5-羟基-6,7-二甲氧基黄酮抑制流感病毒诱导A549细胞炎症反应和铁死亡的作用及机制

目的 研究四方蒿中提取出的5-羟基-6,7-二甲氧基黄酮(5-HDF)对H1N1流感病毒引起的肺损伤的保护作用及潜在机制。方法 使用H1N1流感病毒感染A549细胞制作流感病毒感染模型,检测5-HDF的细胞毒性及其对感染病毒后的炎症和铁死亡相关指标及相关信号通路蛋白的影响。采用乙醇回流提取和硅胶色谱法从四方蒿中提取分离获得5-HDF,并采用NMR和MS鉴定其结构。采用MTT法检测不同浓度的5-HDF对A549细胞的毒性;H1N1流感病毒以0.1的感染复数感染A549细胞;采用流式细胞术检测5-HDF对感染H1N1流感病毒后A549细胞中TRAIL和IL-8表达水平的影响;Western blotting检测phospho-p38 MAPK(Thr180/Tyr182)、phospho-NF-κB p65(Ser536)、cleaved caspase3、cleaved PARP、SLC7A11、GPX4等炎症、细胞凋亡和铁死亡相关蛋白表达的水平。通过鼻腔接种50μL半数致死量(LD50)的H1N1流感病毒液复制小鼠H1N1流感病毒感染模型,以体质量变化率、肺解剖结果、肺组织病理形态变化为指标,考察5-HDF(30 mg/kg、60 mg/kg)体内抗H1N1流感病毒的作用。结果 MTT结果显示5-HDF在0~200μg/mL对A549细胞没有明显的细胞毒性(P>0.05)。流式细胞术和Western blotting结果显示,5-HDF能抑制H1N1流感病毒感染的A549细胞中phospho-NF-κB p65和phospho-p38 MAPK的活化,降低促炎因子IL-8的表达,且5-HDF能上调SLC7A11和GPX4等抗铁死亡相关蛋白表达的水平,并抑制凋亡标志物cleaved caspase3和cleaved PARP及凋亡因子TRAIL的表达(P<0.05)。5-HDF灌胃给药7 d,可提高H1N1流感病毒感染导致的小鼠体质量降低,降低因感染H1N1流感病毒而异常升高的肺指数,并减轻其肺组织病变程度(P<0.05)。结论 本研究推测5-HDF具有一定的抗小鼠H1N1流感病毒感染作用,可能通过增加SLC7A11和GPX4的表达并抑制phospho-NF-κB p65和phospho-p38 MAPK的活化,降低cleaved caspase3和cleaved PARP的表达,来减弱流感病毒H1N1感染A549细胞所引起的铁死亡、炎症反应和细胞凋亡。

基于网络药理学探讨新疆鼠尾草6,7-去氢罗列酮改善心肌缺血作用机制

目的运用网络药理学的方法探讨新疆鼠尾草6,7-去氢罗列酮改善心肌缺血的作用机制。方法通过Swiss target prediction数据库预测6,7-去氢罗列酮作用靶点;检索GeneCards、DrugBank、OMIM数据库获取心肌缺血相关靶点;化合物-疾病靶点取交集,将交集靶点导入String数据库并利用Cytoscape软件构建PPI网络;通过Metascape数据库进行GO功能和KEGG通路富集分析;最后通过Autodock进行分子对接验证。结果6,7-去氢罗列酮作用相关靶点100个,心肌缺血靶点1817个,两者交集靶点共计48个;富集结果表明,6,7-去氢罗列酮可能通过BCL2、BCL2L1、MAPK8等靶点,作用于脂质和动脉粥样硬化、细胞凋亡、PI3K-Akt等信号通路改善心肌缺血;分子对接验证大部分靶点与成分结合性高。结论通过网络药理学的方法揭示了6,7-去氢罗列酮多靶点、多通路改善心肌缺血的作用机制。

Friedlnder反应合成2-(2-羟基苯基)-6,7-亚甲二氧基喹啉及其衍生物

以 6 氨基胡椒醛为原料 ,与邻羟基苯乙酮 (2a) ,4 氯 2 羟基苯乙酮 (2b)发生Friedl nder缩合反应 ,得到新的喹啉衍生物 2 (2 羟基苯基 ) 6 ,7 亚甲二氧基喹啉 (3a)和 2 (5 氯 2 羟基苯基 ) 6 ,7 亚甲二氧基喹啉 (3b) .新的喹啉衍生物 3a～ 3b分别经IR红外光谱 ,1 HNMR核磁共振谱 ,MS质谱 。

2-(E-2-苯乙烯基)-6,7-亚甲二氧基喹啉的合成

以苯甲醛为原料在碱性条件下与丙酮缩合得苄叉丙酮 ,再与 6-氨基胡椒醛发生 Friedlander缩合反应 ,得到新的目标产物 2 -( E-2 -苯乙烯基 ) -6,7-亚甲二氧基喹啉 ,产率 84 %

2-(2-羟苯基)-6,7-亚甲二氧基喹啉及其衍生物的合成

以苯酚和对氯苯酚为原料 ,经酯化为乙酸苯酯 2 a和对氯乙酸苯酯 2 b;2 a和 2 b再经路易斯酸 Al-Cl3催化 ,异构化为邻羟基苯乙酮 3 a和 5—氯— 2—羟基苯乙酮 3 b;3 a和 3 b再与 6-氨基胡椒醛发生 Friel a··nder缩合为 2— ( 2—羟苯基 )— 6,7—亚甲二氧基喹啉 4a及 2— ( 5—氯— 2—羟苯基 )— 6,7—亚甲二氧基喹啉 4b。 4a和 4b为未见文献报导之化合物。其结构经 IR红外光谱 ,1 HNMR核磁共振谱 ,MS质谱 。

6,7-二甲氧基香豆素的合成工艺改进

对苯醌与乙酸酐经1,4-加成生成1,2,4-苯三酚三乙酸酯,然后与苹果酸反应经水解、环合反应得6,7-二羟基香豆素,再经甲基化得到6,7-二甲氧基香豆素,总收率为74.4%,整个过程反应条件温和,操作方便,适合工业生产的要求,对产品结构进行了IR和1HNMR表征。

5,3′,4′-三羟基-6,7-二甲氧基黄酮的另法全合成

从两个易得原料 3 ,4,5 三甲氧基苯甲酸和 3 ,4 二羟基苯甲醛出发 ,分别合成出 2 羟基 4,5 ,6 三甲氧基苯乙酮和 3 ,4 二苄氧基苯甲酰氯 ,随后采用相转移催化法成功地全合成了 5 ,3′ ,4′ 三羟基 6,7 二甲氧基黄酮 .

RP-HPLC双波长切换法同时测定天舒胶囊中天麻素、阿魏酸和6,7-二羟基藁本内酯的含量

目的建立反相高效液相色谱-双波长切换法同时测定天舒胶囊中天麻素、阿魏酸和6,7-二羟基藁本内酯的含量。方法采用Kromasil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-体积分数0.1%乙酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL.min-1,检测波长为270 nm(天麻素)、320 nm(阿魏酸和6,7-二羟基藁本内酯),柱温35℃。结果在15 min内天舒胶囊中天麻素、阿魏酸和6,7-二羟基藁本内酯质量浓度分别在30.50～305.0 mg.L-1(r=0.999 2)、34.96～349.6 mg.L-1(r=0.999 7)和46.54～465.4 mg.L-1(r=0.999 4)内与峰面积线性关系良好;平均加样回收率分别为98.8%、98.7%和98.2%,RSD分别为1.9%、1.2%和2.1%。结论本方法操作简便,结果准确,与《中华人民共和国药典》所述方法相比,增加了含量测定指标,提高了全面控制天舒胶囊质量的水平。

紫外分光光度法测定新疆鼠尾草中6,7-去氢罗列酮的含量

目的 :测定新疆鼠尾草中 6 ,7 去氢罗列酮的含量。方法 :采用薄层分离紫外分光光度法测定。结果 :6 ,7 去氢罗列酮的含量为 0 .37% ,RSD为 2 .6 % ,平均回收率为 98.3%。结论 :本方法简单 。

HPLC法测定新疆鼠尾草各部位6,7-去氢罗列酮的含量

目的:了解二萜类有效成分中 6 ,7-去氢罗列酮在新疆鼠尾草各部位的含量。 方法 :采用 HPL C测定6 ,7-去氢罗列酮在新疆鼠尾草各部位的含量。结果:确定了 6 ,7-去氢罗列酮在新疆鼠尾草各部位的含量。 结论 :首次利用 HPL C法明确了 6 ,7-去氢罗列酮在新疆鼠尾草各部位的含量分布情况。测定平均回收率 99.8% ,RSD=0 .92 %。

6,7-二甲氧基香豆素的合成

首先由2,4,5-三甲氧基苯甲醛与三溴化硼经脱甲基化反应生成4,5-二甲氧基水杨醛,收率约64%;然后在碱性条件下与丙二酸二乙酯经Knoevenagel缩合反应生成4,5-二甲氧基-2-羟基苯丙烯酸乙酯,收率约79%;最后与二氯亚砜经环合反应得到6,7-二甲氧基香豆素,收率可达51%,并对各步产物通过1HNMR和MS等进行表征,结果表明,各步反应中均得到了目标产物。

反相高效液相色谱法测定大鼠血浆中6,7-二甲氧基香豆素含量及其在药动学中的应用

目的 :建立大鼠血浆中 6 ,7 二甲氧基香豆素反相高效液相色谱紫外检测方法 ,并研究其在大鼠体内的药动学过程。方法 :血浆样品经乙腈沉淀蛋白 ,上清液在 5 0℃下经氮气流吹干 ,残渣加入流动相 10 0 μL溶解后 ,离心 ,直接进样。流动相为甲醇 1%乙酸水溶液 四氢呋喃 (30∶6 3∶7)。检测波长为 340nm。大鼠经灌胃予 6 ,7 二甲氧基香豆素后 ,所得血药浓度数据用Topfit程序拟合并估算药动学参数。结果 :线性范围为 0 0 2 5～ 2 5 μg·mL-1。经非房室模型计算 ,6 ,7 二甲氧基香豆素主要药动学参数T1/ 2 为 0 7h ,AUC0→t为 16 5 0 6ng·h·mL-1,AUC0→∞ 为 172 8 9ng·h·mL-1,CLtot为 5 4 0L·h-1,用Topfit程序拟合 ,其体内过程符合二室开放模型。结论 :本法操作简便 ,可应用于大鼠血浆中 6 ,7 二甲氧基香豆素浓度的测定及其药动学研究。

6,7-二氟-4-羟基-2-甲氧甲硫基-3-喹啉羧酸乙酯的合成

3,4-二氟苯胺在三乙胺存在下与二硫化碳生成芳基取代的二硫代氨基甲酸后与氯甲酸乙酯反应得到3,4-二氟苯基异硫氰酸酯,先后与由丙二酸二乙酯在无机碱中成的盐和氯甲基甲醚反应后加热环合,得到氟喹诺酮类抗菌剂普卢利沙星的中间体6,7-二氟-4-羟基-2-甲氧甲硫基-3-喹啉羧酸乙酯,总收率85.7%。

6,7-二氢-5H-环戊烷并[b]吡啶的合成

以“一勺烩”方法制备中间体O 烯丙基 环戊酮肟 ,无需分离纯化化合物O 烯丙基羟胺 ,热解反应以氧气代替空气 ,制得 6 ,7 二氢 5H 环戊烷并 [b]吡啶 ,反应总收率为 35 %。

3-烯丙基-2,4-二氯-6,7-二甲氧基喹啉的合成研究

以3,4-二甲氧基苯胺和丙二酸为原料,在三氯氧磷作用下合成2,4-二氯-6,7-二甲氧基喹啉,2,4-二氯-6,7-二甲氧基喹啉在二异丙基氨基锂作用下与3-溴丙烯发生SNAr反应得到3-烯丙基-2,4-二氯-6,7-二甲氧基喹啉. 2步反应总收率为66. 1%.产物结构经~1H NMR和ESI-MS确证.通过对反应条件研究确定最佳反应工艺,在该最佳反应工艺条件下2,4-二氯-6,7-二甲氧基-3-(2-甲基烯丙基)喹啉的合成收率为77. 5%. 3-烯丙基-2,4-二氯-6,7-二甲氧基喹啉经过还原、氧化、取代反应得到3-(3-叔丁基二甲基硅氧丙基)-2,4-二氯-6,7-二甲氧基喹啉,3步反应总收率为42. 8%.

6,7-二氢-5H-环戊烷并[b]吡啶的合成进展

6,7 二氢 5H 环戊烷并[b]吡啶具有抗溃疡、抗癌等重要生理活性,是合成头孢匹罗的重要原料。按热重排反应、催化脱水脱氢反应、Friedlander缩合反应、Grignard试剂环合反应、Diels Alder反应和1,5 二羰基化合物的环合等合成6,7 二氢 5H 环戊烷并[b]吡啶的反应类型进行分类,首次对其合成进展进行了全面的综述,认为以吡啶衍生物及1,5 二羰基化合物为原料合成6,7 二氢 5H 环戊烷并[b]吡啶的方法值得关注。

6,7-二氢-5H-环戊烯并[b]吡啶的制备

1-氨基-2-氰基环戊烯经乙酰化、闭环和氯化反应制得4-氨基-2-氯-6,7-二氢-5H-环戊烯并[b]吡啶,再经Sandmeyer溴化和钯炭催化氢化脱卤制得6,7-二氢-5H-环戊烯并[b]吡啶,总收率为61%。

Friedlnder反应合成3-甲基-6,7-二甲氧基-2-喹啉甲酸

采用从天然产物中的提取物藜芦醛为起始原料,经过硝化、还原得到邻氨基藜芦醛,再在乙醇钠的催化下,与2-丁酮酸发生Friedlander缩合反应,合成了新化合物3-甲基-6,7-二甲氧基-2-喹啉甲酸。通过1HNMR、IR、UV、MS表征了新化合物的结构。

6,7-去氢罗列酮的NMR谱学研究

目的:确定 6 ,7-去氢罗列酮 1 H- NMR和 1 3 C- NMR图谱中碳氢的信号归属。 方法:采用 HMQC、1 H- 1HCOSY、NOESY等核磁共振技术进行确定。 结果:确定了 6 ,7-去氢罗列酮中所有碳氢的信号归属。 结论:第 1次利用 2 D- NMR技术完整地确定了 6 ,7-去氢罗列酮中所有碳氢的信号归属。