厚壳贻贝5-羟色胺2A受体(5-HT2AR)基因克隆和时空表达

为探究5-羟色胺2A受体(5-HT 2A receptor, 5-HT2AR)基因在海水贝类生长发育中的作用,本研究通过RACE技术和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)克隆了厚壳贻贝5-HT2AR基因的cDNA全长,并分析该基因的时空表达。结果显示,5-HT2AR基因全长2 636 bp,开放阅读框(ORF)2 124 bp,共编码707个氨基酸。序列分析结果显示该序列与人、小鼠、斑马鱼、长牡蛎和虾夷扇贝等物种分别具有45%、45%、48%、49%和67%的同源性。厚壳贻贝雌雄成体各组织和器官中均有5-HT2AR基因表达,雄性中的鳃表达量最高,而在雌性鳃、外套膜和性腺中的表达稍高于其他组织和器官;推测该基因可能与厚壳贻贝的摄食、对外界环境的感知及促进卵母细胞成熟有关。5-HT2AR基因在厚壳贻贝各发育阶段均有表达,且稚贝的表达量为眼点幼虫的1.4倍,推测5-HT2AR基因可能参与了调控厚壳贻贝幼虫的生长发育过程。本研究为进一步了解5-HT基因家族在双壳贝类中的功能奠定了基础。

酸枣仁汤对慢性睡眠剥夺大鼠海马5-HT1AR和5-HT2AR表达的影响

目的:观察酸枣仁汤对慢性睡眠剥夺大鼠海马5-HT1AR和5-HT2AR表达的影响。方法:将SPF级雄性SD大鼠随机分为空白组和造模组,造模组用多平台水环境法制造慢性睡眠剥夺模型,造模成功后再将造模组大鼠随机分为模型组、西药组(舒乐安定)和酸枣仁汤组。用自主活动测试仪记录大鼠自主活动时间,用免疫组化和Western blot法检测大鼠海马中5-HT1AR和5-HT2AR的表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠tL、tD、tall增加,大鼠活动时间增加(P<0.01);与模型组比较,西药组大鼠tL、tall和酸枣仁汤组大鼠tL、tD、tall减少,大鼠活动时间减少。空白组大鼠海马中5-HT1AR水平较高而5-HT2AR水平较低;造模后模型组大鼠海马中5-HT1AR水平下降而5-HT2AR水平上升;给药后西药组和酸枣仁汤组大鼠海马中5-HT1AR水平上升而5-HT2AR水平下降。结论:酸枣仁汤能调节大鼠海马中5-HT1AR和5-HT2AR的表达,从而改善睡眠剥夺大鼠睡眠状态,效果与舒乐安定相当。

无忧汤对抑郁模型大鼠海马5-HT1AR和5-HT2AR表达影响的实验研究

目的通过对大鼠预见性应激大鼠抑郁模型(CUMS)的复制,观察无忧汤对抑郁模型大鼠海马CA1区5-羟色胺受体(5-HTR)的两个亚型5-HT1AR和5-HT2AR表达的影响。方法随机将60只CL级SD雄性大鼠分为空白对照组,模型组,黛力新组,无忧汤低剂量组、中剂量组、高剂量组6组,每组10只。造模开始前予以适应性饲养1周,造模35 d后,给予相应药物治疗35 d,实验结束后采用HE染色法观察大鼠海马CA1区阳性细胞形态结构和细胞数量的变化;采用免疫组化法,观察无忧汤对大鼠海马CA1区5-HT1AR和5-HT2AR表达的影响。结果经过35 d造模后,药物干预组和模型组大鼠体质量增加量明显低于空白对照组(P<0.05);药物干预组和模型组大鼠的食物消耗量显著低于空白对照组(P<0.05);模型组及药物干预组糖水消耗量明显低于空白对照组(P<0.05);模型组及各给药组大鼠水平得分明显低于空白对照组(P<0.05);模型组及药物干预组大鼠垂直得分明显低于空白对照组(P<0.05)。经过35 d给药治疗后,无忧汤高剂量组与无忧汤低剂量组大鼠相比,体质量增加较明显(P<0.05);无忧汤高剂量组与无忧汤低剂量组大鼠相比,食物消耗量增加显著(P<0.05);无忧汤中、高剂量组与无忧汤低剂量组大鼠相比,糖水消耗显著增加(P<0.05);无忧汤高剂量组大鼠与无忧汤低剂量组大鼠相比较,水平得分增加明显(P<0.05);无忧汤中、高剂量组大鼠与无忧汤低剂量组大鼠相比较,垂直得分显著增加(P<0.05)。与空白对照组相比,模型组大鼠海马5-HT1AR阳性表达率降低(P<0.05),5-HT2AR阳性表达率升高(P<0.05);与模型组相比较,黛力新组和无忧汤中、高剂量组大鼠海马5-HT1AR阳性表达升高(P<0.05),5-HT2AR阳性表达降低(P<0.05)。结论无忧汤抗抑郁机制可能与提高抑郁模型大鼠海马CA1区5-HT1AR并下调5-HT2AR的表达有关。

地黄饮子对卒中后抑郁大鼠海马5-HT_(1A)R与5-HT_(2A)R mRNA水平表达的影响

目的:通过观察地黄饮子对PSD大鼠5-羟色胺1A受体(5-HT1AR)与5-羟色胺2A受体(5-HT2 AR)mRNA水平表达的影响,进一步探讨地黄饮子治疗脑卒中后抑郁的可能作用机理。方法:在脑卒中后抑郁大鼠模型上,采用实时荧光定量RT-PCR方法,对PSD大鼠5-HT1AR与5-HT2 AR mRNA水平进行观察。结果:地黄饮子高、中剂量和百优解均能明显提高PSD大鼠海马5-HT1AR mRNA表达水平、降低5-HT2 AR mRNA表达水平(P<0.05);地黄饮子高、中剂量与百优解无显著差异(P>0.05);地黄饮子低剂量作用不明显。结论:地黄饮子可能是通过上调5-HT1AR mRNA、下调5-HT2 ARmRNA在海马区的表达,达到治疗PSD的目的。

逍遥解郁方对卒中后抑郁大鼠5-HT含量及其受体表达影响的研究

目的:探讨逍遥解郁方对卒中后抑郁大鼠5-羟色胺(5-HT)及其受体表达水平的影响和作用机制。方法:SD大鼠50只,随机分为空白组、模型组、氟西汀组、中药低、高剂量组,每组10只。首先采用大脑中动脉结扎(MCAO)术建立卒中模型,在此基础上采用慢性温和不可预知应激(CMUS)结合孤养建立抑郁模型。卒中后抑郁模型建立后,药物连续灌胃28 d后检测各组大鼠血清中5-HT及其脑组织中受体表达。结果:与空白组比较,各组大鼠血清5-HT含量明显降低(P<0.01)。与模型组比较,各组大鼠血清5-HT浓度明显增加伴海马5-HT_(1A)R表达增加(P<0.05),中药低剂量组5-HT_(2A)R表达无统计学差异(P>0.05),但中药高剂量组和氟西汀组5-HT_(2A)R表达明显减少(P<0.05);与中药低剂量组比较,中药高剂量组和氟西汀组5-HT_(2A)R表达亦明显减少(P<0.01),且两组间比较有统计学差异。结论:逍遥解郁方可显著增加PSD大鼠5-HT含量,其作用机制可能是通过上调5-HT_(1A)RmRNA,下调5-HT_(2A)R mRNA表达来实现的。

加味四逆散对慢性应激大鼠额叶5-HT_2AR及其mRNA表达的影响

目的:探讨加味四逆散对慢性应激模型大鼠额叶5-HT2A受体及其mRNA表达的影响。方法:选择open-feild法评分相近的74只大鼠随机分为对照组、模型组、氟西汀组、加味四逆散大、中、小剂量组。应用分养和长期不可预见的中等强度应激造成慢性应激大鼠抑郁模型,以免疫组化法和原位杂交法研究大鼠额叶皮层5-HT2AR及其mRNA的变化。结果:加味四逆散各剂量组于治疗的第7d起效,但无统计学差异,于第14d水平活动、垂直活动和糖水消耗量均增加,且与模型组有统计差异,与对照组比,模型组额叶皮层5-HT2AR及其mRNA表达降低;与模型组比,各治疗组5-HT2AR表达均升高。除加味四逆散小剂量组外,各治疗组mRNA表达均升高。结论:慢性应激能诱发大鼠轻度抑郁障碍和额叶皮层5-HT2AR及其mRNA的低表达,加味四逆散改善慢性应激大鼠的抑郁症状可能与调节额叶皮层5-HT2A受体系统有关。

5-羟色胺受体和转运体在正常和妊娠期糖尿病孕妇胎盘的表达及意义

目的:检测5-羟色胺受体(5-HT2AR)和转运体(SERT)在正常孕妇和妊娠期糖尿病孕妇胎盘中的表达并探讨其在妊娠期糖尿病发生中的意义。方法:使用免疫印迹法检测46例妊娠期糖尿病孕妇胎盘和39例同期分娩的正常孕妇胎盘中5-HT2AR和SERT蛋白的表达。结果:妊娠期糖尿病组的孕前体重指数高于对照组,差异有统计学意(P<0.05)。妊娠期糖尿病组孕妇胎盘组织中的SERT和5-HT2AR蛋白表达量显著低于对照组(P<0.05)。在妊娠期糖尿病组孕妇中,孕前BMI≥30 kg/m2的孕妇胎盘组织中SERT和5-HT2AR蛋白表达量低于BMI<30 kg/m2的孕妇(P<0.05)。结论:SERT和5-HT2AR蛋白表达水平的下调与妊娠期糖尿病的发生密切相关。

逍遥解郁方抗大鼠卒中后抑郁的相关作用机制研究

目的:基于单胺能神经信号通路探讨逍遥解郁方抗大鼠卒中后抑郁(PSD)的作用机制。方法:选取SD大鼠50只,随机分为空白组、模型组、氟西汀组及中药低、高剂量组,每组10只。首先采用大脑中动脉线栓阻塞法(MCAO)建立卒中大鼠模型,在此基础上采用慢性不可预见性温和刺激法(CUMS)结合孤养法建立抑郁模型。造模成功后,各药物组大鼠分别给予相应药物连续灌胃28 d。采用强迫游泳实验和糖水偏好实验对大鼠进行行为学评定;采用ELISA法检测血浆5-羟色胺(5-HT)和去甲肾上腺素(NE)浓度; RT-PCR法检测大鼠海马组织5-HT_(1A)R、5-HT_(2A)R mRNA表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠在强迫游泳实验中不动时间明显延长、挣扎时间明显缩短,糖水偏好度明显降低(P<0.01);与模型组比较,氟西汀组大鼠不动时间无明显变化(P>0.05),中药干预各组大鼠不动时间明显缩短(P<0.01),各组大鼠挣扎时间均明显延长(P<0.01),且糖水偏好度明显增加(P<0.05)。与空白组比较,模型组大鼠血浆5-HT及NE含量均明显降低(P<0.01);与模型组比较,各药物组大鼠血浆5-HT及NE含量明显升高(P<0.05)。与空白组比较,模型组大鼠海马组织5-HT_(1A)R mRNA表达明显降低,5-HT_(2A)R mRNA表达明显增加(P<0.01);与模型组比较,各药物干预组大鼠海马组织5-HT_(1A)R mRNA表达明显增加(P<0.05,P<0.01),氟西汀组和中药高剂量组大鼠海马组织5-HT_(2A)R mRNA表达均明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论:逍遥解郁方可显著提高PSD大鼠血浆5-HT及NE含量;其升高5-HT含量的机制可能与其上调大鼠海马组织5-HT_(1A)R mRNA表达、下调5-HT_(2A)R mRNA表达有关。