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掌叶大黄(RheumpalmatumL.)WRKY基因家族鉴定与分析
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作者 吴圳 张明英 +4 位作者 闫锋 李依民 高静 颜永刚 张岗 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期250-261,共12页
【目的】本研究为开展WRKY基因功能验证提供基础,进而为大黄药材品质形成的转录调控机制研究提供科学依据。【方法】基于掌叶大黄(R.palmatum L.)的全长转录组数据,通过生物信息学方法鉴定掌叶大黄WRKY基因家族成员,分析其蛋白理化性质... 【目的】本研究为开展WRKY基因功能验证提供基础,进而为大黄药材品质形成的转录调控机制研究提供科学依据。【方法】基于掌叶大黄(R.palmatum L.)的全长转录组数据,通过生物信息学方法鉴定掌叶大黄WRKY基因家族成员,分析其蛋白理化性质、结构域、系统发育关系、蛋白互作,结合转录组数据进行不同组织和茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MeJA)处理的表达谱分析。【结果】掌叶大黄WRKY基因家族包含53个成员,编码蛋白氨基酸数量为192-748,均为亲水性蛋白,预测定位均在细胞核。掌叶大黄WRKY基因家族与拟南芥WRKY基因家族成员进化树可分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ3个亚族,其中Ⅱ亚族WRKY占比最高(58.49%)。转录组数据分析显示掌叶大黄WRKY基因家族成员在掌叶大黄根、根茎和叶中差异表达,其中7个基因在根和根茎中表达量较高,12个基因响应MeJA处理呈差异表达,其中10个被MeJA显著诱导,4个候选基因RpWRKY5/6/9/33的qPCR分析与其转录组结果基本一致。蛋白互作网络显示RpWRKY2/16/20/22/23与查尔酮合酶(chalconesynthase,CHS)发生相互作用。【结论】获得53个掌叶大黄WRKY基因、生物信息、组织及响应MeJA的表达特征,其中5个可能与大黄蒽醌类物质的合成有关。 展开更多
关键词 掌叶大黄 WRKY 转录因子 基因表达 茉莉酸甲酯
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Biotransformation of Artemisinin by Hairy Root Cultures of Rheum palmatum L. 被引量:3
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作者 李莉欣 苏艳芳 +1 位作者 刘晓峰 果德安 《Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences》 CAS 2002年第4期122-124,共3页
The biotransformation of artemisinin by hairy root cultures ofRheum palmatum L. was investigated for the first time. The main product, deoxyartemisinin, was isolated and characterized on the basis of its spectral data.
关键词 aRTEMISININ Deoxyartemisinin Rheum palmatum hairy root cultures BIOTRaNSFORMaTION
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Inhibition of Hepatitis B Virus Replication by Rheum palmatum L. Ethanol Extract in a Stable HBV-producing Cell Line 被引量:3
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作者 Yan SUN Li-jun LI +1 位作者 Jing LI Zhi LI 《中国病毒学》 CSCD 2007年第1期14-20,共7页
肝炎 B 病毒(HBV ) 感染是在世界上的一个严重健康问题。然而,仍然为 HBV 感染没有令人满意的治疗学的策略。到为有更高的功效和更少的副作用的新 anti-HBV 代理人的搜索,繁体中文药感冒 palmatum L 的禁止的活动。对 HBV 复制的乙醇... 肝炎 B 病毒(HBV ) 感染是在世界上的一个严重健康问题。然而,仍然为 HBV 感染没有令人满意的治疗学的策略。到为有更高的功效和更少的副作用的新 anti-HBV 代理人的搜索,繁体中文药感冒 palmatum L 的禁止的活动。对 HBV 复制的乙醇摘录(RPE ) 在这研究被调查。量的即时聚合酶链反应(PCR ) 被采用在稳定的生产 HBV 房间线 HepAD38 对 HBV-DNA 复制分析 RPE 的禁止的活动;HBV 表面抗原(HBsAg ) 和 e 抗原(HBeAg ) 的表示层次被酶也决定在 RPE 处理以后的连接 immunosorbent 试金(ELISA ) 。RPE 能 dose-dependently 禁止 HBV-DNA 和 HBsAg 的生产。50% 抑制(IC50 ) 的集中在 209.63 点被计算, 252.53 渭 g /mL, respectivel y。然而,它对 HBeAg 表示的禁止的活动甚至在高集中是细微的。RPE 在 HepAD38 房间上有弱细胞毒素的效果(CC50 = 1 640 渭 g /mL ) 并且选择索引(SI ) 在 7.82 点被计算。与二 anthraquinone 衍生物 emodin 和 rhein 相比, RPE 显示出 anti-HBV 和更弱的 cytotoxicity 的更高的能力。那么感冒 palmatum L。可能拥有能有效地禁止 HBV-DNA 复制和 HBsAg 表示的另外的功能的代理人。他们改进功效并且减少的结构的活跃代理人,鉴定和修正的进一步的纯化 cytotoxicity 被要求。关键词肝炎 B 病毒(HBV )- 抗病毒 - 感冒 palmatum L.ethanol 摘录(RPE )- HepAD38 房间 CLC 数字 R373 同等地相应的作者。 展开更多
关键词 Hepatitis B virus(HBV) aNTIVIRaL Rheum palmatum L.ethanol extract(RPE) HepaD38 cells
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Reference Gene Selection for Quantitative Real-Time PCR Analyses of Acer palmatum under Abiotic Stress 被引量:2
4
作者 Lu Zhu Qiuyue Ma +3 位作者 Shushun Li Jing Wen Kunyuan Yan Qianzhong Li 《Phyton-International Journal of Experimental Botany》 SCIE 2020年第2期385-403,共19页
Quantitative real-time reverse transcriptase PCR(qRT-PCR)technology has been extensively used to estimate gene expression levels,and the selection of appropriate reference genes for qRT-PCR analysis is critically impo... Quantitative real-time reverse transcriptase PCR(qRT-PCR)technology has been extensively used to estimate gene expression levels,and the selection of appropriate reference genes for qRT-PCR analysis is critically important for obtaining authentic normalized data.Acer palmatum is an important colorful leaf ornamental tree species,and reference genes suitable for normalization of the qRT-PCR data obtained from this species have not been investigated.In this study,the expression stability of ten candidate reference genes,namely,Actin3,Actin6,Actin9,EF1α,PP2A,SAMDC,TIP41,TUBα,TUBβand UBQ10,in two distinct tissues(leaves and roots)of A.palmatum under four different abiotic stress conditions(cold,heat,salt and drought)were investigated and assessed using three statistical methods(GeNorm,NormFinder and BestKeeper).The combinations of reference genes that showed stability in the different stressed samples differed.Specifically,Actin6,UBQ10 and Actin9 were the most stable reference genes in all the samples,and Actin3 and Actin6 wexre stably expressed in cold-stressed leaves and roots.Actin3,Actin6 and UBQ10 were identified as an appropriate combination of reference genes for the analysis of heat-stressed leaves and roots,whereas the combination of Actin9,UBQ10 and Actin6 was deemed the most suitable for the analysis of salt-stressed leaves and roots.Similarly,Actin6 and UBQ10 exhibited stable expression in drought-stressed leaves and roots.Furthermore,the expression levels of CBF,Cu/Zn-SOD and HsfA1 were estimated to determine the reliability of the reference genes assessed in this study.This study revealed stable reference genes in A.palmatum that might be used for the normalization of qRT-PCR data obtained under various abiotic stresses. 展开更多
关键词 acer palmatum QRT-PCR abiotic stresses referencegene NORMaLIZaTION
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鸡爪槭(Acer palmatum Thunb.)品种‘赤枫’组培再生体系的建立 被引量:12
5
作者 马建华 朱晓菲 +5 位作者 何程相 丁龙梅 向明剑 黄良伟 姜良珍 谢松林 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期171-178,共8页
鸡爪槭品种‘赤枫’是稀有的生长季观叶,冬季观枝的园林彩化树种。为了建立合理的组培再生体系,在短时期内获得大量种苗,以‘赤枫’带芽茎段为外植体,对其灭菌方式及启动、增殖、生根培养基进行了筛选,并对所获组培苗移栽技术进行了探... 鸡爪槭品种‘赤枫’是稀有的生长季观叶,冬季观枝的园林彩化树种。为了建立合理的组培再生体系,在短时期内获得大量种苗,以‘赤枫’带芽茎段为外植体,对其灭菌方式及启动、增殖、生根培养基进行了筛选,并对所获组培苗移栽技术进行了探讨。结果显示:全年中6月份为最佳外植体采集时间,外植体经50%多菌灵400倍液浸1 h后,以75%乙醇30 s+0.1%升汞10 min浸泡处理的灭菌效果最佳。再生体系各阶段最适培养基为:①启动培养:MS+0.5 mg·L-1 IAA;②增殖培养:MS+2.0 mg·L-1 6-BA+0.5 mg·L-1 IAA;③生根培养:1/2MS+0.3 mg·L-1 NAA。组培苗闭瓶炼苗6 d,开瓶炼苗3 d后,移栽到草炭∶蛭石∶珍珠岩=1∶1∶1的基质中,炼苗成活率可达90%。 展开更多
关键词 鸡爪槭 ‘赤枫’ 组培 再生体系
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Characterization of Rheum palmatum mitochondrial genome and comparative analysis among Caryophyllales species
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作者 Longlong Gao Lijun Hao +5 位作者 Wenjie Xu Tianyi Xin Chi Song Yulin Lin Lingping Zhu Jingyuan Song 《Acupuncture and Herbal Medicine》 2023年第4期323-332,共10页
Objective:This work aimed to report the first complete mitochondrial genome(mitogenome)of Rheum palmatum,summarize the features of Caryophyllales mitogenomes,and to reveal the potential of utilizing the mitogenomes of... Objective:This work aimed to report the first complete mitochondrial genome(mitogenome)of Rheum palmatum,summarize the features of Caryophyllales mitogenomes,and to reveal the potential of utilizing the mitogenomes of R.palmatum and other Caryophyllales species for inferring phylogenetic relationships and species identification.Methods:Both Illumina short reads and PacBio HiFi reads were utilized to obtain a complete mitogenome of R.palmatum.A variety of bioinformatics tools were employed to characterize the R.palmatum mitogenome,compare the reported mitogenomes in Caryophyllales and conduct phylogenetic analysis.Results:The mitogenome of R.palmatum was assembled into a single master circle of 302,993 bp,encoding 35 known protein-coding genes,18 transfer RNA genes,and three ribosome RNA genes.A total of 249 long repeats and 49 simple sequence repeats were identified in this mitogenome.The sizes of mitogenomes in Caryophyllales varied from 253 kb to 11.3 Mb.Among them,23 mitogenomes were circular molecules,one was linear,and one consisted of relaxed circles,linear molecules,and supercoiled DNA.Out of the total mitogenomes,11 were single-chromosome structure,whereas the remaining 14 were multi-chromosomal organizations.The phylogenetic analysis is consistent with both the Engler system(1964)and the Angiosperm Phylogeny Group III system.Conclusions:We obtained the first mitogenome of R.palmatum,which consists of a master circle.Mitogenomes in Caryophyllales have variable genome sizes and structures even within the same species.Circular molecules are still the dominant pattern in Caryophyllales.Single-chromosome mitogenomes account for nearly a half of all the mitogenomes in Caryophyllales,in contrast to previous studies.It is feasible to utilize mitochondrial genomes for inferring phylogenetic relationships and conducting species identification. 展开更多
关键词 CaRYOPHYLLaLES Mitochondrial genome Molecular identification Phylogenetic analysis Rheum palmatum
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DNA测序建立甘肃当归、大黄种子rRNA基因图谱的研究 被引量:11
7
作者 张西玲 姬可平 +3 位作者 李应东 陈彻 李啸红 刘丽莎 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2003年第7期481-484,共4页
目的 :对甘肃地道性中药材当归、大黄种子中rRNA基因内转录间隔区进行碱基序列测定 ,以期建立从分子水平对中草药种子进行鉴定的一种新方法。方法 :提取当归、大黄种子中核DNA ,利用特异性引物对其rRNA基因内转录间隔区进行套式PCR扩增 ... 目的 :对甘肃地道性中药材当归、大黄种子中rRNA基因内转录间隔区进行碱基序列测定 ,以期建立从分子水平对中草药种子进行鉴定的一种新方法。方法 :提取当归、大黄种子中核DNA ,利用特异性引物对其rRNA基因内转录间隔区进行套式PCR扩增 ,并将扩增产物进行碱基序列测定。结果 :经琼脂糖凝胶电泳证实 :以上述方法可获得当归、大黄种子DNA中rRNA基因内转录间隔区PCR扩增产物 ;并经测序后得到了当归、大黄种子rRNA基因内转录间隔区的碱基序列 ,且具有明显的差异和可对比性。结论 :不同植物性中药材种子rRNA基因内转录间隔区碱基序列可做为从分子水平进行鉴定的标记。 展开更多
关键词 当归 大黄 种子 rRNa基因图谱 DNa测序 套式PCR 药用植物
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孟河医派大黄煨制工艺优化及炮制后化学成分含量变化研究
8
作者 薛江林 刘雨欣 +7 位作者 钟佩 刘产明 陆兔林 李林 颜晓静 朱月琴 华丰 黄玮 《中国药房》 北大核心 2025年第1期44-50,共7页
目的优化孟河医派大黄煨制工艺,并比较炮制前后的化学成分含量差异。方法以外观性状评分以及没食子酸、5-羟甲基糠醛、番泻苷A+番泻苷B、结合蒽醌、游离蒽醌含量为评价指标,采用层次分析(AHP)-熵权法计算评价指标的综合评分;再以文火温... 目的优化孟河医派大黄煨制工艺,并比较炮制前后的化学成分含量差异。方法以外观性状评分以及没食子酸、5-羟甲基糠醛、番泻苷A+番泻苷B、结合蒽醌、游离蒽醌含量为评价指标,采用层次分析(AHP)-熵权法计算评价指标的综合评分;再以文火温度、煨制时间、纸张层数、纸裹时间为考察因素,采用正交实验优选大黄煨制工艺,并进行验证。比较按最优工艺制备的煨大黄和生大黄中5种蒽醌类成分(芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚)、5种蒽醌苷类成分(芦荟大黄素苷、大黄酸苷、大黄素苷、大黄酚苷和大黄素甲醚苷)、2种番泻苷类成分(番泻苷A、番泻苷B)以及没食子酸和5-羟甲基糠醛的含量变化。结果大黄的最优煨制工艺为:每80 g大黄用1层湿纸包裹0.5 h,大火煨制20 min后转文火140℃煨制,总煨制时间2.5 h;3次验证实验的综合评分均值为94.10(RSD<1.0%)。大黄煨制后,5种蒽醌苷类成分和2种番泻苷类成分的含量均大幅降低,而5种游离蒽醌类成分和没食子酸的含量均不同程度升高,且有新成分5-羟甲基糠醛生成。结论本研究成功优化了大黄的煨制工艺;大黄煨制前后化学成分含量差异较大,其成分变化可阐释煨制对生大黄缓性增效的作用。 展开更多
关键词 煨大黄 大黄 层次分析 熵权法 正交实验 成分变化规律 孟河医派
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甘肃本地产当归、黄芪和大黄的rDNA ITS序列分析 被引量:7
9
作者 周鹤峰 邵敏 +3 位作者 姬可平 李啸红 李应东 晋玲 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期691-696,共6页
本研究采用改良CTAB法分别提取18份甘肃本地产当归、黄芪和大黄基因组DNA,并用PCR分别扩增其ITS1-5.8S-ITS2序列、直接测序并作序列同源性比对分析。双向测序分析结果表明,甘肃6个不同产地当归rDNA的ITS1、5.8S和ITS2序列一致,片段长度... 本研究采用改良CTAB法分别提取18份甘肃本地产当归、黄芪和大黄基因组DNA,并用PCR分别扩增其ITS1-5.8S-ITS2序列、直接测序并作序列同源性比对分析。双向测序分析结果表明,甘肃6个不同产地当归rDNA的ITS1、5.8S和ITS2序列一致,片段长度分别为215bp、162bp和223bp;供试的黄芪ITS1、5.8S和ITS2序列分别为228bp、164bp和210bp;大黄ITS1、5.8S和ITS2序列分别为160bp、159bp和164bp。供试材料的ITS1-5.8S-ITS2核苷酸序列已提交GenBank。本研究为提供甘肃当归、黄芪和大黄指纹图谱鉴别的分子标记、其道地性药材的分子鉴定和品质评价提供参考。 展开更多
关键词 当归 黄芪 大黄 ITS序列
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血红鸡爪槭叶片总RNA提取方法的比较研究 被引量:8
10
作者 张琰 安龙杰 +1 位作者 史宝胜 卓丽环 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2011年第2期7-11,共5页
血红鸡爪槭叶片中富含多糖、多酚物质,严重影响了RNA提取纯度和质量。为了获得适宜血红鸡爪槭叶片总RNA提取的方法,采用柱式植物RNAout法、TRIZOL法和改良CTAB法3种提取方法对其叶片总RNA提取效果进行比较分析。结果显示,采用柱子法提... 血红鸡爪槭叶片中富含多糖、多酚物质,严重影响了RNA提取纯度和质量。为了获得适宜血红鸡爪槭叶片总RNA提取的方法,采用柱式植物RNAout法、TRIZOL法和改良CTAB法3种提取方法对其叶片总RNA提取效果进行比较分析。结果显示,采用柱子法提取获得的总RNA产率最高,但是有DNA污染;TRIZOL法提取的总RNAOD260/OD280为1.65,可能有多糖和酚类物质的污染,并且产率最低;改良CTAB法提取的总RNA纯度很高,OD260/OD280平均值在2.0左右,产率在上述2种方法之间,电泳图清晰,而且改良CTAB法提取的总RNA,经RT-PCR获得了清晰的特异性条带。表明改良CTAB法提取的总RNA纯度和产率高,完全可以满足进一步分子生物学研究的需要,是血红鸡爪槭叶片总RNA提取的适宜方法。 展开更多
关键词 血红鸡爪槭 总RNa提取 RT-PCR
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鸡爪槭种下分类群的DNA条形码筛选 被引量:9
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作者 高健 孟婉姮 +1 位作者 杜芳 李俊清 《植物科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期734-743,共10页
槭属鸡爪槭(Acer palmatum Thunb.)是北温带广泛分布的一类园艺观赏树种,由于频繁的种内杂交渐渗导致其种下分类群的形态性状特征趋同,致使传统的形态学分类难以准确鉴定,新兴的DNA条形码技术为快速、准确的鉴定鸡爪槭种下分类群提供... 槭属鸡爪槭(Acer palmatum Thunb.)是北温带广泛分布的一类园艺观赏树种,由于频繁的种内杂交渐渗导致其种下分类群的形态性状特征趋同,致使传统的形态学分类难以准确鉴定,新兴的DNA条形码技术为快速、准确的鉴定鸡爪槭种下分类群提供了新的思路。本研究采用5个叶绿体DNA片段(rpl16、psbA-trnH、trnL-trnF、rbcL、matK)和核基因组ITS片段,运用PWG-distance和Tree-Building两种方法对鸡爪槭的8个分类群共32个个体进行DNA条形码分析。结果显示,单个叶绿体基因组片段(分辨率为0%~25%)或核rDNA ITS片段(12.5%)的分辨率较低,不同组合的叶绿体DNA片段(0%~62.5%)、叶绿体片段与核rDNA ITS片段(12.5%~50%)的分辨率则相对较高。其中,rpl16+psbA-trnH+trnL-trnF片段组合的分辨率最高(62.5%),较为符合DNA条形码快速、准确鉴定的要求,因此建议将其作为鸡爪槭种下分类群鉴定的DNA条形码。 展开更多
关键词 鸡爪槭 DNa条形码 叶绿体DNa片段 核基因组ITS片段 物种分辨率
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蒽醌对HBV稳定产毒细胞株HepAD38HBV DNA复制的抑制作用 被引量:8
12
作者 孙燕 李晶 李治 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2008年第1期9-13,共5页
目的对掌叶大黄乙醇提取物中天然成份-蒽醌类化合物的抑制乙肝病毒(HBV)的活性进行检测。方法制备掌叶大黄乙醇提取物(RPE)并从中分离提取有效成份,荧光定量PCR法和ELISA法检测PRE及其各成份对Hep-AD38细胞中HBV表达及复制的作用;同时用... 目的对掌叶大黄乙醇提取物中天然成份-蒽醌类化合物的抑制乙肝病毒(HBV)的活性进行检测。方法制备掌叶大黄乙醇提取物(RPE)并从中分离提取有效成份,荧光定量PCR法和ELISA法检测PRE及其各成份对Hep-AD38细胞中HBV表达及复制的作用;同时用MTT法检测细胞毒性。结果从掌叶大黄乙醇提取物中分离得到的大黄酚-8-O-β-D-葡萄糖甙对HBV DNA复制以及抗原表达均有明显的抑制活性。同时MTT法检测显示大黄酚-8-O-β-D-葡萄糖甙没有明显毒副作用。结论大黄酚-8-O-β-D-葡萄糖甙可以有效抑制HBV DNA复制及HBsAg表达,对其进一步的研究将有助于在此化合物基础上开发出新的抗HBV药物。 展开更多
关键词 乙肝 掌叶大黄 蒽醌 HepaD38
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干姜、大黄、丹参水提物对Aβ_(25-35)诱导SH-SY5Y细胞凋亡的药性学比较研究 被引量:3
13
作者 方玲子 周红祖 余惠旻 《中国中医基础医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1262-1264,1267,共4页
目的:研究干姜、大黄、丹参水提物对β-淀粉样蛋白(Aβ25-35)诱导SH-SY5Y细胞凋亡的影响。方法:体外培养SH-SY5Y细胞,建立Aβ25-35致SH-SY5Y细胞凋亡的模型,同时给予干姜、大黄、丹参水提物进行干预。应用MTT比色法检测细胞活力、流式... 目的:研究干姜、大黄、丹参水提物对β-淀粉样蛋白(Aβ25-35)诱导SH-SY5Y细胞凋亡的影响。方法:体外培养SH-SY5Y细胞,建立Aβ25-35致SH-SY5Y细胞凋亡的模型,同时给予干姜、大黄、丹参水提物进行干预。应用MTT比色法检测细胞活力、流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果:50μmol.L-1Aβ25-35作用于SH-SY5Y细胞72 h,MTT值降低到(65.69±3.26)%,凋亡率增加到(45.17±3.84)%(P<0.01 vs.control)。干姜水提物能明显改善以上凋亡特性,显著升高MTT值,降低凋亡率;大黄和丹参水提物则对Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞凋亡无保护作用。结论:干姜对Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞凋亡具有显著的保护作用,而大黄和丹参却无此保护作用,中药药性不同,其抗凋亡作用亦不同。 展开更多
关键词 SH-SY5Y细胞 β-淀粉样蛋白 干姜 大黄 丹参 热性 寒性 细胞凋亡
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应用rRNA基因间隔区碱基测序对中药(大黄)进行鉴定 被引量:17
14
作者 姬可平 李啸红 +1 位作者 李应东 张西玲 《世界科学技术-中药现代化》 2002年第4期44-47,共4页
目的:对大黄种子中提取的DNA中rRNA基因内转录间隔区进行PCR扩增,对于PCR扩增,并对PCR扩增产物进行碱基序列测定,以期从分子水平建立对中草药的鉴定标准。方法:常规提取当归、大黄种子DNA,利用合成的特异性引物对其DNA中rRNA基因内转录... 目的:对大黄种子中提取的DNA中rRNA基因内转录间隔区进行PCR扩增,对于PCR扩增,并对PCR扩增产物进行碱基序列测定,以期从分子水平建立对中草药的鉴定标准。方法:常规提取当归、大黄种子DNA,利用合成的特异性引物对其DNA中rRNA基因内转录间隔区进行套式PCR扩增,将扩增产物以四色荧光标记的双脱氧末端终止循环法进行碱基序列测定。结果:经琼脂糖凝胶电泳证实大黄种子中rRNA基因内转录间隔区PRC基因内转录间隔区的完整碱基序列。RRNA基因内转录间隔区的碱基序列可作为分子水平鉴定植物中药材的又一有效途径。 展开更多
关键词 大黄 套式PRC DNa测序 RRNa基因 中药鉴定
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Quantitative Variations of Five Anthraglucosides in Rhubarb
15
作者 郑俊华 黄琴 +2 位作者 张治国 高双新 楼之岑 《Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences》 CAS 1992年第1期85-87,共3页
应用高效液相色谱法测定大黄1—5年不同生长年限、植株不同发育阶段、植株不同部分中番泻式A(sennoside A,SA),大黄酸-8-葡萄糖甙(rhein-8-O-β-D-glucoside,R8G),大黄酸甙(rheinoside)A(RA),C(RC),D(RD)等五种蒽甙类成分的含量,结果表... 应用高效液相色谱法测定大黄1—5年不同生长年限、植株不同发育阶段、植株不同部分中番泻式A(sennoside A,SA),大黄酸-8-葡萄糖甙(rhein-8-O-β-D-glucoside,R8G),大黄酸甙(rheinoside)A(RA),C(RC),D(RD)等五种蒽甙类成分的含量,结果表明:(1)大黄随生长年限的延长,五种蒽甙类成分的总含量呈递增趋势,但第二年以后增加缓慢;(2)不同发育阶段中五种蒽甙的总量以果熟期为最高;(3)大黄的根系中五种蒽甙的总含量依下列顺序递减:主根茎→细根→主根及支根→支根茎;茎部只含少量大黄酸甙 D,叶不含任何蒽甙类成分。本研究有利于确定大黄合理的采收年限和季节,以及大黄资源的合理利用。 展开更多
关键词 Rheum palmatum anthraglucosides VaRIaTIONS High Performance Liquid Chromatography
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鸡爪槭ApPSY和ApPDS基因克隆及其表达分析 被引量:5
16
作者 林榕燕 樊荣辉 +3 位作者 陈裕德 罗远华 钟淮钦 林兵 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期2338-2346,共9页
为了探究八氢番茄红素合成酶基因(PSY)和八氢番茄红素脱氢酶基因(PDS)在鸡爪槭叶片呈色中的作用机制,本研究以鸡爪槭黄金槭叶片为材料,采取RT-PCR技术,克隆得到ApPSY基因和ApPDS基因的cDNA序列,对其生物信息学进行初步分析,并检测了不... 为了探究八氢番茄红素合成酶基因(PSY)和八氢番茄红素脱氢酶基因(PDS)在鸡爪槭叶片呈色中的作用机制,本研究以鸡爪槭黄金槭叶片为材料,采取RT-PCR技术,克隆得到ApPSY基因和ApPDS基因的cDNA序列,对其生物信息学进行初步分析,并检测了不同叶色品种及不同发育时期槭树叶片中基因的表达情况。结果表明,ApPSY基因cDNA序列长1 497 bp,有一个1 257 bp的完整开放阅读框,共编码418个氨基酸;ApPDS基因cDNA序列长1 974 bp,有一个1 692 bp的完整开放阅读框,共编码563个氨基酸。生物信息学分析表明,ApPSY和ApPDS蛋白质均为亲水性蛋白质,无信号肽和跨膜结构。进化树结果显示,鸡爪槭ApPSY、ApPDS与柚子、葡萄柚和甜橙的亲缘关系较近。实时荧光定量PCR分析结果表明,在不同发育时期叶片中ApPSY基因在呈色期表达量最高,而ApPDS基因在小绿期表达量最高;在不同叶色品种叶片中ApPSY基因在黄金槭品种中的相对表达量最高,ApPDS基因则在橙之梦品种中的相对表达量最高。本研究结果为进一步阐明ApPSY和ApPDS基因在鸡爪槭中的生物学功能提供了理论依据。 展开更多
关键词 鸡爪槭 apPSY基因 apPDS基因 克隆
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鸡爪槭ApMYB306基因克隆及功能分析 被引量:2
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作者 朱璐 李淑顺 +4 位作者 闻婧 马秋月 颜坤元 任杰 李倩中 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2020年第6期1512-1520,共9页
采用基因克隆的方法获得鸡爪槭金陵黄枫R2R3-MYB转录因子基因,经同源比对和生物信息学分析将其命名为ApMYB306。通过组织表达特性分析发现ApMYB306在茎中表达量最高,叶中表达量次之,根中表达量最低。在洋葱表皮细胞中瞬时表达分析结果显... 采用基因克隆的方法获得鸡爪槭金陵黄枫R2R3-MYB转录因子基因,经同源比对和生物信息学分析将其命名为ApMYB306。通过组织表达特性分析发现ApMYB306在茎中表达量最高,叶中表达量次之,根中表达量最低。在洋葱表皮细胞中瞬时表达分析结果显示ApMYB306蛋白定位于细胞核中。ApMYB306对于高温、低温、干旱和盐胁迫均有明显的响应,受胁迫诱导后表达量显著上升。冷冻处理后,转ApMYB306基因株系成活率较野生型升高。ApMYB306超表达拟南芥株系较野生型开花延迟,表明ApMYB306可能通过抑制拟南芥FT基因启动子的表达调控花期。 展开更多
关键词 鸡爪槭 apMYB306基因 抗逆性
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UHPLC-Q-Exactive Orbitrap HRMS法同时测定大黄-桃仁药对中16种成分及其溶出规律探究 被引量:8
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作者 张聪聪 刘瀚泽 +5 位作者 王永丽 张定棋 陈佳美 刘伟 刘平 王长虹 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期1177-1183,共7页
目的建立UHPLC-Q-Exactive Orbitrap HRMS法同时测定大黄-桃仁药对中16种成分的含量,并探讨不同配比药对中其溶出规律。方法分析采用BEH C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm);流动相0.1%甲酸-乙腈,梯度洗脱。质谱采用电喷雾离子源... 目的建立UHPLC-Q-Exactive Orbitrap HRMS法同时测定大黄-桃仁药对中16种成分的含量,并探讨不同配比药对中其溶出规律。方法分析采用BEH C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm);流动相0.1%甲酸-乙腈,梯度洗脱。质谱采用电喷雾离子源,一级负离子全扫模式。测定单煎液、大黄-桃仁药对不同配比合煎液中,以及单药组、药对组温浸不同时间16种成分的含量。结果16种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.9994),加样回收率95.39%~104.90%,RSD≤4.14%,单煎液和不同配比大黄桃仁药对煎液中16种成分的溶出量差异明显。大黄总蒽醌苷类和桃仁氰苷类成分的含量随着大黄占比减少具有先增加后降低的趋势。在温浸试验中,除没食子酸、番泻苷B、番泻苷A、大黄素外,其他12种成分含量在单药组与药对组的组间差异显著。结论该方法可用于快速、准确测定大黄-桃仁药对中16种成分的含量。大黄-桃仁药对中的糖苷及相对应苷元含量受到大黄占比的影响。 展开更多
关键词 大黄-桃仁药对 化学成分 蒽醌 苦杏仁苷 UHPLC-Q-Exactive Orbitrap HRMS
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基于网络药理学的三黄泻心汤抗As作用机制研究 被引量:7
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作者 王单单 袁会莹 +3 位作者 吴作敏 田会东 杨忠杰 王瑞 《中国动脉硬化杂志》 CAS 2020年第11期972-980,共9页
目的探讨三黄泻心汤抗动脉粥样硬化(As)的作用机制。方法利用中药系统药理学分析平台(TCMSP),通过设置口服利用度(OB)≥30%、类药性(DL)≥0.18为筛选条件并结合文献得到候选化合物,并通过该数据库检索与活性成分相关的作用靶点;通过比... 目的探讨三黄泻心汤抗动脉粥样硬化(As)的作用机制。方法利用中药系统药理学分析平台(TCMSP),通过设置口服利用度(OB)≥30%、类药性(DL)≥0.18为筛选条件并结合文献得到候选化合物,并通过该数据库检索与活性成分相关的作用靶点;通过比较毒物基因组学数据库(CTD)检索出动脉粥样硬化相关基因;利用Cytoscape 3.6.1生物信息学软件构建成分-靶点网络和成分-靶点-信号通路网络图;通过DAVID进行通路注释和分析,预测该三黄泻心汤抗动脉粥样硬化的作用机制。结果三黄泻心汤抗动脉粥样硬化的成分-靶点-信号通路网络中包含41种成分,22个靶点及39条信号通路。其度值较高的候选化合物分子为槲皮素、黄芩素、汉黄芩素、大黄素,度值较高的靶点为前列腺素G/H合成酶2(PTGS2)、细胞黏附分子1(ICAM-1)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素6(IL-6),涉及缺氧诱导因子1信号通路、细胞因子受体相互作用、核因子κB信号通路、血管内皮生长因子信号通路、花生四烯酸代谢及过氧化体增殖物激活受体信号通路等39条信号通路。结论三黄泻心汤中活性成分可作用于PTGS2、ICAM-1、MMP-9、IL-6等靶点,通过调节花生四烯酸代谢、NF-κB信号通路、血管内皮生长因子信号通路等多条信号通路,协同干预动脉粥样硬化。 展开更多
关键词 三黄泻心汤 大黄 黄芩 黄连 动脉粥样硬化 网络药理学
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大黄提取物激活p38MAPK促进HepG2肝癌细胞凋亡 被引量:3
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作者 谭章斌 徐由财 刘祺 《现代消化及介入诊疗》 2022年第8期970-973,978,共5页
目的探讨中药大黄提取物对HepG2肝癌细胞增殖与凋亡的影响和作用机制。方法采用MTS、平板克隆形成实验、钙黄绿素/PI染色观察大黄提取物对HepG2肝癌细胞活性的影响,然后通过Hoechst33342/PI染色观察大黄提取物对肝癌细胞凋亡的影响,最... 目的探讨中药大黄提取物对HepG2肝癌细胞增殖与凋亡的影响和作用机制。方法采用MTS、平板克隆形成实验、钙黄绿素/PI染色观察大黄提取物对HepG2肝癌细胞活性的影响,然后通过Hoechst33342/PI染色观察大黄提取物对肝癌细胞凋亡的影响,最后采用蛋白印迹检测大黄提取物对肝癌细胞内p38MAPK以及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达水平的影响。结果MTS、平板克隆形成实验、钙黄绿素/PI染色提示大黄提取物显著抑制肝癌细胞的活性。Hoechst33342/PI染色提示大黄提取物能够浓度依赖性地促进肝癌细胞凋亡。此外,大黄提取物处理后显著增加肝癌细胞内p38MAPK的磷酸化水平,上调凋亡相关蛋白Bax的表达水平并下调Bcl-2表达。使用p38MAPK抑制剂能部分减弱大黄提取物的抗肝癌作用。结论大黄提取物具有抑制肝癌细胞活性的作用,其作用机制可能是通过激活p38MAPK信号通路诱导肝癌细胞凋亡发挥的。 展开更多
关键词 肝癌 大黄 P38MaPK
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