炎、62例肝硬化... 目的探讨腺苷脱氨酶(ADA)、5’-核苷酸酶(5’-NT)、转铁蛋白(TRF)、总胆汁酸(TBA)、亮氨酸氨基肽酶(LAP)、前白蛋白(PA)6项指标在肝病诊断和治疗中的价值。方法使用日立7600全自动生化分析仪测定41例急性肝炎、78例慢性肝炎、62例肝硬化、50例肝癌患者和53例健康对照者血清的上述6项指标,并对检测结果进行统计学分析。结果与正常对照组相比,急性肝炎组与肝癌组ADA、5’-NT、LAP显著升高(P<0.01),TRF和PA显著降低(P<0.01),TBA升高(P<0.05);慢性肝炎组中ADA、5’-NT、TBA、LAP与正常组相比有显著升高(P<0.01),而TRF、PA显著降低(P<0.01);肝硬化组中ADA、TBA与正常组相比有显著升高(P<0.01),而TRF、PA显著降低(P<0.01),5’-NT升高(P<0.05),但是肝硬化组的LAP与正常组无差异(P>0.05)。急性肝炎组受试者工作特性曲线(ROC)下面积5’-NT最大,慢性肝炎组曲线下面积ADA和PA较大,肝硬化组ADA、TBA和PA曲线下面积较大,肝癌组ADA、5’-NT和PA曲线下面积较大,LAP在慢性肝炎、肝硬化和肝癌组的曲线下面积较小。结论上述六项指标中,ADA和PA对肝病的诊断价值较高,可作为各实验室的常规项目开展,而除LAP外的其他5项指标对肝硬化均有较高临床应用价值。此外,上述6项指标与常规指标联合应用,可对临床医师在诊断、治疗、评估肝功能状况时起到重要的参考作用。 展开更多
关键词 腺苷脱氨酶 5’-核苷酸酶 转铁蛋白 总胆汁酸 亮氨酸氨基前白蛋白 肝病
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低温逆境中水稻幼苗质膜ATP酶和5′─核苷酸酶活性的变化 被引量:6
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作者 王红 简令成 张举仁 《电子显微学报》 CAS CSCD 1994年第3期190-195,共6页
本文以氯化钾(CeCl_3)沉淀的细胞化学方法,观察了水稻幼苗细胞在低温胁迫中质膜ATP酶和5′-核苷酸酶活性的变化,得到的主要结果如下:(1)在适宜的生长温度(28℃)下,水稻幼叶细胞内的ATP酶主要定位于质膜,细... 本文以氯化钾(CeCl_3)沉淀的细胞化学方法,观察了水稻幼苗细胞在低温胁迫中质膜ATP酶和5′-核苷酸酶活性的变化,得到的主要结果如下:(1)在适宜的生长温度(28℃)下,水稻幼叶细胞内的ATP酶主要定位于质膜,细胞间隙和胞间连丝等处,其中以质膜和细胞间隙处的酶活性最强;当幼苗经过1℃的低温处理后,质膜上的ATP酶活性比适温生长时明显降低。(2)生长在适宜温度(28℃)下的水稻幼苗,其细胞内的5-核苷酸酶活性专一性地定位于质膜和胞间连丝上,表现出很强的活性反应;幼苗在1℃低温处理2天后,其细胞内的5-核苷酸酶活性仍是严格定位于质膜及胞间连丝上,只是酶活性比低温处理前明显降低。这些结果进一步证明,质膜是低温伤害的最初部位。 展开更多
关键词 水稻幼苗 ATP酶 5'-核苷酸酶 低温胁迫 农作物
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小鼠胸腺皮质5′-核苷酸酶的细胞化学定位 被引量:2
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作者 孙品伟 吴江声 +1 位作者 陈慰峰 张兰芬 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 1993年第3期310-314,T016,共6页
用Robinson和Kamovsky法,以腺苷-5′-单磷酸或紐?5′-单磷酸为底物,铈为捕获剂,显示BALB/c小鼠胸腺皮质的5′-核苷酸酶。同时使用左旋咪唑抑制非特异性碱性磷酸酶活性。腺苷-5-单磷酸酶和紐?5′-单磷酸酶活性反应产物的细胞化学定位基... 用Robinson和Kamovsky法,以腺苷-5′-单磷酸或紐?5′-单磷酸为底物,铈为捕获剂,显示BALB/c小鼠胸腺皮质的5′-核苷酸酶。同时使用左旋咪唑抑制非特异性碱性磷酸酶活性。腺苷-5-单磷酸酶和紐?5′-单磷酸酶活性反应产物的细胞化学定位基本相似。此酶活性定位于上皮性网状细胞和某些胸腺细胞的质膜外层,特别是两者的相邻面。5′-核苷酸酶活性也见于巨噬细胞溶酶体和上皮性网状细胞的囊泡、靠近质膜的小泡及一些溶酶体内。本研究就胸腺皮质内5′-核苷酸酶的生物学意义进行了讨论。 展开更多
关键词 5'-核苷酸酶 细胞化学 胸腺
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测定人红细胞嘧啶5′核苷酸酶含量的双抗体夹心ELISA方法 被引量:2
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作者 潘竹林 沈茜 +5 位作者 李津婴 闵碧荷 顾定伟 许小平 李红梅 张娴 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2001年第4期368-371,共4页
为了进一步探讨嘧啶 5′核苷酸酶 (P5′N)缺乏症的发病机制 ,我们利用P5′N的特异性底物尿苷一磷酸 (UMP)作为配基 ,制备尿苷一磷酸 己二酰肼 琼脂糖 4B(UMP ADH Sepharose 4B)亲和层析柱 ,结合硫酸铵分级分离和沉淀、离子层析及亲和... 为了进一步探讨嘧啶 5′核苷酸酶 (P5′N)缺乏症的发病机制 ,我们利用P5′N的特异性底物尿苷一磷酸 (UMP)作为配基 ,制备尿苷一磷酸 己二酰肼 琼脂糖 4B(UMP ADH Sepharose 4B)亲和层析柱 ,结合硫酸铵分级分离和沉淀、离子层析及亲和层析等方法提纯人红细胞P5′N。将所得P5′N免疫家兔 ,获得兔抗人抗体。以兔抗人P5′N抗体为包被抗体 ,辣根过氧化物酶 (HRP) 兔抗人P5′N抗体为显示抗体 ,经方阵法、抗原阻断试验及抗原替代试验后 ,建立定量测定人红细胞的P5′N双抗体夹心酶联免疫吸附实验。实验结果显示 ,所得兔抗人红细胞P5′N抗体效价为 1∶4 ,所建双抗体夹心ELISA法灵敏度为 5ng ml,其阻断率大于 95 %,而取代率小于 30 %。同时 ,测定正常人红细胞P5′N含量为 (71.77± 10 .98)ng mgNHP。该法特异性强 ,敏感性高 ,可检测最低含量为 5 - 2 0ng ml的P5′N含量 ,在临床上能适应大样本测定。 展开更多
关键词 嘧啶5′核苷酸酶 双抗体夹心ELISA 红细胞
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