贵州地区急性淋巴细胞白血病儿童TPMT、NUDT15基因多态性与6-MP耐受性分析

目的观察贵州地区ALL儿童TPMT、NUDT15基因多态性,探讨其与6-MP耐受性的关系。方法收集贵阳市儿童医院血液科住院的贵州地区ALL儿童。Sanger法检测患者NUDT15c.415C>T和TPMT*2、TPMT*3A、TPMT*3B、TPMT*3C基因型。所有ALL儿童均按CCLG-2008方案化疗,每周1次监测血常规及肝肾功能。根据2016新编WHO化疗药物毒性反应分度标准,出现Ⅲ~Ⅳ度与6-MP相关的毒性反应,称为6-MP不耐受(除外感染、其他药物影响)。分析TPMT、NUDT15基因多态性与6-MP不耐受的相关性。结果共纳入患者60例,检测到TPMT突变(中间代谢型)3例(5%),正常代谢型57例(95%)。NUDT15基因CT型12例(20%),TT型1例(1.7%),CC型(野生型)47例(78.3%)。NUDT15基因突变率21.7%(13/60)显著高于TPMT基因突变率5%(3/60),差异有统计学意义(P=0.007)。TPMT突变型3例均发生6-MP不耐受(100%),NUDT15突变型13例中11例发生6-MP不耐受(84.6%)。结论TPMT、NUDT15基因突变与6-MP不耐受相关(P<0.05),联合检测TPMT、NUDT15基因对调整6-MP使用,减少6-MP不良反应提供依据。

硫嘌呤甲基转移酶遗传多态性检测在6-MP个体化治疗中的意义

目的:研究硫嘌呤甲基转移酶活性和基因型检测对6-巯基嘌呤(6-MP)的个体化治疗的意义。方法:94例口服6-MP维持治疗的白血病患者,19例口服6-Mp后出现血液系统危象的为观察组,同时服用6-MP没有出现血液系统损害的75患者为对照组,采用高效液相色谱法测定硫嘌呤甲基转移酶(TPMT)活性,等位基因特异性PCR和限制性片段长度多态性(RFLP)的方法检测TPMT*2、TPMT*3A、TPMT*3B和TPMT*3C的等位基因频率。通过临床白细胞记数和骨髓象检查及临床表现判定巯嘌呤的疗效和不良反应。结果:观察组TPMT活性是(6.1±2.1)U.mL-1pRBCs显著低于对照组(15.3±2.3)U.mL-1pRBCs,而观察组的基因突变率10.7%高于对照组1.2%。结论:TPMT活性低下和/或TPMT基因突变型个体,在服用标准剂量的巯嘌呤后,发生不良反应的危险较高,应及时发现此类患者并积极调整剂量实现安全有效的治疗。

抗癌药物6-MP对小白鼠染色质小体的影响和EMX效果

将5周龄的DDY系小白鼠40只,分对照、6-巯基嘌呤腹腔注射(6-MP组)、6-MP+500倍稀释的EMX饮水(EMX饮水组)、6-MP+EMX腹腔注射(EMX注射组)4个组,每组10只。试验8周后断头屠杀,取左侧大腿骨骨髓制作涂片,分别用姬姆萨和吖啶橙(AO)荧光染色,用普通显微镜和荧光显微镜观察1 000个多染性红细胞(PCE),记录其中出现染色质小体的比例(MNPCE/1000PCE)。结果表明:抗癌药物6-MP组和对照组之间的染色质小体数差异极显著(P<0.01),而且EMX饮水和EMX注射能显著降低染色质小体的出现率(P<0.01)。说明EMX能有效减少抗癌药物引起的染色体异常。姬姆萨染色和吖啶橙(AO)荧光染色结果呈正高度相关(r=0.999),姬姆萨染色可以替代吖啶橙(AO)荧光染色做染色质小体试验的测定。

EMX缓解6-MP对小鼠毒副作用的机理初探

5周龄的DDY系小鼠40只,分无处理的对照组、抗癌药物6-巯基嘌呤腹腔注射组(6-MP组)、6-MP+500倍稀释的EMX饮水组(EMX饮水组)、6-MP+EMX腹腔注射组(EMX注射组)4个组,每组10只。试验期间定期进行体重测定。8周后处死小鼠,测定胸腺脾脏系数、骨髓DNA含量、肝脏组织过氧化脂质含量。结果表明,6-MP能引起脱毛、体重增加率下降、脾脏系数下降、肝脏损伤等副作用,EMX能有效抑制抗癌药物副作用,增强机体自身免疫的能力。

肺炎支原体肺炎患儿外周血PCT、IL-6水平与MP抗体滴度、MP-DNA的相关性分析

目的探究肺炎支原体肺炎(MPP)患儿外周血降钙素原(PCT)和白细胞介素-6(IL-6)水平与肺炎支原体(MP)抗体滴度、肺炎支原体DNA(MP-DNA)的相关性。方法选取2023年3月至2024年3月武汉市第三医院收治的97例MPP患儿为研究对象,根据病情严重程度将其分为轻症组(n=63)和重症组(n=34),根据血清MP抗体滴度不同分为1∶160亚组(n=19)、1∶320亚组(n=56)和≥1∶640亚组(n=22)。比较轻症组和重症组患儿临床肺部感染评分(CPIS)、外周血PCT和IL-6水平、血清MP抗体滴度及MP-DNA阳性率,分析外周血PCT和IL-6水平与血清MP抗体滴度、MP-DNA阳性率的相关性。结果重症组患儿CPIS评分、外周血PCT水平、IL-6水平和MP-DNA阳性率均高于轻症组(P<0.05);两组患儿血清MP抗体滴度分布比较,差异有统计学意义(P<0.05);不同血清MP抗体滴度亚组患儿外周血PCT、IL-6水平及MP-DNA阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.05),外周血PCT、IL-6水平随血清MP抗体滴度增加而升高(P<0.05),血清MP抗体滴度1∶160亚组的MP-DNA阳性率低于MP抗体滴度1∶320亚组和≥1∶640亚组(P<0.05);Spearman分析结果显示,MPP患儿外周血PCT和IL-6水平、MPP重症、CPIS评分与血清MP抗体滴度、MP-DNA阳性结果均呈正相关(P<0.05)。结论MPP患儿外周血PCT和IL-6水平随病情严重程度而升高,与血清MP抗体滴度和MP-DNA阳性结果呈正相关,二者对MPP患儿病情评估具有一定参考价值。

UPLC-MS/MS法测定比格犬血浆中6-巯基嘌呤含量不确定度评定

目的评定用超高效液相质谱联用(UPLC-MS/MS)法测定比格犬中血浆6-巯基嘌呤(6-MP)的不确定度。方法分析用UPLC-MS/MS测定比格犬血浆6-MP浓度中不确定度的来源并进行合成。结果比格犬血浆中6-MP低浓度(15 ng·mL^(-1))和高浓度(375 ng·mL^(-1))的扩展不确定度分别为1.04 ng·mL^(-1)和30.14 ng·mL^(-1)(P=95%,k=2)。结论UPLC-MS/MS法测定比格犬血浆中6-MP浓度的不确定度,在低浓度时主要由曲线拟合、回收率及基质效应引入,高浓度时主要来源于回收率、曲线拟合和生物样本配置。

电子传输层锂盐掺杂对Cs_(2)AgBiBr_(6)双钙钛矿太阳电池性能的影响研究

电子传输层是影响钙钛矿太阳电池性能的重要因素。常用的介孔二氧化钛(mp-TiO_(2))电子传输层存在较多表面缺陷,电荷提取效率较低,复合几率高。利用双(三氟甲烷磺酰)亚胺锂(LiTFSI)对mp-TiO_(2)进行锂盐掺杂,并将其应用于Cs_(2)AgBiBr_(6)双钙钛矿太阳电池(下文简称为“Cs_(2)AgBiBr_(6)太阳电池”)中,以研究锂盐掺杂对Cs_(2)AgBiBr_(6)薄膜和Cs_(2)AgBiBr_(6)太阳电池性能的影响。研究结果表明:1)锂盐掺杂改善了Cs_(2)AgBiBr_(6)薄膜的结晶度,降低了其缺陷态密度,促进了电子传输层/钙钛矿界面处的电荷转移;2)掺杂的锂盐最优质量浓度为10 mg/mL,在该掺杂浓度下制备的Cs_(2)AgBiBr_(6)太阳电池的短路电流密度从1.92 mA/cm^(2)提升到2.43 mA/cm^(2),填充因子从58.87%增加到68.05%,光电转换效率从1.19%提升到1.66%;3)在空气环境条件下放置66天后,未封装的Cs_(2)AgBiBr_(6)太阳电池的光电转换效率仍可保持初始值的85%。

TR3受体激动剂6-mercaptopurine对糖尿病ApoE-/-小鼠NF-κB p65/CylinD1通路影响及其与抗动脉硬化关系

目的:观察TR3受体激动剂(6-mercaptopurine,6-MP)对链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导的载脂蛋白E(apolipoprotein E,ApoE-/-)敲除糖尿病小鼠糖脂代谢及NF-κBp65/CylinD1通路的影响及其与抗动脉硬化的关系,探讨TR3受体在改善糖尿病动脉粥样硬化可能机制。方法:40只雄性ApoE^-/-小鼠随机分为4组:ApoE^-/-组、STZ-ApoE^-/-组、STZ-ApoE^-/-+6-MP5(5mg·kg^-1·d^-1)组、STZ-ApoE^-/-+6-MP10(10mg·kg^-1·d^-1)组,每组10只;6-MP腹腔注射法给药,每天1次,连续8周;STZ60mg/kg腹腔注射ApoE^-/-小鼠建立糖尿病动脉粥样硬化模型,血糖试纸法测血糖水平;酶法或匀相法测血脂水平;蛋白免疫印迹试验(Western-blotting)测胸主动脉组织NF-κBp65/CylinD1蛋白水平;油红O染色观察胸主动脉内膜动脉脂质沉积;HE染色测胸主动脉内膜粥样斑块面积。结果:与ApoE^-/-组相比,STZ-ApoE^-/-组血糖及血清TG、TCHO、LDL-C均显著增高(P<0.05);TR3受体激动剂6-MP呈剂量依赖性降低糖尿病ApoE^-/-小鼠血糖、血脂水平,与STZ-ApoE^-/-组相比,STZ-ApoE^-/-+6-MP5组血糖、TG、LDL-C、TC均显著降低(P<0.05),与ApoE^-/-组相比,STZ-ApoE^-/-组胸主动脉NF-κB p65、CylinD1蛋白表达水平均显著增加(P<0.05);6-MP呈剂量依赖性降低糖尿病ApoE^-/-小鼠胸主动脉NF-κB p65/CylinD1蛋白表达,STZ-ApoE^-/-+6-MP5组NF-κBp65/CylinD1蛋白表达水平均明显低于STZ-ApoE^-/-组(P<0.05);STZ-ApoE^-/-+6-MP10组与STZ-ApoE^-/-+6-MP5组之间胸主动脉NF-κBp65/CylinD1蛋白表达水平差异均有统计学意义(P<0.05)。油红O染色显示:TR3受体激动剂6-MP可呈剂量依赖性抑制STZ-ApoE^-/-小鼠胸主动脉内膜脂质沉积;HE染色显示:TR3受体激动剂6-MP可呈剂量依赖性降低STZ-ApoE^-/-小鼠胸主动脉内膜斑块面积,减少斑块内部有空洞(脂质)形成,抑制斑块周围组织及斑块基底部平滑肌层增生,与STZ-ApoE^-/-组相比,STZ-ApoE^-/-+6-MP5组胸主动脉内膜斑块面积明显减小(P<0.05),STZ-ApoE^-/-6-MP10组斑块面积进一步减小(P<0.01)。结论:TR3激动剂6-MP可明显降低糖尿病ApoE^-/-小鼠动脉粥样硬化的形成,其机制可能与其改善糖脂代谢,抑制NF-κBp65/CylinD1信号通路有关。

6-巯基嘌呤滤纸基质室温磷光光谱研究

本文建立了 6 -巯基嘌呤 (6 - MP)的滤纸基质室温磷光 (PS- RTP)检测法 ,实验条件已经最佳化。研究表明 ,6 - MP的 PS- RTP光谱的最大激发波长 λex与最大发射波长 λem分别为 312 nm和 4 5 5 nm。30多种无机盐类重原子微扰剂对 6 - MP的 RTP影响的研究结果表明 ,Cd盐可增强 RTP,其中 Cd(OAc) 2 重原子效应最为显著。酸度条件对 6 - MP的 PS- RTP有较大影响 ,在 p H为 7— 8时 RTP发射较强。此外 ,本文也对影响 6 - MP的 PS- RTP的固体基质类型、重原子浓度、干燥条件等进行了详细的研究。实验表明 ,方法的线性范围为 4 .2 6— 10 6 6 ng/spot,检出限为 3.31ng/spot,相关系数为 0 .997,相对标准偏差为 4 .0 7% ,回收率为 99.6 %— 10 0 .5 %。该方法简便、快速、灵敏 ,应用于商业药片的分析 ,结果令人满意。

6-巯基嘌呤结肠黏附缓释微丸的处方筛选及体外释放的研究

目的:制备6-巯基嘌呤结肠黏附缓释微丸,并对释药特性进行研究。方法:以羟丙甲基纤维素K4M和卡波姆为黏附性骨架材料,乳糖为赋形剂。采用湿法制粒包衣锅滚圆法制备载药微丸,并进行Eud-ragit S100包衣。采用正交试验设计进行处方筛选,确定生物黏附材料HPMC、卡波姆的用量及配比与制剂体外释放度的关系。结果:所得微丸的制备工艺简单,微丸大小均匀,能达到缓释12 h的试验设计要求。结论:HPMC、卡波姆的用量及配比对释药速率均有较大影响。优选处方微丸的释药特性符合设计要求。

一种简易检测人红细胞中6-硫鸟嘌呤浓度的HPLC法

目的:建立一种简易的反相高效液相色谱法检测人红细胞中6-硫鸟嘌呤的浓度。方法:以焦性没食子酸为内标,用70％高氯酸沉淀红细胞裂解液中的蛋白质,上清液在100℃水浴45min后,用HPLC分析。色谱柱为Hypersil BDS C_(18),流动相为水-乙腈-三乙胺(磷酸调至pH3.2)(99:0.8:0.2),流速为1.0mL·min^(-1),紫外检测波长为340nm,进样量为20μL。结果:6-硫鸟嘌呤最低检测限为0.02 mg·L^(-1)(S/N=3),线性范围在0.025～1mg·L^(-1),标准曲线回归方程Y=0.1085X+0.004 11(r=0.9999),平均回收率为96.0％～105.5％。结论:本测定方法简便快速,可满足6-硫鸟嘌呤和6-骁基嘌呤药代动力学研究和临床监测的要求。

巯基嘌呤甲基转移酶基因多态性与急性淋巴细胞白血病6-巯基嘌呤化疗不良反应关系的Meta分析

目的 ：探讨巯基嘌呤甲基转移酶（thiopurine methyltransferase,TPMT）基因多态性与急性淋巴细胞白血病（acute lymphoblastic leukemia,ALL）6-巯基嘌呤（6-mercaptopurine,6-MP）化疗时不良反应的关系。方法：检索ALL不同TPMT基因多态性患者6-MP化疗不良反应的人数为效应指标的相关文献,选择符合入选标准的文献,应用Stata11.0软件对研究结果进行异质性检验和效应值合并,并进行敏感性分析和偏倚评估。结果：纳入TPMT基因多态性与ALL不良反应的文献共5篇,共计病例426例。白细胞减少与TPMT基因多态性关系固定效应模型OR=4.55,95%CI：1.92~10.80;肝脏损害与TPMT基因多态性关系固定效应模型OR=2.63,95%CI：1.40~4.93。结论：TPMT基因多态性与6-MP治疗所引起的白细胞减少、肝脏损害等不良反应显著相关,更可靠的结论尚需大样本进行进一步研究。

旋转铂盘电极上Cu(phen)_2^(2+)与6-巯基嘌呤的相互作用

在Tris-NaC1*(pH=7.2)缓冲溶液中,应用循环伏安法,微分脉冲伏安法、旋转圆盘电极实验、交流阻抗法及其数据模拟等技术研究了Cu(phen)2+25(phcn=1.10-邻菲咯啉)与6-巯基嘌呤(6-MP)的相互作用.结果显示.Cu(phen)2+2MP与6-MP无论在扩散控制过程或电化学控制过程都发生了相互作用.Cu(phen)2+2及其与6-MP的作用产物于铂电极上均呈现一对氧化还原峰,但后者呈现的氧化还原峰负移.峰电流减小.交流阻抗结果显示,无论6-MP存在与否,Cu(phen)2+2在交流阻抗谱上均呈现两个清晰的电容弧,但当6-MP存在时,电化学反应电阻和电化学吸脱附电阻均增大.Cu(phen)2+2在不同转速下的阻抗拟合结果显示.随转速增大.电化学反应电阻和电化学吸脱附电阻均减小.双电层电容呈增大趋势,而吸脱附电容呈减小趋势:当6-MP存在时.仍然呈现此变化规律.

反相高效液相色谱法测定红细胞中6-巯嘌呤代谢产物的浓度

目的 :研究急淋白血病患儿红细胞内 6 -MP 3种代谢产物的含量情况。方法 :应用反相高效液相色谱技术 ,采用外标法 ,样品经乙酸苯汞加合物提取 ,色谱柱为DupondC18(10 μm ,4 6mm× 2 5 0mm) ,柱温 15℃～ 2 0℃ ,流动相为甲醇 -水 (5∶95 ) ,流速 0 9mL·min-1,检测波长 330和 30 0nm。结果 :红细胞内 6 -TGN、 6 -TIMP、 6 -MeMP的浓度在 5～ 2 0 0 0ng/ 8× 10 8红细胞范围内线性关系良好 ,rs=0 885 5～ 0 9871,天内RSD为0 2 %～ 1 2 % ,天间RSD为 1 1%～ 2 1%。结论 :本方法简便、快速、准确 ,适用于 6

甲基强的松龙、环磷酰胺、抗IL-6单抗体外诱导SLE患者血中淋巴细胞凋亡的研究

目的探讨甲基强的松龙(MP)、环磷酰胺(CTX)及抗IL-6单抗(mAb)对系统性红斑狼疮(SLE)患者血中淋巴细胞凋亡的影响。方法通过将MP、CTX和抗IL-6 mAb分别与活动期SLE患者外周血淋巴细胞共同培养不同时间,利用流式细胞仪检查各时间点淋巴细胞的凋亡情况。结果与健康对照组比较,MP具有明显诱导SLE患者血中淋巴细胞凋亡的作用,CTX除此作用外,尚可引起继发性坏死淋巴细胞的增加;抗IL-6mAb诱导淋巴细胞凋亡的作用与CTX无差异,但无引起继发性坏死淋巴细胞增加的作用。结论MP,CTX及抗IL-6mAb体外均可诱导SLE患者血中淋巴细胞凋亡,对探讨SLE新的治疗方法具有一定的意义。

催化动力学库仑滴定法测定6-巯基嘌呤

本文首次报道用催化动力学和库仑分析相结合的方法测定抗癌药物乐疾宁中的主要成份6-巯基嘌呤(6-MP)。此法基于测定与催化剂(或称诱导剂)6-MP浓度成正比的库仑池反应诱导期(从接通电源到指示电流突然增大到指定值的毫库仑数),从而求出催化剂6-MP的量。本法具有库仑分析法与催化动力学分析法的优点即准确、灵敏、快迅和简便。方法线性范围为1.47×10^(-7)～5.29×10^(-6)mol/L。应用于药物乐疾宁中6-MP的测定,回收率为95%～103%,结果满意。

肺炎支原体肺炎患儿血清hs-CRP、IL-6、IL-8及肺炎支原体DNA检测的临床意义

目的:通过检测肺炎支原体肺炎患儿血清hs-CRP、IL-6、IL-8及MP-DNA含量,探讨其水平变化对肺炎支原体肺炎患儿的临床意义。方法:选取2013年1月至2014年12月来我院进行诊治并确诊为肺炎支原体肺炎的患儿47例作为观察组,以及同期来我院进行体检的健康儿童40例作为对照组,比较观察组患儿与对照组儿童血清hs-CRP、IL-6、IL-8及MPDNA水平。结果:(1)治疗前观察组患儿血清hs-CRP、IL-6、IL-8及MP-DNA水平均显著高于对照组儿童,差异具有统计学意义(P<0.05);治疗后观察组患儿血清hs-CRP、IL-6、IL-8及MP-DNA水平均明显降低,与同组治疗前相比,差异具有统计学意义(P<0.05);(2)治疗前观察组轻症和重症患儿血清hs-CRP、IL-6、IL-8及MP-DNA水平均明显高于对照组,变化具有统计学意义(P<0.05);重症患儿血清hs-CRP、IL-6、IL-8及MP-DNA水平明显高于轻症患儿,两组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:血清hs-CRP、IL-6、IL-8及MP-DNA水平在肺炎支原体肺炎的发生、发展过程中具有重要的作用,是诊断肺炎支原体肺炎的重要指标,其检测结果对诊断、治疗以及预后都具有较高的实用价值和重要的临床意义。

MP-IgM、YKL-40、APOC1和IL-6在儿童支原体肺炎治疗及预后中的意义

目的探讨肺炎支原体抗体(mycoplasma pneumoniae immunoglobulin M,MP-IgM)、人软骨糖蛋白39(human cartilage glycoprotein 39,YKL-40)、载脂蛋白C1(apolipoprotein C-I,APOC1)和白细胞介素-6(interleukin 6,IL-6)在儿童支原体肺炎治疗及预后中的意义。方法选取2017年1月至2017年12月本院确诊的80例儿童支原体肺炎患儿为观察组给予对症治疗,选取同期健康体检儿童40例为对照组。分别检测两组儿童外周静脉血中MP-IgM、YKL-40、APOC1和IL-6表达水平。结果与对照组相比,观察组患儿血清YKL-40、APOC1和IL-6表达水平显著升高,血清MP-IgM呈明显阳性;观察组血清YKL-40、APOC1和IL-6表达水平治疗后显著降低,血清MP-IgM阳性(P <0.05)。儿童支原体肺炎血清YKL-40、APOC1和IL-6水平,MP-IgM阳性率与疾病严重程度存在显著的正相关关系,P<0.05。经ROC分析可知,MP-IgM、YKL-40、APOC1和IL-6这4项生物学标志物并联试验灵敏度为92.00%,串联试验特异性为100.00%,显著大于各单项生物学标志物检测(P<0.05)。与对照组相比,观察组患儿FEV_1/FVC(%)及FEV_1%预计值显著降低(P<0.05)。与治疗前相比,观察组患儿治疗后FEV_1/FVC(%)及FEV_1%预计值显著升高(P<0.05)。儿童肺炎支原体患儿YKL-40、APOC1和IL-6水平,MP-IgM阳性率与患儿肺功能存在显著的负相关关系,P<0.05。结论儿童支原体肺炎患儿血清MP-IgM、YKL-40、APOC1和IL-6表达水平异常升高;监测患儿血清MP-IgM、YKL-40、APOC1和IL-6水平变化对于辅助诊断和评价儿童支原体肺炎的病情程度和治疗具有一定的临床意义,值得推广研究。

严重不耐受巯嘌呤的急性淋巴细胞白血病患儿TPMT基因序列分析

本研究分析严重不耐受巯嘌呤(6-MP)的急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿巯嘌呤甲基转移酶(TPMT)基因序列,以探讨ALL儿童6-MP耐受性差异的原因,为更安全合理地应用6-MP提供依据。对2004-10-1-2007-9-30在我院规范应用BCH-2003-ALL化疗方案的ALL儿童,按NCI-CTC V2.0评价药物不良反应。分析处于6-MP维持化疗期,出现3-4度不良反应(即严重不耐受)ALL患儿的TPMT基因序列。为保证测序的准确性,将TPMT基因(NM_000367)编码区的738 bp片段分3段分别进行双向测序。结果表明:在调查的133例ALL患儿中,61例为严重不耐受6-MP,剔除其中2例无标本患儿,对59例进行了TPMT基因测序。其中单纯骨髓不良反应37例,肝脏和骨髓不良反应9例,单纯肝脏不良反应12例,皮肤不良反应1例。59例中男39例,女20例,中位年龄67个月(17-183个月)。在59例患儿中,57例发现C474T变异,变异率为96.6%,其中杂合突变21例,纯合突变36例。又对10例6-MP耐受性好的ALL患儿进行TPMT基因测序。结果显示,8例也出现C474T变异,均为纯合突变,变异率为80%,说明TPMT基因C474T变异与6-MP严重不耐受无关。结论:TPMT基因(NM_000367)编码区的738 bp片段中C474T变异率极高,但与6-MP耐受性无关,提示ALL患儿6-MP的严重不耐受可能与TPMT编码区基因的变异无关。

利用6-巯基嘌呤的细胞增殖毒性评价转移因子的生物活性

目的:建立基于人白血病T细胞株Jurkat E6-1的转移因子(TF)生物活性检测方法。方法:采用细胞毒性和增殖(CCK-8)法探索不同浓度TF对6-巯基嘌呤(6-MP)处理Jurkat E6-1细胞增殖的影响,并对该方法的精密度进行验证。结果:20μg·mL^(-1)TF可使细胞的生存率明显提高,使6-MP的IC50由(0.46±0.10)μg·mL^(-1)右移至(1.11±0.30)μg·mL^(-1);当1.0μg·mL^(-1)6-MP处理细胞时,TF的浓度和细胞生存率具有良好的线性关系,r>0.95。不同批次间在剂量-反应曲线的每个浓度水平上,RSD均小于20%。TF的半数有效浓度(EC50)为(28.49±9.60)mg·mL^(-1),可信限率小于20%。结论:TF可以显著提高暴露于6-MP的Jurkat E6-1细胞生存率,该作用呈剂量依赖性,可为TF生物活性测定提供客观、准确的评价手段。