16 S rDNA研究杜仲提取物5-HMF对去卵巢小鼠肠道菌群的影响

目的探讨从杜仲皮中提取出的生物活性化合物5-羟甲基糠醛(5-HMF)通过肠道菌群调控骨质疏松的作用机制。方法将24只8周龄雌性SD小鼠随机分为4组,其中18只小鼠建立双侧去卵巢骨质疏松模型后,将其随机分为去卵巢组(OVX组)、5-HMF给药组(5-HMF组)和戊酸雌二醇给药组(Positive组);6只小鼠建立假手术组(Sham)组。将上述小鼠连续灌胃给药12周后,收集小鼠股骨和新鲜粪便。Micro-CT分析小鼠股骨骨量的变化;ELISA分析小鼠血清P1NP、E_(2)、TNF-α、IL-6和IL-17水平;16 S rDNA高通量测序检测小鼠粪便中肠道菌群变化情况。结果与Sham组比较,OVX组小鼠的股骨骨密度显著下降(P<0.01),血清P1NP和E_(2)水平显著下降(P<0.001),血清TNF-α、IL-6和IL-17水平显著上升(P<0.01),肠道菌群多样性显著增加(P<0.01),菌群结构也发生了显著变化;与OVX组相比,5-HMF组小鼠股骨骨密度显著升高(P<0.05),血清P1NP和E_(2)水平显著上升(P<0.01),血清TNF-α、IL-6和IL-17水平显著下降(P<0.01),门水平上Bacteroidota菌群相对丰度升高,Firmicutes和Desulfobacterota菌群相对丰度显著下降,Firmicutes/Bacteroidota的相对丰度显著下降(P<0.05);属水平上Muribaculaceae和Alloprevotella的相对丰度升高,Lachnospiraceae_NK4A136_group的相对丰度降低。结论5-HMF显著改善了去卵巢骨质疏松模型小鼠的骨密度、血清骨转换标志物和相关炎症因子水平,这可能与其调节小鼠肠道菌群结构相关。

甲基2,3-O-磺酰-α-D-葡萄糖苷合成5-羟甲基糠醛(5-HMF)及其衍生物的新方法

为解决现有的以生物质为起始原料制备5-羟甲基呋喃甲醛(5-HMF)工业化所存在的问题,本研究开发了一种新颖的5-HMF的制备方法。该制备方法以最重要的生物质——纤维素的酸水解得到的无水D-葡萄糖单体为起始原料,经甲苷化、异丙叉化、环硫酸酯化和高温脱水反应,最终获得5-HMF。该方法中,各步所获得的中间体无需纯化即可用于后续制备过程,制备中所涉及到的各类型试剂廉价易获取,因此该方法具有较好的工业应用前景。

5-HMF高效液相色谱检测方法的建立及功能糖与不同产地党参、何首乌和熟地中5-HMF含量分析

本试验旨在建立5-羟甲基糠醛(5-hydroxymethylfurfural,5-HMF)的高效液相色谱检测方法,检测不同产地党参、制首乌、熟地黄以及5个不同批次功能糖中5-HMF含量。采用C_(18)(4.6 mm×250.0 mm,5μm)色谱柱分离,流动相为甲醇-水(8∶92),流速为1.0 mL/min,柱温为30℃,进样量为10μL,紫外检测器,检测波长为280 nm。经方法学考察,显示该方法线性关系良好;精密度试验测定峰面积RSD平均值为1.438%;重复性试验显示HPLC重复性良好;稳定性试验峰面积RSD范围为1.338%~7.307%;加标回收率显示良好。中药及功能糖5-HMF含量检测结果显示,党参、制首乌和熟地黄相比,熟地黄中5-HMF含量较高,党参中5-HMF含量较低,其中又以河北产熟地黄中5-HMF含量最高。不同批次功能糖中5-HMF含量无显著性差异,但其含量是河北产熟地黄的90~100倍。通过现代化技术,用功能糖成功复制了中药中的活性成分5-HMF,降低了其生产成本,具有良好的发展前景。

RP-HPLC法同时检测苹果汁中乳酸、富马酸、5-HMF和展青霉素的条件优化

建立了一种结合紫外检测器同时检测果汁中的乳酸、富马酸、5-羟甲基糠醛(5-hydroxymethylfurfural,5-HMF)和展青霉素的反相高效液相色谱(reversed-phase high-performance liquid chromatography,RP-HPLC)分离方法。考察了柱温、pH值、流速以及乙腈浓度对各组分保留时间和峰高的影响,最终采用pH为2.5的磷酸水溶液和乙腈的混合液作用于反相C18柱,以进行乳酸、富马酸、5-HMF和展青霉素的色谱分析。在流速为1.00ml/min,温度为30℃的整个分析过程中,流动相为含有5%乙腈的磷酸水溶液。前10min内,两种有机酸被在210nm处分离和检测。而5-HMF和展青霉素则被接下来的10min内于276nm处分离和检测。89.96%到102%的平均回收率证实了方法的准确度。该方法被成功地用于同时定量苹果浓缩汁中的乳酸、富马酸、5-HMF和展青霉素。

RP-HPLC法同时检测苹果汁中5-HMF、展青霉素、乐果及多菌灵

为同时定量检测苹果汁中5-羟甲基糠醛（5-HMF）、展青霉素、乐果及多菌灵的含量,建立了一种基于多通道紫外检测器的反相高效液相色谱（RP-HPLC）分离方法。以甲醇∶乙腈∶水=1∶1∶8的混合液作为流动相,采用C18色谱柱,在流速0.8mL.min^-1、温度30℃下进行5-HMF、展青霉素、乐果及多菌灵的色谱分析。结果表明：前7min内,5-HMF和展青霉素在278nm处被分离和检测;而乐果和多菌灵则在接下来的30min内于210nm处被分离和检测。重现性（n=10）和峰面积精密度（n=10）均在0.5%相对标准偏差（RSD）以内,加标回收率为87.26%-102%。该方法可应用于同时定量检测苹果浓缩汁中5-HMF、展青霉素、乐果及多菌灵。

5-HMF抑制A375细胞增殖的信号转导通路

通过Caspase活性检测和Western blotting法对ROS介导的A375细胞凋亡和G0/G1细胞周期阻滞中相关蛋白进行分析。结果表明:5-HMF通过清除细胞内ROS激活了DNA损伤介导的P53磷酸化、AKT通路和MAPKs通路,这些通路共同作用于相应的下游底物,激活外源性的死亡受体通路和内源性的线粒体通路导致细胞的凋亡,其中,5-HMF通过上调线粒体中的促凋亡因子、下调抑凋亡因子并活化Bid而激活內源性途径;此外,P53、AKT等也可以抑制或增强G0/G1期主要调控因子的表达,导致G0/G1期阻滞,证明了5-HMF可抑制A375细胞增殖的信号转导通路。

RP-HPLC同时检测苹果汁中乳酸、富马酸、5-HMF和展青霉素

【目的】同时定量检测苹果汁中乳酸、富马酸、5-HMF和展青霉素,建立一种基于多通道紫外检测器的反相高效液相色谱(RP-HPLC)分离方法。【方法】采用C18色谱柱(250mm×4.6mmID,5.0μm),以pH为2.5的磷酸水溶液和乙腈按95:5混合为流动相,在流速1.00ml·min-1,温度30℃下进行乳酸、富马酸、5-HMF和展青霉素的色谱分析。【结果】前10min,两种有机酸在210nm下被分离和检测;后10min,5-HMF和展青霉素于276nm下被分离和检测。检测限分别为:乳酸0.1790mg·L-1、富马酸0.0032mg·L-1、5-HMF0.0057mg·L-1和展青霉素0.0089mg·L-1,保留时间、峰高和峰面积的重现性(n=3)变异系数(CV)均小于1.0%。保留时间的日内重现性(n=3)和日间精密度(n=10)变异系数(CV)分别小于0.09%和0.5%。平均回收率为95.64%～99.17%。【结论】该方法可应用于同时定量检测苹果浓缩汁中乳酸、富马酸、5-HMF和展青霉素。

生产工艺对葡萄糖注射液分解产物5－HMF的影响

比较了两种葡萄糖注射液生产工艺对分解产物５－羟甲基糠醛（简称５－ＨＭＦ）含量的影响，用正交法考察了生产工艺中影响葡萄糖分解的主要因素。结果证实：在生产周期中受热时间长短，灭菌温度、时间，样品在消毒锅中放置的位置等均是影响葡萄糖分解产物５－ＨＭＦ多少的主要因素。

HPLC法测定清补平衡膏方中没食子酸、5-HMF和芍药苷的含量

目的：建立同时测定清补平衡膏方中没食子酸、5-HMF和芍药苷含量的高效液相色谱法。方法：采用Hibar ODS柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相梯度洗脱,流速为1.0 m L·min-1,检测波长为230 nm,柱温35℃,进样量10μL。结果：没食子酸在13.45~672.75μg·m L-1（r=0.999 4）范围内,5-HMF在10.76~537.9μg·m L-1（r=0.999 8）范围内,芍药苷在17.69~884.61μg·m L-1（r=0.999 8）范围内,对照品进样浓度和色谱峰峰面积线性关系良好,加样回收率分别为99.80%、96.94%和99.46%,RSD值分别为2.91%、2.93%和2.97%。结论：建立的高效液相色谱法简单易行,结果准确可靠,可有效地用于清补平衡膏方的质量控制。

浓缩苹果汁色值与5-HMF含量在贮存过程中的变化规律

以浓缩苹果汁为实验材料,研究不同贮存温度下浓缩苹果汁色值、5-HMF含量(5–羟甲基糠醛)的变化规律及其之间的关系.结果表明:在贮存过程中浓缩苹果汁的色值随贮存时间的延长而呈线性减小;在贮存过程中浓缩苹果汁的5-HMF含量随着贮存时间的延长而呈线性增加.随着贮存温度的升高,5-HMF含量变化速率加快.在贮存过程中浓缩苹果汁色值的变化与5-HMF含量密切相关,两者之间呈负相关.

正交实验法优选熟地黄中5-HMF的提取工艺

目的:以5-羟甲基糠醛(5-HMF)含量和熟地黄干膏收得率为指标,探讨熟地黄中5-HMF的提取工艺.方法:采用正交试验法考察加水量、提取时间、提取次数及醇沉浓度4个因素对5-HMF含量和干膏收得率的影响,并运用高效液相法测定5-HMF的含量.结果:通过对正交试验结果的极差分析,得出提取次数和提取时间两个因素对干膏收得率和含量影响最大,参考两种主要影响因素,最终确定8倍量水、提取3次、每次1.5h,700mL/L乙醇沉淀的提取工艺,并对该工艺进行三次重复性小试实验.5-HMF收得率可达58%以上.结论:通过对上述提取条件的重复性考察,该方法重复性好,5-HMF收得率稳定,为进一步中试实验提供了参考依据.

甘油果糖注射液中5-HMF限度的研究

本文对我国药典规定甘油果糖注射液主要降解产物5-HMF限度的不合理性进行探讨。

双波长分光光度法与吸收度减法技术联用测定甲硝唑葡萄糖注射液中5-HMF的含量

目的:测定甲硝唑葡萄糖注射液中5-HMF的含量,为5-HMF限量检查提供手段。方法:应用双波长分光光度法与吸收度减法技术,在284nm、320nm波长处直接测定。结果:通过双波长分光光度法与吸收度减法技术联用,不经分离消除了甲硝唑的吸收干扰,测得5-HMF的含量。结论:双波长分光光度法与吸收度减法技术联用测定甲硝唑葡萄糖注射液中5-HMF的含量,方法简单,结果准确,为甲硝唑葡萄糖注射液中5-HMF限量检查提供了手段。

巫溪大宁党参不同的炮制方法对5-HMF的含量影响

目的对5-羟甲基糠醛在大宁党参炮制研究中的现状进行系统的分析,为大宁党参炮制研究提供科学依据。方法对大宁党参炮制的炮制方式、辅料等因素进行改变,测定5-HMF含量,考察对5-羟甲基糠醛含量的影响。结果大宁党参经过炮制后产生5-羟甲基糠醛成分,其中蜜制产生的5-羟甲基糠醛含量最高。结论 5-羟甲基糠醛在炮制过程中产生,其作用和意义仍需进一步研究。

替硝唑葡萄糖注射液中5-HMF检测方法的建立

目的 建立替硝唑葡萄糖注射液中 5 -HMF检测方法。方法 用紫外分光光度法 ,根据其加和性 ,选择替硝唑在 2 84 .0nm的等吸收波长 ,测定替硝唑葡萄糖注射液中 5 -HMF ,并根据葡萄糖注射液中 5 -HMF的要求确定其检测限度。结果 替硝唑浓度为 4 0 μg/ml时 ,2 84 .0nm的等吸收波长为 347.5nm ,葡萄糖注射液在波长几无吸收 ,因此替硝唑葡萄糖注射液中 5 -HMF的吸收度为A =A2 84.0 -A3 4 7.5,并不得超过 0 .0 32。结论 该法操作简单 ,结果准确 ,适用于该制剂的质量控制。

ZnCl_2溶液中微波辅助SnCl_4催化纤维素制备5-HMF

将纤维素溶解在ZnCl_2溶液中,以SnCl_4为催化剂,微波下使纤维素降解成5-羟甲基糠醛(5-HMF)。实验考察了微波功率、纤维素的质量、ZnCl_2溶液浓度、反应时间及催化剂与纤维素物质的量比等对5-HMF产率的影响。结果表明,以SnCl_4为催化剂,在优化条件:1.0 g纤维素溶解在100 m L 70%ZnCl_2溶液中,微波功率为420 W,降解反应9 min,SnCl_4与纤维素物质的量比2∶1下,5-HMF的产率达到39.4%。

固体酸催化单糖制备5-羟甲基糠醛(5-HMF)的研究进展

固体酸近年来被广泛应用于有机合成、催化等领域,具有易于和产物分离、可回收、不腐蚀设备等优点。5-HMF是一种重要的有机中间体,可以作为合成新型高聚物、医药中间体、燃料的原材料,应用固体酸催化糖类生物质制备5-HMF是当前研究的热点之一。综述了固体酸催化单糖制备5-HMF的研究进展,并对固体酸催化单糖制备5-HMF存在的问题和未来的发展方向进行了总结和展望。

热加工食品中晚期糖基化终末产物和5-羟甲基糠醛的形成、检测与控制

食品加工过程中的美拉德反应有助于形成一些热诱导毒性产物,包括晚期糖基化终末产物(advanced glycation end products,AGEs)和5-羟甲基糠醛(5-hydroxymethylfurfural,5-HMF)。食源性AGEs在体内的积累和循环与糖尿病并发症的发生有关,同时可能诱发氧化应激、炎症和动脉粥样硬化。5-HMF的代谢物5-磺基氧甲基糠醛(5-sulfooxymethylfurfural,5-SMF)有潜在基因毒性和致癌性。如何控制热加工食品中这些危害物的形成已成为食品行业的关注焦点。本文从美拉德反应和焦糖化反应两条途径探究了AGEs和5-HMF的形成机理,并对近5年二者的检测方法进行了综述,阐述了各类方法的优缺点,以期为建立二者的通用检测方法奠定基础。在此基础上,从削减前体物质的供给、阻断中间体的转化,以及去除已经生成的AGEs和5-HMF这3个方面着手,综述了近年来相应所采用的抑制策略,以期为AGEs和5-HMF在食品中的控制及热加工食品质量与安全管理提供理论依据。

考察两种不同灭菌器对葡萄糖注射液中5—HMF含量的影响

葡萄糖注射液在生产及存放过程中,其分解产物5—羟甲基糖醛(5-HMF)的量在不断增加。由于它对人体的横纹肌及内脏均有损害,故中国药典规定对其限量检查。为控制其限量,提高产品质量,我院制剂室以全自动快速冷却灭菌器替代卧式蒸汽灭菌器对葡萄糖注射液进行灭菌,现将结果报道如下。 1 仪器及试药 UV-120-20分光光度计(日本岛津);pHS—3C型精密pH计(上海雷磁仪器厂);PLMQ—1.2Ⅱ快速冷却灭菌器(连云港千樱医疗设备有限公司);卧式蒸汽灭菌器。

Cu-Co催化剂选择性加氢醚化HMF制备2,5-二(甲氧基甲基)呋喃

生物质平台分子5-羟甲基糠醛(5-HMF)的高附加值转化利用是当前的研究热点.使用溶胶凝胶法制备加氢醚化双功能Cu-Co催化剂,在温和条件下实现了5-HMF加氢醚化到2,5-二(甲氧基甲基)呋喃(BMMF).在130℃,2 MPa H 2条件下反应2 h,得到最高85.9%的BMMF收率.双功能催化剂中Co 3O 4提供了路易斯酸酸性位点,同时还原得到的Cu 2O及Co 0提供了加氢氛围,最终实现了HMF一步加氢醚化制备BMMF.