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IMMOBILIZATION AND SUBUNIT RECONSTITUTION OF RIBULOSE-1, 5-BISPHOSPHATE CARBOXYLASE/OXYGENASE FROM RICE
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作者 李立人 许仁邦 缪有刚 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 1991年第14期1212-1216,共5页
Ribulose-1, 5-bisphosphate carboxylase/oxygenase ( EC 4.1.1.39 ) ( RuBP carboxylase ) is a bifunctional enzyme which catalyzes both carboxylation and oxygenation of ribulose-1, 5-bisphosphate (RuBP). These reactions a... Ribulose-1, 5-bisphosphate carboxylase/oxygenase ( EC 4.1.1.39 ) ( RuBP carboxylase ) is a bifunctional enzyme which catalyzes both carboxylation and oxygenation of ribulose-1, 5-bisphosphate (RuBP). These reactions are the first step in photosynthetic carbon fixation and photorespiration respectively. Because of its key role in the formation of plant yield, many studies on the structure of active-site and catalytic mechanism of this enzyme have 展开更多
关键词 RICE ribulose-1 5-bisphosphate carboxylase/oxygenase reconstitution.
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DA-6对草莓叶绿体光化学反应和Rubisco活性的影响 被引量:20
2
作者 单守明 刘国杰 +1 位作者 李绍华 苗鹏飞 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期7-10,共4页
以草莓为试材,研究叶面喷施二烷氨基乙醇羧酸酯(DA-6)对叶绿体光化学反应和Rubisco活性的影响。结果表明,处理14 d后,10和20 mg/L DA-6分别使草莓叶片净光合速率提高了7.6%和16.4%,同时还提高了叶绿素含量、叶绿体Hill反应、光合磷酸化... 以草莓为试材,研究叶面喷施二烷氨基乙醇羧酸酯(DA-6)对叶绿体光化学反应和Rubisco活性的影响。结果表明,处理14 d后,10和20 mg/L DA-6分别使草莓叶片净光合速率提高了7.6%和16.4%,同时还提高了叶绿素含量、叶绿体Hill反应、光合磷酸化活性和Mg2+-ATPase活性,并使Rubisco活性各提高了7.9%和16.9%。40 mg/L的DA-6降低了叶片的光合作用速率、叶绿素含量、叶绿体光化学反应和Rubisco活性。试验结果表明,叶面喷施DA-6能调节草莓叶片叶绿体光化学反应和Rubisco活性,并同时影响叶片的净光合作用速率。 展开更多
关键词 二烷氨基乙醇羧酸酯(DA-6) 草莓 光合作用 叶绿体 1 5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶(rubisco)
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沉淀pH值对烟草Rubisco结晶的影响 被引量:8
3
作者 张劲松 高学云 +1 位作者 黄镇 方宇澄 《中国烟草科学》 CSCD 1997年第2期1-5,共5页
烟草Rubisco可以通过控制离子强度与pH形成六角形、十二面体结晶。晶体的形成受Rubisco沉淀过程中的pH值的影响。对Rubisco等电点pH的研究发现,pH5.0、pH5.1、pH5.2、pH5.3、pH5.... 烟草Rubisco可以通过控制离子强度与pH形成六角形、十二面体结晶。晶体的形成受Rubisco沉淀过程中的pH值的影响。对Rubisco等电点pH的研究发现,pH5.0、pH5.1、pH5.2、pH5.3、pH5.4对Rubisco结晶的影响有明显的规律性;pH低,Rubisco沉淀速率与沉淀率高,沉淀物不规则,沉淀物复溶率低,结晶速率与结晶率低,对结晶时pH与离子强度选择范围窄,不利于晶体制备;pH高,Rubisco缓慢沉淀并形成晶体,沉淀速率与沉淀率虽低,但沉淀物复溶率高,结晶速率与结晶率高,对结晶时pH与离子强度的选择范围宽,有利于晶体制备。沉淀过程中,pH5. 展开更多
关键词 烟草 核酮糖 二磷酸羧化酶 加氧酶 沉淀pH 结晶
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黄瓜幼苗Rubisco与Rubisco活化酶对光强的响应 被引量:6
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作者 姜振升 刘培培 +2 位作者 王美玲 毕焕改 艾希珍 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期95-99,共5页
以津优3号幼苗为试材,研究弱光(LL:100μmol.m-2.s-1)、亚弱光(SL:300μmol.m-2.s-1)下黄瓜幼苗光合速率(Pn)、核酮糖-1,5-二磷酸羧化/加氧酶(Rubisco)、Rubisco活化酶(RCA)活性及其基因表达量的变化。结果表明,11 d弱光处理后,黄瓜幼... 以津优3号幼苗为试材,研究弱光(LL:100μmol.m-2.s-1)、亚弱光(SL:300μmol.m-2.s-1)下黄瓜幼苗光合速率(Pn)、核酮糖-1,5-二磷酸羧化/加氧酶(Rubisco)、Rubisco活化酶(RCA)活性及其基因表达量的变化。结果表明,11 d弱光处理后,黄瓜幼苗叶片的Pn、Rubisco初始活性、总活性及RCA活性均显著降低,亚弱光处理的Pn也明显降低,但其Rubisco初始活性和总活性与CK差异不显著。弱光和亚弱光处理的rbcS相对表达量有所降低,而rbcL和CsRCA相对表达量明显增加。说明弱光下Rubisco和RCA活性降低是引起Pn降低的重要原因之一,但当光强达到300μmol.m-2.s-1时,Rubisco和RCA活性与Pn相关性不明显。较长时间的弱光处理后,Pn的降低与rbcS相对表达量减小有关,而rbcL和CsRCA的表达量增加可在一定程度上弥补Rubisco和RCA活性降低引起的光合速率下降。 展开更多
关键词 黄瓜 核酮糖-1 5-二磷酸羧化/加氧酶(rubisco) rubisco活化酶(RCA) 基因表达 弱光 亚弱光
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小麦叶片中1种降解Rubisco大亚基的蛋白酶鉴定 被引量:1
5
作者 吴蔚 陈晓 +5 位作者 张鹏 郑斯旻 吴文 郭金贺 徐朗莱 芮琪 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期63-69,共7页
[目的]探明小麦叶片衰老过程中1种降解1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(ribulose 1,5-bisphosphate carboxylase/oxygenase,Rubisco)大亚基蛋白酶的生化特性。[方法]通过天然梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳后切胶回收的方法获得Rubisco全酶,... [目的]探明小麦叶片衰老过程中1种降解1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(ribulose 1,5-bisphosphate carboxylase/oxygenase,Rubisco)大亚基蛋白酶的生化特性。[方法]通过天然梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳后切胶回收的方法获得Rubisco全酶,采用离子交换层析、非完全变性十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和切胶回收蛋白等方法分离目的蛋白酶,并采用含明胶的聚丙烯酰胺凝胶电泳研究其生化特性(主要是最适p H、最适温度、热稳定性、蛋白酶类型等)。[结果]切胶回收的Rubisco全酶样品中存在降解大亚基的蛋白酶。在Mono-Q离子交换层析条件下,该蛋白酶与Rubisco不易分离。利用非完全变性十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法分离出这种降解大亚基的蛋白酶;在聚丙烯酰胺凝胶中,该蛋白酶相对分子质量大于大亚基相对分子质量,位置在大亚基上方,其余部分没有检测到蛋白酶活性。该酶的最适温度为60℃;最适p H值为7.0,在p H 5.0~8.0均表现出较高的活性;该酶热稳定性一般,在50℃以上几乎完全丧失其活性;丝氨酸蛋白酶抑制剂AEBSF[4-(2-Aminoethyl)benzenesulfonyl fluoride hydrochloride]可以完全抑制蛋白酶活性,金属蛋白酶抑制剂1,10-phenanthroline可以部分抑制该蛋白酶的活性,酸性蛋白酶抑制剂pepstatin、半胱氨酸蛋白酶抑制剂E-64[transepoxysuccinyl-L-leucylamido(4-guanidino)butane]、金属蛋白酶抑制剂EDTA(ethylene diamine tetraacetic acid)和EGTA[ethylenebis(oxyethylenenitrilo)tetraacetic acid]以及丝氨酸蛋白酶抑制剂PMSF(phenylmethanesulfonyl fluoride)不抑制该蛋白酶的活性。[结论]在切胶回收的Rubisco全酶中发现了1种可以降解Rubisco大亚基的蛋白酶,其可能是1种需要金属离子的丝氨酸型蛋白酶。 展开更多
关键词 1 5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(rubisco) 蛋白水解酶 小麦叶片 衰老 理化特性
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桂糖11号Rubisco基因克隆、原核表达及纯化
6
作者 吴朝兴 蒋媛 +5 位作者 王露蓉 顾彩彩 牛俊奇 孙波 李杨瑞 杨丽涛 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期524-529,共6页
【目的】通过原核表达及纯化获得甘蔗1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(Rubisco)的大、小亚基融合蛋白,为获得符合抗体制备条件的高纯度融合蛋白提供技术支持。【方法】以甘蔗品种桂糖11号(GT11)+1叶为材料,根据NCBI公布的甘蔗Rubisco大... 【目的】通过原核表达及纯化获得甘蔗1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(Rubisco)的大、小亚基融合蛋白,为获得符合抗体制备条件的高纯度融合蛋白提供技术支持。【方法】以甘蔗品种桂糖11号(GT11)+1叶为材料,根据NCBI公布的甘蔗Rubisco大、小亚基基因(rbc L和rbc S)的编码域序列(CDS)设计特异性引物,PCR扩增rbc L和rbc S基因的CDS,然后连接至原核表达载体p ET-30a(+),构建重组质粒后转入原核细胞(大肠杆菌Rosetta)中诱导表达,用镍亲和层析柱对融合蛋白进行纯化,并比较分析桂糖11号与其他甘蔗品种在rbc L和rbc S基因的CDS及编码蛋白序列方面的差异。【结果】rbc L和rbc S基因的CDS长度分别为1431和510 bp,其中桂糖11号rbc L基因的CDS与Saccharum hybrid cultivar SP80-3280(Gen Bank登录号AE009947)、Saccharum hybrid cultivar Q155(Gen Bank登录号KU214867)的一致,桂糖11号rbc S基因的CDS与Saccharum hybrid cultivar GT28(Gen Bank登录号JN591757)的存在7个碱基差异,但仅有2个氨基酸发生错义突变。Rbc L和Rbc S融合蛋白以包涵体形式存在原核细胞中,用镍离子亲和层析纯化及超滤浓缩后其浓度均在1.0 mg/m L以上。【结论】从桂糖11号成功克隆Rubisco大亚基和小亚基基因的CDS,大亚基基因的CDS比小亚基的保守性更高,且均可在原核细胞中高度表达,经纯化浓缩获得的高纯度融合蛋白可用于制备Rubisco单克隆抗体。 展开更多
关键词 甘蔗 1 5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(rubisco) 克隆 原核表达 融合蛋白 纯化
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Cloning and Sequence Analysis of rbcS Gene of Wild Barley (Hordeum brevisubulatum) under Salt Stress 被引量:2
7
作者 岳海燕 尹剑锐 +6 位作者 闫守庆 冯宇隆 张莲姬 郭建强 李怀亮 丁雪梅 沈景林 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2010年第8期42-44,共3页
[Objective] The aim was to study the cloning and sequence analysis of rbcS gene of wild barley under salt stress. [Method] The tender leaf blade of wild barley under salt stress was taken as the experimental material.... [Objective] The aim was to study the cloning and sequence analysis of rbcS gene of wild barley under salt stress. [Method] The tender leaf blade of wild barley under salt stress was taken as the experimental material. The primers were designed according to the homology of rbcS gene sequences of wheat and barely in Genbank; then PCR amplification,recovery,ligation,transformation and sequencing of rbcS gene were carried out. [Result] Two rbcS genes including rbcS1 and rbcS2 with the length of 1 252 and 908 bp respectively were cloned from the barely genome. rbcS1 and rbcS2 were both composed by two exons and one intron. The exons length of the two genes was the same of 525 bp,encoding 174 amino acids,and the homology between them was 96%; however,the intron length of rbcS1 and rbcS2 was 448 and 107 bp respectively. 展开更多
关键词 Wild barley Salt stress Ribulose-1 5-bisphosphate carboxylase/oxygenase Small Subunit Sequence analysis
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低温弱光对黄瓜幼苗Rubisco与Rubisco活化酶的影响 被引量:47
8
作者 姜振升 孙晓琦 +3 位作者 艾希珍 王美玲 毕焕改 王洪涛 《应用生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期2045-2050,共6页
以‘津优3号’黄瓜幼苗为试材,研究弱光(100μmol.m-2.s-1)下适温(WL:25℃/18℃)、亚适温(ST+WL:18℃/12℃)和低温(LT+WL:10℃/5℃)对黄瓜幼苗光合速率(Pn)、核酮糖-1,5-二磷酸羧化/加氧酶(Rubisco)、Rubisco活化酶(RCA)活性及其基因表... 以‘津优3号’黄瓜幼苗为试材,研究弱光(100μmol.m-2.s-1)下适温(WL:25℃/18℃)、亚适温(ST+WL:18℃/12℃)和低温(LT+WL:10℃/5℃)对黄瓜幼苗光合速率(Pn)、核酮糖-1,5-二磷酸羧化/加氧酶(Rubisco)、Rubisco活化酶(RCA)活性及其基因表达量的影响.结果表明:与对照(25℃/18℃,400μmol.m-2.s-1)相比,WL、ST+WL和LT+WL处理的单株叶面积和干物质量均明显减小.处理初期,Pn、Rubisco活性及其大亚基基因(rbcL)、小亚基基因(rbcS)表达、RCA活性与基因(CsRCA)表达量大幅度降低,5~7 d后,WL处理趋于平稳,ST+WL处理缓慢回升,而LT+WL处理持续下降,表明黄瓜光合机构对适温弱光和亚适温弱光环境有逐步适应机制.Rubisco和RCA活性及其基因表达对低温弱光的响应与Pn基本一致,表明低温弱光下RCA和Rubisco活性及其基因表达量下降是黄瓜幼苗Pn降低的重要原因. 展开更多
关键词 核酮糖-1 5-二磷酸羧化/加氧酶(rubisco) rubisco活化酶(RCA) 基因表达 低温弱光 亚适温弱光 黄瓜
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黄瓜Rubisco活化酶基因CsRCA表达载体构建与遗传转化 被引量:8
9
作者 刘培培 姜振升 +2 位作者 王美玲 毕焕改 艾希珍 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期869-878,共10页
核酮糖–1,5–二磷酸羧化/加氧酶(Rubisco)是光合碳循环中的关键酶,为了探明其在植物体内的活化机制,用农杆菌介导法将Rubisco活化酶(RCA)基因CsRCA导入黄瓜,分别用PCR、real-timePCR和Western杂交法进行分子检测,分析转基因植株的... 核酮糖–1,5–二磷酸羧化/加氧酶(Rubisco)是光合碳循环中的关键酶,为了探明其在植物体内的活化机制,用农杆菌介导法将Rubisco活化酶(RCA)基因CsRCA导入黄瓜,分别用PCR、real-timePCR和Western杂交法进行分子检测,分析转基因植株的表达量。酶切鉴定结果显示,CsRCA正向插入植物表达载体pCAMBIA1301的CaMV35S启动子和NOS终止子之间,成功构建CsRCA的正义表达载体。将pCAMBIA1301-CsRCA导入黄瓜自交系‘08-1’,获得7株转基因植株,拷贝数均为2(非转基因植株的拷贝数为1),转化率约为3.5%。表达分析结果表明,7株T0代转基因植株叶片的CsRCA mRNA表达量为野生型(WT)的1~1.98倍,在蛋白水平的表达信号显著强于WT。T1代转基因植株的叶片叶绿素和类胡萝卜素含量、光合速率(Pn)及可溶性糖和淀粉含量均显著高于WT。研究结果表明,利用农杆菌介导法获得了稳定遗传的黄瓜CsRCA转基因植株,CsRCA过量表达能显著提高黄瓜叶片的Pn,增加干物质积累。 展开更多
关键词 黄瓜 核酮糖-1 5-二磷酸羧化/加氧酶(rubisco) rubisco活化酶(RCA) 遗传转化 过量表达
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Rubisco与Rubisco活化酶的分子机理研究进展 被引量:24
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作者 何亚飞 李霞 谢寅峰 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期3295-3301,共7页
核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶(Rubisco)首先作为植物光合作用反应固定CO_2的关键酶,而且还参与光呼吸途径,消耗了光合产物,光呼吸造成净光合效率可达50%的损失,Rubisco作用机理对提高植物的光合效率至关重要。自从Calvin等(1953)通... 核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶(Rubisco)首先作为植物光合作用反应固定CO_2的关键酶,而且还参与光呼吸途径,消耗了光合产物,光呼吸造成净光合效率可达50%的损失,Rubisco作用机理对提高植物的光合效率至关重要。自从Calvin等(1953)通过研究光合碳循环首次证明了Rubisco的存在,目前已对其的分布、三级结构、类型以及功能等均有了深入地认识。本研究就Rubisco的结构、功能、分布和性质等以及其活化酶的分子机理的研究进展作了介绍,并对其未来的研究方向做了展望。 展开更多
关键词 核酮糖-1 5-二磷酸羧化酶/加氧酶(rubisco) rubisco活化酶 rubisco类似蛋白(RLP) 分子改造
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适度水分胁迫提高黄瓜幼苗光合作用弱光适应性 被引量:19
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作者 肖文静 孙建磊 +4 位作者 王绍辉 孙惠慧 王虹云 眭晓蕾 张振贤 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1439-1448,共10页
以黄瓜(Cucumis sativus L.)‘戴多星'品种为试材,在人工气候室内研究弱光(75~85μmol·m-2·s-1)下水分胁迫(40%基质最大持水量)对幼苗叶片光合、荧光特性及Rubisco含量的影响。结果表明,弱光逆境下,经20d水分胁迫后的幼... 以黄瓜(Cucumis sativus L.)‘戴多星'品种为试材,在人工气候室内研究弱光(75~85μmol·m-2·s-1)下水分胁迫(40%基质最大持水量)对幼苗叶片光合、荧光特性及Rubisco含量的影响。结果表明,弱光逆境下,经20d水分胁迫后的幼苗较正常水分条件下叶片光合色素(以单位面积计)含量提高,叶绿素a/b(Chl.a/b)下降,植株光饱和光合速率Asat、表观量子效率(AQY)、羧化效率(CE)、RuBP最大再生速率及光饱和点(LSP)均显著增加,CO2补偿点(CCP)显著下降,并且光系统Ⅱ(PSⅡ)最大光化学效率(Fv/Fm)、潜在光化学效率(Fv/Fo)、PSⅡ光化学量子效率(ΦPSⅡ)、光化学反应速率(Prate)、非环式电子传递速率(J)以及PSⅡ吸收光能向光化学反应分配比例P等叶绿素荧光参数呈增加趋势,PSⅠ和PSⅡ间激发能分配不平衡性(β/α–1)减小,叶片可溶性蛋白质含量和Rubisco大、小亚基含量上升,表明适度的水分胁迫有利于提高弱光下黄瓜幼苗的光合适应性;而正常光照下(500~600μmol·m-2·s-1)经水分胁迫后的黄瓜幼苗上述主要光合特性指标如Asat、RuBP最大再生速率、CE、ΦPSⅡ、Prate、J和P等有所下降,光系统间激发能分配不平衡性(β/α–1)增加,光合作用受到一定抑制。 展开更多
关键词 黄瓜 弱光 水分胁迫 光合特性 1 5–二磷酸核酮糖羧化/加氧酶(rubisco)
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Analysis of Short-Term Metabolic Alterations in Arabidopsis Following Changes in the Prevailing Environmental Conditions 被引量:2
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作者 Alexandra Florian Zoran Nikoloski +5 位作者 Ronan Sulpice Stefan Timm Wagner L. Araujo Takayuki Tohge Hermann Bauwe Alisdair R. Fernie 《Molecular Plant》 SCIE CAS CSCD 2014年第5期893-911,共19页
Although a considerable increase in our knowledge concerning the importance of metabolic adjustments to unfavorable growth conditions has been recently provided, relatively little is known about the adjustments which ... Although a considerable increase in our knowledge concerning the importance of metabolic adjustments to unfavorable growth conditions has been recently provided, relatively little is known about the adjustments which occur in response to fluctuation in environmental factors. Evaluating the metabolic adjustments occurring under changing environmental conditions thus offers a good opportunity to increase our current understanding of the crosstalk between the major pathways which are affected by such conditions. To this end, plants growing under normal conditions were transferred to different light and temperature conditions which were anticipated to affect (amongst other processes) the rates of photosynthesis and photorespiration and characterized at the physiological, molecular, and metabolic levels following this transition. Our results revealed similar behavior in response to both treatments and imply a tight connec- tivity of photorespiration with the major pathways of plant metabolism. They further highlight that the majority of the regulation of these pathways is not mediated at the level of transcription but that leaf metabolism is rather pre-poised to adapt to changes in these input parameters. 展开更多
关键词 central metabolism environmental perturbation gene expression metabolic regulation PHOTORESPIRATION PHOTOSYNTHESIS ribulose-1 5-bisphosphate carboxylase/oxygenase (rubisco).
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Distribution characteristics and diversities of cbb and coxL genes in paddy soil profiles from southern China
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作者 Wentao PENG Yan WANG +4 位作者 Xiuxiu ZHU Liufeng XU Juan ZHAO Zhongli CUI Hui CAO 《Pedosphere》 SCIE CAS CSCD 2021年第6期954-963,共10页
The Calvin-Benson-Bassham cycle and Wood-Ljungdahl pathway are two well-known ones in the six carbon sequestration pathways,but the current knowledge of their occurrence in different layers of agricultural soil profil... The Calvin-Benson-Bassham cycle and Wood-Ljungdahl pathway are two well-known ones in the six carbon sequestration pathways,but the current knowledge of their occurrence in different layers of agricultural soil profiles is poor.In this study,the diversities of three genes encoding ribulose-1,5-bisphosphate carboxylase/oxygenase(Rubis CO),i.e.,genes encoding the green-like(cbbLG)and red-like(cbbLR)forms of Rubis COⅠ and encoding Rubis COⅡ(cbbM),and the gene encoding carbon monoxide dehydrogenase large subunit(coxL)from five paddy soils in southern China were investigated by real-time quantitative polymerase chain reaction,restriction fragment length polymorphism(RFLP)analysis,and clone library.The abundances of the four genes ranged from 10^(7) to 10^(9) copies g^(-1) soil,and the cbbLR gene outnumbered the other three genes in all soil samples,suggesting important roles they play in carbon dioxide(CO_(2))fixation.In addition,it was found that the copy numbers of cbbLR and cbbLG decreased with increasing soil depth,while the copy numbers of cbbM and coxL decreased in the shallow depths but increased with increasing soil depth.The results of RFLP showed a larger Shannon index(H)in the deeper soil layers among the four gene clone libraries,indicating that the community diversity in these soil layers was greater.The cbbLG gene had relatively low diversity(at genus level),and most of the sequences were classified as Sideroxydans and Thiobacillus.In contrast,the highly diverse groups were found in the other three gene clone libraries(cbbLR,cbbM,and coxL),most of which were distantly related to known sequences,even forming separate clusters.In summary,this study provides a new insight into CO_(2) fixers along agricultural soil profiles by comparing four bacterial genes. 展开更多
关键词 Calvin-Benson-Bassham cycle carbon dioxide fixation carbon monoxide dehydrogenase ribulose-1 5-bisphosphate carboxylase/oxygenase
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