编辑ZmCCT10、ZmCCT9、ZmGhd7基因的串联DsRed荧光表达盒的CRISPR/Cas9系统的构建及验证

CCT家族基因影响植物开花,在玉米中,ZmCCT10、ZmCCT9基因是光周期敏感基因,ZmGhd7基因是与开花期相关的基因。利用CRISPR/Cas9技术靶向编辑ZmCCT10、ZmCCT9、ZmGhd7基因为研究基因的功能和快速改良玉米的开花期提供了可能。本研究以玉米ZmCCT10、ZmCCT9、ZmGhd7基因为编辑对象,以KN5585为稳定转化受体、以CML312SR、LCL-1、LCL-2为预改良的晚熟材料受体,首先通过Sanger测序验证了3个基因靶标区域在4份玉米材料中的保守性,其次根据sgRNA设计原则选择了1个sgRNA复合编辑3个基因,并利用同源重组方法构建了将由胚特异性启动子Zm3896驱动的DsRed表达盒和由ZmU6-2启动子驱动的sgRNA表达盒串联的CRISPR/Cas9基因编辑敲除载体CCT-CPD,然后采用酶切法和Sanger测序法分析T0代KN5585中3个基因的突变率和突变类型,验证了该系统的基因编辑效果,最后通过对稳定遗传转化植株所结籽粒在籽粒水平、组织水平进行DsRed荧光标记表型鉴定,验证了该系统中DsRed荧光筛选标记的有效性。在此基础上,通过杂交育种法以晚熟材料为母本、以T1代KN5585阳性株为父本获得F1并经过DsRed荧光筛选获得含有有效编辑转基因元件的晚熟材料。本研究构建的编辑ZmCCT10/ZmCCT9/ZmGhd7基因的串联DsRed荧光表达盒的CRISPR/Cas9系统为创制单基因突变体,双基因突变体,三基因突变体奠定了基础,该系统中DsRed荧光筛选标记的应用可以快速筛选区分有无转基因成分的玉米籽粒,成本低,鉴定效率高,具有大规模籽粒筛选的潜力,本研究为鉴定ZmCCT10、ZmCCT9、ZmGhd7三个基因的功能和创制玉米光周期钝感材料奠定了材料基础和高效的技术基础。

仿生电刺激联合人工周期对卵巢储备功能减退患者子宫容受性及血清生长分化因子-9、抑制素B、骨形态发生蛋白-10水平的影响

目的探讨仿生电刺激联合人工周期对卵巢储备功能减退(DOR)患者子宫容受性及血清生长分化因子-9(GDF-9)、抑制素B(INHB)、骨形态发生蛋白-10(BMP-10)水平的影响。方法选取2019年1月至2022年3月广西壮族自治区妇幼保健院收治的87例DOR患者作为研究对象。采用随机数字表法分为A组、B组、C组,每组29例。A组采用仿生电刺激治疗,B组采用人工周期治疗,C组采用仿生电刺激联合人工周期治疗。比较三组治疗前后子宫容受性,血清GDF-9、INHB、BMP-10水平,子宫内膜血流参数及卵巢体积;随访1年,比较三组的妊娠情况;比较三组治疗期间不良反应发生情况。结果与治疗前比较,治疗后A组、B组、C组初级卵泡数、优势卵泡数、排卵数及血清GDF-9、INHB、BMP-10水平均升高,卵巢体积均增大,且A组、B组、C组呈增高趋势(P<0.05)。与治疗前比较,治疗后A组、B组、C组子宫内膜血流搏动指数(PI)、子宫内膜血流阻力指数(RI)均减小,且A组、B组、C组呈下降趋势(P<0.05)。随访1年,C组妊娠率高于A组、B组(P<0.05)。治疗期间,三组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论仿生电刺激联合人工周期可提高DOR患者子宫容受性,改善子宫内膜血流参数及卵巢体积,也可改善血清GDF-9、INHB、BMP-10水平,提高自然妊娠率,且安全性好。

东盛煤业9+10号煤层水文地质条件分析

借助山西潞安集团东盛煤业已有地质和水文地质资料,综合分析了该矿9+10号煤层的水文地质条件,采用理论公式法计算确定了9+10号煤层导水裂缝带最大发育高度为70.22 m,认为9+10号煤层的主要充水水源和水害类型为老空水、顶板水、大气降水,最主要的水害类型为老空水,并针对3种主要水害类型分别提出了水害防治建议。

腌腊肉制品中13-HODE、9,10-DHODE、9,10-EPODE、9,10,13-THODE的HPLC-MS/MS检测

采用高效液相色谱-串联质谱法对腌腊肉制品中13-羟基-9,11-十八碳二烯酸（13-hydroxy-9,11-octadecadienoic acid,13-HODE）、9,10-二羟基-12-十八碳烯酸（9,10-dihydroxy-12-octadecenoic acid,9,10-DHODE）、9,10-环氧-12-十八碳烯酸（9,10-epoxyoctadec-12-enoic acid,9,10-EPODE）及9,10,13-三羟基-11-十八碳烯酸（9,10,13-trihydroxy-11-octadecenoic acid,9,10,13-THODE）进行检测。腌腊肉制品中13-HODE、9,10-DHODE、9,10-EPODE、9,10,13-THODE用甲醇提取,经固相萃取柱去净化浓缩,然后以0.1%甲酸与乙腈为流动相,在XBridge色谱柱上进行梯度分离,采用电喷雾源负离子多反应监测模式进行分析。结果表明,13-HODE、9,10-DHODE、9,10-EPODE、9,10,13-THODE分别在质量浓度为0.05-2.0、0.01-0.5、0.05-1.0、0.01-0.5μg/mL的范围内具有较好的线性关系（R2〉0.999）;检出限分别为0.120、0.008、0.200、0.016μg/g;不同添加水平的平均回收率分别为95.1%、85.2%、86.8%、86.2%。对26种腌腊肉制品含量分析表明,所有样本都含有13-HODE、9,10-DHODE、9,10,13-THODE,含量分别在1.4-100.7、0.1-3.9、0.4-10.2μg/g范围内,21种样本中含有9,10-EPODE,含量范围为0.8-6.9μg/g。结果表明,腌腊肉制品中存在目标分析物的异构体,羟基脂肪酸实际含量可能大大高于检测的量。

系统性红斑狼疮患者血清IL-6、IL-8、IL-9、IL-10水平变化及其与早期肾损伤的相关性研究

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者血清白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-9(IL-9)、白细胞介素-10(IL-10)水平变化及其与早期肾损伤的相关性。方法选择2022年3月至2023年3月陕西省人民医院收治的120例早期肾损伤的SLE患者作为观察组,选择同期于我院体检的120例健康者作为对照组。比较两组受检者血清IL-6、IL-8、IL-9、IL-10水平和尿素氮、血肌酐、血尿酸水平,并采用Pearson相关分析法分析血清IL-6、IL-8、IL-9、IL-10水平与尿素氮、血肌酐、血尿酸的相关性。结果观察组患者的血清IL-6、IL-8、IL-9、IL-10、尿素氮、血肌酐、血尿酸水平分别为(13.38±2.45)pg/mL、(68.01±10.47)pg/mL、(10.49±2.06)pg/mL、(9.42±2.50)pg/mL、(15.12±3.04)mmol/L、(159.90±28.51)μmol/L、(476.22±48.18)μmol/L,明显高于对照组的(4.46±0.39)pg/mL、(30.25±5.55)pg/mL、(5.51±1.10)pg/mL、(4.70±1.08)pg/mL、(5.20±1.38)mmol/L、(86.57±10.80)μmol/L、(204.51±30.60)μmol/L,差异均有统计学意义(P<0.05);Pearson相关分析结果显示,血清IL-6、IL-8、IL-9、IL-10水平与尿素氮、血肌酐、血尿酸均呈正相关(P<0.05)。结论SLE患者的血清IL-6、IL-8、IL-9、IL-10水平均明显升高,且与早期肾损伤密切相关,有助于评估病情的进展。

北京黑猪AQP9和RPS10基因多态性及其与背膘厚的关联分析

旨在研究水通道蛋白9(aquaporins9,AQP9)及核糖体蛋白10(ribosomal protein S10,RPS10)基因多态性及其与北京黑猪背膘厚的相关性,以期能够获得北京黑猪背膘厚的有效标记。本研究以413头北京黑猪为研究对象,测定不同部位(肩部、6-7肋间、胸腰结合、腰荐结合)的背膘厚度。PCR扩增AQP9和RPS10基因的启动子区和外显子区序列筛选SNP位点,并将SNPs与各部位背膘厚进行关联分析。运用荧光定量PCR检测基因的差异表达。结果发现,AQP9基因启动子区有4个突变位点,其中1个SNP:rs332699245 A>C与胸腰结合处背膘厚关联显著(P<0.05),且该位点突变预测到了结合转录因子的改变;RPS10基因在3′UTR、CDS区共有8个突变位点,其中5个与背膘厚显著关联:rs80795904 C>G、rs80932213 T>C与6~7肋间背膘厚关联显著(P<0.05),rs3469834461 C>T与肩部背膘厚、四点平均背膘厚关联显著(P<0.05),rs80862457 C>T与胸腰结合处背膘厚、腰荐结合处背膘厚关联显著(P<0.05),rs336938272 A>C与6~7肋间背膘厚、腰荐结合处背膘厚、四点平均背膘厚均关联显著(P<0.05);且在3′UTR区检测到1个SNP(rs80862457 C>T),位于小RNA(microRNA,miRNA)结合靶点。基因表达差异分析表明,rs332699245 A>C中AA型个体的AQP9基因mRNA水平显著高于AC型个体(P<0.05),rs80862457 C>T中TT型个体的RPS10基因mRNA水平显著高于CC型个体(P<0.05)。综上所述,AQP9和RPS10基因与北京黑猪背膘厚显著关联,rs332699245 A>C和rs80862457 C>T位点可作为北京黑猪背膘厚选育的潜在分子标记,为北京黑猪的选育提供理论支撑。

10Cr9Mo1VNbN钢管焊接及热处理工艺研究

10Cr9Mo1VNbN钢是制造锅炉炉管的优质原材料,存在焊接性较差,对热处理温度很敏感,有较大冷裂倾向,焊后易检出焊缝区及热影响区冲击韧性、硬度等力学性能指标不合格等问题。研究了10Cr9Mo1VNbN钢管的焊接工艺,通过焊接试验和焊接工艺评定优化了焊接工艺以及热处理工艺参数,提升了10Cr9Mo1VNbN钢管的焊接质量,可为类似材质产品的焊接提供焊接工艺参考。

五加生化胶囊和妇炎舒胶囊对人流术后子宫复旧不全患者血清MMP-9、IL-10水平的影响

目的:探讨五加生化胶囊和妇炎舒胶囊对人流术后子宫复旧不全患者血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、白细胞介素-10(IL-10)水平的影响。方法:选取2020年1月—2022年9月本院收治的60例人流术后子宫复旧不全患者为观察对象,采用奇偶数分组法分为对照组和研究组,各30例。对照组予以妇炎舒胶囊治疗,研究组予以五加生化胶囊治疗。比较两组临床疗效、临床症状以及治疗前后子宫内膜厚度、子宫三径之和、子宫内膜血流动力学参数[阻力指数(RI)、搏动指数(PI)、子宫动脉收缩期血流峰值速度(PSV)]、血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、白细胞介素-10(IL-10)水平。随访3个月经周期,比较两组远期并发症发生率。结果:研究组总有效率为93.33%,高于对照组的73.33%(P<0.05);研究组临床症状改善程度优于对照组(P<0.05);治疗后研究组子宫内膜厚度高于对照组,子宫三径之和、RI、PI、PSV低于对照组(P<0.05);治疗后研究组血清MMP-9水平低于对照组,IL-10水平高于对照组(P<0.05);两组远期并发症发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:五加生化胶囊治疗人流术后子宫复旧不全在提高治疗效果、改善临床症状、改善子宫内膜血流动力学水平方面优于妇炎舒胶囊,并可调节血清MMP-9、IL-10水平,且具有一定安全性。

4种9,10-二氢菲类化合物的体外抗肿瘤活性及机制

目的研究4种9,10-二氢菲类化合物对4种人癌细胞的增殖抑制作用及其作用机制。方法采用MTT法测定它们对人肝癌细胞株HepG2,人非小细胞肺癌细胞株NCI-H460,人乳腺癌细胞株MCF-7,人神经胶质瘤细胞株SF-268的增殖抑制作用;采用流式细胞仪技术和蛋白质电泳技术检测它们对HepG2细胞的细胞周期以及细胞周期蛋白表达的影响。结果9,10-二氢菲类化合物对HepG2细胞的增殖有一定的抑制作用;其中4,5-二羟基-2-甲氧基-9,10-二氢菲可能通过下调周期蛋白CyclinB1的表达将HepG2细胞阻滞在G2/M期。结论9,10-二氢菲类化合物通过将HepG2细胞阻滞在G2/M期从而对其增殖产生了一定的抑制作用。

10-(异丙基-2-醇)-9,10-二氢-9-氧杂-10-膦杂菲-10-氧化物的合成

以9,10-二氢-9-氧杂-10-膦杂菲-10-氧化物(DOPO)和丙酮为原料,合成10-(异丙基-2-醇)-9,10-二氢-9-氧杂-10-膦杂菲-10-氧化物。考察了原料摩尔比、反应温度和反应时间对产物收率的影响。结果表明,较优工艺条件为:n(丙酮)∶n(DOPO)=12∶1,反应温度为50℃,反应时间为30 min时,DOPO的转化率为99%,目标产物收率为90%。

10,10’-二溴-9,9’-联蒽合成工艺改进

报道了一种有机电致发光材料中间体10,10’-二溴-9,9’-联蒽的合成工艺方法。结果表明,在乙酸乙酯和冰醋酸(体积比=1∶1)的混合溶剂中,以锌粒和浓盐酸为还原剂,蒽醌为原料,N-溴代丁二酰亚胺(NBS)为溴化剂,两步法反应合成10,10’-二溴-9,9’-联蒽,总产率达到72.3%。该法具有生产周期短、反应条件温和、纯化简单、成本低、产率高等优点。

CD4+IL-9+T细胞因子IL-9、IL-10在大肠癌免疫微环境中的表达及临床意义

目的研究CD4+IL-9+T细胞因子IL-9、IL-10在大肠癌肿瘤免疫微环境中的表达水平,探讨其与临床病理的相关性。方法采集2014年6月1日至2014年10月8日,本院初次行手术治疗的45例大肠癌患者的肿瘤组织、对应癌旁组织及外周血(术前和术后),同时取15例健康志愿者外周血液。运用液相蛋白芯片检测技术检测上述组织和外周血中CD4+IL-9+T细胞主要细胞因子IL-9、IL-10的浓度。结果细胞因子IL-9在大肠癌患者微环境中的浓度为(0.82±0.51)pg/ml,高于癌旁(0.56±0.52)pg/ml,P=0.0318;同时,它也高于术前、术后及健康人外周血中IL-9的浓度,P<0.05;细胞因子IL-10在大肠癌患者微环境中的浓度高于癌旁,分别为(0.87±0.43),(0.52±0.49)pg/ml,P<0.05,也高于术前、术后及健康人外周血中IL-10的浓度,P<0.05。结论大肠癌肿瘤微环境中的CD4+IL-9+T细胞高表达细胞因子IL-9、IL-10,且细胞因子IL-9表达水平与肿瘤Duke's分期存在相关性,分期越高IL-9的蛋白水平越高。由此可见干扰IL-9、IL-10的信号通路或活性或许能够成为治疗大肠肿瘤的新靶点。

10Cr9Mo1VNb与12Cr1MoVG异种钢焊接及热处理工艺探讨

锅炉及蒸汽管道检修改造过程中经常遇到厚壁管异种钢的焊接,为了保证焊接质量,根据标准规范选用合适的焊接材料、采用合适的焊接及热处理工艺,获得了优良的焊接接头,保证管线的安全可靠运行,希望能为以后类似管道焊接及热处理工艺的确定提供一些参考。

2023年2月9—10日石嘴山市大雾天气过程分析

利用地面观测资料、Micaps常规资料、探空资料和EC模式物理量场资料,对2023年2月9—10日发生在石嘴山市的大雾天气过程进行了详细分析。结果表明:本次大雾过程是在较为稳定的大尺度环流背景下产生的,中低层暖温度脊控制,地面均压场维持,大气层结稳定,有利于低层逆温层的生成;探空资料显示,大雾发生过程中,低层出现多层逆温且较为深厚,对大雾的形成和维持起了重要作用;热力结构表明,温度日较差大表示地面辐射冷却为水汽的凝结起到了重要作用,具有辐射雾的特征;温度平流表明,在大雾发展和维持阶段,低层有暖平流输入,具有平流雾的特征;水汽条件表明,前期的降雪天气、地面积雪融化以及沙湖地区靠近水域,都为本次大雾天气提供了较为充沛的水汽;动力条件表明,在大雾发展维持期间高层存在稳定的下沉运动,在中低层,大雾发生前期存在弱的辐合上升运动,大雾消散期间存在下沉运动。

脂肪胺与硝酸10,10'-二烃基-9,9'-联二吖啶盐电荷转移光谱的研究

用分光光度法测定了脂肪胺与硝酸１０，１０＇－二烃基－９，９＇－联二吖啶盐所形成的电荷转移络合物（ＣＴＣ）的吸收光谱，求得了脂肪胺的电离势（Ｉｐ）值和这一系列ＣＴＣ的Ｃ值．脂肪胺与硝酸１０，１０＇－二烃基－９，９＇－联二吖啶盐形成ＣＴＣ时。

Al-9Si-10Cu储能材料对0Cr18Ni9钢的腐蚀行为研究

铝合金是比较理想的中高温储能材料,但在高温时易腐蚀金属容器,所以在实际工程应用时,需控制储能铝合金对容器的腐蚀。通过设置合理的腐蚀试验,研究了储能温度和储能时间分别对Al-9Si-10Cu储能材料腐蚀容器0Cr18Ni9钢的影响规律以及相应的腐蚀机理,结果表明:腐蚀速率和腐蚀层厚度随储能温度的升高而逐渐增加;腐蚀速率随着储能时间的延长逐渐下降并趋于稳定,腐蚀层厚度却随储能时间的延长而不断增加;腐蚀层由两个区域组成,两者的颜色不同且具有明显的分界线;随着储能时间的延长,腐蚀层B区域的宽度几乎保持不变,而腐蚀层C区域却逐渐疏松并剥落,以致0Cr18Ni9钢被逐渐腐蚀。

轴不对称联芳香化合物的研究5.(+)-和(-)-9,9’-联菲-10,10’-二甲酸的合成

文中讨论了(+)-和(-)-9,9′-联菲-10,10′-二甲酸的合成路线设计.选出了最佳的合成路线,其中关键中间体是10-溴-9-菲甲酸.其合成方法是在碱性条件下使9-菲甲酸与溴溴化钾—DMF发生10-位溴代反应,产率很好.研究中也探讨了U11mann反应的条件。合成所得的光学纯的(+)-和(-)-9,9′-联菲-10,10′-二甲酸在碱性和中性条件下均难以消旋,说明它有僵硬的轴不对称结构.

慢性鼻-鼻窦炎组织IL-9和IL-10表达及意义

目的观察慢性鼻-鼻窦炎(CRS)病人局部组织中Th9细胞效应因子白细胞介素-9(IL-9)、白细胞介素-10(IL-10)的含量,探讨Th9细胞在CRS发病中的作用。方法采集45例CRS病人鼻内镜手术后筛窦病变黏膜组织,其中Ⅰ型(慢性鼻窦炎)25例、Ⅱ型(鼻窦炎伴鼻息肉)20例,另选正常筛窦黏膜12例作为对照。苏木精-伊红染色观察黏膜形态,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测组织中IL-9、IL-10的含量。结果Ⅰ型鼻窦炎组IL-9、IL-10的含量最多,Ⅱ型鼻窦炎组次之,正常对照组最少,差异有显著性(F=200.44、154.17,q=12.17～27.64,P<0.01)。结论 Th9细胞在CRS的发生发展中担负着重要的免疫调节作用。

Two New Organic Supramolecular Complexes Based on 2,3,6,7-Tetrahydroxyl-9,10-dimethyl-9,10-dihydro-9,10-ethanoanthracene and 4,4′-Bipyridine or 4,4′-Bipyridinylethane

Two new organic supramolecular cocrystal complexes C18H18O4·C10H8N2（I） and C18H18O4·C12H10N2（II）（C18H18O4 = 2,3,6,7-tetrahydroxyl-9,10-dimethyl-9,10-dihydro-9,10-ethanoanthracene（LH4）, C10H8N2 = 4,4＇-bipyridine（bpy） and C12H10N2 = 4,4＇-bipyridinylethane（bpe）） have been obtained by mixing LH4 with corresponding bpy or bpe ligand. The two complexes have been determined by X-ray crystal structure analysis, elemental analysis and IR analysis. Compound I crystallizes in the orthorhombic Pnma with a = 9.7078（4）, b = 22.4974（10）, c = 20.6272（9） V = 4505.0（3）3, Mr = 454.51, Dc. = 1.340 g·cm^-3, μ = 0.09 mm-1, F（000） = 1920, Z = 8, R = 0.0503 and wR = 0.1360. Compound II crystallizes in monoclinic C2/c with a = 29.944（6）, b = 9.820（2）, c = 22.643（5） , V = 5048.4（18）3, Mr = 480.54, Dc. = 1.265 g cm^–3, μ = 0.084 mm^–1, F（000） = 2032, Z = 8, R = 0.0548 and wR = 0.1600. X-ray single-crystal structure analysis shows that two-dimensional（2D） layer supramolecular structures are formed through hydrogen bonds and π-π interactions in the two complexes. IR analysis also indicates that there are only associated hydroxyl groups in the two complexes.

鼻渊合剂对急性鼻窦炎模型大鼠鼻窦黏膜p38MAPK信号通路及IL-9/IL-10的影响

目的观察鼻渊合剂治疗急性鼻窦炎的临床疗效,并探讨其对大鼠急性鼻窦炎模型鼻窦黏膜p38MAPK信号通路及IL?9、IL-10的影响。方法建造大鼠急性鼻窦炎模型,设中、西药组、生理盐水组,分别使用鼻渊合剂、克拉霉素分散片及桉柠蒎肠溶软胶囊、生理盐水灌胃,观察症状积分,并设空白组,测定造模后0、7、14、21d鼻窦黏膜IL-9、IL-10及p-p38水平,进行统计学分析。结果通过大鼠症状积分比较,表明中、西药都有治疗作用。造模后大鼠IL-9及p-p38水平明显增高;用药后中药、西药组大鼠鼻窦黏膜IL-9及p-p38水平随治疗周期明显下降,与生理盐水组比较有显著性差异(P<0.05),中药组IL-9及p-p38水平下降与西药组无显著性差异。用药后中药组、西药组及生理盐水组鼻窦黏膜IL-10水平随治疗周期逐步升高,中药组、西药组与生理盐水组比较均存在显著性差异(P<0.05),中药组与西药组比较无显著性差异。结论鼻渊合剂治疗急性鼻窦炎有确切疗效,IL-9、IL-10参与了急性鼻窦炎发病的免疫过程,与p38MAPK通路存在一定关系,鼻渊合剂有促进IL-10、抑制p-p38活化阻断p38MAPK通路抑制IL-9产生的作用。