白介素6在甲硝唑羧甲基壳聚糖凝胶治疗大鼠牙周炎中的变化

目的考察炎性因子白介素6(IL-6)在甲硝唑羧甲基壳聚糖凝胶等制剂局部治疗大鼠牙周炎过程中牙周组织和全血的变化情况。方法采用上颌双侧第一磨牙细丝结扎加接种牙龈卟啉单胞菌制备大鼠牙周炎模型。药物治疗:72只牙周炎SD大鼠,每组18只,MODEL组(阳性对照,不涂布任何药物),M/CMCS组(涂布甲硝唑羧甲基壳聚糖凝胶),PERIO组(涂布盐酸米诺环素软膏),MNZ组(涂布甲硝唑凝胶)。造模成功后每天在结扎丝处分组局部涂药2次。在治疗后的第1周,第3周和第5周,4组分别取6只大鼠,麻醉后采集龈沟液和全血样本,上颌骨及牙周组织块,供ELISA免疫组化实验。结果龈沟液和牙周软组织的IL-6浓度,M/CMCS组、PERIO组和MNZ组在第1周、第3周和第5周较MODEL组同期均明显下降(P<0.05);M/CMCS组和PERIO组在3个时间点均分别比MNZ组低(P<0.05),而在第5周时,M/CMCS组比PERIO组低(P<0.05)。牙槽骨的IL-6浓度,与MODEL组比较,M/CMCS组、PERIO组和MNZ组在第1、3、5周各时间点均降低(P<0.05),M/CMCS组与PERIO组的值在第1、3、5周,均分别较MNZ组低(P<0.05)。血清IL-6浓度,M/CMCS组、PERIO组和MNZ组在第1,3,5周时间点分别较MODEL组降低(P<0.05)。同一组内不同组织样本的IL-6浓度,M/CMCS组、PERIO组和MNZ组,龈沟液、牙周软组织和牙槽骨的IL-6浓度在第3、5周时,均分别低于第1周(P<0.05);比较牙周组织与牙槽骨的IL-6浓度,M/CMCS组3个不同时间点差异无统计学意义(P>0.05),PERIO组牙周组织在第3周和第5周时均分别高于牙槽骨(P<0.05),MNZ组第3周时牙周组织的值高于牙槽骨(P<0.05)。MODEL组的牙周组织毁损严重,牙槽骨严重吸收;M/CMCS组牙龈形态较完整,未见明显牙槽骨吸收;PERIO组和MNZ组存在不同程度的牙周损伤和牙槽骨吸收。牙周组织IL-6平均光密度(MOD)值,M/CMCS组、PERIO组和MNZ组在第1、3、5周各相同时间点均比MODEL组明显下降(P<0.05),在第5周时,M/CMCS组低于MNZ组和PERIO组(P<0.05)。结论甲硝唑羧甲基壳聚糖凝胶可以显著减少牙周炎模型大鼠的相关组织IL-6表达,抑制牙槽骨吸收,其效应可能与M/CMCS能够抑制炎性细胞因子IL-6的分泌有关。

6-羧基壳聚糖的制备及血液相容性研究

将壳聚糖溶于0.5mol/L的乙酸,再以NO2选择性氧化壳聚糖分子中氨基葡萄糖单元的6位羟甲基成羧基,制备了6-羧基壳聚糖。红外光谱分析表明该反应选择性较高,产物保持了壳聚糖基本的链结构;扫描电镜和DSC分析发现,6-羧基壳聚糖与壳聚糖的微纤结构不同,其分子构象卷曲,热稳定性较壳聚糖差。抗凝血测试、溶血测试及扫描电镜观察表明:与壳聚糖相比,6-羧基壳聚糖抗凝血性能大大提高,溶血率明显降低,6-羧基壳聚糖具有很好的血液相容性,其血液相容性随壳聚糖氧化度的提高而提高。

低取代6-0-羧甲基壳聚糖结构及其抗菌和促进皮肤创面愈合的研究

采用波谱等现代仪器分析方法表征6-0-羧甲基壳聚糖结构和基本性能,并以6-0-羧甲基壳聚糖水溶胶膜为基本模型,研究其抗菌性能和临床促进皮肤创面愈合等效果。结果表明:改性壳聚糖为低取代(取代度为9.5%)、高脱乙酰度(脱乙酰度为83.2%)的碳6位取代羧甲基壳聚糖,其热分解起始温度低于180℃。溶胶膜对大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌以及铜绿假单胞菌作用60min时的杀灭率分别为>99.99%、98.54%、>99.99%。溶胶膜使用时一般无需换药,对浅Ⅱ°烧烫伤、深Ⅱ°烧烫伤、手术切口、取皮区、溃疡等多种创面均具有明显的促愈合、止血、抑菌、控制渗出、减少疤痕形成的作用,且未发现全身及局部致敏反应,亦未见创面组织过度增生现象。

6-O-羧甲基壳多糖的细胞毒性效应研究

采用溶血试验和细胞毒性试验研究6 -O-羧甲基壳多糖的细胞毒性效应，结果表明：1% 浓度的6-O-羧甲基壳多糖对红细胞溶 血率小于5%，说明该材料无溶血现象。以手术缝合线和500μg/mL的苯酚为对照研究不同分 子量的6-O-羧甲基壳多糖分别在1000μg/mL和2000μg/mL浓度下对大白鼠皮肤成纤维细胞 生长的影响，经过2d，4d，7d细胞培养，细胞增殖率均大于100%，说明该材料对成纤维细胞 无毒性效应且对大白鼠皮肤成纤维细胞有促进生长的作用，分子量越小促生长作用越强，随 着培养时间延长促生长作用亦增强。此研究在一定程度上证明，6-O-羧甲基壳多糖作为医 用生物材料在细胞毒性方面是安全的。

杯[6]芳烃衍生物改性壳聚糖的合成及吸附性能研究

通过单取代溴丙氧基对叔丁基杯[6]芳烃衍生物与壳聚糖发生交联,合成一种新型的杯[6]芳烃-壳聚糖聚合物,对聚合物进行了红外、X射线衍射和扫描电镜表征。并考察了聚合物对过渡金属离子Zn2+,M n2+,Pb2+,C r3+,Cu2+的吸附性能。结果表明,该聚合物兼具杯芳烃与壳聚糖的各自优势,不仅吸附能力较强,而且对部分离子表现出较高的选择性吸附。

染料壳聚糖微球的制备及对Cr^(6+)的吸附研究

以反相悬浮交联法制备了壳聚糖微球载体(CS),并偶联染料配体(CibacronBlueF3GA),制得了染料亲和吸附剂(CB-CS)。通过扫描电镜对其进行表征,结果表明,该吸附剂粒径均匀,平均粒径在400μm左右,而且表面相当光滑;红外光谱数据证明染料配体的偶联是成功的。然后采用静态法研究了CB-CS树脂对废水中Cr6+的吸附性能。实验结果表明CB-CS树脂对Cr6+具有很好的吸附性能,吸附的最佳条件是:pH值3~4,吸附时间为80min。使用CB-CS树脂处理电镀废水中Cr6+,吸附率达到了96%,而且吸附后的CB-CS树脂可以再生使用。

壳聚糖处理对“杨小-2,6”南丰蜜桔果实采后生理及贮藏效果的影响

采用3种不同浓度的壳聚糖处理,研究它们在冷藏(5±1)℃条件下对"杨小-2,6"南丰蜜桔果实采后生理生化及贮藏效果的影响。结果表明:壳聚糖处理显著抑制了果实腐烂和失重,减缓了可溶性固形物含量的上升速度,延缓了糖酸的转化,大大提高了果实中可溶性蛋白质的含量,但对Vc含量影响不大;强烈抑制了果实的呼吸强度;同时,壳聚糖处理还有效地推迟并提高了过氧化氢酶(CAT)活性高峰,延长了货架期。在整个贮藏过程中发现,运用15g/L处理的效果最好。

稻根霉菌丝体表面印迹吸附剂对Cr^6＋的吸附特性研究

真菌菌丝体对重金属离子具有较好的吸附作用;壳聚糖(chitosan)是甲壳素部分或全部脱去乙酰基后得到的产物,对金属离子也具有较强的吸附特性[1]。采用壳聚糖对稻根霉(Rhizopus oryzae)菌丝体进行表面分子印迹,并研究了根霉菌丝体壳聚糖表面印迹吸附剂对Cr6+(铬)的吸附性能和影响因素。结果表明:最佳吸附pH值为3.5～4.0;在初始浓度为200mg·L-1时,动态吸附15h达到饱和,吸附容量为45mg·g-1;在初始浓度为600mg·L-1时,24h静态吸附达到饱和,吸附容量为55mg·g-1;研究结果为综合利用根霉工业发酵中的废弃菌丝体,以及菌丝体表面印迹吸附剂在重金属污水处理方面的应用提供了科学依据。

环氧丙基杯[6]冠醚接枝壳聚糖的合成与吸附性能研究

通过具有稳定杯式构象的环氧丙基杯[6] 1,4 冠4与壳聚糖发生接枝交联反应,合成了新型杯[6]冠醚接枝壳聚糖衍生物.研究了其对阳离子的吸附性能后发现,与没有稳定构象的杯[6]芳烃接枝壳聚糖衍生物相比,具有稳定杯式构象的杯[6]芳烃壳聚糖对离子的选择性吸附性能大为提高,尤其是对Na+和Ag+表现出较好的选择性吸附能力.

高分子涂层和氮化钛涂层对Mg-6%Zn-10%(β-TCP)耐腐蚀性能的影响

用多弧离子溅射法和喷涂法分别在Mg-6%Zn-10%(β-TCP)复合材料表面制备氮化钛(Ti N)涂层、聚己内酯(PCL)涂层和壳聚糖(CS)涂层,通过体外Ringer’s液浸泡实验,检测试样的析氢速率、质量变化和不同时间点试样表面形貌改变及浸泡液中p H改变等指标,评价3种不同涂层对复合材料的耐蚀性的影响。研究结果表明:3种涂层的表面形貌不同,表面均有微孔,Ti N涂层呈皱褶状,PCL涂层表面较光滑,CS涂层表面较粗糙;浸泡实验发现3种试样涂层均发生改变,Ti N组试样浸泡84 h时试样腐蚀呈碎渣状,而PCL组和CS组试样表面相对完整,只在涂层边缘发生部分破坏;Ti N组浸泡液的p H上升明显,92 h内达11.3,而PCL组和CS组浸泡液的p H缓慢上升,6 d后稳定在10.2左右;PCL组的析氢速率和质量损失比CS组的低。Ti N涂层加快Mg-6%Zn-10%(β-TCP)复合材料的腐蚀,PCL和CS涂层均能提高复合材料的耐腐蚀性能,且PCL涂层优于CS涂层。

基于冠醚改性脱乙酰甲壳素制备燃料电池用阴离子导电膜

在碱性条件下,借助三氯甲烷(CHCl_(3))将醛基引入二苯并-18-冠-6(DB18C6)中,制得二甲酰基二苯并-18-冠-6(DDB18C6);以DDB18C6与可溶性脱乙酰甲壳素(CTS)为原料,利用Schiff反应合成了小分子冠醚质量分数递增的接枝冠醚CTS膜,将其命名为C_(a)-CTS膜(a=m(DDB18C6)/m(C_(a)-CTS膜));将C_(a)-CTS膜于碱液中进行离子交换,C_(a)-CTS膜通过氧空穴结构吸附K^(+),进而制得C_(a)-CTSK膜;对各阶段的样品膜进行了结构表征和性能测试。结果表明,随着冠醚接枝度的增加,CTS的热稳定性得到改善;当a=0.20时,C_(0.20)-CTSK膜的接枝度可达43.91%,吸水率可达168.6%,IEC为1.38 mmol/g;在温度为70℃的条件下,C_(0.20)-CTSK膜的电导率可达46.8 m S/cm;冠醚的接枝引入改善了该系列膜的耐碱稳定性;C_(a)-CTSK系列膜在6 mol/L的KOH溶液中浸泡480 h,电导率降低幅度仅为4.0%。

壳聚糖/羟基磷灰石微球对水中Cr^(6+)的吸附研究

以壳聚糖和羟基磷灰石为原料,采用反相乳化法制备了壳聚糖/羟基磷灰石微球作为吸附剂,并对其结构进行表征。考察了pH、Cr^(6+)初始浓度以及吸附时间对该微球吸附性能的影响。结果表明:壳聚糖/羟基磷灰石微球为圆球形,分散度好,平均粒径为30μm,具有较好的吸附性能。温度30℃,体系p H4.0,吸附时间240 min的条件下,25 mg微球对10 mg/L Cr^(6+)的吸附率高于73%.Lagergren一级吸附速率方程能更好的描述微球对Cr^(6+)的吸附行为。30℃下,微球对Cr^(6+)的吸附平衡符合Langmuir等温吸附方程。

4,4’-二溴二苯并18-C-6双极膜的制备及表征

天然高分子材料海藻酸钠(SA)和壳聚糖(CS)分别与柔性聚乙烯醇(PVA)共混,再以4,4’-二溴二苯并18-C-6和Fe3+为交联剂对PVA-SA阳膜层进行改性,以戊二醛(GA)对PVA-CS阴膜层进行改性,制备了PVA-mSA-Fe3+/mCS双极膜(BPM)。测定了膜的接触角、H+渗透性能、电流-电压工作曲线、阻抗行为和热重曲线。结果表明,采用4,4’-二溴二苯并18-C-6和Fe3+改性后的BPM有较小的工作电压、较低的膜阻抗和较高的热稳定性。

静电纺PA6/CS复合纤维膜的过滤性能研究

采用自制单喷头静电纺丝设备,以聚丙烯熔喷非织造布为基布,制备静电纺聚酰胺6/壳聚糖(PA 6/CS)复合纤维膜,研究了静电纺丝时间对复合膜表面形貌、孔径和过滤性能的影响。结果表明:随着静电纺丝时间增加,复合纤维膜对Na Cl气溶胶的过滤效率显著增加,过滤阻力明显增加,品质因子先增加后减小;连续纺丝90 min后,复合纤维膜的过滤效率达到99%以上。

壳聚糖纳米化的结核杆菌ESAT-6和FL重组DNA疫苗对小鼠产生Th1和Th2型细胞因子的影响

目的:探讨壳聚糖纳米包被的结核杆菌早期分泌性抗原(6 kd early secretory antigenic target,ESAT-6)与fms样酪氨酸激酶3配体(fms-like tyrosine kinase 3 ligand,FL)重组DNA疫苗接种C57BL/6小鼠对其Th1和Th2型细胞因子生成的影响。方法:制备壳聚糖(nano-chitosan,CS)纳米颗粒,然后用CS纳米粒包被本室构建的结核杆菌ESAT-6与FL重组质粒(nanoESAT-6-FL)、ESAT-6质粒(nano-ESAT-6)、FL质粒(nano-FL)和pIRES载体(nano-pIRES),并进行电镜和Western blot鉴定。此后将上述质粒分别接种小鼠,同时给小鼠接种未用壳聚糖纳米颗粒包被的上述对应质粒,并设PBS、CS纳米粒及BCG作为对照。接种后9周,取小鼠脾细胞进行培养,并用结核菌纯化蛋白衍生物(purified protein derivatives tuberculin,PPD)给予刺激72 h,然后用ELISA试剂盒检查小鼠脾细胞上清液中的Th1型细胞因子(IFN-γ、IL-12)和Th2型细胞因子(IL-4、IL-10)的分泌水平。结果:成功制备出壳聚糖纳米包被的结核杆菌ESAT-6和FL重组质粒(包括其他几种质粒),并证实被壳聚糖纳米包被的质粒可在真核细胞中表达。用壳聚糖纳米包被的ESAT-6-FL重组质粒免疫小鼠,其脾细胞上清液中的IFN-γ和IL-12水平显著高于未用壳聚糖纳米包被的相应质粒免疫组和其他对照组,而IL-4和IL-10的水平与未用壳聚糖纳米包被的相应质粒免疫组和其他实验组对照组相比均无明显升高。结论:壳聚糖纳米化的ESAT-6-FL重组质粒疫苗接种小鼠能够显著提高小鼠体内Th1型细胞因子的水平。提示用壳聚糖纳米包被结核杆菌ESAT-6-FL重组DNA疫苗能提高其细胞免疫效果。

壳寡糖通过p38MAPK糖基化修饰抑制TNF-α诱导的EA.hy926细胞IL-6、IL-8的表达

目的探讨壳寡糖对血管内皮细胞损伤的保护机制。方法以EA.hy926血管内皮细胞为研究对象,通过TNF-α刺激,建立高表达IL-6、IL-8的内皮细胞损伤模型。以RT-PCR和ELISA方法分别从mRNA和蛋白水平检测壳寡糖对IL-6、IL-8表达的影响。采用Western blot方法检测壳寡糖对p38MAPK信号通路及糖基转移酶(OGT)表达的影响。分析验证p38MAPK信号通路抑制剂和葡萄糖氨对TNF-α诱导的IL-6、IL-8表达的影响。结果成功建立了TNF-α诱导的高表达IL-6、IL-8的血管内皮细胞损伤模型。壳寡糖可从mRNA转录和蛋白翻译水平抑制IL-6、IL-8的表达。初步揭示壳寡糖对TNF-α诱导血管内皮细胞表达IL-6、IL-8的抑制作用可能是通过p38的磷酸化和O-连接糖基化相互作用来完成的。结论壳寡糖可通过OGT调控TNF-α诱导的EA.hy926细胞IL-6、IL-8的表达,保护血管内皮细胞,减少炎症损伤。

6-O-羧甲基壳聚糖对人增生性瘢痕成纤维细胞TGF-β_1表达的影响

目的:观察不同浓度6-O-羧甲基壳聚糖(6-O-CMC)对体外培养的人增生性瘢痕成纤维细胞(hypertrophic scar fibrob lasts,HSFBs)转化生长因子-β1(transforming growth factor-beta1,TGF-β1)蛋白及mRNA表达的影响,在分子水平上探讨其抑制增生性瘢痕生长的作用机制。方法:体外培养人HSFBs,选取第3～5代细胞进行下一步实验。实验分组采用含不同浓度6-O-CMC(0,100,200,400μg/ml)的DMEM培养液分别进行培养。培养24h后,显微镜下观察各组HSFBs形态及生长情况。收集细胞培养上清,运用双抗体夹心ELISA法检测各组TGF-β1蛋白表达水平。运用荧光定量RT-PCR技术检测各组TGF-β1 mRNA表达水平。结果:与空白组相比,三个药物剂量组HSFBs TGF-β1蛋白及mRNA的表达均减少(P<0.05),药物浓度越高表达量越低(P<0.05),且TGF-β1蛋白及mRNA表达的变化具有一致性。结论:6-O-CMC有抑制体外培养的人HSFBs TGF-β1表达的作用,初步探讨了6-O-CMC发挥抑制增生性瘢痕生长的作用机制,为羧甲基壳聚糖类药物的开发利用提供理论依据。

葫芦脲[6]接枝壳聚糖的制备及其对偶氮染料的吸附研究

制备葫芦脲[6]接枝壳聚糖(CB[6]-CS)吸附剂,分别获得3种不同接枝率的CB[6]-CS,并对其结构进行表征。将合成的3种吸附剂CB[6]-CS用于对酸性铬兰K染料进行吸附研究,分别考察了温度、pH值、染料浓度、吸附时间及CB[6]含量对吸附性能的影响。结果表明:CB[6]含量较高时,CB[6]-CS对酸性铬兰K有较高的去除率,并且,CB[6]-CS对酸性铬兰K的吸附作用受溶液的温度和pH影响较大,适宜的吸附条件为25℃,pH大于6.5。通过吸附等温线研究,可知,CB[6]-CS对酸性铬兰K的吸附规律更符合Freundlich吸附等温式;吸附动力学采用了准一级速率方程和准二级速率方程来描述,结果表明吸附动力学符合准二级速率方程。

6-O-羧甲基壳聚糖的硫酸酯化及其产物的抗凝血活性

以甲壳素为原料,采用低温羧甲基化反应制备C6位取代羧甲基甲壳素(6-O-CMCH),然后脱去C2位乙酰基得到C6位取代羧甲基壳聚糖(6-O-CMCS),最后将6-O-CMCS与氯磺酸-浓硫酸反应,通过控制反应条件,获得了取代位置和取代度部分可控的硫酸酯化6-O-CMCS。利用电位滴定、元素分析、FT-IR、1 H-NMR测试分析各级产物的化学结构,并测定终产物活化部分的凝血活酶时间(APTT)、血浆凝血酶原时间(PT)及血浆凝血酶时间(TT)。实验结果表明:硫酸酯化6-O-CMCS与高分子量肝素的结构和抗凝血活性类似,其抗凝血活性机理主要体现在对内源性和共同凝血途径的抑制。

6-羧基壳寡糖清除活性氧的能力及作用机理

利用漆酶/TEMPO体系对壳寡糖(COS)分子进行选择性氧化,制备6-羧基壳寡糖(C-COS).通过傅里叶红外光谱(FTIR)、核磁共振波谱(13C NMR)及酸碱电导滴定对样品进行表征分析,并对6-羧基壳寡糖(C-COS)清除活性氧(ROS)能力进行探究.结果表明:漆酶/TEMPO体系成功将壳寡糖氧化为6-羧基壳寡糖;6-羧基壳寡糖清除活性氧的能力强于壳寡糖且随溶液浓度增加而逐渐提高.C-COS对羟基自由基、过氧化氢、烷氧自由基及超氧阴离子自由基的最大清除率分别达98%、99%、59%、39%.因此,6-羧基壳寡糖在医药及化妆行业有良好应用前景.