ABT263对PHA739358增敏作用的分子机制

目的探讨ABT263对PHA739358增敏作用的分子机制。方法培养人乳腺癌细胞株MDA-MB-231,采用PHA739358及ABT263进行处理。免疫荧光法观察多核细胞形成,PI单染流式细胞术观察多倍体形成,FITC-AnnexinⅤ和PI双染流式细胞术及荧光染料法显示不同组别细胞凋亡情况;Western Blot检测单药和联合用药不同组别对p-Histone H3,抗凋亡蛋白Bcl-xl、Bcl-2、Mcl-1及促凋亡蛋白Bax、PARP的影响。结果免疫荧光和PI单染流式细胞术结果显示,1μM PHA739358作用于MDA-MB-231细胞,48 h后出现多核现象及多倍体细胞形成。Western Blot、流式细胞术、荧光染料结果显示,ABT263可促进多倍体细胞快速凋亡,ABT263与PHA739358联合组的细胞凋亡率为(43.70±0.78)%,高于对照组、ABT263组、PHA739358组、MLN8054组,以及ABT263与MLN8054联合组。Western Blot结果显示,ABT263与PHA739358联合主要抑制Aurora B和Bcl-xl/2,对Mcl-1的影响很小,对Aurora A无影响;ABT263与PHA739358联合作用于MDA-MB-231细胞,48 h后的细胞凋亡数目明显增加,凋亡率从(0.26±0.02)%增加到(42.30±0.23)%,且荧光染料法显示此组凋亡细胞明显增多。结论 ABT263对PHA739358的增敏作用可为乳腺癌的治疗提供新思路。