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Enhanced production of cytidine 5'-monophosphate using biocatalysis of di-enzymes immobilized on amino-functionalized sepharose
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作者 Xiaohong Zhou Wenfeng Zhou +3 位作者 Wei Zhuang Chenjie Zhu Hanjie Ying Hongman Zhang 《Chinese Journal of Chemical Engineering》 SCIE EI CAS CSCD 2023年第6期40-52,共13页
Cytidine 5'-monophosphate(5'-CMP)is an essential nucleotide for additives.In this study,enhanced production of 5'-CMP was realized by the transformation of cytidine using co-immobilized di-enzymes,uridine-... Cytidine 5'-monophosphate(5'-CMP)is an essential nucleotide for additives.In this study,enhanced production of 5'-CMP was realized by the transformation of cytidine using co-immobilized di-enzymes,uridine-cytidine kinase(UCK)and acetate kinase(AcK).The immobilization yield of the enzyme had a clear correlation with the surface charges as zeta potential(ξ).Among them,ε-polylysinefunctionalized sepharose(SA-EPL,ξ=9.31 m V)showed high immobilization yield(78.8%),which was4.9-fold than that of nitrilotriacetic acid functionalized sepharose(SA-NTA,ξ=-12.6 m V).The residual activity of affinity co-immobilized enzyme(EPL-Ni/EPL@Ac K-UCK)was higher than 70.6%after recycled 10 times.Thus,this study provides an effective approach for the production of 5'-CMP with the advantages of low adenosine 5'-triphosphate(ATP)consumption,reduced side reactions,and improved reusability by co-immobilized UCK and Ac K on the functionalized Sepharose. 展开更多
关键词 SEPHAROSE Ε-POLYLYSINE Dual-enzyme cascade cytidine 5'-monophosphate Enzyme immobilization
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Efficacy of Cytidine-5'-diphosp-bocholine Combined with Compound Anisodine in the Treatment of Early Optic Nerve Contusion 被引量:4
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作者 Wenhua Wang Yan Huang +2 位作者 Jianli Zhang Jiahai Jiang Jinxiu Huang 《Eye Science》 2012年第1期37-40,共4页
Purpose:To investigate the efficacy of anisodine combined with cytidine-5'-diphosp-bocholine (citicoline) in the treatment of early optic nerve contusion.Methods:A total of 33 subjects eligible for inclusion were ... Purpose:To investigate the efficacy of anisodine combined with cytidine-5'-diphosp-bocholine (citicoline) in the treatment of early optic nerve contusion.Methods:A total of 33 subjects eligible for inclusion were selected from 105 patients clinically diagnosed with optic nerve contusion.These patients were subsequently divided into the control group (n =16) and the intervention group (n =17).In the control group,the participants received therapy consisting of glucocorticoids,mannitol,vasodilators and vitamin B.The patients in the intervention group additionally received anisodine in combination with citicoline.The visual acuity was graded on a scale from 0 to 8.Results:Prior to treatment,.the 25th,50th and 75th percentiles of visual acuity grade were 3,4 and 6.75 for the controls,and 3,4 and 6.5 for the patients in the intervention group (P=0.97).After treatment,the 25th,50th and 75th percentiles of visual acuity grade were 4,6 and 7.75 in the control group,and 7,7 and 8 in the intervention group (P=0.046).A significant difference was observed in both control (P=0.005) and intervention groups(P=0.001) when comparing presenting visual acuity before and after treatment.Conclusion:The combination of anisodine and citicoline with standard steroid and mannitol therapy appears to be effective in the treatment of early optic nerve contusion. 展开更多
关键词 联合治疗 视神经 樟柳碱 挫伤 早期 胞苷 胞二磷胆碱 疗效
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5-Aza对奶牛乳腺上皮细胞中mTOR蛋白和β-酪蛋白表达的影响 被引量:2
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作者 王春梅 夏安婷 +3 位作者 郑宜文 李庆章 高学军 张莉 《中国乳品工业》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期13-15,42,共4页
本实验以健康的泌乳期中国荷斯坦奶牛的乳腺上皮细胞为实验模型,通过使用DNA去甲基化药物5-氮杂-脱氧胞苷(5-Aza)对奶牛的乳腺上皮细胞进行处理,采用CASY细胞分析仪测定细胞活力,最后采用western blotting检测mTOR蛋白和β-酪蛋白的表... 本实验以健康的泌乳期中国荷斯坦奶牛的乳腺上皮细胞为实验模型,通过使用DNA去甲基化药物5-氮杂-脱氧胞苷(5-Aza)对奶牛的乳腺上皮细胞进行处理,采用CASY细胞分析仪测定细胞活力,最后采用western blotting检测mTOR蛋白和β-酪蛋白的表达量。实验结果显示,0.1μmol/L 5-Aza处理后的奶牛乳腺上皮细胞中的mTOR蛋白及β-酪蛋白的表达量显著增加,说明一定浓度的5-Aza可以提高乳腺泌乳信号通路中关键蛋白mTOR的表达水平,最后提高β-酪蛋白的表达水平,表明DNA甲基化也参与了奶牛泌乳调控。本实验试图从DNA甲基化方面揭示影响奶牛乳品质差异的原因,进一步完善奶牛泌乳的分子机制。 展开更多
关键词 奶牛乳腺 5-aza MTOR DNA甲基化
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5-Aza2-cdR诱导Raji细胞p15基因再表达及细胞生长抑制遗传性的实验研究 被引量:1
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作者 周涛 陆红 +3 位作者 范洪涛 郭秀枝 葛永斌 陈星宇 《陕西医学杂志》 CAS 北大核心 2005年第1期14-18,共5页
目的 :探索 5 - Aza2 - cd R(甲基转移酶抑制剂 )对甲基化细胞系 Raji细胞的生长抑制效应、去甲基化 p1 5基因的再表达 ,及 p1 5基因的再表达遗传性。方法 :对 5 - Aza2 - cd R体外处理高甲基化致 p1 5基因失活的淋巴肉瘤白血病细胞株 R... 目的 :探索 5 - Aza2 - cd R(甲基转移酶抑制剂 )对甲基化细胞系 Raji细胞的生长抑制效应、去甲基化 p1 5基因的再表达 ,及 p1 5基因的再表达遗传性。方法 :对 5 - Aza2 - cd R体外处理高甲基化致 p1 5基因失活的淋巴肉瘤白血病细胞株 Raji细胞 ,细胞生物学特征观察细胞的生长抑制效应。用去甲基化因子 5 - Aza2 - cd R诱导 p1 5基因甲基化的淋巴瘤细胞株Raji细胞 ,RT- PCR方法测定 p1 5基因的表达。结果 :在 1 0 - 7~ 1 0 - 6 M浓度的范围内 ,随着药物浓度的升高 ,Raji细胞生长受到抑制 ,并表现出剂量时间依赖关系 ,细胞生长抑制。在 1 0 - 7和 5× 1 0 - 7M诱导 Raji细胞时 ,p1 5基因去甲基化再表达和生长抑制分别为 6代和 7代。结论 :甲基转移酶抑制剂治疗抗 DNA甲基化的白血病是可行的 ,值得进一步探索。 展开更多
关键词 5-aza2-cdR RAJI细胞 p15 基因表达 细胞生长抑制 甲基转移酶抑制剂 白血病
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p53基因在5-aza诱导小鼠胚胎干细胞向心肌样细胞分化中表达的研究
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作者 刘端阳 董钦 +2 位作者 李凤兰 马宁 李晖 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 北大核心 2011年第4期304-307,311,共5页
目的检测p53基因及其蛋白在5-aza诱导C3H10T1/2向心肌样细胞分化过程中的变化,进而探讨p53基因及其蛋白在胚胎早期心肌分化过程中发挥作用的条件。方法以10μmol/L的5-aza诱导C3H10T1/2向心肌样细胞分化,分别选取诱导后1周、2周、3周4... 目的检测p53基因及其蛋白在5-aza诱导C3H10T1/2向心肌样细胞分化过程中的变化,进而探讨p53基因及其蛋白在胚胎早期心肌分化过程中发挥作用的条件。方法以10μmol/L的5-aza诱导C3H10T1/2向心肌样细胞分化,分别选取诱导后1周、2周、3周4、周这4个时间点进行样品收集。Tr-izol法提取诱导后细胞的总RNA,应用RT-PCR方法检测p53基因、肌钙蛋白Ⅰ的表达情况;应用免疫细胞化学方法检测P53蛋白和心肌肌球蛋白重链的表达情况。结果在mRNA水平,p53在诱导后1周和诱导后3周表达量较诱导后2周4、周要高;在蛋白水平,随着诱导时间的延长,蛋白表达量没有降低,而是维持在一定的水平甚至有所增加。结论在5-aza诱导C3H10T1/2向心肌样细胞分化过程中,P53蛋白维持一定水平的表达是5-aza发挥其作用的先决条件。 展开更多
关键词 p53 5-aza 细胞分化 干细胞 心肌诱导分化
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5-aza-dC联合TSA对不同供体细胞来源牛核移植胚胎体外发育的影响
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作者 丁向彬 王轶敏 +3 位作者 葛秀国 刘新峰 李吉霞 郭宏 《天津农学院学报》 CAS 2012年第2期19-23,共5页
为研究5-aza-dC和TSA提高核移植胚胎体外发育能力的作用是否有供体细胞特异性,实验选择皮肤成纤维细胞、胎儿成纤维细胞和卵丘颗粒细胞作为核供体细胞进行核移植,联合使用20 nM(72 h)5-aza-dC和50 nM(12 h)TSA处理供体细胞和重构胚,比较... 为研究5-aza-dC和TSA提高核移植胚胎体外发育能力的作用是否有供体细胞特异性,实验选择皮肤成纤维细胞、胎儿成纤维细胞和卵丘颗粒细胞作为核供体细胞进行核移植,联合使用20 nM(72 h)5-aza-dC和50 nM(12 h)TSA处理供体细胞和重构胚,比较5-aza-dC+TSA对不同供体细胞来源核移植胚胎体外发育的影响。实验结果表明,经5-aza-dC+TSA处理后,极显著提高了3种供体细胞来源核移植胚胎的体外囊胚发育率(P<0.01)。虽然胎儿成纤维细胞和卵丘颗粒细胞得到的发育率稍高于皮肤成纤维细胞组,但各对照组之间以及各处理组之间的体外发育率没有明显差异,5-aza-dC和TSA对核移植胚胎体外发育的影响没有供体细胞特异性。 展开更多
关键词 5-aza—dC TSA 核移植 供体细胞
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5-Aza-dC和TSA对肝细胞癌细胞株中3-OST-2甲基化和基因表达的影响 被引量:2
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作者 姚树哲 陈海燕 +3 位作者 张晓莹 盛燕 周庚寅 张翠娟 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期356-360,共5页
目的探讨5-Aza-dC和TSA对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞中3-OST-2甲基化水平、基因表达以及对核转录因子UHRF1(ubiquitin-like with PHD and ring finger domains 1,也称为ICBP90/NP95)表达的影响。方法采用甲基化特异性P... 目的探讨5-Aza-dC和TSA对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞中3-OST-2甲基化水平、基因表达以及对核转录因子UHRF1(ubiquitin-like with PHD and ring finger domains 1,也称为ICBP90/NP95)表达的影响。方法采用甲基化特异性PCR(methylation specific PCR,MSP)法检测药物作用前后HCC细胞株中3-OST-2甲基化的状态改变;采用实时荧光定量RT-PCR法检测3-OST-2和UHRF1 mRNA的表达变化;采用细胞爬片免疫组化法检测UHRF1蛋白表达。结果 3-OST-2在HCC细胞株中呈完全甲基化状态,5-Aza-dC或TSA均能部分逆转3-OST-2甲基化,其mRNA表达分别增加2.7倍和4.9倍,两种药物联合处理后,3-OST-2甲基化被完全逆转,其mRNA表达增加9.1倍。5-Aza-dC或TSA均能降低UHRF1 mRNA和蛋白的表达,TSA比5-Aza-dC疗效更好(P<0.01),两种药物联用具有协同作用(P<0.01)。结论启动子甲基化和组蛋白修饰共同导致3-OST-2基因表达降低。5-Aza-dC和TSA单独作用均能部分逆转3-OST-2甲基化,增加其mRNA表达,抑制核蛋白UHRF1表达可能是其中机制之一。 展开更多
关键词 肝细胞肿瘤 5-aza—dC TSA 甲基化 抑癌基因
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5-Aza-CdR对胃癌BGC-823细胞及MAL基因表达的影响 被引量:1
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作者 王源 刘庆彤 +1 位作者 高羽 师水生 《中国药物与临床》 CAS 2013年第7期882-883,共2页
胃癌是严重危害人类健康的常见的恶性肿瘤.根治性手术目前仍然是胃癌的主要治疗方式。但多数患者发现时已是中晚期,直接影响预后。因此深入研究胃癌发生、发展分子机制,为胃癌早期诊断提供依据,也为治疗提供有效的靶点,具有重要意义。
关键词 BGC-823细胞 胃癌发生 5-aza 基因表达 MAL 治疗方式 根治性手术 恶性肿瘤
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AG490及5-Aza对大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖的影响及分子机制
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作者 罗杰 廖剑雄 +2 位作者 刘维佳 余倩 刘琳 《西部医学》 2021年第9期1320-1325,共6页
目的探讨JAK2/STAT3通路抑制剂AG490及DNA甲基化抑制剂5-Aza对血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖的影响及意义。方法采用CCK8检测不同浓度AG490及5-Aza对PDGF-BB诱导PASMCs增殖的影响;将细胞分为... 目的探讨JAK2/STAT3通路抑制剂AG490及DNA甲基化抑制剂5-Aza对血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖的影响及意义。方法采用CCK8检测不同浓度AG490及5-Aza对PDGF-BB诱导PASMCs增殖的影响;将细胞分为对照组(正常的PASMCs)、0μM组(予30μg/L PDGF-BB孵育48h)和25μM/1μM组、50μM/3μM组、100μM/5μM组(25μM/1μM组、50μM/3μM组、100μM/5μM组分别给予25/1、50/3、100/5μmol/L AG490/5-Aza共同孵育细胞)。采用RT-qPCR检测IL-6、GATA6、JAK2及STAT3 mRNA表达水平;Western blot检测GATA6、p-JAK2及p-STAT3蛋白的表达。结果与对照组比较,0μM AG490组IL-6、JAK2、STAT3mRNA表达均增加,GATA6mRNA及蛋白水平降低,p-JAK2/JAK2和p-STAT3/STAT3表达升高(P<0.05)。与0μM AG490组比较,25、50、100μM AG490组细胞增殖减少,IL-6、JAK2和STAT3mRNA的表达均降低,GATA6mRNA及蛋白表达升高,p-JAK2/JAK2水平降低(均P<0.05),50和100μM组中p-STAT3/STAT3水平降低(均P<0.05);与0μM 5-Aza组相比,1μM、3μM、5μM 5-Aza组细胞增殖减少,IL-6mRNA表达降低,GATA6蛋白、p-STAT3/STAT3表达增高,p-JAK2/JAK2水平降低(均P<0.05),JAK2、STAT3mRNA水平无显著差异(P>0.05);3μM和5μM 5-Aza组中GATA6mRNA表达增高(P<0.05)。结论AG490及5-Aza对PDGF-BB诱导的PASMCs增殖具有抑制作用,该作用可能与阻断JAK2/STAT3信号通路,抑制IL-6调节GATA6启动子甲基化有关。 展开更多
关键词 肌细胞 平滑肌 血小板源性生长因子 AG490 5-aza IL-6 GATA6
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5-脱氧杂氮胞苷抑制小鼠附植前的胚胎发育(英文) 被引量:3
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作者 于建宁 李少华 +3 位作者 王丹秋 王蒙 林飞 刘红林 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第2期228-237,共10页
DNA甲基化在哺乳动物发育过程中有关键作用.在小鼠附植前胚胎发育过程中,DNA甲基化一直处于动态变化过程中.通过将体外受精胚在5-AZA-CdR中持续培养,研究5-AZA-CdR对小鼠附植前胚胎发育的影响,为附植前胚胎发育机理的研究及5-AZA-CdR的... DNA甲基化在哺乳动物发育过程中有关键作用.在小鼠附植前胚胎发育过程中,DNA甲基化一直处于动态变化过程中.通过将体外受精胚在5-AZA-CdR中持续培养,研究5-AZA-CdR对小鼠附植前胚胎发育的影响,为附植前胚胎发育机理的研究及5-AZA-CdR的毒副作用研究提供试验基础.从原核期加入不同浓度的5-AZA-CdR时,胚胎不能发育到桑椹胚(0.2和1.0μmol/L)和4-细胞胚(5.0μmol/L);从2-细胞期加入时,胚胎阻滞于未致密化的8-细胞(0.2和1.0μmol/L)和3/4-细胞期(5.0μmol/L);而当从4-细胞加入时,虽然胚胎能够发育到早期桑椹胚,但发育比例同对照相比显著降低(P<0.05).进一步检测凋亡、基因组DNA甲基化和整体转录活性,结果显示,高浓度的5-AZA-CdR导致8-细胞和早期桑椹胚发生早期凋亡,而低浓度的5-AZA-CdR引起8-细胞和早期桑椹胚基因组DNA甲基化的降低和转录活性的降低,并且这种降低呈浓度依赖性.所以加入低浓度的5-AZA-CdR时,胚胎的DNA甲基化降低,引起转录活性的降低,进而导致胚胎发育的停滞. 展开更多
关键词 5-aza—CdR 凋亡 发育 DNA甲基化 转录活性
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甲基化抑制剂5-氮杂胞苷对HL-60细胞增殖及凋亡的影响 被引量:2
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作者 苏庸春 徐酉华 +3 位作者 蔡倩 胡艳妮 李欣 罗庆 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期981-984,共4页
目的:观察5-氮杂胞苷对髓系白血病细胞系HL-60的增殖抑制作用,探讨其对细胞周期、细胞凋亡的影响。方法:常规方法培养HL-60细胞,加入不同浓度的5-氮杂胞苷,以MTT法测定对HL-60的抑制作用,计算细胞生长抑制率;流式细胞术检测小剂量5-氮... 目的:观察5-氮杂胞苷对髓系白血病细胞系HL-60的增殖抑制作用,探讨其对细胞周期、细胞凋亡的影响。方法:常规方法培养HL-60细胞,加入不同浓度的5-氮杂胞苷,以MTT法测定对HL-60的抑制作用,计算细胞生长抑制率;流式细胞术检测小剂量5-氮杂胞苷处理HL-60细胞后48h的细胞凋亡率及细胞周期分布特点。结果:不同浓度5-氮杂胞苷均可以不同程度的抑制细胞生长,且表现为时间、浓度依赖性。在小剂量浓度5-氮杂胞苷处理HL-60细胞48h后,随着5-氮杂胞苷浓度的增加,凋亡细胞百分比逐渐增多(P<0.05);G1期细胞逐渐增多,S期细胞减少,G2/M期细胞相对增多,细胞阻滞在G1期。结论:5-氮杂胞苷对髓系白细胞细胞系HL-60的生长抑制表现为浓度和时间依赖性,一定剂量的5-氮杂胞苷诱导细胞凋亡,使细胞阻滞在G1期。 展开更多
关键词 基因甲基化 5-氮杂胞苷 白血病 凋亡 细胞周期
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胃癌细胞三磷酸腺苷酶、5′—核苷酸酶和胞嘧啶单核苷酸酶活性定位的电镜细胞化学研究 被引量:3
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作者 杜卫东 王书安 +2 位作者 孔庆兖 樊晓萍 许群 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1992年第3期188-199,共12页
应用电镜酶细胞化学方法对12例胃癌细胞三磷酸腺苷酶(Mg^(2+)—ATPase,Ca^(2+)—ATPase),5~1—核苷酸酶(5NPase)及胞嘧啶单核苷酸酶(CMPase)进行了超微结构水平的定位观察。结果表明:胃管状腺癌细胞腔缘微绒毛丰富,Mg^(2+)—ATPase、Ca^... 应用电镜酶细胞化学方法对12例胃癌细胞三磷酸腺苷酶(Mg^(2+)—ATPase,Ca^(2+)—ATPase),5~1—核苷酸酶(5NPase)及胞嘧啶单核苷酸酶(CMPase)进行了超微结构水平的定位观察。结果表明:胃管状腺癌细胞腔缘微绒毛丰富,Mg^(2+)—ATPase、Ca^(2+)—ATPase及5NPase定位于微绒毛表面,反应明显,提示其功能代谢具有极性分布特点。粘液腺癌细胞出、入胞现象活跃,Mg^(2+)—ATPase、Ca^(2+)—ATPase及CMPase反应明显,认为与其粘液的大量分泌,营养物质的摄取与加工以及逃避免疫细胞的杀伤机制有关。低分化腺癌上述酶大都无反应或反应微弱。作者认为胃癌细胞的酶活性及其分布与其分化程度及功能状况有关。 展开更多
关键词 三磷酸腺苷酶 超微结构 胃肿瘤
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左旋多巴及胞二磷胆碱对单眼形觉剥夺大鼠视皮质α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异噁唑丙酸-GluR2表达的影响、 被引量:4
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作者 孙晓楠 陶军 +3 位作者 郝旭红 徐丽 李若溪 张劲松 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1065-1069,共5页
背景研究表明α-氨基-3-羟基-5-甲基±异嗯唑丙酸(AMPA).GluR2与弱视的发生发展有关,左旋多巴及胞二磷胆碱对改善弱视患者的视功能有一定的疗效,但其作用机制尚不完全明了。目的检测敏感期单眼形觉剥夺(MD)大鼠分别应用左旋... 背景研究表明α-氨基-3-羟基-5-甲基±异嗯唑丙酸(AMPA).GluR2与弱视的发生发展有关,左旋多巴及胞二磷胆碱对改善弱视患者的视功能有一定的疗效,但其作用机制尚不完全明了。目的检测敏感期单眼形觉剥夺(MD)大鼠分别应用左旋多巴及胞二磷胆碱后视皮质中AMPA—GluR2的表达情况,探讨左旋多巴及胞二磷胆碱改善视功能的作用机制。方法2周龄健康SD大鼠60只行单侧眼睑缝合31d制作MD动物模型,造模成功后与年龄匹配的正常大鼠15只在自然光条件下一起饲养。将大鼠用随机数字表法随机分为正常对照组、MD组、左旋多巴组、胞二磷胆碱组和生理盐水组,每组15只大鼠。造模后第32天左旋多巴组大鼠给予溶于1ml生理盐水中的左旋多巴40mg/kg灌胃,每日1次;胞二磷胆碱组大鼠给予胞二磷胆碱80mg/kg肌内注射,每日1次;生理盐水组给予1ml生理盐水灌胃,均连续给药28d。分别采用免疫组织化学法、Westernblot法、实时荧光定量PCR法检测各组大鼠视皮质中AMPA—GluR2的表达情况。结果MD组大鼠视皮质中AMPA—GluR2蛋白及mRNA表达均低于正常对照组,差异有统计学意义(0.32±O.02VS.0.64±0.05,t=13.287,P〈0.05;0.30±0.01VS.0.8±t-O.03,t=38.184,P〈0.05);左旋多巴组视皮质中AMPA—GluR2蛋白及mRNA表达均高于生理盐水组(0.59±0.04VS.0.33±0.03,t=11.628,P〈0.05;0.71±0.06VS.0.33±0.02,t=13.435,P〈0.05);胞二磷胆碱组大鼠视皮质中AMPA—GluR2蛋白及mRNA表达均高于生理盐水组,差异有统计学意义(0.52±0.04VS.0.33±0.03,t=8.497,P〈0.05;0.48±0.04VS.0.33±0.02,t=7.500,P〈0.05)。结论AMPA-GluR2与视觉发育的可塑性有关,左旋多巴、胞二磷胆碱能够在一定程度上逆转MD引起的AMPA.GluR2表达下降。这一机制可能与其能够改善视功能的作用有关,其作用部位可能在视皮质。 展开更多
关键词 左旋多巴 胞二磷胆碱 α-氨基-3-羟基-5-甲基4-异噁唑丙酸受体 单眼形觉剥夺
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抗恶性肿瘤新药N^4-戊氧碳酰-5’-脱氧-5-氟胞嘧啶的合成 被引量:2
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作者 朱仁发 何勇 淤奇 《安徽化工》 CAS 2006年第6期22-23,共2页
以去氧氟尿苷、盐酸羟胺、氯甲酸正戊酯等为原料合成N4-戊氧碳酰-5’-脱氧-5-氟胞嘧啶,反应经加成、氢化、缩合、酰胺化等步骤得目标产物。产物经元素分析、IR、1H-NMR、13C-NMR、EI-MS确证。五步合成目标产物N4-戊氧碳酰-5’-脱氧-5-... 以去氧氟尿苷、盐酸羟胺、氯甲酸正戊酯等为原料合成N4-戊氧碳酰-5’-脱氧-5-氟胞嘧啶,反应经加成、氢化、缩合、酰胺化等步骤得目标产物。产物经元素分析、IR、1H-NMR、13C-NMR、EI-MS确证。五步合成目标产物N4-戊氧碳酰-5’-脱氧-5-氟胞嘧啶总产率20.05%(以去氧氟尿苷计)。 展开更多
关键词 N^4-戊氧碳酰-5’-脱氧-5-氟胞嘧啶 化学合成 表征
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二甲基亚砜和5-氮胞苷诱导P19细胞转化为心肌细胞的效率
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作者 金鹏 申星花 李学奇 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期975-977,共3页
目的分析二甲基亚砜(DMSO)和5-氮胞苷(5-Aza)诱导P19细胞转化为心肌细胞的效率,比较两者的区别。方法将研究对象分为3组。一组使用常规方法对P19细胞进行培养,为阴性对照组;一组使用DMSO 1.0%进行诱导;一组使用5-Aza 10μmol/L进行诱导... 目的分析二甲基亚砜(DMSO)和5-氮胞苷(5-Aza)诱导P19细胞转化为心肌细胞的效率,比较两者的区别。方法将研究对象分为3组。一组使用常规方法对P19细胞进行培养,为阴性对照组;一组使用DMSO 1.0%进行诱导;一组使用5-Aza 10μmol/L进行诱导。对所有研究对象使用RT-PCR法检测GATA-4基因相对表达量。结果 DMSO和5-Aza组诱导4 d后,细胞均以克隆集落方式增殖,梭形细胞明显增多。8 d出现自发性节律收缩的心肌样细胞。诱导后2 w,5-Aza组分化细胞明显多于DMSO组。RT-PCR法检测GATA-4基因相对表达量,除阴性对照组外,其他两组均表达心肌早期分化基因。每组15 d后表达量与本组7 d表达量相比较均明显增加。此外,5-Aza组诱导28 d基因表达量明显高于DMSO组28 d。结论 DMSO 1.0%和5-Aza 10μmol/L均可诱导P19细胞转化为心肌细胞,5-Aza 10μmol/L的诱导效率高于DMSO 1.0%。 展开更多
关键词 P19细胞 DMSO诱导 5-aza诱导 RT-PCR效率
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5-氮杂胞苷增强人非小细胞肺癌细胞对吉非替尼的敏感性及其机制 被引量:2
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作者 徐姝 吴建中 +3 位作者 曹海霞 张琰 刘宇飞 冯继锋 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期26-29,共4页
目的:探讨DNA甲基化抑制剂5-氮杂胞苷(5-Aza-2’-deoxycytidine,5-Aza-CdR)在增强人非小细胞肺癌(non-smallcell lung cancer,NSCLC)细胞对吉非替尼敏感性中的作用及其机制。方法:选取EGFR突变型NSCLC细胞株H1650及EGFR野生型NSCLC细胞... 目的:探讨DNA甲基化抑制剂5-氮杂胞苷(5-Aza-2’-deoxycytidine,5-Aza-CdR)在增强人非小细胞肺癌(non-smallcell lung cancer,NSCLC)细胞对吉非替尼敏感性中的作用及其机制。方法:选取EGFR突变型NSCLC细胞株H1650及EGFR野生型NSCLC细胞株H1299,5-Aza-CdR处理后,CCK-8法检测H1650及H1299细胞对吉非替尼敏感性的变化,real-time PCR检测细胞中miR-200c及表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)mRNA的表达水平。结果:EGFR突变型及野生型NSCLC细胞株H1650、H1299对吉非替尼有一定程度的耐药性,5-Aza-CdR处理后H1650及H1299细胞对吉非替尼的敏感性显著增强,表现为吉非替尼对细胞的IC50明显降低[(1.04±0.35)vs(159.37±17.48)μmol/L,(6.28±1.02)vs(223.76±23.63)μmol/L;均P<0.01]。Real-time PCR检测结果显示,5-Aza-CdR处理后EGFR突变型或野生型H1650、H1299细胞中miR-200c[(0.009±0.003)vs(0.002±0.001),(0.004±0.001)vs 0;均P<0.01]和EGFR mRNA[(0.286±0.037)vs(0.015±0.012),(0.057±0.014)vs(0.01±0.01);均P<0.01]的表达水平均显著增高。结论:DNA甲基化抑制剂5-Aza-CdR可上调NSCLC细胞中miR-200c及EGFR mRNA的表达,增强其对吉非替尼的敏感性。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 吉非替尼 敏感性 5-氮杂胞苷(5-aza—CdR) MIR-200C 表皮生长因子受体(EGFR)
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操作条件对5′-单磷酸胞苷晶体粒度分布的影响 被引量:2
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作者 曹磊 黄小权 +3 位作者 熊健 李振江 柏建新 应汉杰 《生物加工过程》 CAS CSCD 2009年第6期63-66,共4页
为了研究操作条件对5。单磷酸胞苷(5′-CMP)晶体粒度分布的影响,分别采用不同形式的搅拌桨、搅拌速率以及反应液流加速率,并且运用激光粒度仪和扫描电镜对晶体粒度分布及形貌进行分析观测。结果显示:采用不同形式的搅拌桨形成的剪... 为了研究操作条件对5。单磷酸胞苷(5′-CMP)晶体粒度分布的影响,分别采用不同形式的搅拌桨、搅拌速率以及反应液流加速率,并且运用激光粒度仪和扫描电镜对晶体粒度分布及形貌进行分析观测。结果显示:采用不同形式的搅拌桨形成的剪切力、颗粒聚集以及二次成核现象的差异导致了晶体粒度分布峰值数量不同;分别选取50、100和150r/min的搅拌速率以及1、3和6mL/h的流加速率时,晶体平均粒径在铆式搅拌桨作用下,在120.3—212.1μm范围内递减,而在45°斜角四折叶式搅拌桨作用下递减范围为3.17~150.2μm,且粒度分布更为均匀,为工业生产中的优化控制提供了一定的理论依据。 展开更多
关键词 5′-CMP 晶体粒度分布 反应结晶
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5-氮杂胞苷通过p53/Gadd45α信号途径影响小鼠神经干细胞的增殖 被引量:2
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作者 刘娜 王虹 包金风 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期592-598,共7页
目的:通过研究DNA甲基化抑制剂5-氮杂胞苷(5-Azacytidine,5-Aza)对小鼠神经干细胞(neural stem cells,NSCs)的影响,进一步阐明DNA甲基化模式的变化对神经发生的影响及机制。方法:采用无血清悬浮培养方法分离培养新生小鼠脑NSCs,通过MTT... 目的:通过研究DNA甲基化抑制剂5-氮杂胞苷(5-Azacytidine,5-Aza)对小鼠神经干细胞(neural stem cells,NSCs)的影响,进一步阐明DNA甲基化模式的变化对神经发生的影响及机制。方法:采用无血清悬浮培养方法分离培养新生小鼠脑NSCs,通过MTT法检测5-Aza对NSCs增殖的影响;应用流式细胞仪检测5-Aza对NSCs细胞周期和凋亡的影响;并用RT-PCR、Western Blot法检测给予5-Aza对NSCs细胞p53和Gadd45αmRNA水平和蛋白表达的影响。结果:MTT法测定结果显示:与对照组相比,5-Aza能够明显抑制NSCs的增殖;流式细胞仪测定结果显示,5-Aza组NSCs在G0/G1期细胞数量较对照组明显减少(P<0.01),而S期、G2/M期细胞数量则明显增多(P<0.01),表明5-Aza可引起细胞周期在G2/M期停滞;且5-Aza组NSCs的凋亡率与对照组相比明显增加(P<0.01)。RT-PCR结果显示:5-Aza组NSCs中p53和Gadd45αmRNA水平较对照组明显增高(P<0.05);Western Blot结果也显示:与对照组相比,5-Aza组NSCs中p53和Gadd45α蛋白表达量明显增加(P<0.05)。结论:5-Aza可能通过影响NSCs细胞周期和诱导凋亡抑制小鼠NSCs增殖;5-Aza阻滞NSCs细胞周期的作用机制可能与p53/Gadd45α信号途径相关。 展开更多
关键词 5-aza 神经干细胞 增殖 p53/Gadd45α信号途径 细胞培养 小鼠
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索拉非尼联合5-氮杂-2'-脱氧胞苷对肝癌SMMC-7721细胞DNMT3B基因表达的影响 被引量:1
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作者 韩正阳 崔兵 +2 位作者 刘纪君 贺晓珊 梅传忠 《蚌埠医学院学报》 CAS 2017年第3期285-289,共5页
目的:探讨索拉非尼联合5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对人肝癌细胞SMMC-7721的作用及其调控DNMT3B基因表达可能的分子机制。方法:单独及联合给药后以MTT法测定SMMC-7721的增殖,Transwell检测其侵袭,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western... 目的:探讨索拉非尼联合5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对人肝癌细胞SMMC-7721的作用及其调控DNMT3B基因表达可能的分子机制。方法:单独及联合给药后以MTT法测定SMMC-7721的增殖,Transwell检测其侵袭,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot法观察DNMT3B、p-Akt-Ser473及ERK蛋白的表达。结果:索拉非尼、5-Aza-CdR对肝癌SMMC-7721细胞半数抑制浓度(IC50)分别为11、6μmol/L,联合用药选取(6+4)μmol/L作为后续用药浓度。与对照组比较单药及联合用药均能抑制细胞侵袭、促进细胞凋亡、减少p-Akt-Ser473和DNMT3B蛋白的表达(P<0.05~P<0.01)。结论:索拉非尼和5-AzaCdR联合用药能有效降低索拉非尼用药浓度,降低肝癌SMMC-7721细胞DNMT3B蛋白表达水平。 展开更多
关键词 肝肿瘤 索拉非尼 5-氮杂-2'-脱氧胞苷
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5-取代胞苷的合成与性质研究 被引量:1
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作者 王玲 张肖肖 +1 位作者 朱振华 郑昌戈 《新疆农业大学学报》 CAS 北大核心 2017年第6期416-423,共8页
本研究以3-丁炔-1-醇和苄溴为原料,合成3-炔-丁基苯甲醚,通过Sonogashira反应与5-碘胞苷合成得到(4-苄氧基)丁炔基-5-胞苷,其结构经核磁共振(1 H NMR和13 C NMR)以及质谱(MS)确证。最后通过研究极性、pH值以及粘度对其光谱性质的影响,... 本研究以3-丁炔-1-醇和苄溴为原料,合成3-炔-丁基苯甲醚,通过Sonogashira反应与5-碘胞苷合成得到(4-苄氧基)丁炔基-5-胞苷,其结构经核磁共振(1 H NMR和13 C NMR)以及质谱(MS)确证。最后通过研究极性、pH值以及粘度对其光谱性质的影响,考察其是否具有成为极性、pH值以及粘度荧光探针的潜在价值。结果表明,在不同溶剂中(4-苄氧基)丁炔基-5-胞苷均有很强发射性。随着极性增加,荧光强度出现减小趋势;荧光强度随着粘度的变化而呈上升趋势;并且插入寡聚核酸中能够保持荧光性,不对周围环境产生影响。说明其该化合物在一定程度上有成为荧光探针的价值。 展开更多
关键词 (4-苄氧基)丁炔基-5-胞苷 光谱性质 荧光探针
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