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稻虱缨小蜂(Anagrus nilaparvatae)在两种稻飞虱上的生殖力及其应用潜能 被引量:7
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作者 林庆胜 黄寿山 +2 位作者 胡美英 李娜 张万里 《生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期4295-4302,共8页
利用寄生变红卵和仔代成蜂数量作为繁殖力估计等方法,编制了稻虱缨小蜂(Anagrus nilaparvataepang and wang)在褐飞虱(Nilaparvata lugens(Stal))卵和白背飞虱(Sogatella furcifera(Horvath))卵上繁殖的实验种群生命表,测定了稻虱缨小... 利用寄生变红卵和仔代成蜂数量作为繁殖力估计等方法,编制了稻虱缨小蜂(Anagrus nilaparvataepang and wang)在褐飞虱(Nilaparvata lugens(Stal))卵和白背飞虱(Sogatella furcifera(Horvath))卵上繁殖的实验种群生命表,测定了稻虱缨小蜂寄生褐飞虱和白背飞虱的生殖力,分析了稻虱缨小蜂对稻飞虱卵的寄生能力。结果表明:在相同的繁蜂条件下,稻虱缨小蜂寄生褐飞虱卵的净生殖力R0为10.26,内禀增长率rm为0.2213,平均单雌产仔数为14.52头;寄生白背飞虱卵的净生殖力R0为8.78,内禀增长率rm为0.1840,平均单雌产仔数为12.20头。两组生命表参数比较分析显示褐飞虱卵具有较强的室内繁蜂潜能,可利用其进行室内繁蜂。应用稻虱缨小蜂、褐飞虱及白背飞虱的生命表参数讨论了稻虱缨小蜂在稻飞虱生物防治中的应用潜能及其可能的利用途径。 展开更多
关键词 稻虱缨小蜂 生命表 褐飞虱 白背飞虱 应用潜能
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Effects of Temperature on Functional Response of Anagrus nilaparvatae Pang et Wang (Hymenoptera:Mymaridae) on the Eggs of Whitebacked Planthopper,Sogatella furcifera Horvth and Brown Planthopper,Nilaparvata lugens Stl 被引量:4
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作者 MA Ming-yong PENG Zhao-pu HE Yuan 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2012年第8期1313-1320,共8页
Understanding the temperature affecting parasitic efficiency is critical to succeed in utilizing parasitoid as natural enemy in pest management. Laboratory studies were carried out to determine the effects of temperat... Understanding the temperature affecting parasitic efficiency is critical to succeed in utilizing parasitoid as natural enemy in pest management. Laboratory studies were carried out to determine the effects of temperature on parasitoid preference of female Anagrus nilaparvatae Pang et Wang (Hymenoptera:Mymaridae) to the eggs of whitebacked planthopper (WBPH), Sogatella furcifera Horváth and brown planthopper (BPH), Nilaparvata lugens Stl to build a composite model describing changes in parasitic response along a temperature gradient (18, 22, 26, 30, 34°C). The results showed that attack responses of A. nilaparvatae on WBPH and BPH were the best described by a Type II functional response. The two parameters, attack rates (a) and handling times (Th), of A. nilaparvatae to both eggs were influenced by the temperature. The maximum attack rates to WBPH (1.235) and BPH (1.049) were at 26 and 34°C, respectively, and the shortest handling times to WBPH (0.063) and BPH (0.057) were at 30 and 26°C, respectively. However, the optimal temperature for parasitic efficiency of A. nilaparvatae to WBPH and BPH eggs was both at 26°C, which showed that the present microclimate temperature of the habitat in the paddyfield was beneficial to A. nilaparvatae and indicated that parasitic efficiency of A. nilaparvatae would be impaired by global warming. 展开更多
关键词 functional response TEMPERaTURE anagrus nilaparvatae whitebacked planthopper brown planthopper
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Influence of Temperature on Symbiotic Bacterium Composition in Successive Generations of Egg Parasitoid, Anagrus nilaparvatae 被引量:1
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作者 WANG Xin XU Hong-xing +3 位作者 LIU Shu-ping TANG Jiang-wu ZHENG Xu-song LV Zhong-xian 《Rice science》 SCIE CSCD 2016年第4期203-210,共8页
Anagrus nilaparvatae is the dominant egg parasitoid of rice planthoppers and plays an important role in biological control. Symbiotic bacteria can significantly influence the development, survival, reproduction and po... Anagrus nilaparvatae is the dominant egg parasitoid of rice planthoppers and plays an important role in biological control. Symbiotic bacteria can significantly influence the development, survival, reproduction and population differentiation of their hosts. To study the influence of temperature on symbiotic bacterial composition in the successive generations of A. nilaparvatae, A. nilaparvatae were raised under different constant temperatures of 22 °C, 25 °C, 28 °C, 31 °C and 34 °C. Polymerase chain reaction-denaturing gradient gel electrophoresis was used to investigate the diversity of symbiotic bacteria. Our results revealed that the endophytic bacteria of A. nilaparvatae were Pantoea sp., Pseudomonas sp. and some uncultured bacteria. The bacterial community composition in A. nilaparvatae significantly varied among different temperatures and generations, which might be partially caused by temperature, feeding behavior and the physical changes of hosts. However, the analysis of wsp gene showed that the Wolbachia in A. nilaparvatae belonged to group A, sub-group Mors and sub-group Dro. Sub-group Mors was absolutely dominant, and this Wolbachia composition remained stable in different temperatures and generations, except for the 3rd generation under 34 °C during which sub-group Dro became the dominant Wolbachia. The above results suggest that the continuous high temperature of 34 °C can influence the Wolbachia community composition in A. nilaparvatae. 展开更多
关键词 TEMPERaTURE aNaGRUS nilaparvatae WOLBaCHIa bacterial community polymerase chain reaction-denaturing gradient gel electrophoresis rice brown PLaNTHOPPER
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miRNA对褐飞虱鞘脂质代谢基因表达的影响及沉默NlSPT1和Nl SMase4的small RNA分析 被引量:1
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作者 王妮 施哲逸 +4 位作者 尤元政 张超 周文武 周瀛 祝增荣 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第20期4022-4034,共13页
【背景】鞘脂质是第二大类膜脂,作为信号转导物质参与细胞生长发育、繁殖及凋亡等过程。鞘脂质代谢酶调控鞘脂质代谢以维持生物体内代谢的稳态。【目的】以重要水稻害虫褐飞虱(Nilaparvata lugens)为研究对象,通过RNA干扰(RNA interfere... 【背景】鞘脂质是第二大类膜脂,作为信号转导物质参与细胞生长发育、繁殖及凋亡等过程。鞘脂质代谢酶调控鞘脂质代谢以维持生物体内代谢的稳态。【目的】以重要水稻害虫褐飞虱(Nilaparvata lugens)为研究对象,通过RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术检测微小RNA(microRNA,miRNA)生物合成通路核心组分NlAgo1、NlDicer1和NlDrosha沉默后褐飞虱鞘脂质代谢通路相关基因的相对转录水平,结合small RNA测序分析沉默丝氨酸棕榈酰转移酶1(serine palmitoyltransferase 1,SPT1)和鞘磷脂酶4(sphingomyelinase 4,SMase4)基因的差异miRNA,探究miRNA在褐飞虱鞘脂质代谢中的作用,为害虫防治提供新的分子靶标。【方法】利用RNAi技术,分别对羽化后第1天(1 PAE,post adult eclosion)的雌成虫NlAgo1、NlDicer1和NlDrosha进行dsRNA注射,以ds GFP为对照;分别解剖羽化后第5天的卵巢组织,以β-actin作为内参基因,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测NlAgo1、NlDicer1和NlDrosha沉默后鞘脂质代谢通路相关基因的表达量变化;根据已有的小RNA文库联合miRNA-靶基因预测软件对可能调控NlSPT1和NlSMase4表达的miRNA进行预测;通过small RNA测序技术对沉默NlSPT1和NlSMase4的差异miRNA进行鉴定和靶基因富集性分析。【结果】与对照组相比,沉默NlAgo1、NlDicer1或NlDrosha显著上调卵巢中NlSPT1和NlSMase4等鞘脂质代谢通路相关基因的表达;靶基因预测结果显示,有6条miRNA能与NlSPT1结合,13条miRNA能与NlSMase4结合;沉默NlSPT1和NlSMase4的差异miRNA的靶基因显著富集在细胞核和蛋白质结合等生物学过程以及内吞作用、内质网加工、MAPK信号通路、TOR信号通路、凋亡、脂质代谢等代谢通路。【结论】NlAgo1、NlDicer1和NlDrosha依赖性的miRNA通过影响鞘脂质代谢相关基因的表达影响鞘脂质代谢。NlSPT1和NlSMase4沉默引起褐飞虱卵巢miRNA表达水平的改变。研究结果可为基于鞘脂质代谢基因为靶标的害虫防治提供理论依据。 展开更多
关键词 褐飞虱 微小RNa 鞘脂质 RNa干扰 small RNa测序
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褐飞虱五个miRNA的克隆鉴定与表达谱分析
5
作者 王妮 张超 +2 位作者 尤元政 周文武 祝增荣 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1289-1298,共10页
【目的】本研究对前期鉴定所获得的5个微小RNA(microRNA, miRNA)进行表达和序列验证,检测其在褐飞虱Nilaparvata lugens不同发育阶段和成虫组织中的表达模式,旨在为探究miRNA调控褐飞虱生长发育和繁殖的作用机制提供理论和实验依据。【... 【目的】本研究对前期鉴定所获得的5个微小RNA(microRNA, miRNA)进行表达和序列验证,检测其在褐飞虱Nilaparvata lugens不同发育阶段和成虫组织中的表达模式,旨在为探究miRNA调控褐飞虱生长发育和繁殖的作用机制提供理论和实验依据。【方法】采用Stem-loop RT-PCR对褐飞虱5个miRNA(miR-1a-3p, miR-71-3p, miR-184-3p, miR-190-5p和miR-281-5p)进行表达验证。结合Sanger测序验证5个miRNA。利用qRT-PCR检测这5个miRNA在褐飞虱不同发育阶段(卵、 1-5龄若虫和雌雄成虫)、 1-5日龄雌成虫和雌成虫组织(头、胸、腹、足、翅、中肠、马氏管和卵巢)中的表达量。通过注射miRNA类似物agomir和抑制剂antagomir对褐飞虱雌成虫这5个miRNA分别进行过表达和抑制分析。【结果】Stem-loop RT-PCR和Sanger测序结果显示miR-1a-3p, miR-71-3p, miR-184-3p, miR-190-5p和miR-281-5p在褐飞虱体内真实存在和表达。发育表达谱分析发现,miR-1a-3p和miR-71-3p在褐飞虱整个发育阶段均有不同程度的表达,且分别在雄成虫和2龄若虫中高表达;miR-184-3p和miR-281-5p在褐飞虱雌雄成虫中表达量最高,在卵和若虫中表达量较低,且在卵和若虫间的表达量无显著差异;miR-190-5p在卵中表达量显著高于其他发育阶段的。miR-1a-3p的表达量在雌成虫4日龄时显著降低;miR-71-3p和miR-184-3p的表达量在雌成虫3日龄时达到最高;miR-190-5p和miR-281-5p在雌成虫1日龄时的表达量较高,在2-4日龄时的表达量显著下降。组织表达谱分析发现,miR-1a-3p在足部和卵巢中显著高表达;miR-71-3p主要在雌成虫卵巢特异性地高表达;miR-184-3p在中肠中表达量最高,其次是在卵巢中的表达量;miR-190-5p和miR-281-5p均在翅中表达量最高,其次是在头和胸中(miR-190-5p)以及中肠和卵巢中(miR-281-5p)。注射miRNA类似物后,5个miRNA的表达量均比阴性对照显著上调;注射miRNA抑制剂后,除miR-281-5p表达量比阴性对照显著上调外,其余4个miRNA的表达量均比阴性对照显著下调。【结论】这5个miRNA可能在褐飞虱生长发育和繁殖中起调控作用,研究结果为后续开展褐飞虱miRNA功能研究提供了基因参考和基础前提。 展开更多
关键词 褐飞虱 MIRNa 表达谱 生长 发育 繁殖
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高通量测序分析褐飞虱circRNA表达谱及其潜在功能
6
作者 于鑫滢 赵哲奇 闸雯俊 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期431-442,共12页
【目的】探究褐飞虱Nilaparvata lugens如何适应抗性水稻品种YHY15,并为研究环状RNA(circular RNA, circRNA)在褐飞虱对抗性水稻适应机制中的作用奠定基础。【方法】利用高通量测序技术鉴定生物型1和生物型Y(能致害抗性水稻YHY15的生物... 【目的】探究褐飞虱Nilaparvata lugens如何适应抗性水稻品种YHY15,并为研究环状RNA(circular RNA, circRNA)在褐飞虱对抗性水稻适应机制中的作用奠定基础。【方法】利用高通量测序技术鉴定生物型1和生物型Y(能致害抗性水稻YHY15的生物型)褐飞虱的circRNA,并统计其类型和分布。分析生物型1和生物型Y褐飞虱间circRNA表达差异,并对circRNA来源基因进行GO功能注释和KEGG富集分析。【结果】生物型1和生物型Y褐飞虱共鉴定到19个circRNA,分布在9条染色体上,其中17个circRNA由剪接位点之间的外显子构成,2个circRNA由剪接位点之间的所有碱基构成,17个circRNA长度在200~800 bp。生物型Y褐飞虱的circRNA表达丰度与表达量比生物型1褐飞虱的更高。分析结果表明,在生物型1褐飞虱克服抗性水稻YHY15形成新的生物型Y的过程中,在自然选择压力下,circRNA的表达出现变化,推测这种变化影响了褐飞虱新生物型的形成。KEGG分析结果表明,鉴定到的生物型1和生物型Y褐飞虱circRNA来源基因主要富集到自噬相关通路上。【结论】褐飞虱长期取食抗性水稻,导致褐飞虱消化、解毒和代谢能力进化,能降解抗性水稻为抵御褐飞虱而产生的次生代谢物。鉴定到的生物型1和生物型Y褐飞虱的circRNA来源基因与细胞自噬相关,表明褐飞虱通过细胞自噬过程应答抗虫水稻,这种应答反应促进褐飞虱适应抗虫水稻,致害性增强和生物型形成。 展开更多
关键词 褐飞虱 circRNa 细胞自噬 抗虫水稻 高通量测序
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The life-history trait trade-offs mediated by reproduction and immunity in the brown planthopper,Nilaparvata lugens Stål
7
作者 Dan Sun Hongfeng Wang +4 位作者 Jiahui Zeng Qiuchen Xu Mingyun Wang Xiaoping Yu Xuping Shentu 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2024年第6期2018-2032,共15页
Reproduction and immune defense are costly functions,and they are expected to tradeoff with each other to drive evolution.The brown planthopper(BPH),Nilaparvata lugens Stål(Hemiptera,Delphacidae),is a global supe... Reproduction and immune defense are costly functions,and they are expected to tradeoff with each other to drive evolution.The brown planthopper(BPH),Nilaparvata lugens Stål(Hemiptera,Delphacidae),is a global superpest that mostly damages rice crops.Yeast-like symbionts(YLS)exist in the abdominal fat body tissue and are tightly associated with the development,growth,and reproduction of BPH.Our previous research demonstrated that mating behavior promotes the release of YLS from the fat body into the hemolymph in the BPH,thereby triggering an immune response.Additionally,the fitness costs related to life-history traits of BPH(such as survival rate)have a strong dependence on the relative abundance of YLS.However,the possible relationship between reproduction and the immune response in BPH has not been identified.In this study,an omics-based approach was used to analyze the transcriptome of fat body tissues in mated and unmated BPH at 72 h post-eclosion,from which two antimicrobial peptide genes,NlDefensin A(NlDfA)and NlDefensin B(NlDfB),were selected since they were highly expressed in mated BPH.Subsequently,the full-length cDNA sequences of the NlDfA and NlDfB genes were cloned and analyzed.qPCR results showed up-regulation of the NlDfA and NlDfB genes in mated BPH when compared to unmated BPH.Spatial-temporal expression analysis indicated that the NlDfA and NlDfB genes were expressed in all tissues and developmental stages,and they were most highly expressed in the fat body at 24 h post-eclosion.Moreover,the symbionts in BPH were significantly inhibited by the in vitro expression of the NlDfA and NlDfB proteins.Furthermore,RNA interference(RNAi)-mediated suppression of NlDfA and NlDfB dramatically increased the relative abundance of YLS in the fat body,while YLS in the hemolymph decreased significantly.These BPHs also displayed some fitness disadvantages in survival,fecundity,hatchability,and possibly the vertical transmission of YLS from hemolymph to egg.Our results indicated that mating could heighten the immunity of BPH by upregulating the expression of the NlDfA and NlDfB genes,which protect the host from pathogen challenges during reproduction.However,the reduced content of YLS may act as a fitness disadvantage in dictating the life-history traits of BPH.This work has significant theoretical and practical implications for the precise green control technology that involves crucial gene targeting,as well as for the“endosymbionts for pest control”strategy in insects. 展开更多
关键词 Nilaparvata lugens REPRODUCTION immune defense trade-off
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Gapless Genome Assembly of ZH8015 and Preliminary Multi-Omics Analysis to Investigate ZH8015's Responses Against Brown Planthopper Infestation
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作者 LI Dian DUAN Wenjing +5 位作者 LIU Qun’en WU Weixun ZHAN Xiaodeng SUN Lianping ZHANG Yingxin CHENG Shihua 《Rice science》 SCIE CSCD 2024年第3期317-327,I0042-I0045,共15页
Accurate genomic information is essential for advancing genetic breeding research in specific rice varieties.This study presented a gapless genome assembly of the indica rice cultivar Zhonghui 8015(ZH8015)using Pac Bi... Accurate genomic information is essential for advancing genetic breeding research in specific rice varieties.This study presented a gapless genome assembly of the indica rice cultivar Zhonghui 8015(ZH8015)using Pac Bio HiFi,Hi-C,and ONT(Oxford Nanopore Technologies)ultra-long sequencing technologies,annotating 43037 gene structures.Subsequently,utilizing this genome along with transcriptomic and metabolomic techniques,we explored ZH8015's response to brown planthopper(BPH)infestation.Continuous transcriptomic sampling indicated significant changes in gene expression levels around 48 h after BPH feeding.Enrichment analysis revealed particularly significant alterations in genes related to reactive oxygen species scavenging and cell wall formation.Metabolomic results demonstrated marked increases in levels of several monosaccharides,which are components of the cell wall and dramatic changes in flavonoid contents.Omics association analysis identified differentially expressed genes associated with key metabolites,shedding light on ZH8015's response to BPH infestation.In summary,this study constructed a reliable genome sequence resource for ZH8015,and the preliminary multi-omics results will guide future insect-resistant breeding research. 展开更多
关键词 brown planthopper gapless genome genome assembly multi-omics Nilaparvata lugens rice
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CRISPR/Cas9-mediated NlInR2 mutants:Analyses of residual mRNA and truncated proteins
9
作者 Jun Lü Jingxiang Chen +4 位作者 Yutao Hu Lin Chen Shihui Li Yibing Zhang Wenqing Zhang 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2024年第6期2006-2017,共12页
CRISPR/Cas9 technology is a powerful genome manipulation tool in insects.However,little is known about whether mRNA and protein of a target gene are completely cleared in homozygous mutants.This study generated homozy... CRISPR/Cas9 technology is a powerful genome manipulation tool in insects.However,little is known about whether mRNA and protein of a target gene are completely cleared in homozygous mutants.This study generated homozygous mutants of the insulin receptor gene 2(NlInR2)in the brown planthopper(Nilaparvata lugens)using CRISPR/Cas9 genome editing.Both frameshift mutants,E5_D17 and E6_I7,differentiated towards long wings,but there were differences in wing morphology,with E5_D17 showing wing deformities.Subsequent investigations revealed the presence of residual expression of NlInR2 mRNA in both mutants,as well as the occurrence of spliceosomes featuring exon skipping splicing in E5_D17.Additionally,the E5_D17 exhibited the detection of N-terminally truncated NlInR2 protein.RNA interference experiments indicated that the knockdown of NlInR2 expression in the E5_D17 mutant line increased the proportion of wing deformities from 11.1 to 65.6%,suggesting that the residual NlInR2 mRNA of the E5_D17 mutant might have retained some genetic functions.Our results imply that systematic characterization of residual protein expression or function in CRISPR/Cas9-generated mutant lines is necessary for phenotypic interpretation. 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9 Nilaparvata lugens residual mRNa skipping exon truncated protein
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褐飞虱ABCG基因的克隆与表达分析 被引量:3
10
作者 闸雯俊 王芳芳 +6 位作者 李三和 胡刚 陈志军 刘凯 周雷 杨国才 游艾青 《湖北农业科学》 北大核心 2014年第23期5871-5874,共4页
三磷酸腺苷结合盒转运蛋白(ATP-binding cassette,ABC)广泛分布于各种生物体中,是最大的膜蛋白家族之一。在昆虫中,ABC转运子不仅在分子转运过程中有重要的功能,同时在杀虫剂抗性、代谢和发育中都起到重要的作用。克隆和鉴定了褐飞虱(Ni... 三磷酸腺苷结合盒转运蛋白(ATP-binding cassette,ABC)广泛分布于各种生物体中,是最大的膜蛋白家族之一。在昆虫中,ABC转运子不仅在分子转运过程中有重要的功能,同时在杀虫剂抗性、代谢和发育中都起到重要的作用。克隆和鉴定了褐飞虱(Nilaparvata lugens Stal,BPH)ABCG基因(Nl ABCG),结果表明Nl ABCG基因全长1 222 bp,含有一个长度为789 bp的开放阅读框,编码263个氨基酸。Nl ABCG蛋白与内华达古白蚁(Zootermopsis nevadensis)ABCG的同源性最高,达到69%。利用q RTPCR检测Nl ABCG基因在褐飞虱不同发育阶段和不同组织中的表达,发现Nl ABCG转录本在褐飞虱的所有发育阶段都有表达,在1龄若虫中表达量最低,随着生长发育表达量逐渐升高。Nl ABCG在褐飞虱5龄若虫的中肠中表达量最高。Nl ABCG基因的序列特征和表达谱非常保守,为其功能的分析提供了信息。 展开更多
关键词 褐飞虱(Nilaparvata LUGENS Stal BPH) NlaBCG 克隆
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利用SSR定位籼稻品种Kaharamana中抗褐飞虱基因Bph9(英文) 被引量:11
11
作者 苏昌潮 翟虎渠 +2 位作者 王春明 孙立宏 万建民 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第3期262-268,共7页
褐飞虱是危害水稻生产最重要的害虫之一,利用寄主抗性被认为足防治褐飞虱最经济而有效的方法。斯里兰卡水稻品种Kaharamana对东亚和东南亚的褐飞虱种群均表现抗虫性,利用分子遗传学的方法对其携带的Rph9基因进行了SSR 定位。所用的遗传... 褐飞虱是危害水稻生产最重要的害虫之一,利用寄主抗性被认为足防治褐飞虱最经济而有效的方法。斯里兰卡水稻品种Kaharamana对东亚和东南亚的褐飞虱种群均表现抗虫性,利用分子遗传学的方法对其携带的Rph9基因进行了SSR 定位。所用的遗传群体为来源于Kaharamana和02428的含有180个单株的F2分离群体,每个F2单株套袋自交获得F2:3家系。利用苗期集团鉴定对F2:3家系进行抗褐飞虱鉴定,以推测相应F2单株的基因型。连锁分析表明,Bph9位于第12染色体上的两个SSR标记RM463和RM5341之间,分别与之相距6.8 cM和9.7 cM。该标记有助于将Bph9用于分子标记辅助选择育种研究。 展开更多
关键词 抗褐飞虱基因 SSR标记 籼稻品种 定位 分子标记辅助选择 分子遗传学 水稻生产 水稻品种 斯里兰卡 分离群体
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水稻褐飞虱内生共生细菌Arsenophonus的鉴定和系统分析 被引量:18
12
作者 王渭霞 罗举 +1 位作者 赖凤香 傅强 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期647-654,共8页
利用16SrDNA通用引物扩增了水稻褐飞虱Nilaparvata lugens(Stal)体内共生细菌的序列,经克隆、测序和NCBI数据库比对,发现褐飞虱体内存在杀雄菌属Arsenophonus类共生细菌,系统发育上与粉虱科和木虱科体内的Arsenophonus属亲源关系较近。... 利用16SrDNA通用引物扩增了水稻褐飞虱Nilaparvata lugens(Stal)体内共生细菌的序列,经克隆、测序和NCBI数据库比对,发现褐飞虱体内存在杀雄菌属Arsenophonus类共生细菌,系统发育上与粉虱科和木虱科体内的Arsenophonus属亲源关系较近。在褐飞虱体内该共生细菌具有两种长度不同的16SrDNA序列,分别为1504bp和547bp,其中后者为前者中间缺失了957bp,其余序列相同。通过重新设计两对引物进行扩增,进一步确认不同褐飞虱地理种群及寄主种群均存在两种片段。Arsenophonus特异的23SrDNA引物的扩增结果表明,Arsenophonus存在于所有检测的褐飞虱种群中,但不存在于水稻寄主中。荧光定量PCR检测发现3个褐飞虱室内寄主种群Arsenophonus属共生细菌含量不同,其中TN1种群明显高于Mudgo种群和ASD7种群。此为水稻褐飞虱体内存在Arsenophonus属共生细菌的首次报道。 展开更多
关键词 褐飞虱 共生菌 杀雄菌属 16S RDNa 系统发育
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不同致害性褐飞虱种群的DNA多态性研究 被引量:15
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作者 关秀杰 傅强 +2 位作者 王桂荣 赖凤香 张志涛 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期152-158,共7页
采用RAPD_PCR方法 ,对分别在水稻品种TN1、Mudgo和ASD7上纯化 82代的 3个不同致害性褐飞虱种群的基因组DNA多态性进行了分析。从 2 0 5个RAPD引物中筛选出了具种群特异性的引物 10个 ,结果表明 :尽管未达到统计意义上的显著差异 ,雌、... 采用RAPD_PCR方法 ,对分别在水稻品种TN1、Mudgo和ASD7上纯化 82代的 3个不同致害性褐飞虱种群的基因组DNA多态性进行了分析。从 2 0 5个RAPD引物中筛选出了具种群特异性的引物 10个 ,结果表明 :尽管未达到统计意义上的显著差异 ,雌、雄两性试虫种群间的遗传多样性一般高于种群内 ,种群内的多样性则以未经抗性品种筛选的TN1种群最高。用相似性系数进行类平均距离法聚类 ,能将同一致害性种群的各个个体与其他致害种群分开 ,雌、雄虫均无一例外 ,表明不同致害性种群间存在明显的遗传分化 ;同时雌、雄两性试虫分别归为 2组 ,提示褐飞虱致害性遗传可能与性染色体连锁。不同致害性种群存在特有条带 。 展开更多
关键词 褐飞虱 致害性 生物型 DNa多态性 RaPD-PCR
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转Bar基因水稻及草铵膦对褐飞虱取食和产卵行为的影响 被引量:6
14
作者 黄芊 凌炎 +4 位作者 蒋显斌 龙丽萍 黄凤宽 黄所生 吴碧球 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期1110-1114,共5页
【目的】研究抗除草剂转基因水稻及其相应的非选择性除草剂草铵膦对褐飞虱取食和产卵行为的影响,为转Bar基因水稻的生态安全性评价提供科学依据。【方法】以褐飞虱[Nilaparvata lugens (Stl)]为研究对象,以转Bar基因水稻Bar68-1、非... 【目的】研究抗除草剂转基因水稻及其相应的非选择性除草剂草铵膦对褐飞虱取食和产卵行为的影响,为转Bar基因水稻的生态安全性评价提供科学依据。【方法】以褐飞虱[Nilaparvata lugens (Stl)]为研究对象,以转Bar基因水稻Bar68-1、非转基因亲本对照水稻D68以及感虫对照水稻TN1为研究材料,并在转基因抗除草剂水稻上进行喷施0.5%草铵膦处理,对各处理褐飞虱的取食量、取食选择性和产卵选择性进行比较。【结果】褐飞虱在D68上的着虫率和取食量与TN1相比差异不显著,但产卵选择率显著低于TN1;褐飞虱在Bar68-1上的取食量、着虫率和产卵选择率与D68相比差异不显著;喷施0.5%草铵膦处理对褐飞虱取食量、取食选择性的影响与清水对照相比差异不显著,但对褐飞虱的产卵选择率、卵块数和卵粒总数有一定影响,均显著低于清水对照。【结论】抗除草剂转基因水稻Bar68-1对褐飞虱的取食和产卵行为没有影响。 展开更多
关键词 转BaR基因水稻 草铵膦 褐飞虱 取食 产卵
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转cry1Ab基因水稻对拟水狼蛛捕食作用间接影响的评价 被引量:21
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作者 刘志诚 叶恭银 +2 位作者 傅强 张志涛 胡萃 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期175-178,共4页
室内评价了拟水狼蛛 (Pirata subpiraticus)对取食转 cry1Ab基因水稻的稻纵卷叶螟 (Cnaphalocrocis medinalis)幼虫和褐飞虱 (N ilaparvata lugens)若虫的捕食量及功能反应。结果表明 ,拟水狼蛛对这 2种猎物的捕食功能反应均符合Holling... 室内评价了拟水狼蛛 (Pirata subpiraticus)对取食转 cry1Ab基因水稻的稻纵卷叶螟 (Cnaphalocrocis medinalis)幼虫和褐飞虱 (N ilaparvata lugens)若虫的捕食量及功能反应。结果表明 ,拟水狼蛛对这 2种猎物的捕食功能反应均符合Holling 型圆盘方程。该蜘蛛对取食转 cry1Ab基因水稻的稻纵卷叶螟幼虫的捕食量和处理时间低或短于取食对照的 ,但差异未达显著水平 ,而瞬时攻击率显著低于对照。该蜘蛛对以转 cry1Ab基因水稻为食的褐飞虱若虫的捕食量、瞬时攻击率和处理时间与取食对照的相比有一定的变化 ,但差异均不显著。综合考虑 ,认为转 cry1Ab基因水稻对拟水狼蛛捕食作用无明显的负作用。 展开更多
关键词 转基因水稻 CRY1aB基因 拟水狼蛛 稻纵卷叶螟 褐习虱 捕食作用
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转基因抗虫水稻MSA和MSB对非靶标害虫褐飞虱和白背飞虱的影响 被引量:48
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作者 傅强 王锋 +3 位作者 李冬虎 姚青 赖凤香 张志涛 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期697-704,共8页
本文报道了转SCK +cry1Ac双基因抗虫水稻MSA和MSB对非靶标害虫褐飞虱Nilaparvatalugens和白背飞虱Sogatellafucifera生物学及田间发生动态的影响。与亲本明恢 86相比 ,MSA对两种飞虱若虫发育历期、初羽化成虫鲜重、羽化率、短翅率、成... 本文报道了转SCK +cry1Ac双基因抗虫水稻MSA和MSB对非靶标害虫褐飞虱Nilaparvatalugens和白背飞虱Sogatellafucifera生物学及田间发生动态的影响。与亲本明恢 86相比 ,MSA对两种飞虱若虫发育历期、初羽化成虫鲜重、羽化率、短翅率、成虫产卵量、卵受精率、单雌子代数及发育进度等生物学指标均无明显影响 ,而MSB虽然对多数指标影响不明显 ,但可以引起白背飞虱初羽化雌虫鲜重与短翅率显著下降 ,还引起褐飞虱初羽化雄虫鲜重明显减轻。在近距离 (株间距约 8cm)寄主选择实验中 ,褐飞虱对MSA和MSB无明显选择性 ,而白背飞虱若虫和成虫均明显趋向两种转基因水稻。田间小区实验表明MSB上的稻飞虱 (主要为白背飞虱 )密度一般低于亲本明恢 86 ,但差异不显著 。 展开更多
关键词 转基因水稻 SCK CRY1 ac 非靶标害虫 褐飞虱 白背飞虱 生态风险
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Cry1Ab杀虫蛋白在水稻-褐飞虱-拟水狼蛛食物链中转移与富集 被引量:33
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作者 陈茂 叶恭银 +4 位作者 卢新民 胡萃 彭于发 舒庆尧 Illimar ALTOSAAR 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期208-213,共6页
采用ELISA方法检测了2个转 cry1Ab 基因水稻 (Bt水稻) 品系KMD1和KMD2不同生育期叶鞘内Cry1Ab杀虫蛋白的含量及其通过褐飞虱和拟水狼蛛的转移和富集情况。结果表明, 这2个品系中抽穗期和黄熟期叶鞘内Cry1Ab的含量均显著低于苗期、分蘖... 采用ELISA方法检测了2个转 cry1Ab 基因水稻 (Bt水稻) 品系KMD1和KMD2不同生育期叶鞘内Cry1Ab杀虫蛋白的含量及其通过褐飞虱和拟水狼蛛的转移和富集情况。结果表明, 这2个品系中抽穗期和黄熟期叶鞘内Cry1Ab的含量均显著低于苗期、分蘖期和孕穗期, KMD1和KMD2中Cry1Ab杀虫蛋白可以通过食物链转移到Bt水稻非靶标害虫褐飞虱及其天敌拟水狼蛛体内。褐飞虱在KMD1或KMD2上取食2 d后, 体内均含有 Cry1Ab杀虫蛋白, 但连续取食2、4、6、8和10 d后,其体内含量并未因取食时间的延长而呈现明显增加的趋势。当拟水狼蛛捕食以KMD1或KMD2为食的褐飞虱时, 在捕食2、4、6、8和10 d后, 其体内均可检测到Cry1Ab杀虫蛋白, 其含量并未随捕食时间的延长而明显上升, 但均显著高于相应时间褐飞虱体内的含量。可见, 该蛋白可通过水稻转移至褐飞虱, 再转移至拟水狼蛛, 并存在明显的富集现象, 而这种富集并不随蜘蛛捕食时间的延长而加强。拟水狼蛛捕食以KMD1或KMD2为食的褐飞虱时, 其捕食量未受到显著影响, 其中肠酶粗提物对Cry1Ab杀虫蛋白具有明显的降解作用。 展开更多
关键词 BT水稻 CRY1aB杀虫蛋白 褐飞虱 拟水狼蛛 食物链 生物富集 解毒
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转cry1Ab/vip3H基因水稻对非靶标害虫褐飞虱连续多代生长发育与繁殖的影响 被引量:10
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作者 陈洋 田俊策 +2 位作者 彭于发 郭予元 叶恭银 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2011年第4期490-497,共8页
实验室条件下,转cry1Ab/vip3H基因水稻G6H1对褐飞虱Nilaparvata lugens生长发育与繁殖的继代效应评价结果表明,不论是在苗期或是成株期,在各水稻品种上连续饲喂褐飞虱4代后,该虫各代的生长发育和繁殖参数都没有受到水稻品种的显著影响,... 实验室条件下,转cry1Ab/vip3H基因水稻G6H1对褐飞虱Nilaparvata lugens生长发育与繁殖的继代效应评价结果表明,不论是在苗期或是成株期,在各水稻品种上连续饲喂褐飞虱4代后,该虫各代的生长发育和繁殖参数都没有受到水稻品种的显著影响,即不论是在第1代、第2代还是第4代,取食G6H1与取食其非转基因亲本Xiushui 110相比,褐飞虱若虫的发育时间、成虫寿命和产卵量都没有显著差异。同时,2008年和2009年的田间调查结果表明,G6H1和Xiushui 110稻田间褐飞虱的若虫、成虫和成若虫总密度均无显著差异。 展开更多
关键词 cry1ab/vip3H基因 转基因水稻 褐飞虱 安全性评价
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褐飞虱蜕皮激素合成相关Halloween基因的克隆及功能分析 被引量:7
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作者 李凯龙 傅强 +2 位作者 王渭霞 赖凤香 万品俊 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1129-1140,共12页
【目的】蜕皮激素(ecdysone)是调控昆虫生长发育和繁殖的重要激素,其合成主要由5个称为Halloween基因编码的细胞色素P450(spook/CYP307A1,Phantom/CYP306A1,disembodied/CYP302A1,shadow/CYP315A1和shade/CYP314A1)参与。褐飞虱Nilaparv... 【目的】蜕皮激素(ecdysone)是调控昆虫生长发育和繁殖的重要激素,其合成主要由5个称为Halloween基因编码的细胞色素P450(spook/CYP307A1,Phantom/CYP306A1,disembodied/CYP302A1,shadow/CYP315A1和shade/CYP314A1)参与。褐飞虱Nilaparvata lugens系东南亚和东亚地区危害最为严重的水稻害虫之一,以蜕皮激素调控基因为靶标,应用RNAi技术防控褐飞虱正逐步成为研究热点。本研究旨在揭示褐飞虱体内Halloween基因的功能,为褐飞虱的防控和新农药的开发提供理论依据。【方法】本研究基于褐飞虱基因组和转录组数据,利用RT-PCR技术克隆了参与蜕皮激素合成的5个Halloween基因;利用生物信息学软件预测分析其编码蛋白的结构特性;利用MEGA5.0邻接法构建系统进化树;利用实时荧光定量PCR技术研究其时空表达特征;利用注射法RNAi技术分析Cyp314a1基因表达下调对褐飞虱生长发育和繁殖的影响。【结果】克隆获得褐飞虱的5个Halloween基因,即NlCyp307a1(Gen Bank登录号:KM217014.1),NlCyp306a1(Gen Bank登录号:KM217013.1),NlCyp302a1(Gen Bank登录号:KM216995.1),NlCyp315a1(Gen Bank登录号:KM216998.1)和NlCyp314a1(Gen Bank登录号:KU928172)。进化分析表明,这5个基因分属于CYP2和线粒体两大类群,并与各自的同源基因聚类在一起,说明Halloween基因和蜕皮激素合成途径在昆虫进化过程中十分保守。Nl CYP314A1具有5个P450的保守结构域和两个跨膜结构域,是典型的线粒体酶。qRT-PCR检测结果显示,5个Halloween基因的表达量在整个褐飞虱5龄若虫期内呈现波动状,且均在5龄若虫蜕皮后的24 h和60 h出现表达量峰值。NlCyp314a1在褐飞虱发育各个龄期均表达,且在成虫中表达量最高;NlCyp314a1在胸部表达量较头部和腹部高,其在脂肪体中的表达量最高,其次是在足、表皮、翅芽中,中肠中表达量最低。利用注射法RNAi对NlCyp314a1基因进行沉默后,NlCyp314a1的表达量在注射后第4天较对照极显著降低84.6%(P<0.01),同时蜕皮激素通路下游的响应关键基因Nl FTZ-F1的表达量较对照极显著降低64.1%(P<0.01)。表型观察发现,NlCyp314a1表达量的下调导致了褐飞虱蜕皮困难,出现畸形虫体,第7天死亡率大于95%,且NlCyp314a1表达量的下调导致了褐飞虱卵巢发育畸形。【结论】褐飞虱蜕皮激素合成相关的Halloween基因在进化上非常保守,Halloween基因功能的研究揭示了褐飞虱体内Halloween基因对于褐飞虱蜕皮和繁殖的重要性。其表达水平的降低导致了褐飞虱生长发育和繁殖受阻,提示褐飞虱Halloween基因可用于褐飞虱蜕皮和繁殖进程的调控,同样也为Halloween基因在褐飞虱防治方面的潜在应用提供了依据。 展开更多
关键词 褐飞虱 蜕皮激素 Halloween基因 基因表达 蜕皮 繁殖
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褐飞虱抗原检测最佳ELISA条件的建立 被引量:4
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作者 赵伟春 程家安 陈正贤 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期629-634,共6页
应用褐飞虱单克隆抗体3B2和4B8比较了直接、间接和多种抗体夹心ELISA方法.结果表明:当拟环纹豹蛛稀释512倍(含拟环纹豹蛛0.04mg/mL)时,直接和间接ELISA的OD值比阳性对照仍降低5%以上.而当捕食者稀释100倍时,对同种单抗、异种单抗和两种... 应用褐飞虱单克隆抗体3B2和4B8比较了直接、间接和多种抗体夹心ELISA方法.结果表明:当拟环纹豹蛛稀释512倍(含拟环纹豹蛛0.04mg/mL)时,直接和间接ELISA的OD值比阳性对照仍降低5%以上.而当捕食者稀释100倍时,对同种单抗、异种单抗和两种单抗混合夹心ELISA检测OD值的影响均小于5%.在加入100倍豹蛛稀释液时,3种抗体夹心ELISA检测灵敏度均为16.90ng/mL(1/17509头褐飞虱雌成虫),直接和间接ELISA分别为:67.59ng/mL(1/4378头)和135.18ng/mL(1/2189头).建立了4B8稀释1000倍(28.13μg/mL),捕食者匀浆液定容至1mL/头后再稀释100倍,HRP-4B8稀释4000倍(1.04μg/mL)的夹心ELISA用于检测捕食者肠道中的褐飞虱抗原.在此系统下,检测灵敏度为每头拟环纹豹蛛含1.69μg猎物蛋白(1/175头褐飞虱雌成虫),非目标抗原的影响小于5%. 展开更多
关键词 褐飞虱 抗原检测 ELISa条件 单克隆抗体 酶联免疫 吸附试验 灵敏度 非目标抗原
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