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烟曲霉孢子诱导M1型巨噬细胞极化的机制研究
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作者 张晓威 张潇怡 +1 位作者 陈志玫 田玉玲 《中国实验诊断学》 2024年第3期335-340,共6页
目的探讨烟曲霉孢子诱导M1型巨噬细胞极化的分子机制。方法分离外周血单核细胞,体外经PMA刺激后诱导成M0巨噬细胞,经烟曲霉活化孢子刺激培养2 d后检测巨噬细胞表型和特征基因表达,确定其极化类型。流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)、实... 目的探讨烟曲霉孢子诱导M1型巨噬细胞极化的分子机制。方法分离外周血单核细胞,体外经PMA刺激后诱导成M0巨噬细胞,经烟曲霉活化孢子刺激培养2 d后检测巨噬细胞表型和特征基因表达,确定其极化类型。流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)、实时定量反转录聚合酶链式反应(Real-Time Quantitative Reverse Transcription,qRT-PCR)确定巨噬细胞极化状态,免疫共沉淀(Western-Blotting)法检测Dectin-1/2分子及其下游蛋白在巨噬细胞表达的差异。结果烟曲霉孢子被激活后,可以诱导巨噬细胞向M1型极化,同时上调巨噬细胞表面Dectin-1/2分子的表达,继而激活Syk/CARD9/NF-κB炎症信号通路;同时Syk/STAT1信号通路被激活后进一步促进M1型巨噬细胞极化。结论Dectin/Syk/CARD9信号通路在烟曲霉孢子诱导巨噬细胞M1极化中发挥重要的作用,可为烟曲霉相关疾病的诊断和干预提供重要参考和理论依据。 展开更多
关键词 烟曲霉 巨噬细胞 极化
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麦冬多糖对烟曲霉菌性角膜炎小鼠炎症反应的影响
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作者 朱江 陶语漳 +1 位作者 白淑玮 许治国 《山西医科大学学报》 CAS 2024年第8期1024-1031,共8页
目的探讨麦冬多糖(OJP)对烟曲霉菌性角膜炎(AFK)小鼠的治疗作用及机制。方法通过对小鼠角膜注射烟曲霉菌(AF)悬浮液建立AFK模型,将54只建模成功的AFK小鼠随机分为5组:模型组(n=11)、低剂量组(n=11)、中剂量组(n=11)、高剂量组(n=11)和... 目的探讨麦冬多糖(OJP)对烟曲霉菌性角膜炎(AFK)小鼠的治疗作用及机制。方法通过对小鼠角膜注射烟曲霉菌(AF)悬浮液建立AFK模型,将54只建模成功的AFK小鼠随机分为5组:模型组(n=11)、低剂量组(n=11)、中剂量组(n=11)、高剂量组(n=11)和激动剂组(n=10);取未建模的小鼠作为对照组(n=10)。低剂量组、中剂量组和高剂量组小鼠分别用50μL浓度为5,10,20 g/L的OJP溶液滴眼。激动剂组小鼠用50μL浓度为20 g/L的OJP溶液滴眼,同时用0.25 mg/kg的Toll样受体4(TLR4)激动剂CRX-527溶液灌胃。对照组和模型组小鼠分别用50μL生理盐水滴眼。各组小鼠均给药1周。治疗结束24 h后,在裂隙灯显微镜下进行角膜炎症评分。采用苏木素伊红(HE)染色观察角膜形态;采用ELISA法检测角膜组织上清液中促炎因子白介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-6水平;采用qRT-PCR分析角膜IL-1β、TNF-α、IL-6、TLR4、髓样分化因子88(MyD88)、核因子-κB(NF-κB)p65的mRNA水平;采用Western blot分析角膜TLR4、MyD88、NF-κB p65蛋白相对表达。结果与对照组比较,模型组大鼠的角膜炎症评分升高(P<0.05),角膜出现明显病变,角膜IL-1β、TNF-α、IL-6蛋白表达和mRNA水平均升高(P<0.05),角膜TLR4、MyD88和NF-κB p65的mRNA水平和蛋白表达均升高(P<0.05)。与模型组比较,低剂量组、中剂量组和高剂量组大鼠的角膜炎症评分降低(P<0.05),角膜病变减轻,角膜IL-1β、TNF-α、IL-6蛋白表达和mRNA水平均降低(P<0.05),角膜TLR4、MyD88和NF-κB p65的mRNA水平和蛋白表达均降低(P<0.05)。与低剂量组比较,中剂量组和高剂量组大鼠的角膜炎症评分降低(P<0.05),角膜病变减轻,角膜IL-1β、TNF-α、IL-6蛋白表达和mRNA水平均降低(P<0.05),角膜TLR4、MyD88和NF-κB p65的mRNA水平和蛋白表达均降低(P<0.05)。与高剂量组比较,激动剂组大鼠的角膜炎症评分升高(P<0.05),角膜病变加重,角膜IL-1β、TNF-α、IL-6蛋白表达和mRNA水平均升高(P<0.05),角膜TLR4、MyD88和NF-κB p65的mRNA水平和蛋白表达均升高(P<0.05)。结论OJP可能通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路减轻AFK小鼠角膜炎症损伤。 展开更多
关键词 麦冬多糖 烟曲霉菌性角膜炎 炎症 TOLL样受体4 NF-ΚB 髓样分化因子88
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百里醌对烟曲霉菌角膜炎的抗炎作用及其机制
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作者 姚华 胡丽婷 +3 位作者 徐强 刘雪晴 郑雯丹 赵桂秋 《青岛大学学报(医学版)》 CAS 2024年第2期169-173,共5页
目的 探讨百里醌(TQ)在体内、体外真菌性角膜炎模型中的抗炎作用及其机制。方法 采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和小鼠体内Draize试验筛选出TQ的安全抗炎浓度。建立小鼠真菌性角膜炎模型,给予小鼠角膜3.75 mg/L TQ(TQ组)或体积分数0.001二... 目的 探讨百里醌(TQ)在体内、体外真菌性角膜炎模型中的抗炎作用及其机制。方法 采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和小鼠体内Draize试验筛选出TQ的安全抗炎浓度。建立小鼠真菌性角膜炎模型,给予小鼠角膜3.75 mg/L TQ(TQ组)或体积分数0.001二甲基亚砜(DMSO组)结膜下注射。显微镜下观察两组小鼠角膜炎症情况并进行临床炎症评分;采用苏木精-伊红(HE)染色法和髓过氧化物酶(MPO)实验观察TQ对小鼠角膜中性粒细胞募集的影响;应用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA),检测各组人角膜上皮细胞(HCECs)环氧化酶2(COX-2)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)蛋白和mRNA的表达水平。结果 当TQ浓度低于3.75 mg/L时,HCECs存活率≥95%,健康小鼠角膜未见荧光素钠染色,HCECs和小鼠角膜均不受TQ影响。与DMSO组相比,TQ组小鼠角膜炎症减轻,临床评分降低(F3 d=2.01,P<0.01;F5 d=3.00,P<0.01),中性粒细胞的募集和活性降低(t=6.55,P<0.001)。PCR和ELISA检测结果显示,与DMSO组相比较,TQ组HCECs中COX-2、IL-1β及IL-6 mRNA和蛋白的表达均明显降低(t=6.12~15.06,P<0.001)。结论 TQ可以通过减少中性粒细胞的聚集、降低炎症因子的表达,在真菌性角膜炎中发挥抗炎作用。 展开更多
关键词 百里醌 角膜炎 炎症 烟曲霉菌
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白及多糖在小鼠烟曲霉菌性角膜炎中的抗炎作用
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作者 张冉冉 彭旭东 赵桂秋 《青岛大学学报(医学版)》 CAS 2024年第1期28-32,共5页
目的研究白及多糖(BSP)在小鼠烟曲霉菌性角膜炎中的抗炎机制,探讨BSP对真菌性角膜炎的治疗作用。方法建立小鼠烟曲霉菌性角膜炎模型,使用BSP水溶液局部滴眼处理,裂隙灯下观察感染后第1、3、5天小鼠角膜的炎症程度,反转录-聚合酶链反应... 目的研究白及多糖(BSP)在小鼠烟曲霉菌性角膜炎中的抗炎机制,探讨BSP对真菌性角膜炎的治疗作用。方法建立小鼠烟曲霉菌性角膜炎模型,使用BSP水溶液局部滴眼处理,裂隙灯下观察感染后第1、3、5天小鼠角膜的炎症程度,反转录-聚合酶链反应法检测小鼠角膜中炎症因子和模式识别受体Dectin-1的mRNA水平,酶联免疫吸附试验和蛋白免疫印迹法检测炎症因子和Dectin-1蛋白的表达。结果BSP处理的小鼠角膜炎症评分在感染后第3、5天明显低于对照组(F=6.64、11.58,P<0.05)。16 g/L的BSP水溶液可以降低小鼠角膜中炎症因子白细胞介素1β、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α以及模式识别受体Dectin-1的mRNA和蛋白表达水平,差异均具有统计学意义(F=2.21~97.39,P<0.05)。结论BSP通过下调炎症因子水平和抑制模式识别受体Dectin-1的表达在小鼠烟曲霉菌性角膜炎中发挥抗炎作用。 展开更多
关键词 白及多糖 烟曲霉菌 角膜炎 炎症 小鼠
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甘草查尔酮A对小鼠真菌性角膜炎的抗炎作用
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作者 田怡然 栾军杰 +2 位作者 张芸凤 彭旭东 杨珊珊 《青岛大学学报(医学版)》 CAS 2024年第3期388-392,共5页
目的 探讨甘草查尔酮A(LA)在小鼠烟曲霉菌(AF)性角膜炎中的抗炎作用。方法 采用CCK-8实验检测不同浓度的LA溶液(12、24、36、48、60μmol/L)对小鼠来源巨噬细胞(RAW264.7)增殖活力的影响;采用免疫荧光法检测AF感染后第3天小鼠角膜中性... 目的 探讨甘草查尔酮A(LA)在小鼠烟曲霉菌(AF)性角膜炎中的抗炎作用。方法 采用CCK-8实验检测不同浓度的LA溶液(12、24、36、48、60μmol/L)对小鼠来源巨噬细胞(RAW264.7)增殖活力的影响;采用免疫荧光法检测AF感染后第3天小鼠角膜中性粒细胞的浸润程度;使用实时荧光定量PCR和酶联免疫吸附试验方法检测各组RAW264.7细胞中白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和血红素加氧酶(HO-1)的mRNA及蛋白表达水平。结果 60μmol/L的LA对RAW264.7细胞没有毒性(P>0.05),并显著降低感染后小鼠角膜的中性粒细胞浸润(t=5.94,P<0.01);60μmol/L的LA显著下调AF诱导的IL-6、IL-1β、TNF-α的mRNA和蛋白表达(F=15.35~507.53,P<0.001)并上调HO-1 mRNA表达(F=1 633.06,P<0.001)。结论 LA能够通过减少中性粒细胞浸润、下调炎症因子表达和增强HO-1表达,在AF性角膜炎中起到抗炎作用。 展开更多
关键词 角膜炎 甘草 黄酮类 烟曲霉菌 血红素加氧酶-1 小鼠
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CDC42基因的激活和抑制对烟曲霉极性生长影响的初步探究
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作者 张梦楠 于婉婉 马彦 《中国真菌学杂志》 CSCD 2024年第1期1-7,共7页
目的构建烟曲霉CDC42基因显性激活性(dominant active,DA)和显性抑制性(dominant negative,DN)点突变菌株,初步了解这两种点突变对烟曲霉极性生长以及RAC1基因表达的影响。方法运用分子生物学方法构建CDC42基因激活性(CDC42^(G14V))和... 目的构建烟曲霉CDC42基因显性激活性(dominant active,DA)和显性抑制性(dominant negative,DN)点突变菌株,初步了解这两种点突变对烟曲霉极性生长以及RAC1基因表达的影响。方法运用分子生物学方法构建CDC42基因激活性(CDC42^(G14V))和抑制性(CDC42^(T19N))菌株;光学显微镜观察点突变菌落特征;RT-PCR方法检测Ku80、DA Cdc42和DN Cdc42菌株中RAC1的表达量。结果成功构建烟曲霉CDC42显性激活性(DA)和显性抑制性(DN)点突变菌株并经测序确认;烟曲霉DA Cdc42和DN Cdc42菌株的菌落生长直径、形成分生孢子数和各时间点孢子发芽率较对照株Ku80都明显降低,且差异均有统计学意义(P<0.05);RT-PCR结果表明DA Cdc42和DN Cdc42菌株中的RAC1的表达量均较对照株Ku80有所上升(P<0.05)。结论CDC42的激活和抑制都会对烟曲霉的极性生长产生负面影响;且会影响RAC1基因的表达。 展开更多
关键词 烟曲霉 CDC42 点突变 极性生长
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通过构建烟曲霉bem46过表达菌株研究其在极性生长中的作用
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作者 于婉婉 张梦楠 马彦 《中国真菌学杂志》 CSCD 2024年第4期373-378,共6页
目的构建烟曲霉bem46基因过表达株,探究bem46基因过表达情况下对烟曲霉极性生长及与其他极性基因的相互作用关系。方法原生质体法构建烟曲霉bem46过表达株;激光共聚焦显微镜观察烟曲霉bem46过表达时的绿色荧光定位;观察记录烟曲霉Ku80... 目的构建烟曲霉bem46基因过表达株,探究bem46基因过表达情况下对烟曲霉极性生长及与其他极性基因的相互作用关系。方法原生质体法构建烟曲霉bem46过表达株;激光共聚焦显微镜观察烟曲霉bem46过表达时的绿色荧光定位;观察记录烟曲霉Ku80、烟曲霉bem46基因缺陷株(Δbem46)和烟曲霉bem46过表达株的发芽率;记录烟曲霉Ku80、Δbem46和过表达株菌落径向生长情况;光学显微镜下观察乳酸酚棉蓝染色的烟曲霉bem46过表达菌落生长情况;实时荧光定量PCR方法测定烟曲霉Ku80、Δbem46和过表达株中有关极性生长的基因的相对表达量。结果利用原生质体法成功构建烟曲霉bem46的过表达株;激光共聚焦显微镜观察到bem46过表达时绿色荧光大量聚集在孢子头部位,而菌丝中几乎无荧光显示;相比于Ku80正常状态的发芽情况,bem46过表达株的发芽时间提前,而Δbem46株的发芽时间滞后;Ku80株、Δbem46和过表达株的径向生长差异无统计学意义;经过乳酸酚棉蓝染色以及显微镜下的观察,发现Ku80株、Δbem46和过表达株的孢子头形态有明显的差异,bem46过表达时可明显刺激孢子头膨大;通过测定烟曲霉Δbem46和bem46过表达株中极性生长基因的相对表达量,发现不论bem46基因在烟曲霉中缺失还是过表达,烟曲霉中cdc24、bem1、bem3、bud5、rsr1以及rasb基因的相对表达量均明显降低,cdc24表达量变化不大。结论bem46基因可以促进烟曲霉孢子萌发,影响烟曲霉极性生长过程中的孢子和菌丝形态;在相关基因的信号转导通路中,bem46基因可能参与cdc 42有关的极性生长信号转导通路。 展开更多
关键词 烟曲霉 极性生长 bem46 cdc 42 信号通路
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北部湾海洋真菌Aspergillus fumigatus DL-p0m-g2的化学成分及药理活性研究
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作者 冯婷 孙建 +7 位作者 王玉妃 盘伟斌 覃旭灿 覃炳云 周丽曼 王聪 王佩 孔凡栋 《热带海洋学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期154-166,共13页
为获得具有生物活性的化合物,对一株分离于北部湾钉螺菌株Aspergillus fumigatus DL-p0m-g2的化学成分及药理活性进行研究。综合应用反相ODS(octadecylsilyl)柱色谱、半制备液相等多种色谱学方法进行分离纯化,根据化合物理化性质、质谱... 为获得具有生物活性的化合物,对一株分离于北部湾钉螺菌株Aspergillus fumigatus DL-p0m-g2的化学成分及药理活性进行研究。综合应用反相ODS(octadecylsilyl)柱色谱、半制备液相等多种色谱学方法进行分离纯化,根据化合物理化性质、质谱和核磁共振波谱学数据进行结构鉴定,并对分离得到的化合物进行细胞毒活性、抑菌活性和胆固醇转运蛋白NPC1L1(NPC1-like intracellular cholesterol transporter 1)蛋白结合等生物活性评价。实验共分离得到21个生物碱类化合物和1个甾体,分别鉴定为6-methoxyspirotryprostatin B(1)、spirotryprostatin A(2)、fumitremorgin C(3)、cyclotryprostatin A(4)、fumitremorgin B(5)、pseurotin A(6)、azaspirofuran A(7)、azaspirofuran B(8)、cephalimysin C(9)、cephalimysin B(10)、fumiquinazoline C(11)、fumiquinazoline B(12)、fumiquinazoline A(13)、fumiquinazoline D(14)、fumiquinazoline F(15)、tryprostatin B(16)、verruculogen(17)、chaetominine(18)、bisdethiobis(methylthio)glitoxin(19)、helvolic acid(20)、7-deacetylpyripyropene A(21)、terezine D(22)。其中化合物6对人肝癌细胞(Hep G2)、人肺癌细胞(A549)、人直肠癌细胞(HCT116)有一定的细胞毒活性;化合物1、3和20对金黄色葡萄球菌表现出抑菌活性;化合物14与NPC1L1蛋白具有较好的结合,显示其在降脂药物开发中的研究潜力。 展开更多
关键词 Aspergillus fumigatus 化学成分 细胞毒活性 抑菌活性 NPC1L1蛋白结合
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烟曲霉相关C型凝集素受体研究进展
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作者 程和 苗贵芝 马彦 《医学分子生物学杂志》 CAS 2024年第3期287-292,共6页
烟曲霉(Aspergillus fumigatus,A.fumigatus)是最普遍的空气传播真菌病原体,可导致免疫功能低下患者发生致命的侵袭性曲霉病。对病原体与宿主免疫系统的相互作用过程的了解是理解其致病性的关键。通过保守的跨膜或可溶性的模式识别受体(... 烟曲霉(Aspergillus fumigatus,A.fumigatus)是最普遍的空气传播真菌病原体,可导致免疫功能低下患者发生致命的侵袭性曲霉病。对病原体与宿主免疫系统的相互作用过程的了解是理解其致病性的关键。通过保守的跨膜或可溶性的模式识别受体(pattern recognition receptor,PRRs)识别病原体表面上的保守分子结构,称为病原体相关分子模式(pathogen associated molecular patterns,PAMPs)。C型凝集素受体(C-type lectin receptors,CLRs)是PRRs中主要受体家族之一,CLRs可以通过C型凝集素样结构域(Ctype lectin-like domains,CTLDs)来识别β-葡聚糖、甘露糖、几丁质等真菌细胞壁成分,从而诱导固有免疫和获得性免疫来清除病原体。目前烟曲霉中所涉及的CLRs主要为Dectin-1、Dectin-2、MelLec、DC-SIGN等,这些CLRs在宿主细胞识别烟曲霉中起着至关重要的作用,并且针对Dectin-1及Dectin-2已开发出新型抗烟曲霉药物。因此为了进一步了解与烟曲霉相关的各类CLRs的作用机制及其相关信号通路,为开发新型抗真菌药物提供一种新思路,文章对与烟曲霉相关的CLRs最新研究进展进行了综述。 展开更多
关键词 烟曲霉 C型凝集素受体 固有免疫 抗真菌感染
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CD3ε of a pan T cell marker involved in mouse Aspergillus fumigatus keratitis
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作者 Wen-Hao Shi Li-Mei Wang +4 位作者 Hai-Jing Yan Shi-Long Liu Xian Yang Xue-JiaoYang Cheng-Ye Che 《International Journal of Ophthalmology(English edition)》 SCIE CAS 2024年第4期616-624,共9页
AIM:To explore whether CD3ε is involved in the adaptive immunity of Aspergillus fumigatus(A.fumigatus)keratitis in mice and the role of innate and adaptive immunity in it.METHODS:Mice models of A.fumigatus keratitis ... AIM:To explore whether CD3ε is involved in the adaptive immunity of Aspergillus fumigatus(A.fumigatus)keratitis in mice and the role of innate and adaptive immunity in it.METHODS:Mice models of A.fumigatus keratitis were established by intra-stromal injection and corneal epithelial scratching.Subconjunctival injections of natamycin,wedelolactone,LOX-1 inhibitor(poly I)or Dectin-1 inhibitor(laminarin)were used to treat mice with A.fumigatus keratitis.Mice were pretreated by intraperitoneal injection of anti-mouse CD3ε.We observed the corneal infection of mice under the slit lamp microscope and made a clinical score.The protein expression of CD3ε and interleukin-10(IL-10)was determined by Western blotting.RESULTS:With the disease progresses,the degree of corneal opacity and edema augmented.In the intrastromal injection models,CD3εprotein expression began to increase significantly on the 2^(nd) day.However,in the scraping epithelial method models,CD3ε only began to increase on the 3^(rd) day.After natamycin treatment,the degree of corneal inflammation in mice was significantly attenuated on the 3^(rd) day.After wedelolactone treatment,the severity of keratitis worsened.And the amount of CD3ε protein was also reduced,compared with the control group.By inhibiting LOX-1 and Dectin-1,there was no significant difference in CD3ε production compared with the control group.After inhibiting CD3ε,corneal ulcer area and clinical score increased,and IL-10 expression was downregulated.CONCLUSION:As a pan T cell marker,CD3ε participate in the adaptive immunity of A.fumigatus keratitis in mice.In our mice models,the corneas will enter the adaptive immune stage faster.By regulating IL-10,CD3ε exerts antiinflammatory and repairs effects in the adaptive immune stage. 展开更多
关键词 CD3ε adaptive immunity Aspergillus fumigatus keratitis INTERLEUKIN-10
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Identifying genetic susceptibility to Aspergillus fumigatus infection using collaborative cross mice and RNA-Seq approach
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作者 Roa'a H.S.Yosief Iqbal M.Lone +3 位作者 Aharon Nachshon Heinz Himmelbauer Irit Gat-Viks Fuad A.Iraqi 《Animal Models and Experimental Medicine》 CAS CSCD 2024年第1期36-47,共12页
Background:Aspergillus fumigatus(Af)is one of the most ubiquitous fungi and its infection potency is suggested to be strongly controlled by the host genetic back-ground.The aim of this study was to search for candidat... Background:Aspergillus fumigatus(Af)is one of the most ubiquitous fungi and its infection potency is suggested to be strongly controlled by the host genetic back-ground.The aim of this study was to search for candidate genes associated with host susceptibility to Aspergillus fumigatus(Af)using an RNAseq approach in CC lines and hepatic gene expression.Methods:We studied 31 male mice from 25 CC lines at 8 weeks old;the mice were infected with Af.Liver tissues were extracted from these mice 5 days post-infection,and next-generation RNA-sequencing(RNAseq)was performed.The GENE-E analysis platform was used to generate a clustered heat map matrix.Results:Significant variation in body weight changes between CC lines was ob-served.Hepatic gene expression revealed 12 top prioritized candidate genes differ-entially expressed in resistant versus susceptible mice based on body weight changes.Interestingly,three candidate genes are located within genomic intervals of the previ-ously mapped quantitative trait loci(QTL),including Gm16270 and Stox1 on chromo-some 10 and Gm11033 on chromosome 8.Conclusions:Our findings emphasize the CC mouse model's power in fine mapping the genetic components underlying susceptibility towards Af.As a next step,eQTL analysis will be performed for our RNA-Seq data.Suggested candidate genes from our study will be further assessed with a human cohort with aspergillosis. 展开更多
关键词 aspergillus fumigatus infection collaborative cross(CC)mice gene expression profile gene-network host susceptibility quantitative trait loci(QTL)mapping RNA-SEQ
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耐多药肺结核合并烟曲霉、甲型H1N1流感病毒感染1例并文献复习
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作者 冯美 杨丹丹 +3 位作者 杨雅吉 赵月娟 雷素云 高丽 《中国真菌学杂志》 CSCD 2024年第2期177-180,183,共5页
患者,男,61岁,农民,因“反复咳嗽8年,加重伴发热1 d”入院,入院后予抗结核治疗、奥司他韦抗病毒治疗、伏立康唑抗真菌治疗等,治疗过程中关注CYP2C19基因检测、血药浓度、药物相互作用、不良反应、肝肾功能监测,经治疗后患者症状好转出... 患者,男,61岁,农民,因“反复咳嗽8年,加重伴发热1 d”入院,入院后予抗结核治疗、奥司他韦抗病毒治疗、伏立康唑抗真菌治疗等,治疗过程中关注CYP2C19基因检测、血药浓度、药物相互作用、不良反应、肝肾功能监测,经治疗后患者症状好转出院。耐多药肺结核合并侵袭性曲霉菌、甲型H1N1流感病毒感染,精准诊疗是关键,同时开展抗结核、真菌、病毒治疗可能会加重肝肾功能负担,精准用药剂量的把控,药物间的相互作用都是需要重点关注的内容。该文旨在提高对耐多药肺结核合并烟曲霉、甲型H1N1流感病毒感染病例的认识。 展开更多
关键词 原发性耐多药 烟曲霉 甲型H1N1流感病毒
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烟曲霉对人支气管上皮细胞DNA损伤和IL-33表达的影响及其机制
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作者 王侨 曾紫菱 +8 位作者 王星 马宁 王志彬 徐国锋 袁谢芳 王孝芸 李月蛟 唐红梅 张沄 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期1205-1216,共12页
目的:探讨烟曲霉(Af)对人支气管上皮细胞DNA损伤和白细胞介素33(IL-33)表达的影响,阐明其相关作用机制。方法:采用不同浓度(1、5和10 mg·L^(-1))Af刺激支气管上皮BEAS-2B细胞,筛选合适的刺激浓度。采用N-乙酰半胱氨酸(NAC)和Af刺激... 目的:探讨烟曲霉(Af)对人支气管上皮细胞DNA损伤和白细胞介素33(IL-33)表达的影响,阐明其相关作用机制。方法:采用不同浓度(1、5和10 mg·L^(-1))Af刺激支气管上皮BEAS-2B细胞,筛选合适的刺激浓度。采用N-乙酰半胱氨酸(NAC)和Af刺激BEAS-2B细胞时,将细胞分为对照组、Af组、NAC组和Af+NAC组。采用DNA双链断裂修复抑制剂NU7441和Af刺激BEAS-2B细胞时,将细胞分为对照组、Af组、NU7441组和Af+NU7441组。采用彗星实验检测各组细胞彗星尾部DNA百分率,采用免疫荧光法检测各组细胞中DNA损伤相关蛋白磷酸化组蛋白H2AX(γH2AX)表达水平,采用2,7-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)荧光探针法检测各组细胞中活性氧(ROS)水平,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组细胞中IL-33、胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)和白细胞介素25(IL-25)mRNA表达水平,采用Western blotting法检测各组细胞中磷酸化核因子κB(p-NF-κB)、磷酸化共济失调毛细血管扩张突变(p-ATM)和γH2AX蛋白表达水平。结果:与对照组比较,1 mg·L^(-1) Af组细胞中彗星尾部DNA百分率和γH2AX表达水平差异无统计学意义(P>0.05),5 mg·L^(-1) Af组细胞中彗星尾部DNA百分率和γH2AX表达水平明显升高(P<0.01);与5 mg·L^(-1) Af组比较,10 mg·L^(-1) Af组细胞中彗星尾部DNA百分率和γH2AX表达水平均明显升高(P<0.01)。与对照组比较,1 mg·L^(-1) Af组支气管上皮细胞中ROS水平明显升高(P<0.05);与1 mg·L^(-1) Af组比较,5 mg·L^(-1) Af组细胞中ROS水平明显升高(P<0.01);与5 mg·L^(-1) Af组比较,10 mg·L^(-1) Af组细胞中ROS水平明显升高(P<0.05)。NAC处理后,与Af组比较,Af+NAC组细胞中彗星尾部DNA百分率(P<0.01)、γH2AX表达水平(P<0.05)和ROS水平(P<0.01)明显降低;NU7441处理后,与Af组比较,Af+NU7441组细胞中彗星尾部DNA百分率明显升高(P<0.01),γH2AX表达水平明显升高(P<0.01)。RT-qPCR检测,NAC处理后,与对照组比较,Af组细胞中IL-33 mRNA表达水平明显升高(P<0.05);与Af组比较,Af+NAC组细胞中IL-33 mRNA表达水平明显降低(P<0.05);NU7441处理后,与Af组比较,Af+NU7441组细胞中IL-33 mRNA表达水平明显升高(P<0.05)。Westernblotting法检测,NAC处理后,与对照组比较,Af组细胞中p-NF-κB、p-ATM和γH2AX蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与Af组比较,Af+NAC组细胞中p-NF-κB、p-ATM和γH2AX蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。NU7441处理后,与Af组比较,Af+NU7441组细胞中p-NF-κB、p-ATM和γH2AX蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论:Af通过引起人支气管上皮细胞DNA损伤促进细胞中IL-33表达,其机制可能与激活ATM/NF-κB信号通路有关。 展开更多
关键词 烟曲霉 DNA损伤 白细胞介素33 支气管上皮细胞 活性氧
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治疗药物监测在婴儿肺部烟曲霉菌感染药学监护应用实践
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作者 梁倩莹 莫小兰 +2 位作者 吴玮哲 吴艳兰 张剑珲 《儿科药学杂志》 CAS 2024年第10期13-17,共5页
目的:总结并分享医师和药师联合治疗1例婴儿肺部烟曲霉菌感染的经验。方法:临床药师参与1例婴儿肺部烟曲霉菌感染的治疗过程,从药物选择、血药浓度监测及不良反应等方面优化给药方案,开展药学监护,实施个体化给药。结果:患儿通过药学监... 目的:总结并分享医师和药师联合治疗1例婴儿肺部烟曲霉菌感染的经验。方法:临床药师参与1例婴儿肺部烟曲霉菌感染的治疗过程,从药物选择、血药浓度监测及不良反应等方面优化给药方案,开展药学监护,实施个体化给药。结果:患儿通过药学监护服务及时避免了不良事件并取得了良好的感染控制效果,病情好转出院。结论:治疗药物监测(TDM)是儿童使用药物后药效评估和不良反应监护的重要手段,临床药师利用专业优势参与制定个体化给药方案,可促进临床合理用药。 展开更多
关键词 伏立康唑 烟曲霉 治疗药物监测 婴儿 药学监护
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烟曲霉几丁质酶基因的克隆与表达 被引量:10
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作者 王颖 王俊琦 +4 位作者 胡红焱 杨雪鹏 杨寿钧 余小应 金城 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期843-850,共8页
Chi4 4是烟曲霉 (Aspergillusfumigatus)YJ 4 0 7产生的一种胞外几丁质酶。通过用真菌几丁质酶保守氨基酸序列与Chi4 4的N 端序列检索烟曲霉部分基因组序列数据库 ,获得一个编号为contig5 5 5的烟曲霉基因组序列 ,可能包含烟曲霉几丁质... Chi4 4是烟曲霉 (Aspergillusfumigatus)YJ 4 0 7产生的一种胞外几丁质酶。通过用真菌几丁质酶保守氨基酸序列与Chi4 4的N 端序列检索烟曲霉部分基因组序列数据库 ,获得一个编号为contig5 5 5的烟曲霉基因组序列 ,可能包含烟曲霉几丁质酶的基因。根据检索结果用RT PCR方法从烟曲霉YJ 4 0 7中克隆到 1 4kb的cDNA片段 ,该cDNA的ORF编码一个 395个氨基酸的蛋白 ,分子量为 4 3 6kD。对其推导氨基酸序列分析表明该蛋白与其它真菌来源的几丁质酶同源 ,而且活性中心与人巨噬细胞几丁质酶高度同源。该cDNA已在E .coli与PichiapastorisGS115中获得表达 ,分别获得 4 3kD和 4 4kD的重组蛋白 ,两种重组蛋白均有几丁质酶活性。与野生酶相比 ,大肠杆菌表达的 4 3kD重组酶及Pichia酵母表达的 4 4kD重组酶稳定性下降 ,说明Chi4 展开更多
关键词 烟曲霉(Aspergillus fumigatus) 几丁质酶(chitinase) cDNA 表达 稳定性
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真菌Aspergillus fumigatus var .fumigatus的次生代谢产物(英文) 被引量:5
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作者 鲁春华 黄耀坚 沈月毛 《中国天然药物》 SCIE CAS CSCD 2005年第5期269-271,共3页
目的:研究西双版纳粗榧共生真菌Aspergillus fumigatusvar .fumigatus的次生代谢产物。方法:通过柱层析法分离发酵产物的化学成分,并利用波谱数据和文献数据对照鉴定化合物的结构。结果:分离到2个化合物,分别鉴定为trypacidin (1)及其... 目的:研究西双版纳粗榧共生真菌Aspergillus fumigatusvar .fumigatus的次生代谢产物。方法:通过柱层析法分离发酵产物的化学成分,并利用波谱数据和文献数据对照鉴定化合物的结构。结果:分离到2个化合物,分别鉴定为trypacidin (1)及其衍生物1 ,2-seco-trypacidin (2)。结论:化合物2是新结构;并对文献中关于trypacidin的C-4和C-7a位碳谱数据的指定进行了更正。 展开更多
关键词 ASPERGILLUS FUMIGATUS var.fumigatus Trypacidin 1 2-seco-trypacidin
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烟曲霉产壳聚糖酶液体发酵条件研究 被引量:9
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作者 周桂 何子平 禤金彩 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期34-37,共4页
以烟曲霉(Aspergillus fumigatus)为出发菌,通过选择适合的培养条件,筛选出产壳聚糖酶的菌株。实验结果表明,烟曲霉是良好的产壳聚糖酶出发菌。烟曲霉液体发酵产壳聚糖酶最适培养基组成为:壳聚糖1%,KH2PO40.06%,尿素0.2%,(NH4)2SO40.1%,... 以烟曲霉(Aspergillus fumigatus)为出发菌,通过选择适合的培养条件,筛选出产壳聚糖酶的菌株。实验结果表明,烟曲霉是良好的产壳聚糖酶出发菌。烟曲霉液体发酵产壳聚糖酶最适培养基组成为:壳聚糖1%,KH2PO40.06%,尿素0.2%,(NH4)2SO40.1%,MgSO40.012%,20%土豆汁3%,NaCl 0.05%。在pH 5.0、温度28℃、摇床转速120 r/min培养条件下振荡培养3 d,烟曲霉产壳聚糖酶的能力最强,达25.1 U/mL。 展开更多
关键词 烟曲霉(Aspergillus fumigatus) 壳聚糖酶 液体发酵
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海洋来源真菌烟曲霉(Aspergillus fumigatus)次级代谢产物研究(Ⅱ) 被引量:11
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作者 赵文英 朱庆书 顾谦群 《青岛科技大学学报(自然科学版)》 CAS 2007年第5期390-393,共4页
对一株海洋来源的微生物(Aspergillus fumigatus.)中的次级代谢产物进行了研究,采用硅胶柱色谱方法进行分离纯化,根据理化性质和光谱数据鉴定了化合物的结构,分别为环-(丙-缬)(1),环-(色-脯)(2),N-[2-(4-羟基苯基)乙基]乙... 对一株海洋来源的微生物(Aspergillus fumigatus.)中的次级代谢产物进行了研究,采用硅胶柱色谱方法进行分离纯化,根据理化性质和光谱数据鉴定了化合物的结构,分别为环-(丙-缬)(1),环-(色-脯)(2),N-[2-(4-羟基苯基)乙基]乙酰胺(3),对羟基苯乙酰胺(4),4,8-二羟基-1-四氢萘醌(5),3,4-二羟基苯甲酸甲酯(6),麦角甾醇(7)和过氧化麦角甾醇(8)。化合物1~8均首次从该菌株中分离。 展开更多
关键词 海洋来源真菌 ASPERGILLUS FUMIGATUS 次级代谢 成份
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海洋真菌Aspergillus fumigatus次生代谢产物研究 被引量:3
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作者 毛瑞华 吴文明 +1 位作者 方伟 阮汉利 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1857-1863,共7页
对来源于腔节藻属海藻Coelarthrumboergesenii(采自中国南海西沙群岛)的一株海洋内生真菌Aspergillusfumigatus的发酵液进行化学成分的分离及鉴定。采用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱和高压液相色谱等分离手段,从乙酸乙酯萃取部分中分离得... 对来源于腔节藻属海藻Coelarthrumboergesenii(采自中国南海西沙群岛)的一株海洋内生真菌Aspergillusfumigatus的发酵液进行化学成分的分离及鉴定。采用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱和高压液相色谱等分离手段,从乙酸乙酯萃取部分中分离得到16个次级代谢产物(1-16),经核磁共振、质谱等现代波谱技术鉴定了它们的结构,分别为gliotoxin ( 1 ). bis (dethio) bis (methylsulfanyl) gliotoxin ( 2 ), fumiquinazoline C ( 3 ). (-) -chaetomium ( 4 ).verruculogen(5) .fumitremorgin C(6) .brevianamide F(7) .fumigaclavine C(8) .decanedioic acid,2-methylene(9) .decanedioic acid, 2-methylene-, 1-methyl ester ( 10 ). 2-undecenedioic acid ( 11 ). 2-undecenedioic acid, 1-methyl ester ( 12 ). helvolic acid ( 13 ). di-2-ethyl hexyl phthalate ( 14 ). physcion ( 15 ). emodin (16),其中化合物9、10和12为新天然产物。 展开更多
关键词 海洋真菌 内生真菌 ASPERGILLUS FUMIGATUS 代谢产物 生物碱
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产纤维素酶真菌菌株的分离筛选及产酶条件优化 被引量:20
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作者 魏姣 万学瑞 +7 位作者 吴润 畅通 马亚茹 刘磊 张小丽 张天亮 杨润霞 贾晓蕊 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期8-15,共8页
【目的】由于真菌的纤维素酶系较全,且可分泌至胞外,易分离,所以试验致力于筛选高产纤维素酶真菌菌株.【方法】利用羧甲基纤维素钠培养法、刚果红染色法、纤维素酶活性测定法从样品中分离筛选出产纤维素酶菌株,同时结合菌落形态观察、... 【目的】由于真菌的纤维素酶系较全,且可分泌至胞外,易分离,所以试验致力于筛选高产纤维素酶真菌菌株.【方法】利用羧甲基纤维素钠培养法、刚果红染色法、纤维素酶活性测定法从样品中分离筛选出产纤维素酶菌株,同时结合菌落形态观察、显微镜观察和ITS序列同源性分析进行鉴定.【结果】通过初筛,筛选出15株Hc值较大的产纤维素酶真菌菌株,再经过液体发酵复测羧甲基纤维素酶活和滤纸酶活,筛选出一株产纤维素酶活最高的菌株B-2-3,经鉴定B-2-3为烟曲霉(Aspergillus fumigatus),其羧甲基纤维素酶活为2 341.76U/mL,滤纸酶活为398.18U/mL.经过产酶条件优化,确定其最适产酶条件为温度25℃、接种量4μL、蛋白胨0.5~0.6g/L、CMCNa 0.3~0.35g/L、pH 6.5.【结论】筛选出一株产纤维素酶活较高的烟曲霉菌株B-2-3. 展开更多
关键词 纤维素酶 筛选 鉴定 烟曲霉
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