“过眼热”针法治疗血管性痴呆患者对血清β-淀粉样蛋白(Aβ1-40)水平的影响

研究血管性痴呆患者在临床治疗中使用“过眼热”针法的效果,重点研究其对血清β-淀粉样蛋白(Aβ1-40)水平的影响。方法 选择80例黑龙江省中医药科学院针灸科、黑龙江中医药大学附属第一医院针灸科的血管性痴呆患者进行数据研究,分组后开展不同治疗,病例选取时间是自2023年1月至2024年1月,其中对照组使用普通针刺,而研究组使用“过眼热”针法治疗。结果 组间总有效率的对比是研究组更高,治疗后血清β-淀粉样蛋白(Aβ1-40)明显更低,治疗后MMSE分值更高,治疗后ADL分值更高,治疗后血液流变学指标更低,治疗后MoCA分值更高,证候评分治疗后更低,治疗后SOD更高,治疗后IL-6更低,P<0.05,比较治疗前数据为P>0.05。结论 血管性痴呆患者在临床治疗中使用“过眼热”针法的效果理想。

脑微出血患者血清Aβ_1-40、Aβ_1-42的检测及其意义

目的对脑微出血患者血清Aβ1-40、Aβ1-42的检测方法及临床意义进行研究分析。方法选取我院自2011年10月-2013年10月收治的39例急性腔隙性脑梗死与39例未出现急性腔隙性脑梗死患者分别作为观察组与参考组,比较两组受检者Aβ1-40、Aβ1-42水平变化。结果观察组患者Aβ1-40与参考组比较明显较高(P<0.05),观察组患者Aβ1-42水平明显低于参考组,比较有统计学意义(P<0.05)。结论血清Aβ1-40、Aβ1-42是检验脑微出血的有效指标,可反映病变程度,有显著临床价值。

双白术内酯对Aβ_(1-40)致痴呆模型大鼠的作用

目的观察双白术内酯对Aβ1-40诱导老年性痴呆大鼠的学习记忆力影响和脑组织中胆碱酯酶含量的变化,从而了解其作用机制。方法取健康大鼠48只,随机分为6组。分别为正常对照组、模型对照组、阳性药物(盐酸多奈哌齐片,Donepezil)对照组(1.0mg·kg-1·d-1)、双白术内酯低(BL0.1mg·kg-1·d-1)、中(BM0.3mg·kg-1·d-1)、高(BH1.0mg·kg-1·d-1)剂量组。除正常对照组外,各组大鼠立体定向注射凝聚态Aβ1-40诱导老年性痴呆(Alzheimer’s disease,AD)动物模型。连续给药10d后,用水迷宫法检查学习、训练结果;并取脑组织测胆碱酯酶含量。结果双白术内酯各组大鼠游水迷宫所需时间明显短于模型组,错误次数亦明显少于模型组(P<0.05或P<0.01)。双白术内酯各组可使大鼠胆碱酯酶活性明显的降低(P<0.01)。结论双白术内酯可以改善Aβ1-40致痴呆模型大鼠的学习记忆能力,并降低脑内胆碱酯酶水平。

黑水缬草提取物对老年痴呆大鼠脑内神经元中β-APP、Aβ_(1-40)和Caspase-3表达的影响

目的:探讨黑水缬草提取物对老年痴呆模型大鼠大脑皮质神经元和海马神经元中β-APP、Aβ1-40和Caspase-3表达的影响。方法:利用多因素造成大鼠老年痴呆病理复合模型,采用免疫组化法观察老年痴呆大鼠大脑皮质神经元和海马神经元中β-APP、Aβ1-40和Caspase-3蛋白表达变化。结果:黑水缬草各给药组和中药对照组显示出一定的疗效(P<0.05),其中以50%乙醇树脂洗脱高剂量效果尤为显著(P<0.05或P<0.01)。结论:黑水缬草50%乙醇树脂洗脱物能有效抑制神经元细胞内β-APP和Aβ1-40阳性细胞过表达,阻止其聚集脑内形成老年斑和神经纤维缠结,并能有效抑制Caspase-3的活化而减少神经元细胞的凋亡。

三七总皂苷对老年性痴呆动物模型快速老化小鼠大脑Aβ_(1-40)、Aβ_(1-42)表达的影响

目的:探讨三七总皂苷(PNS)对快速老化小鼠SAMP8大脑Aβ1-40、Aβ1-42表达的影响。方法:采用免疫组织化学方法,随机选取快速老化小鼠大脑顶叶皮层、海马周围白质连续五个视野在高倍显微镜下观察,并计数五个视野下Aβ1-40、Aβ1-42免疫阳性细胞的平均个数。结果:PNS能明显减少快速老化小鼠大脑Aβ1-40、Aβ1-42免疫阳性神经元的数量。结论:PNS对SAMP8小鼠大脑Aβ1-40及Aβ1-42的表达有明显的抑制作用。

β淀粉样蛋白1-40和1-42的聚集性质比较

β淀粉样蛋白 (Aβ)是阿尔茨海默症 (AD)患者脑中斑块的核心蛋白 ,它由多种衍生自淀粉样前体蛋白(APP)的不同长度的肽组成 ,其中Aβ40和Aβ42是主要的组分。我们通过电镜研究了这两种蛋白的纤维形成过程。在溶液中Aβ42倾向于形成斑块状沉积 ,而Aβ40则更易于形成典型的纤维。这种不同可能由Aβ42的相对更为紧密的二级构象所致。根据这些数据 ,我们推测静电作用对于早期Aβ42聚集是非常重要的 。

白凤丸对Aβ_(1-40)和C31导致PC12细胞损伤的保护作用

目的 :探讨Aβ1 4 0 和C3 1对体外培养的PC12细胞的作用 ,同时研究了白凤丸有效成份BFP对其作用的影响。方法 :采用四甲基偶氮唑盐 (MTT)检测方法 ,在培养的PC12细胞观察应用Aβ1 4 0 和C3 1前后对细胞在 5 70nm的吸收值的影响 ,以及给予BFP和雌二醇共同孵育后吸收值的改变。结果 :Aβ1 4 0 和C3 1可使细胞在 5 70nm的吸收值显著降低 ,而应用BFP和雌激素后 ,能有效地提高细胞在 5 70nm的吸收值。结论 :Aβ1 4 0 和C3 1对PC12细胞具有毒性作用 ,而BFP能显著拮抗这种作用 ,与雌激素的作用类似 ,具有一定的神经保护作用。

老年性痴呆血浆中Aβ1-42、Aβ1-40及p-tau(^(181)P)蛋白的临床诊断意义

目的探讨血浆中β淀粉样蛋白(Aβ)142、Aβ140及过度磷酸化微管相关蛋白p tau(181P)对老年性痴呆(AD)的诊断意义。方法采用分层法选择早期AD患者23例(19≤MMSE≤26,CDR=1),中后期AD患者35例(MMSE<19,CDR≥2)及年龄、性别相匹配的健康对照组(HC)30例。所采集血标本置EDTA抗凝管中,低温离心取上清,加酸置低温冰箱保存。应用ELISA方法检测血浆Aβ142、Aβ140及p tau(181P)蛋白水平。结果早期AD患者血浆Aβ142浓度较HC组显著升高,随着病情加重AD患者血浆Aβ142浓度明显下降,至中后期其水平与HC组差异无显著性。而AD各组患者血浆Aβ140浓度与HC组比较差异无显著性。AD患者血浆中可检测到p tau(181P)蛋白且特异性较高,中后期AD患者血浆p tau(181P)蛋白浓度较HC组显著升高。结论根据病程将AD患者进行分层并对血标本进行特殊处理,检测血浆中Aβ142、Aβ140及p tau(181P)蛋白浓度可能成为临床辅助诊断AD的生物指标。

二精丸对去卵巢+D-半乳糖联合Aβ1-40致肾阴虚AD大鼠学习记忆能力的影响

目的探讨二精丸对去卵巢+D-半乳糖联合β-淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)致肾阴虚阿尔茨海默病(AD)大鼠学习记忆能力的影响。方法在采用D-半乳糖+去卵巢法建立肾阴虚大鼠模型的基础上,联合海马注射Aβ1-40建立肾阴虚AD学习记忆障碍大鼠模型。雌性SD大鼠按体质量随机分为假手术组、模型组、二精丸高剂量组(9.0 g·kg^-1)、二精丸中剂量组(4.5 g·kg^-1)、二精丸低剂量组(2.25 g·kg^-1)、阳性药组(多奈哌齐,1.0 mg·kg^-1)。每日1次,连续灌胃给药30 d。通过Morris水迷宫试验、新物体识别试验检测大鼠学习记忆能力;采用HE染色、尼氏染色观察大鼠海马神经元细胞形态;免疫组化法测定大鼠海马雌激素β受体(ERβ)、Aβ及p-tau404蛋白表达水平;ELISA法测定大鼠血清的雌激素水平。结果与模型组比较,二精丸中、高剂量组从第3天开始逃避潜伏期显著缩短(P<0.05,P<0.01),高剂量组的穿越平台次数明显增加(P<0.05),新物体识别指数明显升高(P<0.05);二精丸组大鼠海马区神经元、尼氏小体数量增多,形态较完整,排列较整齐,无破损,核仁清晰;二精丸中、高剂量组大鼠海马区阳性Aβ细胞数显著减少(P<0.01),血清雌激素水平显著升高(P<0.05,P<0.01);二精丸高剂量组大鼠海马区p-tau404阳性细胞数量明显减少(P<0.01);二精丸高、中、低剂量组大鼠海马区ERβ阳性细胞数量增多(P<0.01)。结论二精丸可能通过上调大鼠脑内ERβ表达和雌激素水平,减少脑内Aβ淀粉样蛋白的沉积,抑制tau蛋白的过度磷酸化,从而改善肾阴虚AD大鼠的学习记忆能力。

β-淀粉肽-(1-40)对电压依赖性钙电流的作用及铝和银杏内酯B对该作用的影响

目的 探讨不同时期配制的 β 淀粉肽 (1 4 0 ) (Aβ1 40 )对大鼠海马CA1区锥体神经元高电压依赖性钙通道电流 (IHVA)的作用并观察铝和银杏内酯B (GB)对该作用的影响。方法 应用全细胞膜片钳技术记录海马神经元IHVA电流 ,并观察药物对其的作用。结果 (1)细胞外给予老化处理的Aβ1 40 可以增强IHVA幅度 ,Aβ1 40 的作用具有不可逆性和浓度依赖性 ;新鲜配制的Aβ1 40 对IHVA几乎没有影响。 (2 )Aβ1 40 增强IHVA的作用可以被L 型钙通道阻断剂nifedipine抵消。 (3)PKA的抑制剂H 89可以抵消Aβ1 40 对IHVA的增强作用。 (4)Aβ1 40 增加IHVA的作用可被 1 0mmol/L的AlCl3 进一步增加。 (5 )细胞外给予GB对正常的IHVA没有影响 ,但可抵消Aβ1 40 对IHVA的增强作用。结论 β 淀粉肽(Aβ)通过增强IHVA可引起胞内钙超载 ,这可能是其产生神经毒性作用的机制之一 ,铝可以加强Aβ的毒性作用 ;GB可通过抑制钙离子内流对神经元起一定保护作用。

可溶的和纤维化的Aβ_(1-40)对膜脂的通透性的影响

利用光散射,浊度,荧光以及电镜等技术研究了可溶性的A茁1-40聚集形成纤维的动力学过程;用三种水溶性的分子质量不同的荧光探剂ANTS/DPX,Calcein,DextranFD-4包裹在脂质体内,检测可溶的和纤维化的A茁1-40对其内含物漏出的影响。结果表明:可溶性的A茁1-40在pH7.4,37℃温育4天以后开始聚集,7天后形成稳定的纤维;聚集的A茁1-40能够诱导包裹在脂质体内的ANTS/DPX,Calcein的漏出,但不能诱发Dextran(FD-4)的漏出,并初步估算出聚集的A茁1-40在膜上能产生孔径为13-18魡的小孔,而可溶的A茁1-40无此作用。这提示我们,聚集成纤维的A茁1-40能改变膜脂的物理化学性质,并造成内含物的漏出,这些作用可能是造成神经细胞毒性的重要原因。

雌激素对去卵巢大鼠记忆功能、脑海马部位Aβ1-40及PKC表达的影响

目的 探讨雌激素对去卵巢大鼠记忆功能、海马部位 β淀粉样蛋白 1 - 4 0 (Aβ1 - 4 0 )及蛋白激酶 C(PKC)表达的影响。方法 大鼠去卵巢建立动物模型 ,1 7w行水迷宫试验 ,1 8w取脑组织做 Aβ1 - 4 0及 PKC的免疫组化染色。结果 去卵巢大鼠的雌激素 (E2 )水平明显降低 (P<0 .0 1 ) ;去卵巢组的记忆功能下降 ;脑海马部位的 Aβ1 - 4 0表达比假手术组和雌激素替代组增加 (P<0 .0 1 ) ,而 PKC表达则减少 (P<0 .0 1 )。结论 雌激素可能是通过提高 PKC的表达水平 ,使淀粉样前体的代谢生成 Aβ1 - 4 0减少来保护海马部位胆碱能神经元 ,从而改善记忆功能。雌激素可能是影响记忆功能重要因素之一。

Aβ_(1-40)诱导PC12细胞神经突触改变的ERK信号转导机制的初步实验研究

目的探讨ERK信号转导通路在β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)诱导神经突触损伤中的可能作用机制。方法星形胶质细胞诱导PC12细胞分化为神经元样细胞,然后随机分为两组:对照组和Aβ1-40组,分别作用不同时间段。应用扫描电镜观察突触数目,透射电镜观察神经突触超微结构,免疫荧光技术检测突触素、生长相关蛋白-43(GAP-43)表达,Western blot检测ERK蛋白表达。结果Aβ1-40作用PC12细胞4h时,突触囊泡数目明显减少,突触间隙模糊,突触数目明显减少,突触素和GAP-43表达也明显减少,磷酸化ERK(p-ERK)明显减少,与对照组相比差异有统计学意义(P<0·01)。结论Aβ1-40可以诱导PC12细胞神经突触毒性损伤,而且ERK信号转导通路的激活受到抑制,因而推测Aβ1-40诱导PC12细胞神经突触毒性损伤机制与ERK信号转导通路活化受到抑制有关,这可能是AD早期神经突触损伤机制之一。

丹蒌片对Aβ1-40致脑微血管内皮细胞损伤保护作用的机制研究

目的研究丹蒌片对β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)诱导脑微血管内皮细胞(BMEC)损伤的保护作用。方法(1)将大耳白兔BMEC培养在含10%胎牛血清和1%青霉素/链霉素的完全培养基中,用Aβ1-40建立BMEC损伤模型。实验分正常组(C)、模型组(M)和晚期糖基化终末产物受体(RAGE)中和抗体组(RAGE-Ab),24 h后使用Western Blot法检测各组血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、巨噬细胞炎性蛋白-1β(MIP-1β)、趋化因子受体-5(CCR5)的表达。(2)用丹蒌片制备含药血清,实验分为正常组(10%空白血清培养)、模型组、低浓度用药组(10%丹蒌片低浓度含药血清+Aβ1-40)、高浓度用药组(10%丹蒌片高浓度含药血清+Aβ1-40),24 h后用Western Blot法测定各组细胞上述因子的表达水平。结果(1)与正常组相比,模型组RAGE、VCAM-1、MIP-1β、CCR5表达显著增加(P<0.01),RAGE-Ab组各因子表达水平显著降低(P<0.01);(2)与空白血清组相比,模型组RAGE、VCAM-1、MIP-1β、CCR5表达增加(P<0.001),与模型组相比,丹蒌片含药血清组各因子的表达显著降低(P<0.01)。结论丹蒌片含药血清具有保护Aβ1-40诱导的BMEC损伤的作用,其机制可能与抑制Aβ和RAGE诱发的BMEC趋化反应有关。

Aβ_(1-40)侧脑室注射模拟阿尔茨海默病树鼩模型的核磁共振成像特征

目的分析阿尔茨海默病(AD)模型树鼩大脑影像学特征。方法在脑立体定位仪上侧脑室注射Aβ1-40建立AD动物模型。经视觉-空间行为学检测确定模型成功后,用MRI作脑冠状面T2加权成像(T2WI)和弥散张量成像(DTI)分析。结果模型组模型组参考记忆错误(3周,4周)和工作记忆错误(2周,3周,4周)显著多于对照组(P<0.05)。模型组完成任务的时间(2周,3周)显著多于对照组(P<0.05)。3周起模型组树鼩单侧或双侧海马减小,相应侧脑室或双侧脑室增大。12周时模型组树鼩双侧颞角宽度显著大于对照组和治疗组(P<0.01)。弥散张量成像扫描显示,模型组树鼩海马双侧表观弥散系数(ACD)大于对照组(P<0.01)。模型组胼胝体纤维束缺失严重。结论侧脑室注射Aβ1-40可引起树鼩学习记忆障碍。MRI能显示AD树鼩脑部的特征性改变,颞角宽度、海马ADC值、胼胝体纤维受损对痴呆的诊断有参考价值。

儿茶素抑制Aβ_(1-40)的SH-SY5Y细胞毒性作用研究

建立了Aβ_(1-40)诱导的SH-SY5Y神经母瘤细胞损伤模型,并探讨了儿茶素对该细胞模型的保护作用及可能机制。采用四唑盐(MTT)法检测细胞存活能力、乳酸脱氢酶(LDH)法检测细胞膜的通透性变化,对Aβ_(1-40)的SHSY5Y细胞毒性及儿茶素的保护作用进行研究;并通过活性氧(ROS)试剂盒及Caspase 3活性检测试剂盒分别对Aβ_(1-40)损伤SH-SY5Y细胞的ROS水平及Caspase 3活性变化进行检测。结果发现儿茶素能够提高由Aβ_(1-40)引起的SH-SY5Y细胞存活能力下降,降低LDH的释放量,其作用机制可能与儿茶素能够降低Aβ_(1-40)诱导的细胞氧化水平及Caspase 3活性的升高有关。

褪黑素抑制实验性老化大鼠海马注射Aβ_(1-40)毒性作用

目的 :观察褪黑素 (melatonin ,MT)对实验性老年性痴呆大鼠的防治作用。 方法 :连续 6周腹腔内注射D 半乳糖 ,双侧海马内注射Aβ1 4 0 造成AD模型。以Y 型迷宫、一次性被动回避实验检测大鼠的学习记忆行为 ,测定大脑皮层脂褐素含量以及海马线粒体膜流动性、SOD活性、MDA含量 ,电镜观察海马超微结构。结果 :褪黑素可显著改善痴呆大鼠的学习记忆障碍 ,明显逆转海马SOD活性、MDA含量及皮层脂褐素含量相对其正常水平的增高 ,阻抑海马神经元的变性及凋亡。 结论 :褪黑素可能通过影响自由基水平对实验性老年性痴呆大鼠有一定的防治作用。

天参益智方对老年痴呆模型学习记忆能力及Aβ_(1-40)的影响

目的研究天参益智方(TSYZ)对AD大鼠模型学习记忆障碍的保护作用,探讨其对AD大鼠脑内Aβ1-40沉积的影响。方法以慢性铝中毒法复制AD大鼠模型,用Moriss水迷宫法检测AD大鼠学习记忆能力;采用免疫组化法检测AD大鼠海马和皮质Aβ1-40水平。结果天参益智方治疗组逃出水迷宫的时间及搜索距离显著低于模型对照组(P<0.05,P<0.01),大鼠海马和皮质的平均灰度值显著升高(P<0.01),Aβ1-40水平明显低于模型组。结论天参益智方明显减少AD大鼠脑组织中Aβ1-40沉积,这可能是其改善AD大鼠学习记忆功能作用机制之一。

依达拉奉对急性脑梗死患者血清Aβ1-40、Aβ1-42水平的影响

目的探讨依达拉奉治疗对脑梗死患者血清Aβ(1-40)、Aβ(1-42)的影响。方法选择脑梗死患者64例,将其分为依达拉奉组及对照组,每组32例,依达拉奉组给予静脉滴注依达拉奉30mg/日,每日2次,共治疗14天;对照组不使用依达拉奉,其他治疗相同。两组患者分别于治疗前、治疗后3周、治疗后6周抽取静脉血进行Aβ(1-40)、Aβ(1-42)水平检测,将检测结果进行统计学分析。结果治疗前依达拉奉组血清Aβ(1-40)为1.87±0.39,对照组血清Aβ(1-40)为1.83±0.41,两组间无显著差异(P=0.691)。治疗前依达拉奉组血清Aβ(1-42)为1.43±0.26,对照组血清Aβ(1-42)为1.45±0.29(P=0.675),治疗后3、6W,依达拉奉组Aβ(1-40)水平逐步降低(1.79±0.35 vs 1.34±0.21,P<0.05)。依达拉奉组Aβ(1-42)于治疗后3W升高(1.61±0.32,P<0.05)。对照组Aβ(1-40)和Aβ(1-42)水平无显著改变(P>0.05)。治疗前两组Aβ(1-40)/Aβ(1-42)比率无差异(依达拉奉组1.365,对照组1.314,P=0.582),治疗后3、6W依达拉奉组Aβ(1-40)/Aβ(1-42)比率逐步降低(1.17,0.89),对照组Aβ(1-40)/Aβ(1-42)比率于治疗后3W明显增高(1.58,P=0.048),其后下降,但仍大于治疗前水平。结论依达拉奉可以降低急性脑梗死后血清Aβ(1-40)水平,降低血清Aβ(1-40)/Aβ(1-42)比率。

老年大鼠股骨颈骨折术后认知功能及Aβ1-40、Bax、Bcl-2的改变

目的探讨老年大鼠股骨颈骨折术后空间学习记忆能力、血清AIM-40及海马内抗凋亡基因Bcl-2和促凋亡基因Bax表达的变化。方法SD老年大鼠35只随机分为三组：空白组（K组，n=7）、对照组（D组，n=14）、手术组（S组，n=14）。D、S组根据处理时间不同各分2个亚组，Dl、D3、S1、s3组（每组7只）。Morris水迷宫测试大鼠的学习记忆能力，ELISA法检测血清AIM～40浓度，RT-PCR检测海马内Bcl-2和BaxmR—NA的表达。结果学习记忆能力测试表明：S组逃逸潜伏期显著延长（P〈0．05），穿过原平台的次数明显减少（P〈0．05）；S组血清AIM～40浓度明显升高，与K组、D组相比，差异均有统计学意义（P〈0．05）；S组BaxmRNA的表达比K组和D组都显著升高（P〈0．01），Bcl-2mRNA的表达比K组显著降低（P〈0．01，P〈0．05），Bcl-2／Bax值比K组和D组都显著降低（P〈0．01，P〈0．05）。结论老年大鼠股骨颈骨折术后可暂时影响大鼠的空间学习记忆能力，可能与血清Aβ1-40浓度升高以及海马内Bcl-2／Bax比例降低有关。