非剥脱点阵激光联合侧柏叶酊对斑秃小鼠IL-7/IL-7Rα信号通路和Tregs细胞亚群的影响

目的:研究1565 nm非剥脱点阵激光联合侧柏叶酊(Platycladus orientalis tincture,POT)对斑秃(Alopecia areata,AA)小鼠治疗作用以及对白细胞介素7(Interleukin 7,IL-7)/白细胞介素7受体α(Interleukin-7 receptorα,IL-7Rα)信号通路和调节性T细胞(Regulatory T cells,Tregs)亚群的影响。方法:将50只成年雄性C3H/HeJ小鼠随机分为对照组(C组),模型组[M组,环磷酰胺(Cyclophosphamide,CTX)诱导AA模型],M+1565 nm组(1565 nm非剥脱点阵激光治疗AA),M+POT组(POT治疗AA)、M+1565 nm+POT组(1565 nm非剥脱点阵激光联合POT治疗AA),每组10只。流式细胞术检测C组和M组皮损组织中Tregs细胞亚群的比例和所有组血液中单个核细胞中Tregs细胞亚群的比例。Western blot法检测各组小鼠皮损组织中IL-7和IL-7Rα的表达。结果:与C组比,M组皮肤组织IL-7和IL-7Rα的表达均明显增加,而且Tregs细胞比例明显减少(P<0.05)。与M组比,M+1565 nm组和M+POT组IL-7的表达均降低(P<0.05)。与M组比,M+1565 nm+POT组IL-7和IL-7Rα的表达均降低,且Tregs细胞比例都显著增加(P<0.05)。结论:1565 nm非剥脱点阵激光联合POT治疗可以抑制斑秃小鼠IL-7/IL-7Rα信号并减少Tregs细胞的比例。

术前C7/T1椎间孔面积对后路单开门椎管扩大成形术治疗脊髓型颈椎病疗效的影响

目的:探究术前C7/T1椎间孔面积对脊髓型颈椎病患者接受后路单开门椎管扩大成形术疗效的影响。方法:回顾性分析2021年9月~2022年9月在我院因脊髓型颈椎病行后路单开门椎管扩大成形术治疗的76例患者,其中男58例、女18例,年龄为64.4±8.5岁。于患者术前颈椎双斜位X线片上测量C7/T1椎间孔面积,根据C7/T1椎间孔面积分为两组:A组,C7/T1椎间孔面积≤平均值(40例),B组,C7/T1椎间孔面积大于平均值(36例)。收集并比较两组患者的手术时间、术中出血量,两组患者的术前、术后3个月、术后12个月的JOA评分,计算JOA改善率;记录两组患者术后12个月的轴性症状发生情况,采用T检验、方差分析及卡方检验分析术前不同C7/T1椎间孔面积的患者接受颈后路单开门手术治疗后是否存在疗效的差异性。结果:C7/T1椎间孔面积A组为35.2±9.7mm^(2),B组为65.7±13.1mm^(2);术前C2~C7 Cobb角A组为14.0°±3.6°,B组为16.0°±5.5°,两组间椎间孔面积和C2~C7 Cobb角有统计学差异(P<0.05)。手术时间A组127.5±23.6min,B组120.3±32.6min;出血量A组176.8±88.2mL,B组183.6±100.2mL,两组间均无统计学差异(P>0.05)。术前JOA评分A组10.9±2.0分,B组10.3±2.1分,两组间无统计学差异(P>0.05)。术后3个月JOA评分A组12.8±1.5分,B组14.0±2.2分;术后12个月JOA评分A组14.1±1.5分,B组15.9±1.7分,两组间有统计学差异(P<0.05)。术后3个月、12个月JOA评分改善率两组间有统计学差异(P<0.05)。A、B两组术后12个月的轴性症状发生率分别为42.5%和19.4%,有统计学差异(P<0.05)。结论:术前C7/T1椎间孔面积较大的患者后路单开门椎管扩大成形术后神经功能的恢复更好,JOA改善率更高,术后轴性症状的发生率更低。

B7-H6在宫颈上皮内瘤变、宫颈癌组织中表达差异及与肿瘤浸润T淋巴细胞、预后的相关性

目的探究宫颈上皮内瘤变、宫颈癌组织中B7同源体6(B7-H6)表达差异与肿瘤浸润T淋巴细胞、预后相关性。方法选取2019年6月—2021年3月60例经病理检查确诊为宫颈癌的手术患者作为研究组,另选同期同年龄段60例宫颈上皮内瘤变作为对照组。比较2组组织B7-H6表达情况(H-score评分)及血清B7-H6水平,并比较研究组不同肿瘤浸润T淋巴细胞浸润程度患者H-score评分、血清B7-H6水平,分析研究组H-score评分、血清B7-H6水平与肿瘤浸润T淋巴细胞浸润程度的相关性。研究组术后随访1年,比较不同预后患者一般资料、H-score评分、血清B7-H6水平,探讨预后影响因素,并分析H-score评分和血清B7-H6水平预测患者预后的价值。结果研究组H-score评分和血清B7-H6水平高于对照组(P<0.01)。研究组肿瘤浸润T淋巴细胞浸润程度0级患者H-score评分、血清B7-H6水平高于1级、2级患者,且1级患者高于2级患者(P<0.05)。研究组H-score评分、血清B7-H6水平与肿瘤浸润T淋巴细胞浸润程度呈负相关(P<0.01)。多因素Logistic回归分析显示,肿瘤直径、国际妇产科协会(FIGO)分期、淋巴结转移、间质浸润深度、H-score评分、血清B7-H6水平均为宫颈癌手术患者预后不良的独立危险因素(P<0.01)。肿瘤直径、FIGO分期、淋巴结转移、间质浸润深度、H-score评分和血清B7-H6水平预测宫颈癌手术患者预后不良的曲线下面积(AUC)分别为0.736、0.726、0.714、0.712、0.842和0.840,H-score评分和血清B7-H6水平预测的AUC分别大于肿瘤直径、FIGO分期、淋巴结转移、间质浸润深度预测的AUC(P<0.05)。H-score评分和血清B7-H6水平在预测宫颈癌手术患者预后不良方面拥有良好的临床效用。结论宫颈癌组织B7-H6表达高于宫颈上皮内瘤变,且宫颈癌组织B7-H6表达、血清B7-H6水平与肿瘤浸润T淋巴细胞浸润程度呈负相关,也是宫颈癌手术患者预后不良的独立危险因素,在预测预后方面具有一定临床价值。

Toll样受体7、白细胞介素-6与类风湿关节炎的相关性研究进展

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一类慢性炎症性自身免疫性病变,其主要特征为滑膜炎症、软骨损伤及关节破坏等。滑膜细胞和免疫细胞之间的相互作用可调节免疫介导的关节疼痛和畸形,RA疾病进展可导致终身残疾。Toll样受体(toll-like receptor,TLR)可与机体自身产生的内源性配体结合,其不仅在刺激免疫过程中发挥主要作用,还参与炎症性疾病、创伤及肿瘤的发病过程。研究表明,TLR7在RA的发病机制中发挥关键作用;此外,白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)是RA发病机制的核心因子之一,其表达水平与RA的严重程度呈正相关。本文综述TLR7、IL-6与RA的相关性研究进展,旨在为RA的临床治疗提供思路。

编码IL-7的溶瘤疱疹病毒通过激活CD8^(+)T细胞增强对肝癌的杀伤活性

目的:探究分泌IL-7的溶瘤疱疹病毒(HSV)是否可以通过激活CD8^(+)T细胞抑制肝癌生长。方法:Western blot检测IL-7表达情况;结晶紫染色法检测溶瘤病毒HSV以及HSV-IL-7对肿瘤细胞的体外裂解情况;皮下移植瘤模型检测HSV以及HSV-IL-7对肿瘤的抑制能力;ELISA法检测血清以及肿瘤组织中IL-7、IFN-γ、TNF-α含量;免疫组化法检测肿瘤组织中CD8^(+)T细胞的浸润情况;流式细胞术检测肿瘤浸润CD8^(+)T细胞Granzyme B的分泌水平。结果:HSV-IL-7感染的肿瘤细胞均高表达IL-7;HSV以及HSV-IL-7在体外均可以有效裂解B16-F10、CT-26以及H22肿瘤细胞系,且具有剂量依赖性;HSV-IL-7可以显著抑制H22肝癌细胞的体内生长(P<0.01),延长荷瘤小鼠的生存期(P<0.001);HSV-IL-7可以显著提高肿瘤部位IL-7的含量(P<0.0001),同时有效增加肿瘤浸润CD8^(+)T细胞的数目(P<0.001);HSV-IL-7可以显著增强肿瘤浸润CD8^(+)T细胞分泌Gran-zyme B的能力以及增加肿瘤组织中IFN-γ和TNF-α含量(P<0.0001)。结论:HSV-IL-7在体内外均具有良好的肿瘤抑制活性,同时其可以通过分泌IL-7,激活体内CD8^(+)T细胞的抗肿瘤性,从而进一步抑制肿瘤生长并延长荷瘤小鼠的生存期。

国产化FMQL动态加载JFM7K325T的方法

随着业务复杂度、通信指标要求、国产化要求的提高,会在通信设备的数字板上联合用国产化SOC和国产化FPGA芯片,例如FMQL作为主芯片运行实时操作系统,JFM7K325T作为扩展芯片辅助FMQL进行实时数字信号处理。为了满足软件定义无线电要求,通信设备运行过程中,FMQL需对JFM7K325T进行动态加载。本文介绍了FMQL对JFM7K325T进行动态加载的方法,包括系统设计、时序设计、软件设计,并对该方法进行了测试验证,实验结果证明了该方法具备有效性、稳定性、可扩展性。FMQL对JFM7K325T进行动态加载的方法可运用到通信设备的工程项目中,具备工程实用性,也为宸芯CX8911、金卓KS2300X等其他型号的国产化主芯片联合JFM7K325T设计通信设备提供了参考。

Let-7e-5p调控Fas/FasL影响小鼠变应性鼻炎发病的机制研究

目的探讨let-7e-5p对小鼠变应性鼻炎的影响及机制。方法将18只BALB/c小鼠按随机数字表法均分为对照(Control)组、变应性鼻炎(AR)组、let-7e-5p激动剂阴性对照(AR+agomir-NC)组、let-7e-5p激动剂(AR+agomir)组、let-7e-5p抑制剂阴性对照(AR+antagomir-NC)组和let-7e-5p抑制剂(AR+antagomir)组。除Control组外,其余组应用卵白蛋白(OVA)致敏建立AR模型,AR+agomir组和AR+antagomir组同时给予let-7e-5p agomir或let-7e-5p antagomir进行干预,末次激发致敏后对小鼠变应性鼻炎进行评分,HE染色观察鼻黏膜组织,统计嗜酸性粒细胞数量,real-time PCR检测let-7e-5p、Fas、FasL m RNA表达,Western blot检测Fas、FasL蛋白表达,酶联免疫吸附试验检测血清免疫球蛋白E(IgE)、特异性IgE(sIgE)、干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-12、IL-4、IL-13水平,双荧光素酶实验分析let-7e-5p和Fas、FasL的靶向关系。结果与Control组比较,AR组小鼠变应性鼻炎评分升高,鼻黏膜增生明显,嗜酸性粒细胞数量增加,let-7e-5p mRNA表达及IFN-γ、IL-12水平下降,Fas、FasL表达及IgE、sIgE、IL-4、IL-13水平升高(均P<0.05)。与AR+agomir-NC组比较,AR+agomir组小鼠变应性鼻炎评分降低,鼻黏膜结构清晰,嗜酸性粒细胞数量减少,let-7e-5p mRNA表达及IFN-γ、IL-12水平升高,Fas、FasL表达及IgE、sIgE、IL-4、IL-13水平下降(均P<0.05)。与AR+antagomir-NC组比较,AR+antagomir组小鼠变应性鼻炎评分升高,鼻黏膜增厚,嗜酸性粒细胞数量增加,let-7e-5p mRNA表达减少,Fas、FasL表达及IgE、sIgE、IL-4、IL-13水平升高(均P<0.05),IL-12、IFN-γ水平差异无统计学意义。与NC+3’UTR-WT组比较,let-7e-5p agomir+3’UTR-WT组荧光素酶活性下降(P<0.05)。结论Let-7e-5p通过靶向调节Fas/FasL影响1型辅助性T细胞(Th1)/2型辅助性T细胞(Th2)平衡,从而参与AR小鼠变应性鼻炎发病的进展。

T7E1检测CRISPR-Cas9基因编辑效果实验设计

CRISPR-Cas9是一种现代生命科学研究中普遍使用的新型基因编辑技术。为了升级课程内容体系,使实验教学贴近科研实际,提升实验课程教学质量,设计了T7核酸内切酶1(T7E1)检测CRISPR-Cas9基因编辑效果实验。以CRISPR-Cas9基因编辑技术对mfn1编辑过的HeLa细胞为实验材料,提取基因组DNA,PCR扩增mfn1基因片段,切胶回收后,变性,退火,使用T7E1对编辑效果进行检测。经1%琼脂糖凝胶电泳,可观察到T7E1将略大于500 bp的mfn1基因片段切成两条大小约为250 bp的DNA片段,表明CRISPR-Cas9成功地对mfn1进行了编辑。

DHCR7基因在胃癌中的表达及其与免疫相关基因的关系

目的探究7-脱氢胆固醇还原酶(DHCR7)基因在胃癌中的表达及其与免疫相关基因的关系。方法使用UALCAN、TIMER数据库分析DHCR7基因在不同类型肿瘤中的表达情况。使用GEPIA、TCGA、GEO数据库分析DHCR7基因在胃癌中的表达。Kaplan-Meier Plotter数据库分析DHCR7基因表达与胃癌患者预后的相关性。通过cBioPortal数据库找出与DHCR7共表达的基因,并展示这些基因中相关系数比较高的基因。对胃癌中与DHCR7表达正负相关的基因进行基因本体分析(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析,首先分析DHCR7基因与CD8^(+)T细胞以及招募CD8^(+)T细胞相关趋化因子的相关性;其次分析DHCR7基因与免疫激活相关基因的相关性;最后分析DHCR7表达与胃癌患者临床病理学特征的关联。结果DHCR7基因在大多数肿瘤类型中均有高表达趋势。DHCR7基因在胃癌中的表达高于正常胃黏膜。Kaplan-Meier Plotter数据库中201790-s-at芯片结果显示高表达DHCR7组患者生存期较短。与DHCR7负相关基因的GO、KEGG通路富集分析主要富集在免疫相关功能和信号通路上,DHCR7与CD8^(+)T细胞、招募CD8^(+)T细胞相关的趋化因子以及免疫激活基因都具有负相关性。DHCR7高表达与胃癌患者年龄呈正相关。结论DHCR7在胃癌组织中呈高表达,高表达DHCR7患者预后不良,DHCR7基因能够影响胃癌免疫微环境,有望成为胃癌免疫治疗的新靶点。

激光热处理对T74态7B04铝合金板材性能的影响

为了探究T74态7B04铝合金经过激光热处理后的性能变化,对1.5 mm厚T74态7B04铝合金板材进行了不同温度下的激光热处理,并对激光热处理后的T74态7B04铝合金试件进行了单向拉伸试验和断口形貌观测。试验结果表明:与原始T74态7B04铝合金相比,激光热处理后T74态7B04铝合金断后伸长率显著提高且强度下降较小。当激光热处理功率为884 W,对应热处理温度为540℃时,T74态7B04铝合金试件的断后伸长率提高了110.91%,抗拉强度和屈服强度分别下降了11.48%和5.9%;断口观测结果表明激光热处理后的材料韧窝增多且加深,且激光热处理前后均属于韧性断裂,与单向拉伸试验结果一致,说明激光热处理在有效增强T74态7B04铝合金的塑性的同时,使得合金的强度有所保持。

miR-125b通过靶向B7-H4对再生障碍性贫血T细胞活化的影响

目的:探讨miR-125b在再生障碍性贫血(AA)患者T细胞活化中的作用及分子机制。方法:纳入山东省滨州医学院附属医院从2018年1月至2021年10月30例AA患者,15名健康个体作为健康对照(HC)组,分离外周血单个核细胞(PBMC),RT-q PCR检测PBMC中miR-125b、B7-H4 mRNA的水平。免疫磁珠分选AA患者和健康对照者naive T细胞和non-naive T细胞,检测miR-125b、B7-H4 mRNA的水平。转染慢病毒LV-NC inhibitor、LV-miR-125b inhibitor至细胞中,流式细胞术检测T细胞活化。双荧光素酶报告基因实验检测miR-125b和B7-H4之间的靶向关系。RT-q PCR和Western blot检测miR-125b、CD40L、ICOS、IL-10 mRNA和B7-H4蛋白的水平。结果:与HC组比较,AA患者PBMC中miR-125b表达上调(P<0.05),B7-H4 mRNA表达下调(P<0.05),CD4+CD69+T细胞和CD8+CD69+T细胞比例较高(P<0.05)。AA患者的naive T细胞和non-naive T细胞中miR-125b的表达均显著上调,B7-H4 mRNA表达下调(P<0.05),且non-naive T细胞较naive T细胞更明显(P<0.05)。与NC inhibitor组比较,miR-125b inhibitor组中miR-125b的表达显著降低(P<0.05),PBMC中CD4+和CD8+T细胞上CD69的表达水平显著降低(P<0.05),miR-125b inhibitor和B7-H4-3′UTR-WT共转染后荧光素酶活性显著升高(P<0.05)。与NC inhibitor组比较,miR-125b inhibitor组细胞中B7-H4 mRNA和蛋白水平显著升高(P<0.05)。与miR-125b inhibitor+shRNA组比较,miR-125b inhibitor+sh-B7-H4组CD4+和CD8+T细胞上的CD69表达水平显著升高(P<0.05),CD40L、ICOS和IL-10mRNA水平亦显著升高(P<0.05)。结论:miR-125b可能通过靶向B7-H4促进AA患者T细胞活化。

^(18)F-FDG-PET/CT糖代谢参数与B7-H3、CD8^(+)T细胞在结直肠癌中的相关性研究

背景:糖酵解功能与结直肠癌的增殖、转移、耐药性等具有明显相关性,对如何量化评估糖酵解水平还缺乏相应指标。目的:探讨术前^(18)F-FDG-PET/CT糖代谢参数与结直肠癌患者临床病理特征、B7-H3、CD8^(+)T细胞表达的相关性。方法:收集2021年4月—2022年7月苏州大学附属第一医院确诊的40例结直肠腺癌患者,所有患者在术前2周内行全身^(18)F-FDG-PET/CT检查,获取最大标准化摄取值(SUVmax)、平均标准化摄取值(SUVmean)、肿瘤代谢体积(MTV)、病灶糖酵解总量(TLG)。采用免疫组化染色检测B7-H3、CD8^(+)T细胞表达,并分析其与临床病理特征、^(18)F-FDG-PET/CT糖代谢参数的相关性。结果:MTV、TLG与结直肠癌患者的T分期、淋巴结转移相关(P<0.05),而SUVmax、SUVmean、MTV、TLG与其他临床病理特征无关(P>0.05)。与癌旁组织相比,结直肠癌组织中B7-H3表达显著升高(P<0.001),CD8^(+)T细胞表达显著降低(P<0.001)。结直肠癌组织中B7-H3表达与CD8^(+)T细胞表达无关(P>0.05);B7-H3表达与T分期、淋巴结转移相关(P<0.05);CD8^(+)T细胞表达与肿瘤大小、分化程度相关(P<0.05)。结直肠癌组织中B7-H3表达与SUVmax、SUVmean、MTV和TLG相关(P<0.05),CD8^(+)T细胞与MTV、TLG相关(P<0.01)。结论:^(18)F-FDG-PET/CT糖代谢参数中的MTV和TLG能更有效地反映结直肠癌病理特征和转移情况,可能具有更高的评估价值。在结直肠癌组织中,B7-H3明显高表达、CD8^(+)T细胞明显低表达,两者与PET/CT糖代谢参数均存在相关性。联合^(18)F-FDG-PET/CT和B7-H3、CD8^(+)T细胞的表达情况可能为结直肠癌临床判断分期、转移以及评估糖酵解水平等提供更为可靠的参考价值。

系统性红斑狼疮患者外周血中T细胞α7nAChR mRNA的表达及其临床意义

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血中T细胞α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAChR)mRNA的表达及其临床意义。方法选取2019年7月至12月于中国医科大学附属第一医院风湿免疫科住院的16例女性SLE患者作为SLE组,以性别、年龄相匹配的16例女性健康志愿者作为正常对照组(NC组)。留取SLE组患者治疗前血样,进行白细胞计数、淋巴细胞计数、免疫球蛋白、补体、C反应蛋白(CRP)、红细胞沉降率、细胞因子、T细胞亚群等项目检测。利用实时PCR检测SLE组患者CD4^(+)T细胞和CD8^(+)T细胞α7nAChR mRNA的表达水平。采用Pearson相关或Spearman相关分析α7nAChR mRNA表达与SLE患者各项临床指标的关系。结果与NC组比较,SLE组外周血中CD4^(+)T细胞和CD8^(+)T细胞α7nAChR mRNA表达水平均显著降低(分别为1.02±0.49 vs0.50±0.27,P=0.005;1.83±0.46 vs 0.83±0.58,P=0.001)。SLE组患者外周血中CD4^(+)T细胞α7nAChR mRNA水平与IgG(r=-0.637,P=0.035)、CRP(r=-0.611,P=0.034)及系统性红斑狼疮疾病活动指数(SLEDAI)评分(r=-0.605,P=0.030)显著负相关。结论SLE患者外周血中T细胞α7nAChR mRNA低表达;α7nAChR mRNA表达与SLEDAI、血清IgG和CRP水平显著负相关,提示α7nAChR可能参与了SLE的发生发展,可作为判定SLE疾病活动的临床新指标。

基于T7转录系统的谷氨酸棒杆菌重组蛋白高效表达系统的创建

本研究以前期构建的大肠杆菌-谷氨酸棒杆菌穿梭载体pAU2为基础,通过添加T7 RNA聚合酶编码基因及人工合成的克隆表达区,构建了1个新的谷氨酸棒杆菌分泌型基因高效表达载体pAU29KS。pAU29KS载体克隆/表达盒使用T7启动子作为目的基因的启动子,通过载体序列中T7 gene 1基因编码的T7 RNA聚合酶与T7启动子互作来进行目的基因的高效转录;启动子区下游使用谷氨酸棒杆菌核糖体结合位点RBS保守序列(gaaagga)来高效起始目的蛋白合成;克隆/表达盒RBS与多克隆位点MCS之间使用谷氨酸棒杆菌强信号肽cgl_2070编码序列来进行目的蛋白的胞外高效分泌。以嗜热脂肪土芽孢杆菌的α-淀粉酶AmyF作为报告蛋白,进行谷氨酸棒杆菌C.glutamicum/pAU29KS表达系统的蛋白分泌生产能力检测。透明圈法检测结果显示,工程菌株C.glutamicum/pAU29KS-amyF能够在淀粉平板上产生清晰可见的透明圈;培养物上清液的SDS-PAGE考马斯亮蓝染色和Western Blotting检测结果都显示出清晰的特异性条带,与AmyF预测分子量相一致;淀粉酶活性检测结果显示,培养物上清液呈现高淀粉酶活力,而细胞裂解上清液未检测到淀粉酶活力,说明高效表达的α-淀粉酶在强信号肽cgl_2070的介导下完全分泌到胞外培养基中。本研究构建的基于T7转录系统的C.glutamicum/pAU29KS能够对目标蛋白进行高效分泌生产,是一套新的谷氨酸棒杆菌分泌型重组蛋白表达系统。

Lmo7对MC3T3-E1细胞增殖、迁移及成骨分化影响的实验研究

目的:研究Lmo7基因对小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(mouse embryo osteoblast precursor cells,MC3T3-E1 cells)增殖、迁移及成骨能力的影响。方法:体外培养MC3T3-E1细胞并对其进行成骨诱导,在0、3、7、14 d时收样,通过实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)与蛋白质印迹法(Western blotting)验证Lmo7的表达变化。利用慢病毒转染pLV-shLmo7获得稳定干扰Lmo7表达的细胞株,并通过CCK-8实验、EdU细胞增殖实验、细胞划痕实验、Transwell实验检测Lmo7对细胞增殖、迁移能力的影响。通过碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色法检测ALP的表达活性,通过RT-qPCR检测成骨相关基因Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)、Osterix、ALP、骨钙素(osteocalcin,OCN)的表达。结果:Lmo7基因在成骨诱导的过程中表达上调。成功构建了Lmo7干扰的稳转细胞株,其增殖活性显著提高,而迁移能力受到抑制。对其进行成骨诱导后发现,与对照组相比,Lmo7干扰稳转株的ALP染色较浅,成骨相关基因Runx2、Osterix、ALP、OCN表达水平明显下调,且差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:Lmo7低表达后可促进细胞增殖,抑制细胞迁移,下调Runx2、Osterix、ALP、OCN的表达能够抑制MC3T3-E1细胞体外成骨分化。

基于JFM7K325T着陆设备时序信号设计与实现

针对飞机进场着陆问题,提出一种基于JFM7K325T着陆设备时序信号设计方案,JFM7K325T负责产生数字信号处理(DSP)的时钟、复位、逻辑控制和数据的预处理,在时钟的同步下按一定格式产生不同功能的着陆设备数据信号,并通过试验验证该方案的可行性。

T_(1)倾斜角与C_(7)倾斜角多因素分组相关性分析

目的:通过T_(1)倾斜角(T_(1) slope,T_(1)S)与C_(7)倾斜角(C_(7) slope,C_(7)S)相关性分析,探讨C_(7)S是否可替代T_(1)S。方法:以2015年7月至2020年7月门诊和住院的442例颈椎疾患患者为观察对象,筛选出能识别T_(1)上终板患者259例,男145例,女114例,其中颈椎手术患者163例,门诊非手术患者96例,年龄20~83(58.6±11.2)岁。将筛选对象按性别、年龄、颈椎是否后凸、颈椎序列是否失衡、颈椎是否手术进行分组,其中男性组145例,女性组114例;青年组76例(<40岁),中年组109例(40~60岁),老年组74例(>60岁);颈椎后凸组92例,非后凸组167例;颈椎序列失衡组51例,非失衡组208例;颈椎手术组163例,非手术组96例。依次分析各种形式分组T_(1)S与C_(7)S相关性。结果:442例患者T_(1)上终板可见者259例(58.6%),C_(7)上终板可见者401例(90.7%)。上述259例患者T_(1)S平均值为(24.5±8.7)°,其中男性组(25.9±7.7)°,女性组(23.7±6.9)°;C_(7)S平均值(20.8±7.3)°,其中男性组(22.5±7.5)°,女性组(19.7±5.8)°。T_(1)S与C_(7)S总相关系数r=0.89,复相关系数R^(2)=0.79,线性回归方程为T_(1)S=0.91×C_(7)S+4.35。在上述一般资料和畸形各因素分组中,T_(1)S与C_(7)S均具有高度相关性(r值为0.85~0.92,P<0.05)。结论:不同因素分组中T_(1)S与C_(7)S具有高度相关性,对于无法测得T_(1)S的病例,可使用C_(7)S取代T_(1)S,为评估脊柱矢状面平衡,分析病情以及制定手术方案提供指导和参考。

记忆型双特异性CAR-T细胞的工艺优化研究

目的 研究能够显著降低CAR-T细胞的体外分化程度、维持记忆型CAR-T(CAR-Tm)细胞高浓度稳态的新工艺路径,提升和延长CAR-T细胞的肿瘤杀伤效果。方法 采用流式细胞分析(FACS)技术,对原工艺采用CD3/CD28磁珠分选CD3^(+)T细胞,在体外培养过程中不断补充IL-2细胞因子,和新工艺利用CD4/CD8磁珠分选出CD4^(+)和CD8^(+)T细胞并用耦联人源化抗体纳米粒(TransAct)活化,在体外培养过程中添加IL-7和IL-15培养所得T细胞分别进行CAR-Tm细胞亚群分析,并通过对比不同TransAct用量和培养时间获得最优制备工艺。结果 新工艺得到的低分化记忆型CAR-T(CAR-Tscm^(+)CAR-Tcm亚群)细胞占总T细胞和CAR-T细胞的比例显著高于原工艺(P<0.05),TransAct的最佳用量为20%,细胞体外最佳培养时间为12 d。结论 联用IL-7细胞因子、IL-15细胞因子、TransAct有利于维持靶向CD19/CD37双特异性低分化CAR-Tm细胞高位数量和维持时间,提高持久性,为其后续临床研究及产业化奠定了基础。

喷丸覆盖率对7B50-T7751铝合金裂纹扩展速率的影响

喷丸强化通过改变材料的表面粗糙度、显微硬度和残余应力等表面完整性来影响材料的疲劳裂纹扩展性能。本文采用两种不同喷丸覆盖率(100%和300%)对7B50–T7751铝合金表面进行喷丸强化,使用粗糙度仪、扫描电子显微镜(SEM)和X射线衍射(XRD)等对强化后的试样进行表面完整性表征,对喷丸处理后的试样进行疲劳裂纹扩展试验,并对疲劳断口进行分析,研究不同喷丸覆盖率对疲劳裂纹扩展速率的影响。试验结果显示,喷丸降低了试样的裂纹扩展速率,提高了试样的疲劳裂纹扩展寿命。在喷丸覆盖率为100%~300%范围内,覆盖率为300%疲劳试样的疲劳裂纹扩展性能相对较好,主要是由于喷丸强化在试样表层引入了一层有益的压缩残余应力层,提高了试样表层的硬度。

激酶ULK1对急性T淋巴细胞白血病细胞凋亡作用的研究

目的 探讨ULK1对急性T淋巴细胞白血病细胞株CEM-C7凋亡的影响及与AMPKα/ULK1轴之间的关系。方法 通过予不同浓度ULK1激活剂LYN-1604(0、1.2、2μmol/L)、ULK1抑制剂MRT68921(0、1.2、2μmol/L)干预CEM-C7细胞24 h,流式细胞术检测各药物浓度对CEM-C7细胞株凋亡率的影响,筛选凋亡最明显的药物浓度进行后续实验,Edu及Soft agar实验检测其对CEM-C7细胞株增殖的影响,流式细胞术检测其对CEM-C7细胞株线粒体膜电位的影响,透射电镜观察其对CEM-C7细胞细胞核及线粒体超微结构变化的影响,Western blot检测激活和抑制ULK1后ULK1、p-ULK1(Ser317)、Caspase3、Cleaved-caspase3、Bcl-2、Bax、PCNA、AMPKα、p-AMPKα(Ser172)的表达情况。结果 ULK1抑制剂及激活剂分别干预CEM-C7细胞24 h以后,与对照组相比,ULK1抑制剂可明显促进CEM-C7细胞发生凋亡,抑制CEM-C7细胞增殖,使细胞线粒体的膜电位明显下降,差异均具有统计学意义(P<0.05);透射电镜可观察到明显的细胞凋亡现象;p-ULK1(Ser317)、p-AMPKα(Ser172)的蛋白水平表达下降,而ULK1激活剂对CEM-C7细胞株无明显影响。结论 ULK1可能通过AMPKα/ULK1轴影响其对CEM-C7细胞的凋亡功能。