DTNB比色法测定金属硫蛋白含量

采用5,5’-二硫硝基苯甲酸(DTNB)作为金属硫蛋白(MT)巯基衍生化试剂,通过优化反应条件,应用比色法测定412nm波长处显色产物硫代硝基苯甲酸阴离子(TNBA)的量确定金属硫蛋白含量。结果表明:MT含量在2～15μg和10～150μg范围内呈良好线性,线性回归方程分别为A412nm=0.0059C+0.0251和A412nm=0.0052C+0.0201,相关系数分别为R2=0.9942和R2=0.9997,平均回收率为99.94%(n=6,RSD=0.27%),精密度良好(n=6,RSD=0.7%),MT最低定量限可达到2μg,从而建立了一种操作简便易行的金属硫蛋白快速检测方法。

利用衍生化试剂DTNB测定枸杞中谷胱甘肽

利用5,5'-二硫硝基苯甲酸(DTNB)衍生化试剂和植物材料同步破壁提取的样品处理方法,采用电喷雾质谱法和分光光度法对枸杞中还原型谷胱甘肽(GSH)进行定性、定量分析。枸杞样品提取过程中GSH受破壁后胞外化学环境的影响导致氧化变性。利用5,5'-二硫硝基苯甲酸(DTNB)衍生化试剂同步提取,因生成稳定的GSH的衍生化产物避免了GSH氧化变性导致的GSH分析信息丢失。用UV-Vis分光光度法测定GSH含量,发现枸杞中含有丰富的GSH。标准加入法测定枸杞干品中GSH,其含量范围达(6.56±0.54)mg/g,是目前所测植物样品中GSH含量较高的物种。本研究对药用植物胞内活性物质的准确分析提供方法学的尝试,并通过测定发现枸杞中富含GSH。

地鳖虫中抑制AchE活性物质的提取工艺优化

在浸提时间、浸提温度、料液比等单因素实验基础上,运用响应面法优化了地鳖虫中抑制AchE活性物质的提取条件,最终得出其最佳提取工艺为:浸提时间5.1h、浸提温度61.1℃、浸提料液比1∶20.3,在此条件下获得的粗提物对AchE酶活力的抑制率最高可达27.7%。

纸芯片显色法用于L-半胱氨酸的快速测定

该文以5,5'-二硫硝基苯甲酸(DTNB)为含巯基化合物的衍生化试剂,建立了其纸芯片快速检测新方法。显色剂DTNB和样品在显色区相遇并显色,用手机拍照记录,采用Photoshop软件分析显色强度,进行比色检测,并以L-半胱氨酸(L-Cys)为例,优化得到纸芯片检测L-Cys的最佳显色条件。结果显示,L-Cys浓度在0.01～0.1 mmol/L范围内与显色强度呈良好的线性关系(r=0.999 8),检出限达0.001 mmol/L。多种氨基酸和干扰离子对L-Cys在纸芯片上的测定干扰不超过±5%。采用该方法测得牛血清样品中L-Cys含量为0.013 mmol/L,加标回收率为99.1%～103%,该方法检测L-Cys具有操作简单、耗样量少、检测快速、重现性好等优点。

以DTNB为电子媒介检测农产品中甲拌磷残留的生物传感法的建立

目的:建立一种检测有机磷残留的生物传感法。方法:基于壳聚糖膜,用戊二醛交联法固定胆碱氧化酶制备胆碱传感器。测试时在反应液中加入5,5-二硫代双(2-硝基苯甲酸)(DTNB),增大传感器对硫代胆碱的响应信号,建立测试有机磷的反应体系。结果:用该传感方法检测有机磷农药甲拌磷,与分光光度法比较,测试结果相近,无显著差异(p>0.01)。检测甲拌磷线性范围0.78～12.5mg/L,检测限为0.02mg/L。结论:实验建立的检测有机磷农药的传感方法稳定、简便、快速,可望改进为成熟的机磷农药现场快速检测技术,从而为农产品监测提供有力的手段。