基于微生物转化得到7β,15α-二羟基-18β-甘草次酸的优良菌株筛选

目的以7β,15α-二羟基-18β-甘草次酸为目标产物,通过微生物转化筛选优良菌株。方法使用10种真菌(CGMCC 3.149、CGMCC 3.193、CGMCC 3.3402、CGMCC 3.739、CGMCC 3.2462、CGMCC 3.2886、CGMCC 3.3400、CGMCC 3.577、CGMCC 3.970、Zw-4)进行转化菌株的初筛和复筛实验,采用高效液相色谱法测定转化液中7β,15α-二羟基-18β-甘草次酸含量,将7β,15α-二羟基-18β-甘草次酸转化率作为评价指标,选择转化率较高且初筛和复实验结果一致的菌株作为优良菌株。结果7β,15α-二羟基-18β-甘草次酸在2.56~81.79μg/ml范围内呈良好的线性关系;初筛实验中转化率最高的菌株是CGMCC 3.3400;复筛中转化率最高的菌株是CGMCC 3.970。结论优良菌株为CGMCC 3.970。

Δ^5-3β，7β-二羟基甾醇和Δ^5-3β，7α-二羟基甾醇的立体选择合成及其对胆碱酯酶的抑制活性

目的研究不同支链结构的Δ5-3β,7β-二羟基甾醇和Δ5-3β,7α-二羟基甾醇对胆碱酯酶的抑制活性.方法以3个不同支链结构的Δ5-3β-羟基甾醇为起始物,先乙酰化保护3β-羟基,再烯丙位氧化引入7-羰基,该羰基分别用NaBH4-CeCl3和L-selectride还原成不同取向的羟基,最后水解除去保护基得到6个不同支链结构的Δ5-3β,7β-二羟基甾醇和Δ5-3β,7α-二羟基甾醇,进而对目标化合物进行乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶抑制活性实验.结果合成的6个化合物对乙酰胆碱酯酶无明显的抑制活性(IC50>100 μmol·L-1),对丁酰胆碱酯酶则有较强的抑制活性(IC50< 32 μmol·L-1),其中24-亚甲基胆甾-5-烯-3β,7α-二醇的抑制活性最强(IC50=9.5 μmol·L-1).结论 7位羟基的取向和不同的支链结构对化合物1～6发挥丁酰胆碱酯酶体外抑制活性有一定的影响.

7β-羟基胆固醇对创伤性癫痫大鼠海马谷氨酸转运体表达的影响及机制

目的:研究7β-羟基胆固醇(7-βOHCH)对创伤性癫痫大鼠谷氨酸转运体mRNA表达的影响及其机制。方法:105只大鼠脑内立体定向单侧杏仁体注射三氯化铁(FeCl3)建立创伤性癫痫模型,随机分成对照组(A组)、模型组(B组)和7-βOHCH治疗组(C组),动态观察各组大鼠行为学表现、脑电图变化、海马区域GFAP和谷氨酸转运体mRNA表达。结果:A组大鼠术后无明显行为学改变;术后30 d时,B组94.2%大鼠出现癫痫样发作而C组为74.3%(P<0.05)。A组在整个实验过程中各导联均以α和β波为主要节律的基础脑电图,B、C组出现与痫性发作一致的高幅棘波、棘慢波综合和尖波。注射侧海马组织各区B组均有大量胶质细胞增生而C组无(P<0.01)。海马3种谷氨酸转运体mRNA的表达与A组比较,B、C组均呈先高后低的变化趋势。结论:7β-OHCH通过抑制海马区域胶质细胞增生、上调GLAST和GLT1的表达,发挥治疗创伤性癫痫的作用。

7β-甲氧基莫诺苷转化为莫诺苷影响因素的研究

目的:考察7β-甲氧基莫诺苷转化为莫诺苷的影响因素,为研究山萸肉饮片中有效成分的变化规律提供参考。方法:以7β-甲氧基莫诺苷和莫诺苷为检测指标成分,考察在单体成分情况下,溶液的p H、加热温度、加热时间等因素的影响。结果与结论:当p H=2,甲醇含量为5%时,7β-甲氧基莫诺苷向莫诺苷转变的转化率较高;加热温度大于100℃的条件下,加热时间(≤240 min)对7β-甲氧基莫诺苷的转化也有影响。

7β-羟基胆固醇减少铁离子所致的大鼠脑反应性胶质增生

目的 研究 7β 羟基胆固醇 (7βOHCH)抗脑损伤后反应性星形胶质细胞增生的作用及其意义。方法 在大鼠脑皮质注射铁离子致胶质细胞增生 ,损伤部位同时注入含 7βOHCH脂质体悬液或不含 7βOHCH脂质体悬液 ,用免疫组化和图像分析技术观察各组大鼠脑损害改变及胶质纤维酸性蛋白阳性细胞数。结果 注入铁离子的大鼠脑损伤周围皮质有大量炎性细胞浸润 ,胶质纤维酸性蛋白阳性细胞数比对照组明显增多 ,注入 7βOHCH的大鼠脑损伤周围皮质细胞结构、胶质纤维酸性蛋白阳性细胞数与对照组相似。 结论 7βOHCH对反应性星形胶质细胞增生有明显抑制作用 ,为防止脑损伤后反应性胶质增生和帮助脑功能恢复提供了又一途径。

低剂量双酚A与17β雌二醇对MCF-7细胞增殖作用的剂量效应关系及其联合作用探索

采用MCF7细胞增殖实验研究了类雌激素双酚A(BPA)、17β雌二醇(E2)对MCF7细胞增殖效应的单独作用以及两者间联合作用的剂量效应关系.结果显示,BPA在10-10～10-3mol·L-1浓度范围内、E2在10-14～10-3mol·L-1浓度范围内的单独作用均存在低浓度促进、高浓度抑制的倒U型剂量效应关系曲线,体系中E2浓度分别为10-8、10-11、10-14mol·L-1情况下,BPA在10-3～10-9mol·L-1浓度范围内和E2的联合作用与其单独作用存在显著差异,呈现出独立作用模式.

7β-(1-芳基-5-甲基-1,2,3-三唑-4-甲酰胺基)-3-(2-芳胺基-1,3,4-噻二唑-5-硫亚甲基)头孢菌素衍生物的半合成和抗菌活性

通过 2 -芳胺基 - 1,3,4 -噻二唑 - 5 -硫醇 1a,1b和头孢菌素母体 7- ACA的亲核取代反应 ,先制得头孢菌素新母体 1a,1b,用 1-芳基 - 5 -甲基 - 1,2 ,3-三唑 - 4 -甲酰氯 3a,3b与 2 a,2 b缩合 ,制得头孢菌素新衍生物 4 a,4 b.初步体外抗菌试验结果表明 ,所合成的头孢菌素衍生物 4 a,4 b对革兰氏阳性菌显示出中等程度的抑制活性 .

类风湿性关节炎患者caspase-7β亚型基因的多态性分析

目的:探讨中国台州地区caspase-7β亚型基因rs2227309多态性与类风湿性关节炎(rheumatoidarthritis,RA)易感性的关系。方法:对204位类风湿性关节炎患者与203位健康体检者进行研究,采用荧光定量单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)分析的方法对caspase-7β亚型基因rs2227309多态性进行检测。结果:RA患病组中GG、AG、AA基因型频率分别为33.3%、53.4%、13.2%,健康对照组中GG、AG、AA基因型频率分别为33.0%、44.3%、22.7%。RA患者组与健康对照组相比,caspase-7β亚型基因rs2223709基因型分布的差异显著(P<0.05)。RA患病组GG+AG基因型频率高于健康对照组,差异显著(P<0.05,OR=1.921,95%CI为1.140～3.236)。RA患者组与健康对照组中G等位基因频率分别为60.0%与55.2%。RA患者组与健康对照组相比,等位基因分布的差异不显著(P>0.05,OR=1.221,95%CI为0.924～1.613)。结论:Caspase-7β亚型基因rs2227309可能与中国台州地区人群类风湿性关节炎易感性有关,这种关系可能是由于caspase-7非功能亚型转录水平相对升高致使滑膜细胞凋亡活性减弱所致。

Δ~5-3β,7β-二羟基甾醇及其C-7差向异构体波谱特征及胆碱酯酶的抑制活性(英文)

本文对△^5-3β，7β-二羟基甾醇（1—3）和△^5-3β，7α-二羟基甾醇（4～6）的一些核磁共振波谱特征进行了比较。活性测试表明化合物1—6对乙酰胆碱酯酶（AChE）无明显的抑制活性，对丁酰胆碱酯酶（BuChE）则有较强的抑制活性，其中24-亚甲基胆甾-5-烯-3β，7α-二醇（6）的IC50值为9．5μM。通过活性数据比较我们发现7α-羟基甾醇对丁酰胆碱酯酶的抑制活性明显比相应的7β-羟基甾醇高。我们通过计算7位羟基和四环平面之间的二面角角度来尝试解释这些活性差别。

17β-雌二醇-ARIS构建及其标准曲线的质量评估

以 1 7β-雌二醇 -黄素腺嘌呤二核苷酸结合物为标记物 ,以葡萄糖氧化酶为全酶 ,建立了 1 7β-雌二醇脱辅基酶再激活免疫测定系统 (1 7β- E2 - ARIS) ,完成了两条标准曲线的制作 ,通过 logit代换法对两条标准曲线进行了直线回归。两条标准曲线的拟合度 (r)分别为0 .996 7* * 和 0 .9991 * * ,灵敏度分别为 1 1 .5 4pg· m L- 1 (2 . 31 pg·孔 - 1 )和 1 4.88pg·m L- 1 (2 . 98pg·孔 - 1 ) ,平均变异系数(CV% )分别为 4.6 4%和 9.34% ,测定范围为 31 .2 5～ 1 0 0 0 pg·m L- 1 。

7β-氨基-3-(1-甲基-1H-四唑-5-硫甲基)-3-头孢烯-4-羧酸的合成研究

采用7-氨基头孢霉烷酸(7-ACA)和1-甲基-1H-1,2,3,4-四唑-5-硫醇(5-MMT)为原料,以乙酸为溶剂,甲磺酸为催化剂,经亲核取代制备7β-氨基-3-(1-甲基-1H-四唑-5-硫甲基)-3-头孢烯-4-羧酸(7-AMCA),探讨了物料配比、催化剂用量、溶剂用量、反应时间、温度等因素对反应的影响,在7-ACA与5-MMT原料摩尔配比为1∶1.20,反应温度65℃、反应时间100 min等较佳工艺条件下,得到7-AMCA的收率为89.87%,HPLC纯度99.21%.产品结构经1H-NMR,IR和元素分析表征确认.

南方红豆杉紫杉烷7β-羟基化酶基因全长序列的克隆和进化分析

从南方红豆杉Taxus wallichianavar.mairei的新鲜嫩叶中提取基因组DNA作为模板,利用三组特异引物进行PCR扩增,然后克隆测序得到紫杉烷7β-羟基化酶的基因全长。该基因编码区起始密码子为ATG,终止密码子为TGA,全长1 692 bp;碱基组成为490 A(29.0%),351 C(20.7%),362 G(21.4%)和489 T(28.9%)。将紫杉烷7β-羟基化酶基因全长序列与细胞色素P450基因家族的其它三个成员进行比对,发现它与紫杉烷2α-羟基化酶基因、紫杉烷10β-羟基化酶基因及紫杉烷13α-羟基化酶基因的一致性分别为74%、68%及76%。它们的外显子和内含子的连接区均具保守的GT-AG结构,内含子区的变异性明显高于外显子区。进一步以红豆杉属的13个紫杉烷羟基化酶基因家族成员为对象,利用位点间可变ω(非同义替换率dN和同义替换率dS的比值)模型对该基因家族的适应性进化进行分析。分支模型、位点模型以及分支-位点模型的分析表明:紫杉烷羟基化酶基因家族的少数分支处于正选择压力下(ω>1),但未检测到正选择位点;而绝大部分位点受强烈的负选择作用(ω<1)。

一种高效氧化3-羟甲基-7β-苯乙酰胺-3-头孢-4-羧酸二苯甲基酯的方法

以7-氨基头孢烷酸(7-ACA)为原料,经水解、氨基和羧基保护,制得3-羟甲基-7β-苯乙酰胺-3-头孢-4-羧酸二苯甲酯(Ⅰ),产率48%;并在乙腈中用2-碘酰基苯甲酸实现羟基选择性氧化,产物3-甲酰基-7β-苯乙酰胺-3-头孢-4-羧酸二苯甲酯(Ⅱ),收率达94%。

3β-乙酰氧基-7β-羟基-17,17-亚乙二氧基-15β,16β-亚甲基雄甾-5-烯的合成

以 3 β 乙酰氧基 1 5 β,1 6β 亚甲基雄甾 5 烯 1 7 酮为原料 ,用化学氧化法 ,经 3步合成标题化合物 ,其结构经IR ,MS表征 ,总收率 5 0 .8%。

7β-羟基胆固醇双琥珀酸单酯钠(RS 034)对荷瘤小鼠骨髓细胞、肝、脾的DNA、RNA和蛋白质合成及对大鼠血象的影响

本文报告的结果表明7β-羟基胆固醇双琥珀酸单酯钠(RS 024)在有效抗肿瘤剂量下(45mg/kg/day,×7ip)对荷瘤小鼠(EAC)骨髓细胞DNA、RNA和蛋白质合成有促进作用,对肝、脾的DNA、RNA合成无显著影响,但能促进肝,脾中及血清蛋白质合成。按400mg/kg/day连续给药30天,对大鼠红细胞、白细胞数及淋巴细胞百分率无明显影响。提示该药在有效抗癌剂量下毒性较小,并在一定程度上对免疫功能有增强作用。

多粘类芽孢杆菌CP7β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因的克隆、表达及应用

【目的】克隆多粘类芽孢杆菌(Paenibaccillus polymyxa)CP7的β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因,构建高效表达工程菌株,为CP7菌的抗菌活性组分研究和开发利用以及葡聚糖酶在农业生产中的应用提供理论依据。【方法】通过CP7菌β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因的克隆及原核表达构建工程菌株,采用平板对峙培养和生长速率测定法研究重组酶对供试真菌的生长抑制活性,同时采用体外消化法研究该酶对麦类饲料消化率的影响。【结果】成功克隆目的基因并在原核系统获得高效表达。重组酶蛋白对4种供试真菌菌丝生长具有明显抑制作用,平均抑制率高达40%以上;添加了重组β-1,3-1,4-葡聚糖酶的处理组样品,经体外消化后黏度降低了4.69%(P﹥0.05)。【结论】β-1,3-1,4-葡聚糖酶是CP7菌发酵液中抗真菌活性组分或其中之一,对真菌生长抑制的活性作用提示其可作为农业抗病虫害新型药物进行开发研究;该酶能够有效降低麦类饲料黏度,表明其作为饲料添加剂的开发利用同样具有良好前景。

7β-叔丁氧羰基氨基-3-氯甲基-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲酯的合成

7-ACA经水解、氨基保护得到的7β-叔丁氧碳基氨基-3-羟甲基-3-头孢烯-4-羧酸,与二苯基重氮甲烷反应保护羧基得7β-叔丁氧羰基氨甚-3-羟甲基-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲酯,最后经氯代制得硫酸头孢噻利等的中间体7β-叔丁氧羰基氨基-3-氯甲基-3-头孢烯-4-羧酸二苯甲酯,总收率约29%(以7-ACA计)。

3-甲酰基-7β-苯乙酰胺基-3-头孢-4-羧酸二苯甲基的催化脱羰基反应

用常见膦配体与[IrCl(cod)]2(cod为1,5-环辛四烯)、RuCl2(cod)或RhCl3形成的复合催化剂及以SBA-15、MCM-41和MCM-48为载体所形成的负载型复合催化剂,对3-甲酰基-7β-苯乙酰胺-3-头孢-4-羧酸二苯甲基酯进行了催化脱羰基反应研究。结果发现,催化剂用量为底物物质的量的5%时,[IrCl(cod)]2/SBA-15/亚磷酸三乙酯负载型复合催化剂脱羰基反应的产率最高,高效液相色谱产率为32%,柱色谱分离产率为23%,与文献报道的以化学计量RhCl(PPh3)3对该化合物进行脱羰基反应的产率相当,不但大大减少了贵金属的使用量,而且催化剂可以重复使用。

17β雌二醇刺激农田土壤微生物群落结构变化PCR-DGGE指纹分析

采用PCR-DGGE技术分析在不同的质量分数和暴露时间下17β雌二醇刺激农田土壤微生物群落结构变化.结果表明,在暴露期间内,有部分细菌的生长受到抑制.部分细菌的数量随着雌二醇浓度或暴露时间的增加而减少,而部分细菌则在雌二醇的影响下被富集,表现在DGGE条带由浅变深.雌二醇污染的农田土壤样品中微生物群落结构发生巨大的变化,200ng/kg雌二醇刺激下的农田土壤样品中微生物群落多样性指数明显大于另外两组;100ng/kg雌二醇刺激下农田土壤的微生物多样性指数随着暴露时间的增加呈下降趋势;300ng/kg实验组多样性指数则变现为相似的平缓增长趋势.研究发现,适宜质量分数的雌二醇能够增加农田土壤微生物群落结构的多样性.

7β,10β-二甲氧基-10-DABⅢ的合成路线综述

卡巴他赛由FDA审核批准上市,临床上用于治疗激素难治性转移性前列腺癌。从结构上看,卡巴他赛是多西他赛7、10-OH甲醚化的衍生物,所以对7、10-OH进行选择性的甲醚化是卡巴他赛合成的关键技术点。7β,10β-二甲氧基-10-DABⅢ是卡巴他赛合成的关键中间体,本文对此中间体的合成路线进行综述,以期清晰地展示其合成研究现状,为卡巴他赛的合成研究及工业生产提供参考和借鉴。