流苏石斛中3种木脂素类成分的含量测定研究

【目的】建立流苏石斛中3种木脂素类成分的含量测定方法。【方法】应用高效液相色谱-电喷雾-离子肼质谱(HPLCESI-MSn)联用技术以及高效液相色谱(HPLC)保留时间定位结合紫外吸收光谱(UV)比对鉴定流苏石斛中的木脂素类成分。采用Kromasil 100-5 C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相进行梯度洗脱,体积流量为0.8 mL·min-1,柱温为35℃,质谱使用ESI离子源,负离子模式下采集数据。HPLC含量测定采用与MS分析相同的色谱柱,流动相甲醇+乙腈(V/V=1∶1)-0.01 mol/L乙酸铵溶液,梯度洗脱,流速0.8 mL·min-1,柱温40℃,检测波长为215 nm。【结果】从流苏石斛中鉴定出丁香树脂酚双葡萄糖苷、丁香树脂酚单葡萄糖苷、丁香树脂酚,含量测定结果显示丁香树脂酚双葡萄糖苷、丁香树脂酚单葡萄糖苷、丁香树脂酚线性范围分别为0.1701~3.4020、0.1020~2.0400、0.0403~0.8060μg(r≥0.9995),平均加样回收率范围在97.71%~101.67%,相对标准偏差(RSD)均小于3.0%。10批样品丁香树脂酚双葡萄糖苷、丁香树脂酚单葡萄糖苷、丁香树脂酚的含量分别为0.7779~1.3852、0.0734~0.1966、0.0295~0.1882 mg·g-1。【结论】本研究方法可为流苏石斛的质量评价提供参考依据。

流苏石斛的黄酮类成分及其对皮质酮诱导PC12细胞损伤的保护作用研究

目的 研究流苏石斛的黄酮类成分及其对皮质酮诱导的PC12细胞损伤的保护作用。方法采用聚酰胺树脂、葡聚糖凝胶、硅胶柱色谱等方法进行成分分离,通过核磁共振波谱分析与鉴定结构;采用体外细胞实验对所得化合物进行活性检测。结果 从流苏石斛中分离得到10个黄酮及其苷类成分,分别鉴定为新西兰牡荆苷Ⅱ(1)、异佛莱心苷(2)、佛莱心苷(3)、芹菜素-6-C-α-L-鼠李糖-8-C-β-D-异鼠李糖苷(4)、芹菜素-6-C-α-L-阿拉伯糖-8-C-β-L-阿拉伯糖苷(5)、芹菜素-6,8-二-C-α-L-阿拉伯糖苷(6)、金圣草黄素-7-O-β-D-葡萄糖苷(7)、芹菜素-6-C-α-L-鼠李糖苷(8)、异牡荆素(9)和芹菜素(10),其中化合物3~6、8~10可显著提高皮质酮诱导损伤的PC12细胞的存活率。结论 化合物4、5、7~10为首次从该种植物中分离得到,化合物5、7、8为首次从该属植物中分离得到;化合物3~6、8~10对皮质酮诱导的PC12细胞损伤具有一定的神经保护作用。

流苏石斛的离体快速繁殖

以流苏石斛茎段为外植体进行离体快速繁殖研究。结果显示:茎段诱导芽的适宜培养基为MS+BA2.0mg·L-1+NAA0.5mg·L-1+CH0.5g·L-1,芽的诱导率达58.3%;培养基MS+BA4.0mg·L-1+NAA0.5mg·L-1+CH0.5g·L-1可促进丛芽的形成,而丛芽增殖的适宜培养基为MS+BA2.0mg·L-1+NAA0.2mg·L-1+CH0.5g·L-1,增殖系数达6.23;试管苗生根的最佳培养基为1/2MS+IBA0.5mg·L-1+NAA0.5mg·L-1,50d后试管苗生根率可达100%。研究还发现,壮苗的适宜培养基为1/2MS+BA0.5mg·L-1+NAA0.1mg·L-1+CH0.2g·L-1,丛芽在该培养基上培养75d后,可同时完成增殖与生根程序。

流苏石斛化学成分的研究(Ⅰ)

目的 :从兰科植物流苏石斛 (DendrobiumfimbriatumHook .)茎中提取分离活性成分。方法 :95 %乙醇提取、溶剂抽提、硅胶柱层析、重结晶等。结果 :分离出 9个化合物 ,鉴定出其中 6个 ,分别为大黄酚 (3)、三十二烷酸 (5 )、对羟基反式肉桂酸三十烷基酯 (6 )、对羟基顺式肉桂酸三十烷基酯 (7)、β 谷甾醇 (8)和鼓槌联苄 (9)。 结论 :大黄酚为首次从石斛属植物中分得 。

流苏石斛化学成分研究

目的 研究流苏石斛 (Dendrobiumfimbriatum)的化学成分。方法 应用色谱技术进行分离纯化 ,用IR ,MS ,1 HNMR ,1 3CNMR和 2D NMR技术鉴定化合物的结构 ,并进行初步的药理实验。结果 从乙醇提取物中分得 8个化合物 ,分别鉴定为流苏菲 (1)、毛兰菲 (2 )、crepidatin(3)、大黄素甲醚 (4)、大黄酸 (5 )、泽兰内酯 (6 )、滨蒿内酯 (7)和n octacostylferulate(8)。结论 流苏菲为一个新化合物 ,对BGC人胃癌细胞有一定的抑制活性 ,大黄素甲醚和大黄酸为首次从石斛属植物中得到 ,其余均为首次从该种植物中得到。

流苏石斛化学成分的研究(Ⅱ)

目的 :对兰科植物流苏石斛的化学成分进行研究。方法 :色谱和光谱分析法分离和鉴定化学成分。结果 :从丙酮部分分得 6个化合物 ,分别为大黄素、芦荟大黄素、鼓槌石斛素、moscatilin、胡萝卜苷和 ( -) -莽草酸。结论 :大黄素和芦荟大黄素为首次从石斛属植物中得到 ,其余均为首次从该种植物得到。

流苏石斛组培快繁与炼苗移栽

以流苏石斛(Dendrobium fimbriatum Hook.)为试料,研究了种子萌发形成原球茎,原球茎的增殖培养、器官分化,建立了快速繁殖体系,经过初代培养、继代培养,成功培育出再生植株,并对组培苗的大棚移栽驯化等方面进行研究,初步形成从组培快繁到大棚生产的一系列培育过程,为流苏石斛的规模化生产发展奠定基础。

药用植物束花石斛、流苏石斛及其形态相似种的PCR-RFLP鉴别研究

目的建立简易的采用rDNAITS区作为分子标记对中药石斛的基源植物进行分子鉴定的技术。方法用聚合酶链反应—限制性片段长度多态性(PCRRFLP)方法获得ITS片段的限制性图谱。束花石斛及其形态相似种的PCR扩增产物用ClaI和ApaLI酶切,流苏石斛及其形态相似种的PCR扩增产物用SphI酶切。结果根据预测的PCRRFLP图谱,可以鉴别药用植物束花石斛、流苏石斛及它们的形态相似种。用这种方法鉴定了市场上收集的25件商品束花石斛、流苏石斛新鲜药材的原植物。结论rDNAITS的PCRRFLP可用于鉴定石斛药材的原植物,具有简便、费用低的优点。

硝酸镧对流苏石斛试管苗生长的影响

探讨了不同浓度的硝酸镧对流苏石斛试管苗生长的影响。结果表明,硝酸镧对流苏石斛试管苗的增殖率、高生长、茎粗、叶长、叶宽、生根数、生根率、根长、质量增量、硝酸还原酶活性、过氧化物酶活性等有显著影响。硝酸镧质量浓度低于10 mg/L时能有效促进流苏石斛试管苗的生长分化。

流苏石斛与束花石斛挥发油成分

为探明黔产流苏石斛茎与束花石斛茎中的挥发油组成及差异,采用固相微萃取技术分别提取贵州兴义野生流苏石斛茎与束花石斛茎中的挥发油,GC-MS法对其化学成分进行分析鉴定和计算相对百分含量。结果表明:从黔产流苏石斛茎与束花石斛茎中分离鉴定出化学成分62个和54个,其相对含量占挥发油总量的97.66%和96.65%;两者具有相同的挥发性化学成分40个,其主要成分均含有β-波旁烯、δ-杜松烯、反-2-辛烯醛等;其中,流苏石斛茎挥发油中相对含量最高的为β-波旁烯(47.53%),而束花石斛中相对含量最高的为依兰油烯(19.397%)。

流苏石斛种子非共生萌发的研究

通过对流苏石斛(Dendrobium fimbriatum Hook.)成熟种子进行无菌播种诱导原球茎,研究了其在不同温度、不同质量浓度植物生长调节剂配比下种子无菌萌发情况,原球茎分化获得幼苗。结果表明:25℃,Knudson C(KC)+2%蔗糖+0.7%琼脂时,原球茎诱导时间为7-15 d,种子萌发率可达98.3%。25℃,KC+2 mg.L-1 6-BA+0.1-0.5 mg.L-1 NAA+3%蔗糖+0.7%琼脂时有利于原球茎诱导和幼苗分化,分化率可达91.2%。幼苗继代转接后均能正常生长、增殖和生根。

流苏石斛(Dendrobium fimbriatum)迁地保护种群的数量动态

运用静态生命表、生殖力表和Leslie矩阵模型,研究了保存于中国科学院西双版纳热带植物园兰科植物迁地保护区中的濒危物种流苏石斛种群数量动态过程,评价了流苏石斛的迁地保护效果。结果表明:迁地保护种群的年龄锥体为壶型锥体,种群的净增长率、内禀增长率和周限增长率较低,种群正处于下降态势;Leslie矩阵模型分析表明,在未来50年内,该种群各龄级的个体数及种群总数均表现出持续下降趋势。模型分析发现:1)迁地保护区模拟生境尽管适宜流苏石斛的生长,但由于附着在树上,中龄级个体先端产生的无性繁殖芽不能及时附着在附主上掉落死亡。因此,需要改善迁地保护区的生境条件,如增加岩石生境(流苏石斛野生种群几乎都是岩生的)使幼龄级个体脱落后能够顺利进入种群;2)种群下降的另一主要原因就是中龄级个体繁殖力太低。因此,建议加强对中龄级个体的管理提高繁殖能力以及深入研究实现种子的就地共生萌发,从根本上实现流苏石斛资源的保护。

珍稀药用植物流苏石斛研究进展

为了推进流苏石斛产业发展,该文对流苏石斛的种质资源分布、化学成分、药用功能及繁育特性等方面进行了综述,并对以后的发展提出了展望。

有瓜石斛的性状与显微鉴别

本文对有瓜石斛的生药性状和显微特征作了较详细的报道

4种蹄盖蕨科植物配子体形态和发育的比较研究

利用光学显微镜详细观察蹄盖蕨科(Athyriaceae)2属4种植物,即蹄盖蕨属的尖头蹄盖蕨(Athyrium vidalii)、长柄蹄盖蕨(A.longius)和喜马拉雅蹄盖蕨(A.fimbriatum)以及亮毛蕨属的亮毛蕨(Acystopteris japonica)配子体发育过程,记录配子体各发育阶段的特征。4种植物的孢子都为单裂缝,两侧对称,孢子萌发类型为向心型,配子体发育类型为铁线蕨型,性器官都为薄囊蕨型,成熟原叶体为对称的心脏形,无毛状体;种间差异包括孢子纹饰、孢子萌发时间、配子体形成时间、丝状体长度、片状体和原叶体的形态以及性器官大小。

多效唑对流苏石斛试管苗生长的影响

研究不同浓度多效唑对流苏石斛试管苗生长影响的结果表明：多效唑能缩短流苏石斛试管苗再生芽分化的时间，促进再生苗根的分化，提高生根的数量；同时，多效唑能使再生苗的叶片变短、变大，对再生植株有显著的矮化作用，使植株的茎段变短、变粗，抑制根的伸长生长。多效唑对流苏石斛试管苗生长的影响具有明显的规律性，低浓度时其效果均随着浓度的升高而增强，并在1～1．5mg-L^-1的范围内达到最佳效果，再提高浓度则趋于饱和。

毛咀地星的抗氧化、抗菌和抗肿瘤活性和化学成分研究

毛咀地星是一种药用蘑菇,为了进一步开发利用毛咀地星,该研究探讨了毛咀地星乙醇提取物的抗氧化、抗菌和抗肿瘤活性,并采用硅胶柱色谱、制备薄层色谱和重结晶等方法,对毛咀地星乙醇提取物进行分离纯化,研究了其化学成分。结果表明:毛咀地星乙醇提取物多酚含量为10.53μg·mg^(-1),DPPH和·OH自由基清除能力的IC50值分别为91.35和148.76μg·m L^(-1);乙醇提取物对金黄葡萄球菌、大肠杆菌和枯草芽抱杆菌均无抑制作用;乙醇提取物在浓度为1 mg·m L^(-1)时,对燕麦镰刀菌的抑制率为36.11%;乙醇提取物在浓度为200μg·m L^(-1)时,对BG-803、NCI-H502和MDA-MB-231肿瘤细胞的抑制率分别为18.87%、17.71%和41.23%。并从乙醇提取物中分离纯化到6个化合物,根据理化性质和波谱数据分析,化合物结构分别鉴定为5α,8α-过氧化麦角甾-6,9(11),22-三烯-3β-醇(1)、5α,8α-过氧化麦角甾-6,22-二烯-3β-醇(2)、D-阿拉伯糖醇(3)、L-谷氨酸(4)、麦芽糖(5)和蔗糖(6),以上化合物均为首次从该菌中分离得到。

药用植物马鞭石斛组织培养与快速繁殖

以马鞭石斛(Dendrobiumf imbriatum Hook.var.oculatum.Hook.)的种子为外植体进行了组织培养快速繁殖技术研究,以期筛选出适合各个阶段培养的培养基配方。结果表明:马鞭石斛种子萌发原球茎诱导的最佳培养基为MS+GA 0.1mg/L+6-BA 1.5mg/L,诱导率达85%;KT 0.5mg/L+6-BA 2.5mg/L+NAA 1.0mg/L的MS培养基最适宜马鞭石斛原球茎增殖及幼苗分化,分化率为90%;最适宜马鞭石斛生根的培养基为MS+AC 0.5mg/L+NAA 1.0mg/L,生根率为100%。

流苏石斛多糖理化性质·免疫活性及提取工艺研究

[目的]研究流苏石斛水溶性多糖(WDFP)、碱溶性多糖(BDFP)及酸溶性多糖(ADFP)的理化性质与免疫活性差异,并对WD-FP的提取工艺进行优化。[方法]分别以水、碱、酸提取流苏石斛获得WDFP、BDFP和ADFP,比较3者理化性质和免疫活性;并采用响应面法优化WDFP的提取工艺条件。[结果]WDFP、BDFP和ADFP的分子量分别为2.10×105、3.34×106和3.53×106Da,特性黏度分别为68.2、134.9和40.4 ml/g。WDFP主要由葡萄糖和甘露糖组成,BDFP主要由阿拉伯糖、木糖和葡萄糖组成,ADFP主要由木糖和葡萄糖组成。WDFP免疫调节活性最高,BDFP次之,ADFP最低。WDFP最佳提取条件为:提取温度82℃,提取时间51 min,料液比1∶33.3(W/V,g/ml,下同);在此条件下,提取得率为9.68%。[结论]研究结果为流苏石斛多糖的进一步研究提供基础,为其工业化生产提供参考。

流苏石斛原球茎诱导初步探究

通过植物组织培养技术对流苏石斛种子、茎段诱导原球茎因子进行初步探究.实验表明:以种子为诱导材料,在MS基本培养基中添加6-BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L的诱导效果较好,诱导率达84.9%;以茎段为诱导材料时,在MS+6-BA3.0 mg/L+NAA0.5 mg/L+TDZ0.4 mg/L的培养基上诱导率高达93%,以添加100g/L的马铃薯汁能更好地提高原球茎的诱导率,诱导率高达95.2%.