硒对大鼠胃癌时脑垂体ACTH阳性细胞的影响

目的 观察硒在预防大鼠实验性胃癌过程中垂体远侧部 ACTH细胞的免疫组织化学变化。方法 用断乳雄性 Wistar大鼠 30只 ,分为盐水对照组 N-甲基 - N -硝基 - N-亚硝基胍(MNNG)组和 Se+MNNG组 ,每组 1 0只。用免疫组织化学、图像分析和形态计量方法观察大鼠脑垂体 ACTH细胞。结果 补硒组大鼠 ACTH细胞的面数密度减小 ,免疫反应减弱 ,与 MNNG组相比有显著性差异 (P<0 .0 5) ,与对照组相比略有增加 ,但无统计学意义 (P>0 .0 5)。 MNNG组大鼠 ACTH细胞的面数密度增大 ,免疫反应增强 ,与对照组相比有显著性差异 (P<0 .0 5)。结论 硒在预防大鼠实验性胃癌过程中 ,可能参与了垂体远侧部 ACTH细胞功能的调节。

寒冷对大鼠下丘脑核团癌基因c-fos及垂体ACTH细胞表达的变化

本实验用寒冷刺激大鼠，观察垂体ＡＣＴＨ细胞及下丘脑核团ｃ－ｆｏｓ癌基因表达蛋白出现的变化。发现寒冷能促使垂体前叶ＡＣＴＨ细胞数目增多，体积胀大，且具有粗大突起伸到扩张的血窦旁。在视交叉腹外侧的视上核（ＳＯ）神经元及视交叉上核（Ｓｃｈ）周围部神经元皆出现ｃ－ｆｏｓ强阳性反应。第三脑室侧壁室管膜上皮及少数室周核（ｐｅ）神经元为ｃ－ｆｏｓ阳性。视前内侧区（ＭＰＡ）可见分散的阳性神经元。位于室旁核内的外侧，出现ｃ－ｆｏｓ反应较浅的小神经元。本文最后探讨有关ＡＣＴＨ释放的调节。

大鼠实验性腹膜炎自愈过程中腺垂体ACTH细胞和TSH细胞的免疫细胞化学研究

用成年雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠７０只，分为实验组和对照组。实验组大鼠在无菌条件下腹腔注射松节油（０．６５ｍｌ／ｋｇ），造成急性非特异性腹膜炎。对照组未经任何处理。分别于注射后１ｄ、２ｄ、３ｄ、５ｄ、７ｄ、１０ｄ取腹水，做瑞氏－姬姆萨染色，取脑垂体做ＡＣＴＨ细胞和ＴＳＨ细胞免疫细胞化学染色。注射后１ｄ，腹水内中性粒细胞百分比明显增高；注射后２ｄ、３ｄ、５ｄ逐渐恢复；７～１０ｄ时，基本恢复正常。脑垂体ＡＣＴＨ细胞和ＴＳＨ细胞的免疫细胞化学反应结果，以积分法表示。统计结果表明，注射后１ｄ、２ｄ、３ｄ、５ｄＡＣＴＨ细胞和ＴＳＨ细胞的积分明显高于对照（Ｐ＜０．０１），注射后３ｄ积分最高，注射后７ｄ，实验组ＡＣＴＨ细胞的积分恢复到正常水平（Ｐ＞０．０５）。ＴＳＨ细胞于注射后１０ｄ恢复（Ｐ＞０．０５）。结果表明，腹膜炎早期ＡＣＴＨ细胞和ＴＳＨ细胞的分泌活动即增强；并于注射后３ｄ达高峰。当腹膜炎恢复时，这些细胞的功能也恢复正常。本研究说明，在大鼠实验性腹膜炎自愈过程中，腺垂体ＡＣＴＨ细胞和ＴＳＨ细胞也参与了内分泌调节。

6周递增跑台运动对大鼠下丘脑室旁核CRH细胞及腺垂体ACTH细胞的影响

目的探讨6周递增负荷运动对大鼠下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素(corticotropin-releasing hormone,CRH)细胞及腺垂体促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic hormone,ACTH)细胞的影响。方法 SPF级雄性SD大鼠120只,随机分成绝对安静组(Absolute control,著AC)组、对照组(Control,C)、运动后即刻组(Immediate,I)、运动后3h组(3 Hours,3H),进行6周递增负荷跑台运动,分别在第0、2、4、6周用免疫组织化学的方法对下丘脑上CRH和腺垂体上ACTH细胞进行检测。结果 CRH细胞的变化为:第2周末只有I组比AC组有显著性差异提高(P<0.05),其余各组之间没有显著性差异;第4周末,只有3H组比I组有显著性提高(P<0.05),其余各组之间没有显著性差异;第6周末,3H组比AC组和C组有显著性提高(P<0.05)。ACTH细胞的变化为:第0周末,I组和3H组比C组和AC组有极显著性提高(P<0.01),3H组比I组有极显著性提高(P<0.01);第2周末各组皆无显著性差异;第4周末,I组比AC组有显著性差异(P<0.05),AC组、C组和3H组比I组有极显著性降低(P<0.01);第6周末,3H组比AC组有显著性增高(P<0.05),C组和I组比AC组有极显著性增高(P<0.01),I组和3H组比C组有极显著性增高(P<0.01),3H组比I组有极显著性增高(P<0.01)。结论 6周递增负荷运动初期(4周内)大鼠产生了不同程度的适应,大强度运动提高了CRH细胞和ACTH细胞的应激反应,但对ACTH细胞比对CRH细胞的影响大。

大鼠实验性腹膜炎自愈期间腺垂体ACTH细胞的免疫电镜研究

用免疫电镜方法，研究了在大鼠实验性腹膜炎自愈期间，垂体前叶ＡＣＴＨ细胞的变化。结果发现，注射后１、３、５、７ｄＡＣＴＨ细胞内分泌颗粒被标记的胶体金颗粒均有增多（Ｐ＜０．０５），而以注射后３ｄ最多（Ｐ＜０．０１）。注射后３ｄ和５ｄ可见粗面内质网明显扩张，高尔基复合体发达。注射后７ｄ粗面内质网仍有扩张，其分泌颗粒上所标记的金颗粒数较正常对照增多，而较第３ｄ和５ｄ略有减少。结果表明，在大鼠实验性腹膜炎自愈过程中，ＡＣＴＨ细胞功能明显增强，参与了腹膜炎自愈过程的调节。

大鼠实验性胃溃疡自愈期间垂体远侧部ACTH细胞的免疫电镜研究

用成年雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠，分为溃疡组和对照组。用免疫电镜包埋后免疫金间接法标记ＡＣＴＨ细胞，研究胃溃疡自愈过程中垂体远侧部ＡＣＴＨ细胞的超微结构变化。结果显示，在实验性胃溃疡第４ｄ，一些ＡＣＴＨ细胞含少量很小的分泌颗粒，沿质膜分布。有较多的ＡＣＴＨ细胞胞质出现许多空泡。溃疡第６ｄ，ＡＣＴＨ细胞的高尔基复合体发达，其扁囊膨大部含中等电子密度的内容物，其内可见金颗粒标记。溃疡６～１０ｄ，较多的ＡＣＴＨ细胞含许多分泌颗粒。溃疡第２８ｄ，ＡＣＴＨ细胞的超微结构基本恢复正常。本研究结果表明，在大鼠实验性胃溃疡自愈期间，垂体远侧部ＡＣＴＨ细胞的超微结构显示明显的变化。这些变化主要反映了ＡＣＴＨ细胞合成、贮存及释放激素的活动增强，提示垂体远侧部ＡＣＴＨ细胞参与了溃疡自愈过程的调节。

脑血管病患者外周血单个核细胞ACTH受体表达

采用放射配体分析及放射免疫测定法，检测了18例脑血管病患者外周血单个核细胞（PMNC）ACTH受体表达及血浆ACTH水平。结果显示：脑出血患者PMNCACTH受体表达水平及血浆ACTH含量均显著高于健康对照组（P<0.01），脑梗死患者血浆ACTH水平显著升高（P<0.01），但其PMNCACTH受体表达无明显变化（P>0.05）。上述患者免疫细胞活性检测结果表明，脑出血患者T细胞及NK细胞活性均较健康对照组明显降低（P<0.01），脑梗死患者只表现T细胞活性受抑制（P<005）。相关性分析显示，脑血管病患者PMNCACTH受体表达水平与T细胞和NK细胞活性呈负相关（P<0．01）。以上结果提示，脑血管病患者细胞免疫功能抑制效应可能是通过免疫细胞膜上ACTH受体介导的。

G蛋白介导组胺H_3受体调节垂体瘤At T-20细胞分泌ACTH

目的探讨G蛋白在组胺H3 受体信号转导机制中的作用。方法以高表达组胺H3 受体的垂体细胞瘤AtT 20作为观察系统 ,用放免分析法测定给予H3 受体激动剂后各时间点细胞上清液中ACTH分泌量的变化 ,并观察药物对细胞增殖的影响。结果组胺H3 受体激动剂R (α) MeHA(10 -7mol/L)作用8h ,能明显促进ACTH的释放 ,H1、H2受体激动剂无此作用 ,R (α) MeHA引起ACTH分泌的效应能被H3 受体特异性拮抗剂thioperamide所拮抗 ,而H1 受体和H2 受体拮抗剂均不影响R (α) MeHA的效应。用G蛋白失活剂NEM预处理细胞后 ,取消了R α MeHA增强AtT 20细胞分泌ACTH的效应。结论特异性激动组胺H3 受体后能引起兴奋 分泌偶联过程 ,其信号转导过程中有G蛋白的参与。

牛ACTH受体和TGFβ1的调节作用

目的观察牛肾上腺皮质细胞ACTH受体的分布和转化生长因子β1（TGFβ1）对ACTH受体的调节作用。方法牛肾上腺皮质束、网带细胞（BAC细胞）的原代培养和(125)I－ACTH特异性受体结合标记等。结果在该培养条件下，BAC细胞的受体可分为高、低两种亲和力亚型。它们在每个细胞上的数目分别为3400（高）和15000（低）个。kD分别为4．90368×10(-11)和3．53974×10(－10)mol／L。TGFβ1可减少高亲和力受体至2000个，增加低亲和力受体到33000个。它们的kD也相应地发生了改变。结论TGFβ1对受体亚型具有不同的调节作用，TGFβ1对ACTH高亲和力受体的负性调节作用和ACTH对TGFβ1受体的正性调节作用可能构成对肾上腺皮质激素生成活动调节的角反馈机制。

小鼠脑垂体TSH细胞和ACTH细胞的体视学研究

用免疫组织化学PAP法,对小鼠脑垂体TSH细胞、ACTH细胞进行双重染色,在同一切片上同时显示两种细胞,观察细胞形态,并用体视学方法对两种细胞进行定量测定。结果显示,TSH细胞体积较大,呈多边形;ACTH细胞体积略小,呈不规则形。TSH细胞的体积密度、面数密度、数密度均高于ACTH细胞的相应数值,而TSH细胞的相邻细胞百分比则低于ACTH细胞的相应数值。

AOM所致大鼠结肠癌形成过程中垂体远侧部ACTH阳性细胞免疫组织化学观察

目的观察氧化偶氮甲烷(azoxymethane,AOM)所致大鼠结肠癌形成过程中,大鼠脑垂体远侧部ACTH细胞的免疫组织化学变化并探讨其意义。方法用断乳SD(Sprague Dawley)雄性大鼠30只,分为AOM实验组和盐水对照组。用AOM(15mg/kg)每周腹腔注射,连续2周,诱导大鼠结肠癌的形成。分别于实验第10、30、34周取材,用免疫组织化学、图像分析法观察大鼠实验性结肠癌形成过程中脑垂体远侧部ACTH阳性细胞的变化。结果亚甲基蓝染色光镜下观察,可见AOM腹腔注射的大鼠结肠黏膜出现异常隐窝(aberrant crypt,AC)和异常隐窝灶(aberrant crypt foci,ACF)。免疫组织化学显示,与同期正常对照组相比,对照组大鼠垂体远侧部ACTH阳性细胞阳性反应显著性增强(P<0.01)。结论在大鼠实验性结肠癌形成过程中脑垂体远侧部ACTH细胞可能参与了机体抗肿瘤的内分泌调节。

高原不同海拔大鼠垂体ACTH细胞超微结构研究

目的观察急进高原不同海拔地区大鼠垂体远侧部促肾上腺皮质激素(ACTH)细胞的超微结构变化。探讨ACTH在机体对低氧应激反应中的作用,以及低氧对大鼠ACTH细胞分泌功能的影响。方法本实验将Wistar大鼠随机分为1700m、3100m、4050m三组,分别运至高原相应海拔地区12天后,取大鼠腺垂体用透射电镜方法进行染色,观察高原低氧环境下ACTH细胞的变化。结果结果显示电镜下三组大鼠ACTH细胞的细胞形态、分泌颗粒及线粒体、粗面内质网等细胞器随海拔不同有一定变化。其中3100m和4050m级组ACTH细胞分泌颗粒较对照组(1700m)明显变大变多,且粗面内质网、线粒体等细胞器有所增加,核仁和胞浆也有相应变化。结论高原低氧对大鼠垂体ACTH细胞的超微结构有影响,海拔不同(亦即低氧程度不同时),垂体ACTH内分泌细胞的超微结构有一定的变化规律,提示ACTH可能是参与高原低氧应激反应的重要生理和病理体液因子,其在短期高原低氧应激反应中具有重要的调节作用。

多种垂体外肿瘤细胞系ACTH基因表达的研究

用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交、免疫细胞化学和电镜技术，以垂体ＡＣＴＨ瘤细胞系（ＡｔＴ２０）为对照，从转录、翻译及亚细胞水平检测了５种垂体外不同病理组织来源的肿瘤细胞系ＡＣＴＨ基因表达，包括属于ＡＰＵＤ系统的两种人小细胞肺癌（ＳＣＬＣ－Ｈ６９和ＳＣＬＣ），３种非ＡＰＵＤ系统肿瘤：肺腺癌（ＡＧＺＹ８３－α、低分化胃粘液癌（ＭＧＣ－８０３）和肝癌（Ｂｅｌ－７４０２）。结果证实，（１）ＡＣＴＨ基因表达不仅存在于ＡＰＵＤ系统肿瘤，而且也存在于非ＡＰＵＤ系统肿瘤，如ＡＧＺＹ８３－α和ＭＧＣ－８０３。（２）不同细胞系中ＰＯＭＣ（ＡＣＴＨ前体）转录的ｍＲＮＡ表达长度不同（８００ｂｐ、１２００ｂｐ、１４００ｂｐ）。支持激素类物质合成在组织中普遍存在的假说。

中华鲟(Acipenser sinensis)脑垂体的形态和ACTH细胞定位

为研究中华鲟(Acipenser sinensis)神经内分泌系统的基本结构和功能,本文对中华鲟脑垂体的组织形态进行了观察,结果表明中华鲟的神经垂体较小,腺垂体可分为前、中和后腺垂体三部分,神经垂体形成分支插入后腺垂体。中华鲟垂体还有一个特点是有分支的垂体裂。前腺垂体位于垂体前侧,细胞间隙大,细胞分散呈窦状。中腺垂体细胞间隙小,细胞密集呈条索状,嗜酸性细胞和嗜碱性细胞区分明显。后腺垂体包围在神经垂体周围。腺垂体中有长且分支的垂体裂,腺垂体形成许多突起深入其中,垂体裂周围的细胞密集,染色深,排列成类似上皮组织的形态。免疫组化结果表明,中华鲟脑垂体ACTH细胞主要分布于后腺垂体。ACTH的前体基因是POMC,RT-PCR证明其主要分布在脑垂体中,在体内其他组织中基本检测不到。编码ATCH的片段位于POMC中最保守的区域。预测发现POMC基因有一个26氨基酸的信号肽,将不带信号肽的POMC基因插入表达载体。再转染HELA细胞POMC主要在细胞质中表达,而带有信号肽的POMC蛋白在细胞内很少,推测可能分泌到胞外,信号肽对POMC表达和功能发挥起重要作用,本研究结果可为该基因在中华鲟神经内分泌研究中提供参考。

IL-1β对小鼠垂体正常细胞和ACTH瘤细胞生长的影响

目的 探讨垂体内自分泌、旁分泌因子IL-1β是否参与垂体细胞和垂体瘤细胞的生长增殖过程。方法 以体外原代培养的小鼠垂体正常细胞为对照,采用噻唑蓝(MTT)法观察10-9mol/L～10-13mol/LIL-1β对小鼠垂体ACTH瘤细胞(AtT20)生长增殖的影响。结果 (1)IL-1β刺激垂体原代培养细胞4～72h,不同浓度的IL-1β各组(n=9)与对照组(n=9)间的差异无显著性(P>0.05),实验中培养细胞处于对数生长期状态。(2)IL-1β刺激AtT20细胞48、72h,IL-1β各浓度组(n=9)细胞生长分裂的增加与对照组(n=9)相比差异有显著性(P<0.05,P<0.01)。结论 IL-1β参与了AtT20细胞生长增殖的调节,提示IL-1β可能是参与垂体ACTH瘤发病的因素之一。

不同年龄大鼠胃肠道G细胞和ACTH-IR细胞的变化

目的：了解大鼠胃肠道胃泌素（ｇａｓｔｒｉｎ，Ｇ）细胞和促肾上腺皮质激素免疫反应性（ａｄｒｅｎｏｃｏｒｔｉｃｏｔｒｏｐｈｉｃｈｏｒｍｏｎｅｉｍｍｕｎｏｒｅａｃｔｉｖｉｔｙ，ＡＣＴＨＴＲ）细胞年龄变化特点及胃肠道与脑垂体ＡＣＴＨＩＲ细胞年龄变化的关系。方法：应用ＰＡＰ免疫组织化学方法和胶金免疫电镜技术。结果：１８个月大鼠胃窦Ｇ细胞及十二指肠和脑垂体ＡＣＴＨＩＲ细胞数量均分别显著低于其它组（Ｐ＜００５；Ｐ＜００１）。２５个月大鼠十二指肠ＡＣＴＨＩＲ和胃窦Ｇ细胞数量为最高值，脑垂体ＡＣＴＨＩＲ细胞数量最高值为３５天大鼠。此外，在胶金免疫电镜下，可见十二指肠杯状细胞内含有胶金颗粒。结论：大鼠十二指肠和脑垂体ＡＣＴＨＩＲ细胞及胃窦Ｇ细胞数量均有明显的年龄变化；胃肠道Ｇ细胞与ＡＣＴＨＩＲ细胞数量随年龄变化是一致的，而胃肠道与脑垂体ＡＣＴＨＩＲ细胞数量与年龄变化却不相一致；胃肠道的一些杯状细胞可能有分泌ＡＣＴＨＩＲ物质的功能。

大鼠实验性腹膜炎自愈过程中垂体远侧部ACTH细胞和TSH细胞变化的定量研究

用成年雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠３６只，分为实验组和对照组，对照组动物不做任何处理，实验组动物腹腔注射无菌松节油造成急性非特异性腹膜炎。用免疫组织化学、图像分析和形态计量方法研究了大鼠实验性腹膜炎自愈过程中垂体远侧部ＡＣＴＨ细胞和ＴＳＨ细胞的变化。结果表明，注射后第１ｄ和第３ｄ，ＡＣＴＨ免疫反应细胞的面数密度增大，免疫反应增强（Ｐ＜０．０１）；ＴＳＨ免疫反应细胞面数密度无变化，但在注射后的第３ｄ，ＴＳＨ细胞免疫反应减弱（Ｐ＜０．０５）。第５ｄ，ＡＣＴＨ细胞免疫反应稍有增强、面数密度稍有增大，但同对照组相比无显著性差异（Ｐ＜０．０５）。注射后第７ｄ，ＴＳＨ细胞免疫反应增强（Ｐ＜０．０５）。注射后第１０ｄ，ＡＣＴＨ细胞和ＴＳＨ细胞的面数密度和免疫反应均恢复正常。本研究结果提示实验性腹膜炎自愈过程中，ＡＣＴＨ细胞功能增强而ＴＳＨ细胞功能被抑制并参与了炎症自愈的调节。

人参皂甙对外源ACTH所致小鼠免疫功能抑制的调整效应

本实验通过应用外源ＡＣＴＨ，观察了人参皂甙的内分泌免疫调节效应，实验结果证实，外源ＡＣＴＨ不仅诱发小鼠肾上腺皮质酮分泌增加，同时也导致小鼠ＮＫ细胞活性、Ｔ细胞转化活性的抑制，这种抑制与皮质酮升高水平呈负相关关系。应用人参皂甙可以部分抵消外源ＡＣＴＨ所致肾上腺皮质酮分泌增加，促进ＮＫ细胞以及Ｔ细胞活性恢复。上述结果提示，人参皂甙可以通过调整垂体（ＡＣＴＨ）－肾上腺（皮质酮）轴的活动参与机体免疫功能调节。

免疫增强状态下大鼠淋巴结中ACTH免疫阳性细胞数量变化与免疫功能的相关关系

目的 :研究在免疫增强应答中 ,淋巴结促肾上腺皮质激素免疫阳性 (ACTH- ir)细胞数量的动态变化以及与体液、细胞免疫的相关关系。方法 :取成年雄性 SD大鼠建立动物模型。在免疫增强过程中 ,按不同时序取样五次 ,分别检测血清 Ig G含量与颌下淋巴结单位面积中 ACTH- ir细胞和 CD2 5阳性细胞数量的动态变化。结果 :ACTH- ir细胞数量在初次免疫刺激后显著上升 ,在第 6天达到峰值 (P<0 .0 5 )。此后随机体免疫状况增强而迅速下降 ,于第 2 6天降到最低值 (P<0 .0 5 )。多因素相关分析显示 (ACTH- ir)细胞和 CD2 5阳性细胞在数量上呈负相关关系 ;而 (ACTH- ir)细胞数量与 IL- 2 ,Ig G含量间未发现有相关关系。结论 :结果提示在免疫增强状态下 ,CD2 5阳性细胞对 (ACTH- ir)细胞可能具有竞争性抑制作用。

血清SAA和ACTH表达水平与重症细菌感染性疾病的关系及对患者治疗效果的评估

目的探讨血清淀粉样蛋白A(SAA)和促肾上腺皮质激素(ACTH)表达水平与重症细菌感染性疾病的关系,分析其对患者治疗效果的评估价值。方法选取秦皇岛市第一医院2018年1月至2019年1月重症监护室收治的126例感染性疾病患者,根据微生物培养结果分为细菌感染组(n=74)和非细菌感染组(n=52),另选取同期60例体检健康者为对照组。对比各组血清SAA、ACTH水平及白细胞计数(WBC),观察细菌感染组治疗后各时间段血清SAA、ACTH水平及WBC和序贯器官衰竭估计评分(SOFA)评分变化;ROC曲线分析血清SAA、ACTH水平及WBC对重症细菌感染性疾病的诊断价值。结果细菌感染组血清SAA、ACTH水平及WBC值明显高于非细菌感染组(P<0.001),且感染组血清SAA、ACTH水平及WBC值明显高于对照组(P<0.001);细菌感染组治疗后1 d、7 d、14 d、出院前血清SAA、ACTH水平及WBC和SOFA评分逐渐降低。ROC曲线显示,WBC诊断重症细菌感染性疾病的AUC与SAA、ACTH诊断差异无统计学意义(P>0.05),SAA联合ACTH诊断重症细菌感染性疾病的AUC明显大于WBC、SAA、ACTH(P<0.05),且敏感度和特异度最高。结论重症细菌感染性疾病患者血清SAA、ACTH水平明显提升,可实时监测治疗效果,联合检测血清SAA、ACTH水平可提升重症细菌感染性疾病的诊断价值。