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Inhibitory Effect of Flavonoid Glycosides from Chlorophytum comosum on Nasopharyngeal Carcinoma 5-8F Cells and Its Mechanism
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作者 Chenliang CHU Xinchen WANG +2 位作者 Kuan LU Liang QIN Lu JIN 《Medicinal Plant》 2024年第1期66-70,共5页
[Objectives]To study the inhibitory activity of two flavonoid glycosides isolated from Chlorophytum comosum Laxum R.Br on human nasopharyngeal carcinoma(NPC)cell line 5-8F in vitro and its mechanism.[Methods]The flavo... [Objectives]To study the inhibitory activity of two flavonoid glycosides isolated from Chlorophytum comosum Laxum R.Br on human nasopharyngeal carcinoma(NPC)cell line 5-8F in vitro and its mechanism.[Methods]The flavonoid glycosides were isolated and purified from the ethanol alcoholic extract of the roots of Liliaceae plant Chlorophytum comosum by silica gel column chromatography,macroporous resin column chromatography,Sephadex LH-20,and reverse column chromatography(ODS).The inhibitory activity of flavonoid glycosides on human nasopharyngeal carcinoma cells was analyzed by CCK-8 method,and the potential mechanism was preliminarily analyzed by molecular docking.[Results]Two flavonoid glycosides were identified as isovitexin 2″-0-rhamnoside and 7-2″-di-O-β-glucopyranosylisovitexin.Two flavonoid glycosides showed promising inhibitory effect on human nasopharyngeal carcinoma cell line 5-8F,with IC_(50) values of 24.8 and 27.5μmol/L,respectively.Molecular docking results showed that the potential targets of two flavonoid glycosides include CyclinD1,Bcl-2β-Catenin,ILK,TGF-β,in addition,two glycosides showed higher predicted binding affinity towards CyclinD1,which verifies the cytotoxicity of the two compounds on human nasopharyngeal carcinoma cell line 5-8F in vitro.[Conclusions]Two flavonoid glycosides are the active molecules in Chlorophytum comosum that can inhibit the proliferation of human nasopharyngeal carcinoma cells,and have the potential to be used in the research and development of anti nasopharyngeal carcinoma drugs. 展开更多
关键词 Chlorophytum comosum Laxum R.br. Flavonoid glycosides 5-8F cells Antitumor mechanism
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8-Br-cAMP和槲皮素对Eca-109细胞周期及凋亡的影响 被引量:10
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作者 任伟宏 宫璀璀 +3 位作者 吴景兰 赵素玲 赵志娟 苏安英 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2003年第5期678-681,共4页
目的 :观察 8 Br cAMP和槲皮素 (quercetin)对Eca 10 9细胞周期及凋亡的影响。方法 :将贴壁培养的Eca 10 9细胞随机分成 3组 ,Br组 :加 8 Br cAMP至终浓度为 2× 10 5mol/L ;Q组 :加槲皮素至终浓度为 4 3μmol/L ;C组 :不加任何药... 目的 :观察 8 Br cAMP和槲皮素 (quercetin)对Eca 10 9细胞周期及凋亡的影响。方法 :将贴壁培养的Eca 10 9细胞随机分成 3组 ,Br组 :加 8 Br cAMP至终浓度为 2× 10 5mol/L ;Q组 :加槲皮素至终浓度为 4 3μmol/L ;C组 :不加任何药物 ,只加入新培养液培养。 3组在同等条件下继续培养 4 8h。采用流式细胞仪检测细胞的周期 ,采用TUNEL法检测细胞凋亡百分率 ,采用DNA琼脂糖凝胶电泳法观察细胞DNA降解情况。结果 :2实验组细胞中G2 M期细胞比例较对照组显著上升 (P <0 .0 1)。细胞凋亡百分率 :2实验组显著高于对照组 (P <0 .0 1) ;Br组和Q组相比 ,差异无统计学意义 (P >0 .0 5 )。DNA琼脂糖凝胶电泳中Br组和Q组皆呈DNA“梯样型”带 ,对照组未呈现DNA降解。结论 :8 Br cAMP和槲皮素皆可阻滞Eca 10 9细胞于G2 M期 ,并进一步诱导Eca 10 9细胞凋亡。 展开更多
关键词 细胞凋亡 8-br-camp 槲皮素 ECA-109细胞 食管癌
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8-Br-cAMP和槲皮素对Eca-109细胞凋亡中P38和Caspase-3表达的影响 被引量:10
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作者 王红梅 郑乃刚 +2 位作者 吴景兰 王一菱 宫璀璀 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2003年第5期672-674,共3页
目的 :探讨 8 Br cAMP和槲皮素对Eca 10 9细胞凋亡中P38、Caspase 3表达的影响。方法 :将贴壁培养的Eca 10 9细胞随机分为 3组 :①对照组 :只加DMEM(Sigma)培养液 (含体积分数 10 %胎牛血清 )培养 4 8h。②Br组 :终浓度为 2× 10 -5... 目的 :探讨 8 Br cAMP和槲皮素对Eca 10 9细胞凋亡中P38、Caspase 3表达的影响。方法 :将贴壁培养的Eca 10 9细胞随机分为 3组 :①对照组 :只加DMEM(Sigma)培养液 (含体积分数 10 %胎牛血清 )培养 4 8h。②Br组 :终浓度为 2× 10 -5mol/L 8 Br cAMP的培养液培养 4 8h。③Q组 :终浓度为 4 3μmol/L槲皮素的培养液培养 4 8h。对以上 3组细胞以TUNEL法染色计数细胞凋亡率。以免疫组化方法观察 3组细胞的P38MAPK IR和Caspase 3 IR反应性。结果 :Br组及Q组细胞凋亡率高于对照组 ;Br组及Q组细胞的P38MAPK IR高于对照组 ;Br组及Q组细胞的Caspase 3 IR亦高于对照组。P38MAPK IR与Caspase 3 IR呈正相关。P均 <0 .0 5。结论 :P38MAPK及Caspase 3参与了 8 Br cAMP及槲皮素诱导的Eca 10 展开更多
关键词 P38 MAPK Caspase-3 细胞凋亡 ECA-109细胞 8-br-camp 槲皮素
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8-Br-cAMP和槲皮素对Eca-109细胞DNApolβ基因及相关基因表达的影响 被引量:8
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作者 李士坤 郑乃刚 +2 位作者 吴景兰 白经修 董子明 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2003年第5期663-666,共4页
目的 :探讨 8 Br cAMP及槲皮素等分化诱导剂对Eca 10 9细胞DNApolβ基因及相关基因表达的影响。 方法 :将培养的Eca 10 9细胞分为 3组 :①加 8 Br cAMP组 (Br组 ) ;②加槲皮素组 (Q组 ) ;③不加任何药物对照组 (C组 )。同时培养 4 8h ,... 目的 :探讨 8 Br cAMP及槲皮素等分化诱导剂对Eca 10 9细胞DNApolβ基因及相关基因表达的影响。 方法 :将培养的Eca 10 9细胞分为 3组 :①加 8 Br cAMP组 (Br组 ) ;②加槲皮素组 (Q组 ) ;③不加任何药物对照组 (C组 )。同时培养 4 8h ,将野生型DNApolβ的cDNA ,EGFRcDNA ,野生型 (wt)p5 3cDNA及c myccDNA分别制备了生物素 /地高辛标记的探针进行原位杂交和RNA斑点印迹阵列。另进行POLB ,XRCC1,VEGF及PCNA的免疫组化染色及免疫斑点印迹阵列。结果 :Br组和Q组的DNApolβ ,EGFR ,c myc基因表达下调而wtp5 3基因表达上调。POLB ,XRCC1,PCNA及VEGF免疫斑点印迹减弱。 8 Br cAMP及槲皮素显著下调Eca 10 9细胞的DNApolβ基因表达及相关癌基因表达 ,同时上调抑癌基因的表达。作为POLB的异二聚体XRCC1及恶性细胞生物标志的PCNA及VEGF表达下调。结论 :分化诱导剂下调Eca 10 9细胞DNApolβ基因表达 ,提示Eca 10 9细胞的polβ基因是高表达的 ;功能调整后的polβ通过相关基因表达的改变尤其是wtp5 展开更多
关键词 DNA聚合酶Β 基因表达 ECA-109细胞 8-br-camp 槲皮素 食管鳞状上皮癌
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CaMKⅡ在8-Br-cAMP诱发的脊髓背角LTP中的作用 被引量:4
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作者 杨红卫 信文君 +2 位作者 张红梅 周利君 刘先国 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期101-104,共4页
目的 探讨钙钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)在8 Br cAMP诱发的脊髓背角长时程增强(LTP)中的作用。方法 采用SD 大鼠, 常规细胞外记录技术记录脊髓背角腰膨大部位浅层C 纤维诱发电位。结果 ①8 Br cAMP(1 mmol/L)诱发的脊髓背角LT... 目的 探讨钙钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)在8 Br cAMP诱发的脊髓背角长时程增强(LTP)中的作用。方法 采用SD 大鼠, 常规细胞外记录技术记录脊髓背角腰膨大部位浅层C 纤维诱发电位。结果 ①8 Br cAMP(1 mmol/L)诱发的脊髓背角LTP咬合(occlude)强直刺激诱导的LTP;②CaMKⅡ选择性抑制剂KN 93 (100μmol/L)或AIP(200μmol/L)阻断8 Br cAMP诱导的脊髓背角LTP;③蛋白质合成抑制剂茴香霉素(200μmol/L)抑制8 Br cAMP诱发的脊髓LTP。结论 CaMKⅡ参与8 Br cAMP诱导的脊髓背角C 纤维诱发的LTP;8 Br cAMP诱导的LTP与强直电刺激诱导的LTP在机制上至少存在部分相同的步骤或途径。 展开更多
关键词 长时程增强 -钙调蛋白依赖性蛋白激酶 8-B-camp 脊髓背角 病理性疼痛
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8-Br-cAMP与顺铂对Eca-109细胞DNA polβ,wtp53基因表达及多药耐受蛋白的影响 被引量:4
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作者 郑乃刚 李士坤 +1 位作者 吴景兰 董子明 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2003年第5期657-660,共4页
目的 :比较分化诱导剂 8 Br cAMP与基因毒性药物顺铂对Eca 10 9细胞DNApolβ及wtp5 3基因表达和多药耐受蛋白的影响。方法 :分别制备生物素和地高辛标记的polβ探针和生物素标记的野生型p5 3(wtp5 3)探针 ,并检测各探针灵敏度。将培养... 目的 :比较分化诱导剂 8 Br cAMP与基因毒性药物顺铂对Eca 10 9细胞DNApolβ及wtp5 3基因表达和多药耐受蛋白的影响。方法 :分别制备生物素和地高辛标记的polβ探针和生物素标记的野生型p5 3(wtp5 3)探针 ,并检测各探针灵敏度。将培养的人食管癌Eca 10 9细胞分组如下 :① 8 Br cAMP组 (Br组 ) ;②不加 8 Br cAMP的对照组 (C1组 ) ,①②组同时培养 4 8h ;③顺铂组 (Pt组 ) ;④不加Pt的对照组 (C2组 ) ,③④组同时培养 2 4h。应用原位杂交技术显示各组细胞polβ基因的表达。对①②及③组细胞进行polβ及wtp5 3双信号原位杂交 ,并应用多药耐受蛋白 (MRP)的免疫组化方法检测耐药性。结果 :生物素标记的polβ探针的杂交信号呈兰紫色细颗粒 ,分布于胞质 ;Br组信号弱于C1组 ,P <0 .0 5。Pt组的信号比C2组强 ,P <0 .0 5。Br组的MRP IR弱于C1组 ,P <0 .0 5 ;Pt组的多药耐受蛋白免疫反应性 (MRP IR)强于C2组 ,P <0 .0 5。地高辛标记的polβ探针的杂交信号呈橙色细颗粒 ,生物素标记的wtp5 3探针的杂交信号呈蓝紫色细颗粒 ,均分布于胞质。在双杂交信号细胞内C1组的橙色强于蓝紫色信号 ;而Br组的蓝紫色信号较明显 ,Pt组的橙色信号较C1组更显著 ,3组相比P皆 <0 .0 5。结论 :8 Br cAMP可下调polβ基因表达及耐药性 ,上? 展开更多
关键词 DNA聚合酶Β 8-br-camp 顺铂 WTP53 耐药性 ECA-109细胞 食管癌
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8-Br-cAMP和槲皮素单独和联合应用对Eca-109细胞凋亡和Bcl-2、Bax、XRCC1等凋亡相关蛋白的作用 被引量:3
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作者 宫璀璀 王文丽 +1 位作者 吴景兰 刘影 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2003年第5期698-700,共3页
目的 :探讨 8 Br cAMP和槲皮素联合应用对Eca 10 9细胞的凋亡和Bcl 2、Bax、XRCC1等凋亡相关蛋白的作用。方法 :将Eca 10 9细胞随机分为 4组 :① 8 Br cAMP组 (Br组 ) ;②槲皮素组 (Q组 ) ;③ (Br+Q)组 ;④不加药物的对照 (C)组。同时培... 目的 :探讨 8 Br cAMP和槲皮素联合应用对Eca 10 9细胞的凋亡和Bcl 2、Bax、XRCC1等凋亡相关蛋白的作用。方法 :将Eca 10 9细胞随机分为 4组 :① 8 Br cAMP组 (Br组 ) ;②槲皮素组 (Q组 ) ;③ (Br+Q)组 ;④不加药物的对照 (C)组。同时培养 4 8h ,对以上 4组细胞制备细胞滴片及硝酸纤维素膜 (NCM)滴膜 2种标本 ,分别进行Bcl 2、Bax、XRCC1的免疫组化和免疫斑点印迹实验 ,并以TUNEL法检测各组细胞凋亡率。结果 :细胞凋亡率 ,C组为 4 % ,(Br +Q)组为 70 % ,Br组为 4 2 % ,Q组为 35 % ,(Br+Q)组 >Br组或Q组 >C组 ,P <0 .0 0 1。Br、Q及 (Br+Q)组与对照组相比 ,Bcl 2 IR及XRCC1 IR皆低于C组 ,P <0 .0 0 1,而Bax IR则高于C组 ,P <0 .0 0 1;Br组 :Q组或Br组 :(Br +Q)组 ,P >0 .0 5。Bcl 2 IR与XRCC1 IR呈显著正相关 ,与Bax IR和Bax IR与XRCC1皆呈显著负相关。结论 :Br与Q联合用药与单独用药皆可下调Bcl 2及XRCC1表达 ,上调Bax表达 ;联合用药的细胞凋亡率显著高于单用Br或Q。提示 。 展开更多
关键词 Bcl-2 Bax XRCC1 8-br-camp 槲皮素 ECA-109细胞 细胞凋亡
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8-Br-cAMP和槲皮素对Eca-109细胞内游离钙离子浓度的影响 被引量:2
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作者 任伟宏 宫璀璀 +2 位作者 吴景兰 赵素玲 顾侦芳 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2003年第5期682-684,共3页
目的 :观察 8 Br cAMP和槲皮素对人食管癌Eca 10 9细胞内游离钙离子浓度 ([Ca2 + ]i)的影响。方法 :将贴壁培养的Eca 10 9细胞随机分成 3组 ,Br组 :加 8 Br cAMP至终浓度为 2× 10 5mol/L ;Q组 :加槲皮素至终浓度为 4 3μmol/L ;C... 目的 :观察 8 Br cAMP和槲皮素对人食管癌Eca 10 9细胞内游离钙离子浓度 ([Ca2 + ]i)的影响。方法 :将贴壁培养的Eca 10 9细胞随机分成 3组 ,Br组 :加 8 Br cAMP至终浓度为 2× 10 5mol/L ;Q组 :加槲皮素至终浓度为 4 3μmol/L ;C组 :不加任何药物 ,只加入新培养液培养。 3组细胞同时培养 4 8h ,用激光共聚焦显微镜观察 3组细胞内钙离子的荧光强度。结果 :对照组细胞内游离钙离子荧光强度为 5 9.2± 8.1,Br组细胞内游离钙离子荧光强度为6 3.3± 8.5 ,与对照组比较差异无统计学意义 (P >0 .0 5 ) ;Q组细胞内游离钙离子荧光强度为 113.3± 12 .5 ,与对照组相比差异有统计学意义 (P <0 .0 1)。结论 展开更多
关键词 CA^2+ 8-br-camp 槲皮素 ECA-109细胞 食管癌
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8-Br-cAMP和血小板衍生生长因子对多囊卵巢综合征患者颗粒细胞E_2生成的影响 被引量:2
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作者 贾莉婷 张展 +3 位作者 王雪梅 王全先 袁恩武 李遂柱 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2006年第2期290-292,共3页
目的探讨8-溴-环磷酸腺苷(8-Br-cAMP)和血小板衍生生长因子(PDGF)对多囊卵巢综合征(P-COS)患者离体卵巢黄素化颗粒细胞雌二醇(E2)生成的影响。方法收集体外授精-胚胎移植(IVF-ET)时PCOS患者(n=6)和正常对照(n=8)的黄素化颗粒细胞进行体... 目的探讨8-溴-环磷酸腺苷(8-Br-cAMP)和血小板衍生生长因子(PDGF)对多囊卵巢综合征(P-COS)患者离体卵巢黄素化颗粒细胞雌二醇(E2)生成的影响。方法收集体外授精-胚胎移植(IVF-ET)时PCOS患者(n=6)和正常对照(n=8)的黄素化颗粒细胞进行体外原代培养,在其培养的不同时间(0h、48h、120h)以睾酮(10-7mol/L)作为底物,分别添加8-Br-cAMP(2mmol/L)和(或)PDGF(10μg/L)于无血清培养液(TCM199)中,共培养3h后收集培养上清、细胞。用放射免疫法测定颗粒细胞分泌E2量;用考马斯亮蓝G250/BSA测颗粒细胞蛋白含量,以校正E2含量。结果与对照组比较,8-Br-cAMP和PDGF在0h、48h和120h均显著刺激PCOS组颗粒细胞分泌E2(P<0.05);8-Br-cAMP和PDGF联合作用在48h、120h显著刺激PCOS组颗粒细胞分泌E2(P<0.05)。结论8-Br-cAMP和PDGF均可加速PCOS患者卵巢颗粒细胞内雄激素向雌激素的转化;8-Br-cAMP和PDGF对颗粒细胞芳香化酶活性的调节作用是一致的。 展开更多
关键词 多囊卵巢综合征 8--环磷酸腺苷 血小板衍生生长因子 芳香化酶 颗粒细胞 雌二醇
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8-Br-cAMP联合HSV-TK/GCV治疗舌鳞癌移植瘤的研究 被引量:4
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作者 王安训 温映萍 +1 位作者 李苏 黄洪章 《中山医科大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第1期89-91,I006,共4页
[目的]探讨8-Br-cAMP联合单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(HSV-TK)/丙氧鸟苷(GCV)对舌鳞癌移植瘤的治疗作用。[方法]舌鳞癌Tca8113细胞接种于28只裸鼠右侧腋下,随机分成4组进行治疗:对照组,8-Br-cAMP组,HSV-TK/GCV组,8-Br-cAMP联合 HSV-TK/GCV... [目的]探讨8-Br-cAMP联合单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(HSV-TK)/丙氧鸟苷(GCV)对舌鳞癌移植瘤的治疗作用。[方法]舌鳞癌Tca8113细胞接种于28只裸鼠右侧腋下,随机分成4组进行治疗:对照组,8-Br-cAMP组,HSV-TK/GCV组,8-Br-cAMP联合 HSV-TK/GCV组;观察肿瘤的生长状态、计算抑瘤率和群体倍增时间;观察肿瘤的组织病理学及超微结构改变。[结果]与对照组比较,8-Br-cAMP和HSV-TK/GCV单独应用时肿瘤的生长明显受到抑制(P<0.01),肿瘤的群体倍增时间延长;析出分析显示两者间存在协同的抑瘤作用(P<0.01)。光镜下对照组和8-Br-cAMP组无明显差别,HSV-TK/GCV组和8-Br-cAMP联合HSV-TK/GCV组肿瘤组织中可见囊性变和大片的灶性坏死;透射电镜显示8-Br-cAMP对舌癌细胞具有诱导分化作用。[结论]8-Br-cAMP与HSV-TK/GCV系统具有协同的抑制舌鳞癌移植瘤生长作用。 展开更多
关键词 8-br-camp 自杀基因 单纯疱疹病毒胸苷激酶基因 基因疗法 舌肿瘤
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8-Br-cAMP和槲皮素诱导Eca-109细胞p16基因启动子DNA结合蛋白的定位研究 被引量:1
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作者 苏安英 张莹 +2 位作者 吴景兰 丁一 张钦宪 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2003年第5期694-696,共3页
目的 :探讨 8 Br cAMP和槲皮素 (quercetin)诱导的Eca 10 9细胞p16基因启动子特异性结合的序列特异性DNA结合蛋白 (DBP)的定位。方法 :应用DBP定位改进方法 ,以制备的特异性DNA探针检测目的DBP在细胞内的定位 ;以免疫细胞化学技术 ,检... 目的 :探讨 8 Br cAMP和槲皮素 (quercetin)诱导的Eca 10 9细胞p16基因启动子特异性结合的序列特异性DNA结合蛋白 (DBP)的定位。方法 :应用DBP定位改进方法 ,以制备的特异性DNA探针检测目的DBP在细胞内的定位 ;以免疫细胞化学技术 ,检测细胞PCNA免疫反应性 ,作为肿瘤细胞恶性程度生物标志。结果 :DBP定位信号以胞核为主 ,胞质有阳性信号的细胞 ,胞膜也呈阳性信号 ;2实验组信号比对照组强 ;各组信号均以大细胞更强 ;PCNA免疫细胞化学阳性呈棕黄色颗粒 ,主要位于胞核 ,对照组强于实验组。各组均以大细胞阳性信号更强。结论 :2实验组与p16基因启动子结合的DBP主要位于胞核 ,但核外存在结合潜力的蛋白质。 2实验组PCNA免疫反应性均下降。提示这些与p16基因启动子区结合的DBP在一定程度上可诱导细胞恶性逆转化。 展开更多
关键词 DNA结合蛋白 定位 PCNA 8-br-camp 槲皮素 ECA-109细胞 食管癌
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8-Br-cAMP对视网膜母细胞瘤株增殖的影响 被引量:2
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作者 郭慧丽 郭希让 王爱凤 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2003年第5期474-475,共2页
目的 从细胞水平上探讨8-Br-cAMP对视网膜母细胞瘤株增殖的影响。方法 采用8-Br-cAMP对视网膜母细胞瘤株HXO-Rb_(44)细胞进行体外实验,通过蛋白斑点印迹方法检测HXO-Rb_(44)细胞PCNA-IR的OD值,观察其增殖情况,流式细胞术检测细胞周期变... 目的 从细胞水平上探讨8-Br-cAMP对视网膜母细胞瘤株增殖的影响。方法 采用8-Br-cAMP对视网膜母细胞瘤株HXO-Rb_(44)细胞进行体外实验,通过蛋白斑点印迹方法检测HXO-Rb_(44)细胞PCNA-IR的OD值,观察其增殖情况,流式细胞术检测细胞周期变化。结果 HXO-Rb_(44)细胞增殖受抑制,PCNA OD值与药物作用时间呈显著负相关(P<0.01),且细胞周期发生改变,被阻滞于G_0/G_1期,S期比率下降,亦与药物作用时间有关。结论 8-Br-cAMP具有抑制Rb_(44)细胞增殖作用,使其阻滞于G_1期,为临床治疗视网膜母细胞瘤提供了新的途径。 展开更多
关键词 8-br-camp 视网膜母细胞瘤 癌细胞 细胞增殖 细胞周期
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8-Br-cAMP对Hela细胞wtp53,mtp53,c-myc和iNOS基因表达的影响 被引量:1
13
作者 宫璀璀 任伟宏 +2 位作者 吴景兰 王文丽 刘影 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2003年第5期666-669,共4页
目的 :探讨 8 Br cAMP对Hela细胞癌基因和抑癌基因等表达的影响。方法 :将培养的Hela细胞分为 3组 :① 8 Br cAMP组 (Br组 ) :加至 8 Br cAMP终浓度为 2× 10 -5mol/L ;②阳性对照组 (60 Co组 ) :给予60 Co照射量 4Gy ,72 0s;③阴... 目的 :探讨 8 Br cAMP对Hela细胞癌基因和抑癌基因等表达的影响。方法 :将培养的Hela细胞分为 3组 :① 8 Br cAMP组 (Br组 ) :加至 8 Br cAMP终浓度为 2× 10 -5mol/L ;②阳性对照组 (60 Co组 ) :给予60 Co照射量 4Gy ,72 0s;③阴性对照组 (C组 ) :仅加含体积分数为 10 %胎牛血清的DMEM培养液。各组细胞均培养 4 8h后 ,将 1× 10 7ml-1细胞悬液滴加至预先处理过的硝酸纤维素膜和载玻片上。应用原位杂交和完整细胞原位斑点印迹技术分别检测 3组Hela细胞中野生型p5 3(wtp5 3)、突变型p5 3(mtp5 3)、c myc和iNOS基因的表达。结果 :8 Br cAMP组与阳性对照组相比 ,差异无统计学意义 ,P >0 .0 5 ;与阴性对照组相比 ,上调wtp5 3和iNOS基因的表达 ,同时下调mtp5 3和cmyc基因的表达 ,P <0 .0 1。结论 :结果提示 8 Br 展开更多
关键词 癌基因 抑癌基因 8-br-camp HELA细胞
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8-Br-cAMP和槲皮素单独和联合应用对Eca-109细胞POLB及多药耐受相关蛋白的影响 被引量:1
14
作者 宫璀璀 王文丽 +1 位作者 吴景兰 刘影 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2003年第5期701-702,共2页
目的 :探讨 8 Br cAMP和槲皮素单独和联合应用对Eca 10 9细胞耐药性的影响。方法 :将培养的Eca 10 9细胞随机分为 4组 :① 8 Br cAMP组 (Br组 ) ;②槲皮素组 (Q组 ) ;③ (Br+Q)组 ;④不加药物的对照组 (C)组。同时培养 4 8h ,对以上 4... 目的 :探讨 8 Br cAMP和槲皮素单独和联合应用对Eca 10 9细胞耐药性的影响。方法 :将培养的Eca 10 9细胞随机分为 4组 :① 8 Br cAMP组 (Br组 ) ;②槲皮素组 (Q组 ) ;③ (Br+Q)组 ;④不加药物的对照组 (C)组。同时培养 4 8h ,对以上 4组细胞制备细胞滴片及硝酸纤维素膜 (NCM)滴膜 2种标本 ,分别进行MRP和POLB的免疫组化染色和免疫斑点印迹阵列及TLC扫描。结果 :免疫组化染色显示 :C组的MRP IR、POLB IR强于Br组、Q组或 (Br+Q)组 ,P <0 .0 1。TLC扫描OD值 :C组MRP IR高于Br、Q(Br+Q)组约 3倍 ;POLB IR高于Br、Q或 (Br+Q)组约 2倍 ;MRP与POLB呈显著正相关r=0 .9838,P <0 .0 1。结论 :8 Br cAMP和槲皮素联合用药或单独用药均可降低Eca 10 9细胞的多药耐受性而提高药物的敏感性 。 展开更多
关键词 MRP POLB 8-br-camp 槲皮素 ECA-109细胞
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8-Br-cAMP对Eca-109细胞c-myc,wtp53,iNOS基因和EGFR表达的影响 被引量:1
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作者 王红梅 宫璀璀 +1 位作者 吴景兰 王一菱 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2003年第5期669-672,共4页
目的 :探讨 8 Br cAMP对Eca 10 9细胞c myc、wtp5 3、iNOS基因和EGFR表达的影响。方法 :将贴壁培养的Eca 10 9细胞随机分为 2组 :①实验组 :加 8 Br cAMP至终浓度为 2× 10 -5mol/L ,培养 2 4h ;②对照组 :不加 8 Br cAMP ,培养 2 4... 目的 :探讨 8 Br cAMP对Eca 10 9细胞c myc、wtp5 3、iNOS基因和EGFR表达的影响。方法 :将贴壁培养的Eca 10 9细胞随机分为 2组 :①实验组 :加 8 Br cAMP至终浓度为 2× 10 -5mol/L ,培养 2 4h ;②对照组 :不加 8 Br cAMP ,培养 2 4h。对 2组的细胞涂片和硝酸纤维素膜 (NCM)标本进行c myc、wtp5 3、iNOS基因和EGFR表达检测 ,并对扫描数值进行统计学处理。结果 :原位杂交及免疫组化反应信号皆定位于Eca 10 9细胞的胞质 ,扫描数值显示 :①c mycmRNA :实验组为 3.38± 0 .99,对照组为 5 .18± 1.39;②wtp5 3mRNA :实验组为 2 .74± 0 .83,对照组为 0 .38±0 .2 7;③iNOSmRNA :实验组为 4 .5 2± 0 .74 ,对照组为 2 .6 3± 0 .13;④EGFR IR :实验组为 2 .37± 1.0 5 ,对照组为 4 .38±0 .4 8。以上实验组与对照组比较差异有统计学意义 (P均 <0 .0 5 )。结论 :c myc、wtp5 3和NO均可参与 8 Br 展开更多
关键词 C-MYC基因 wtp53基因 INOS基因 EGFR 8-br-camp ECA-109细胞 癌细胞
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8-Br-cAMP上调舌癌细胞株间隙连接蛋白基因Cx43表达的研究 被引量:1
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作者 王安训 黄洪章 孔庆瑜 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第3期279-281,共3页
目的:探讨 8-Br-cAMP( 8-Bromo 3': 5'-cyclic adenosine monophosphate)对舌癌细胞株 (Tca8113)细胞间隙连接蛋白基因 Cx43表达的调节作用。方法:应用 MTT法检测 8-Br-cAMP对舌癌细胞株生长的抑制作用;应用免疫细胞化学... 目的:探讨 8-Br-cAMP( 8-Bromo 3': 5'-cyclic adenosine monophosphate)对舌癌细胞株 (Tca8113)细胞间隙连接蛋白基因 Cx43表达的调节作用。方法:应用 MTT法检测 8-Br-cAMP对舌癌细胞株生长的抑制作用;应用免疫细胞化学、流式细胞仪等技术,对 8-Br-cAMP诱导舌癌细胞株细胞间隙连接蛋白基因 Cx43的表达进行分析。结果:舌癌细胞经 10- 5 mol/L、 10- 4 mol/L、 10- 3 mol/L 8-Br-cAMP处理后,细胞生长受抑制,其抑制率随浓度升高而升高;免疫细胞化学检测可见 Cx43蛋白的表达明显提高;流式细胞仪分析 ,Cx43蛋白荧光强度增强,阳性细胞计数率由 4.8%上升至 26.5%,经 t检验两组间存在显著性差异( P< 0.01)。结论: 8-Br-cAMP对舌癌细胞的抑制作用可能通过上调 Cx43蛋白的表达而实现。 展开更多
关键词 8-br-camp 间隙连接蛋白 舌癌 CX43
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8-Br-cAMP联合顺铂作用于肺腺癌细胞A549的初步研究 被引量:2
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作者 陈曦 刘志勇 《东南大学学报(医学版)》 CAS 2010年第2期193-198,共6页
目的:观察8-溴-环腺苷酸(8-Br-cAMP)联合顺铂(DDP)对人肺腺癌细胞A549生长及其表皮生长因子受体(EGFR)表达的影响。方法:MTT法测定不同浓度8-Br-cAMP、DDP以及两药联用处理人肺腺癌细胞A549后细胞增殖活性的差异;应用RT-PCR技术检测EGFR... 目的:观察8-溴-环腺苷酸(8-Br-cAMP)联合顺铂(DDP)对人肺腺癌细胞A549生长及其表皮生长因子受体(EGFR)表达的影响。方法:MTT法测定不同浓度8-Br-cAMP、DDP以及两药联用处理人肺腺癌细胞A549后细胞增殖活性的差异;应用RT-PCR技术检测EGFR mRNA表达水平的变化;Western blot技术检测EGFR蛋白表达水平的变化;利用流式细胞术测定细胞周期的改变。结果:8-Br-cAMP及DDP均能抑制人肺腺癌细胞A549的增殖,并呈浓度及时间依赖性;DDP联合8-Br-cAMP细胞抑制率显著高于相应浓度单药组(P<0.05),两者呈现出相加的抗瘤效果。8-Br-cAMP可下调人肺腺癌A549细胞EGFR mRNA和蛋白的表达。8-Br-cAMP将细胞周期阻滞在G2/M期(P<0.05)。结论:8-Br-cAMP、DDP均可抑制A549细胞增殖。8-Br-cAMP可显著提高顺铂的细胞毒作用,增强化疗效果,并将细胞阻滞于G2/M期。8-Br-cAMP可以下调EGFR表达,可一定程度地逆转化癌细胞。 展开更多
关键词 8--环腺苷酸 肺腺癌细胞A549 表皮生长因子受体 蛋白激酶A
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8-Br-cAMP和槲皮素联合应用对Eca-109细胞增变基因表型的影响 被引量:1
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作者 宫璀璀 郑乃刚 +2 位作者 王广兰 吴景兰 李璇 《河南医学研究》 CAS 2010年第3期281-284,共4页
目的:探讨8-Br-cAMP和槲皮素联合应用对Eca-109细胞增变基因表型变动的影响。方法:将Eca-109细胞分为4组:①8-Br-cAMP组(Br组);②槲皮素组(Q组);③(Br+Q)组;④不加药物的对照组(C)。同时培养48 h,对以上4组细胞制备细胞滴片及硝酸纤维素... 目的:探讨8-Br-cAMP和槲皮素联合应用对Eca-109细胞增变基因表型变动的影响。方法:将Eca-109细胞分为4组:①8-Br-cAMP组(Br组);②槲皮素组(Q组);③(Br+Q)组;④不加药物的对照组(C)。同时培养48 h,对以上4组细胞制备细胞滴片及硝酸纤维素膜(NCM)滴膜2种标本,分别进行Bcl-2、Bax、XRCC1、MRP和POLB的免疫组化和免疫斑点印迹实验,并以TUNEL法检测各组细胞凋亡率。结果:细胞凋亡率,C组为4%,(Br+Q)组为70%,Br组为42%,Q组为35%,(Br+Q)组>Br组或Q组>C组,(P<0.001)。Br、Q及(Br+Q)组与对照组相比,Bcl-2-IR及XRCC1-IR皆低于C组(P<0.001),而Bax-IR则高于C组(P<0.001);Br组:Q组或Br组:(Br+Q)组(P>0.05)。Bcl-2-IR与XRCC1-IR呈显著正相关,与Bax-IR和Bax-IR与XRCC1皆呈显著负相关。C组的MRP-IR、POLB-IR强于Br组、Q组或(Br+Q)组(P<0.01。)TLC扫描OD值:C组MRP-IR高于Br、Q或(Br+Q)组约3倍;POLB-IR高于Br、Q或(Br+Q)组约2倍;MRP与POLB呈显著正相关r=0.9838(P<0.01)。结论:Br与Q联合用药或单独用药皆可下调Bcl-2,XRCC1,MRP与POLB的表达,上调Bax的表达,提示Br与Q联合用药与单独用药皆可下调Eca-109细胞的增变基因表型。 展开更多
关键词 增变基因表型 8-br-camp 槲皮素 ECA-109细胞
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槲皮素和8-Br-cAMP对Eca-109细胞抑癌基因表达的影响 被引量:2
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作者 任伟宏 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2004年第4期623-625,共3页
目的 :探讨槲皮素和 8 Br cAMP对Eca 1 0 9细胞抑癌基因表达的影响。方法 :将培养的Eca 1 0 9细胞随机分成 3组 :①Br组 ,加 8 Br cAMP至终浓度为 2× 1 0 -5mol/L ;②Q组 ,加槲皮素至终浓度为 4 3μmol/L ;③C组 ,不加任何药物 ,... 目的 :探讨槲皮素和 8 Br cAMP对Eca 1 0 9细胞抑癌基因表达的影响。方法 :将培养的Eca 1 0 9细胞随机分成 3组 :①Br组 ,加 8 Br cAMP至终浓度为 2× 1 0 -5mol/L ;②Q组 ,加槲皮素至终浓度为 4 3μmol/L ;③C组 ,不加任何药物 ,只加入新培养液培养。 3组细胞同时培养 4 8h后 ,分别提取mRNA。将野生型 (wt)p5 3、p1 6和p2 1WAF1cDNA分别制备成生物素标记的探针 ,以mRNA斑点印迹阵列显示Eca 1 0 9细胞wtp5 3、p1 6和p2 1WAF1基因的表达。将 3组细胞分别滴片 ,同时进行分化染色 ,记数分化和增殖细胞比率。结果 :与C组相比 ,Br组和Q组wtp5 3、p1 6和p2 1WAF1mRNA信号增强 ,P <0 .0 1 ;Br组和Q组分化细胞比率显著提高 ,P <0 .0 1。结论 :槲皮素和 8 Br cAMP皆可通过上调wtp5 3、p1 6和p2 1WAF1基因的表达 ,抑制Eca 1 0 9细胞增殖 ,诱导Eca 1 0 展开更多
关键词 食管癌细胞 WTP53 p16 P21WAF1 槲皮素 8-br-camp
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8-Br-cAMP提高HSV-TK/GCV自杀基因系统旁观者效应的研究 被引量:1
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作者 黄洪章 王安训 《口腔颌面外科杂志》 CAS 2002年第1期5-8,共4页
目的 探讨8-Br-cAMP对单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)/丙氧鸟苷(GCV)系统旁观者效应的增强作用及机理。方法 应用FCM、透射电镜检测8-Br-cAMP对口腔鳞癌细胞(Tca8113)、间隙连接蛋白43(Cx43)及间隙连接的诱导分化作用;采用析因... 目的 探讨8-Br-cAMP对单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)/丙氧鸟苷(GCV)系统旁观者效应的增强作用及机理。方法 应用FCM、透射电镜检测8-Br-cAMP对口腔鳞癌细胞(Tca8113)、间隙连接蛋白43(Cx43)及间隙连接的诱导分化作用;采用析因分析法分析8-Br-cAMP对HSV-TK/GCV系统旁观者效应的影响。结果 口腔鳞癌细胞经 10-4mol/L 8-Br-CAMP处理后:FCM检测显示 Cx43表达阳性的细胞由治疗前的(4.8 ± 0.26)%上升到(21.3±0.65)%,两组比较P<0.001;透射电镜显示细胞超微结构出现分化,细胞间出现间隙连接;MTT检测显示增强了HSV-TK/GCV系统治疗时的旁观者效应,两者间存在协同关系。结论8-Br-cAMP可诱导分化口腔鳞癌细胞并显著提高HSV-TK/GCV系统治疗时的旁观者效应。 展开更多
关键词 单纯疱疹病毒胸苷激酶 8-br-camp 旁观者效应 间隙连接蛋白 肿瘤
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