XG32菌株产ACC脱氨酶的培养条件和酶活影响因素

为了明确具1-氨基环丙烷-1-羧酸（1-aminocyclopropane-1-carboxylate ACC）脱氨酶活性细菌菌株XG32的产酶条件和酶活影响因素，以ACC为底物，研究了诱导培养基中底物的浓度、温度、pH对该菌株产酶的影响及产酶的时程：分别在不同温度、不同pH及添加8种金属离子的条件下测定了酶的活力和稳定性．结果表明：菌株XG32在有底物ACC存在时才能被诱导产酶，温度上升至5℃及pH〉5．5时酶活性才开始被诱导，在25℃和pH7．0-8．0时酶活性最高；诱导初始至24h内是酶产生的上升期，24h后酶产生呈下降趋势．酶的最适反应温度为30℃，高于35℃酶的活力下降，在65℃酶的活力趋于零；该酶在pH7．5-9．5之间有较好的稳定性；金属Cu^2＋、Zn^2＋对ACC脱氨酶有激活作用，而Hg^2＋、Ag^2＋则有抑制作用．因此，认为ACC脱氨酶酶活性的出现对底物的存在非常敏感，在自然界中少量的酶就可以催化ACC的分解．但酶活力受条件影响较大，仅能在一定的范围内保持酶活的稳定性．

利用PCR技术快速检测根际产ACC脱氨酶细菌

通过产生ACC脱氨酶降低胁迫乙烯水平并缓解盐胁迫危害,是植物根际促生菌(PGPR)促进宿主生长和抗逆的重要机制。本研究提出了利用PCR技术快速检测产ACC脱氨酶细菌的快捷方法。以编码ACC脱氨酶的acd S基因为标记,分别使用acd Sf3/acd Sr4、Deg ACCf/Deg ACCr和F1936f/F1938r三对引物,对多种盐生植物和美洲黑杨(Populus deltoids)的根部及根际土中分离得到的细菌菌株进行检测。结果表明,结合acd Sf3/acd Sr4引物和递减PCR(touchdown-PCR)方法时,能获得单一的特异性扩增条带且扩增成功率高;但Deg ACCf/Deg ACCr和F1936f/F1938r两对引物特异性较差。从247个菌株中检测到25株含有acd S基因,旨为今后研究植物根际细菌acd S基因遗传性及储备丰富的功能性菌株奠定基础。

氢氧化细菌SDW-16的分离鉴定及促生特性

利用气体循环培养体系从沙打旺根际土壤分离得到1株氢氧化细菌SDW-16(GenBank登录号:KF835389),16S rDNA序列分析和生理生化特征鉴定其为荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)。菌株对植物促生机制的初步研究表明菌株SDW-16除具有铁载体分泌能力外,还具有产IAA和ACC脱氨酶活性,其中产IAA量为(21.62±0.30)μg/mL,ACC脱氨酶活力高达(8 372.17±805.43) nmol/(mg·h)。菌株SDW-16具有多项促生能力且均高于其他菌株,说明菌株SDW-16有较高的促生特性,同时也初步证明了氢氧化细菌的促生机制。