人参皂甙通过垂体—肾上腺轴调整应激期NK细胞的受抑作用

本文主要探讨了人参皂甙抗手术应激时,NK细胞活性的调节与垂体—肾上腺激素分泌有关的机理。实验证实,人参皂甙能部分拮抗应激所致的小鼠脾NK细胞活性下降。其可能机制是,手术应激引起小鼠外周血ACTH、皮质酮含量增加,同时,脾细胞上高亲和力ACTHR在应激期表达也增加,因此,应激期升高的ACTH、皮质酮等作用在脾脏免疫活性细胞,导致免疫功能抑制;而人参皂甙能部分抑制应激期ACTH、皮质酮的增加,提高免疫细胞功能。由此而知,人参皂甙拮抗应激期NK细胞活性下降,与降低垂体—肾上腺轴活动有关。

C_(57)BL/6J小鼠超数排卵的研究

目的 确定C57BL 6J小鼠超排的最佳激素剂量和最合适的注射间隔时间 ,提高超排率。方法 40只C57BL 6J雌鼠随机分为四组 ,分别用 5IU或 10IU的PMSG和HCG ,间隔 48h或 72h注射 ,比较排出卵母细胞的数量。结果 5IU +5IU剂量的PMSG和HCG、间隔 48h注射组超排效果最好 ;8～ 10周龄雌鼠较 6～ 8周龄雌鼠超排效果好。结论 C57BL 6J小鼠超排的最佳激素剂量为 5IUPMSG +5IUHCG ,最合适的注射间隔时间为 48h ,处于繁殖期的雌鼠超排效果好。

补肾定喘汤对哮喘大鼠肺组织糖皮质激素受体及血浆皮质酮、ACTH的影响

目的 :研究补肾定喘汤防治支气管哮喘的可能机制。方法 :用卵蛋白致敏SD大鼠的方法建立哮喘模型 ,随机分为模型组、必可酮组、补肾定喘汤组。采用放射性配基竞争结合分析法测定肺组织糖皮质激素受体 (GR) ;用放射免疫分析法测定血浆促肾上腺皮质激素 (ACTH)和皮质酮。结果 :哮喘大鼠肺组织GR升高 (P <0 0 1) ,血浆ACTH下降 (P <0 0 1) ,血浆皮质酮降低 (P <0 0 1)。补肾定喘汤能使肺组织过高的GR水平下降 (P <0 0 5 ) ,可升高血浆ACTH和皮质酮水平(P <0 0 1)。结论 :补肾定喘汤能调节肺组织GR水平 ,兴奋垂体 肾上腺皮质系统。

肉蔻五味丸抗抑郁作用及机制研究

目的:探讨肉蔻五味丸的抗抑郁作用及其作用机制,为临床用药提供依据。方法:雄性C57BL/6小鼠随机分为空白对照组(control)、模型组(model)、盐酸氟西汀(fluoxetine 10 mg/kg)阳性药组、肉蔻五味丸低剂量(rk 0.2 g/kg)组、肉蔻五味丸高剂量(rk0.5 g/kg)组,给予慢性轻度不可预见性加孤养刺激建立抑郁模型,建模同时灌胃给予小鼠药物治疗。给药五周后,进行行为学检测(强迫游泳实验、悬尾实验和高架十字迷宫实验);LC-MS/MS法检测海马内5-羟色胺(5-HT)等神经递质含量;q PCR法检测海马内5-羟色胺1A受体(5-HT1AR)、5-羟色胺7受体(5-HT7R)、GABAA型受体(GABAAR)、GABAB型受体(GABABR)、神经生长因子(NGF)和胶质细胞源神经营养因子(GDNF)基因表达;ELISA法检测小鼠血清内促肾上腺皮质激素(ACTH)和皮质酮(COR)的含量。结果:低剂量肉蔻五味丸有效减少慢性应激导致的小鼠游泳和悬尾不动时间的增加(P<0.05),降低模型组小鼠进入高架中央区活动时间(P<0.05),逆转小鼠海马5-HT(P<0.001)、5-HT/5-HIAA(P<0.001)的降低以及GABABR(P<0.01)、NGF(P<0.01)、GDNF(P<0.001)基因表达的降低(P<0.05),并且降低血清中ACTH的水平(P<0.05)。结论:肉蔻五味丸低剂量具有抗抑郁作用,其机制可能与提高抑郁小鼠海马5-HT含量、GABABR、NGF和GDNF基因表达以及降低血清中ACTH的水平有关。

牛ACTH受体和TGFβ1的调节作用

目的观察牛肾上腺皮质细胞ACTH受体的分布和转化生长因子β1（TGFβ1）对ACTH受体的调节作用。方法牛肾上腺皮质束、网带细胞（BAC细胞）的原代培养和(125)I－ACTH特异性受体结合标记等。结果在该培养条件下，BAC细胞的受体可分为高、低两种亲和力亚型。它们在每个细胞上的数目分别为3400（高）和15000（低）个。kD分别为4．90368×10(-11)和3．53974×10(－10)mol／L。TGFβ1可减少高亲和力受体至2000个，增加低亲和力受体到33000个。它们的kD也相应地发生了改变。结论TGFβ1对受体亚型具有不同的调节作用，TGFβ1对ACTH高亲和力受体的负性调节作用和ACTH对TGFβ1受体的正性调节作用可能构成对肾上腺皮质激素生成活动调节的角反馈机制。

脑血管病患者外周血单个核细胞ACTH受体表达

采用放射配体分析及放射免疫测定法，检测了18例脑血管病患者外周血单个核细胞（PMNC）ACTH受体表达及血浆ACTH水平。结果显示：脑出血患者PMNCACTH受体表达水平及血浆ACTH含量均显著高于健康对照组（P<0.01），脑梗死患者血浆ACTH水平显著升高（P<0.01），但其PMNCACTH受体表达无明显变化（P>0.05）。上述患者免疫细胞活性检测结果表明，脑出血患者T细胞及NK细胞活性均较健康对照组明显降低（P<0.01），脑梗死患者只表现T细胞活性受抑制（P<005）。相关性分析显示，脑血管病患者PMNCACTH受体表达水平与T细胞和NK细胞活性呈负相关（P<0．01）。以上结果提示，脑血管病患者细胞免疫功能抑制效应可能是通过免疫细胞膜上ACTH受体介导的。

亚临床状态肾上腺皮质肿瘤ACTH受体的表达及临床意义

目的对比不同类型肾上腺皮质肿瘤中促肾上腺皮质激素受体(ACTH-R)表达水平的差异,探讨亚临床皮质醇分泌瘤与其他类型肾上腺皮质肿瘤的异同。方法应用荧光实时定量PCR检测不同类型肾上腺皮质肿瘤组织中ACTH-R mRNA的表达;比较不同组织中ACTH-R表达的差异,对ACTH-R在肾上腺皮质肿瘤中的表达行相关性分析。结果 ACTH-R/β-actin mRNA相对比值在正常肾上腺皮质(NC)中为0.961±0.164,醛固酮分泌瘤(APA)中为0.845±0.386,皮质醇分泌瘤(CPA)中为0.636±0.104,亚临床皮质醇分泌瘤(sub-CPA)中为1.242±0.372,肾上腺皮质无功能瘤(NFA)中为1.297±0.228。ACTH-R/β-actin mRNA相对比值在NFA及sub-CPA的表达均显著高于正常肾上腺皮质、APA和CPA(P<0.01),在CPA中的表达均显著低于其他各组(P<0.05)。结论 ACTH-R的差异表达可能是亚临床皮质醇分泌瘤内分泌功能低下的决定因素之一。

艾灸调整实验性RA大鼠HPAA功能的GR机制研究

目的:探索艾灸调整实验性类风湿性关节炎(RA)大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPAA)功能的糖皮质激素受体(GR)机制。方法:将SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、艾灸组、艾灸加注射RU28362组,用福氏完全佐剂塑造实验性RA病理模型,以GR激动剂RU28362腹腔注射作为干预研究手段,艾灸"肾俞"、"足三里"穴治疗,检测大鼠足容积,用ELISA法测定大鼠血浆CRH、ACTH、GC含量。结果:模型组大鼠足肿胀度明显高于空白对照组(P<0.01),艾灸组大鼠足肿胀度明显低于模型组(P<0.01),艾灸加注射RU28362组足肿胀度与模型组比较无显著性差异(P>0.05);与空白组对照组比较,模型组血浆CRH、GC含量显著增高(P<0.01),ACTH含量显著降低(P<0.05);艾灸组血浆CRH、GC含量明显低于模型组(P<0.01),ACTH含量明显高于模型组(P<0.05),但艾灸加注射RU28362组血浆CRH、ACTH、GC含量与模型组比较无显著性差异(P>0.05)。结论:艾灸对实验性RA具有明显的抗炎效应;艾灸对实验性RA大鼠的HPAA功能紊乱有良性调整作用;海马GR在艾灸调整实验性RA大鼠HPAA功能中具有重要作用。

ACTH和吗啡对创伤痛大鼠海马锥体神经元NMDA受体通道的抑制

目的 探讨创伤痛大鼠海马锥体神经元NMDA受体通道动力学特性的变化及ACTH和吗啡的作用。方法 实验以双侧踝关节离断大鼠为创伤痛模型 ,应用细胞贴附式膜片钳技术。结果 在正常 7～ 10d大鼠急性分离的海马CA1区锥体神经元上 ,记录到多数膜片的NMDA受体通道有两个电导水平 ,分别为 5 0pS及 3 8pS ,以 5 0pS占多数 ,且以短开放为主 ,但也有长开放通道。 3 8pS电导仅有短开放通道。大鼠双侧踝关节完全离断后 2h ,5 0pS及 3 8pS短开放通道、5 0pS长开放通道的开放概率和开放时间均比正常对照组显著增加 ,还出现了 3 8pS长开放通道。在 5 0pS短开放通道的记录中 ,ACTH1 2 4 和吗啡可显著抑制创伤大鼠海马CA1区锥体神经元NMDA受体通道的开放概率和开放时间 ;预先加入阿片受体拮抗剂纳络酮能阻断上述的抑制效应。结论 ACTH和吗啡对伤害性信息传递的调制作用可能与其通过阿片受体抑制创伤大鼠海马NMDA受体通道动力学特性的变化有关。

免疫源性的ACTH受体及5-HT1A受体表达研究

目的:通过检测ACTHR、5HT1AR蛋白及其mRNA在人淋巴组织中的表达情况,寻求神经免疫内分泌网络之间功能双向调节的形态学依据。方法:应用免疫组织化学及核酸分子原位杂交方法检测ACTHR、5HT1AR蛋白及其mRNA在人100例淋巴结、脾脏及肠道淋巴组织中的表达。结果:免疫组织化学显示ACTHR、5HT1AR在各种淋巴组织中表达的阳性率为82.5%和86.3%,与原位杂交(阳性率为70%和75%)之间无统计学差异(χ2=1.907、0.570,均P>0.05)。结论:人的免疫活性细胞不但可以表达ACTHR、5HT1AR蛋白,还可以合成其mRNA,ACTH、5HT都可以通过免疫细胞膜上的ACTHR、5HT1AR发挥对免疫系统的调节作用。

G蛋白介导组胺H_3受体调节垂体瘤At T-20细胞分泌ACTH

目的探讨G蛋白在组胺H3 受体信号转导机制中的作用。方法以高表达组胺H3 受体的垂体细胞瘤AtT 20作为观察系统 ,用放免分析法测定给予H3 受体激动剂后各时间点细胞上清液中ACTH分泌量的变化 ,并观察药物对细胞增殖的影响。结果组胺H3 受体激动剂R (α) MeHA(10 -7mol/L)作用8h ,能明显促进ACTH的释放 ,H1、H2受体激动剂无此作用 ,R (α) MeHA引起ACTH分泌的效应能被H3 受体特异性拮抗剂thioperamide所拮抗 ,而H1 受体和H2 受体拮抗剂均不影响R (α) MeHA的效应。用G蛋白失活剂NEM预处理细胞后 ,取消了R α MeHA增强AtT 20细胞分泌ACTH的效应。结论特异性激动组胺H3 受体后能引起兴奋 分泌偶联过程 ,其信号转导过程中有G蛋白的参与。

激活δ-阿片受体同时促进ACTH、β-内啡肽和催乳素的平行释放

给大鼠第三脑室微量注射δ-阿片受体激动剂DPDPE(1μg或3μg/3μl),用放射免疫法测定血浆ACTH.β-内啡肽和催乳素的含量。观察到DPDPE可显著升高大鼠血浆中上述激素水平。实验结果表明,激活δ-阿片受体可同时兴奋上述垂体前叶激素的释放;提示应激或某种病理状态下,ACTH、β-内啡肽和催乳素的相伴释放机制可能与δ-阿片受体的激活有关。

促肾上腺皮质激素的中枢抗阿片镇痛效应及其作用机制分析

本研究采用多种方法在行为学、细胞受体、受体后第二信使以及脑内Ｆｏｓ蛋白的诱导表达等多个水平，对ＡＣＴＨ的中枢抗阿片镇痛效应、作用机制以及作用部位进行了深入的观察。结果表明，ＡＣＴＨ在脊髓水平可以对抗阿片μ和δ受体介导的镇痛，不对抗κ受体所介导的镇痛。进一步研究表明，ＡＣＴＨ的这一效应可能不是直接发生在阿片受体上的对抗，而是在受体后ｃＡＭＰ和Ｃａ（２＋）信使通路上与阿片相互作用的结果。另外，ＡＣＴＨ可以诱导脑内许多核团中Ｆｏｓ蛋白的表达，其中包括与痛觉调制有关的核团，推测ＡＣＴＨ可能通过激活这些核团的神经元发挥其中枢效应。

大鼠周血淋巴细胞的EGFR、EGF基因表达及ACTH—IR的观察

本实验以２４只Ｗｉｓｔａｒ大鼠的密度梯度离心后的周血淋巴细胞作为观察对象，应用免疫组织化学方法显示ＥＧＦＲ—ＩＲ和ＡＣＴＨ—ＩＲ，用生物素标记的ｃＲＮＡ探针原位杂交显示ＥＧＦ的基因表达，此外对比观察了ＰＨＡ刺激转化的淋巴母细胞和未转化的淋巴细胞的ＡＣＴＨ－ＩＲ。结果见到淋巴细胞ＥＧＦＲ－ＩＲ呈现阳性、ＥＧＦ－ｍＲＶＡ信号呈蓝紫色颗粒布满胞质，提示淋巴细胞对ＥＧＦ可具有自分泌甚至旁分泌效应。ＡＣＴＨ－ＩＲ在未转化淋巴细胞呈弱阳性而转化的淋巴母细胞显著增强。

糖皮质激素及其受体在肾病综合征中的意义

应用受体放射分析技术检测了３４例肾病综合征（ＮＳ）患者及４０例对照组的外周血淋巴细胞糖皮质激素受体（ＧＣＲ）。结果显示：患者ＧＣＲ水平与糖皮质激素（ＧＣ）的疗效密切相关，对ＧＣ治疗敏感者，其ＧＣＲ水平高于对ＧＣ无反应者（Ｐ＜０．０１）及对照组（Ｐ＜０．０１）。同时检测了ＮＳ患者及对照组血浆促肾上腺皮质激素（ＡＣＴＨ）和皮质醇的含量，发现ＮＳ患者ＡＣＴＨ及皮质醇含量明显低于对照组（Ｐ＜０．０５），但与ＧＣ疗效未见明显相关性。

脑室注射ACTH对抗羟甲芬太尼引起的镇痛

通常中枢注射促肾上腺皮质激素（ＡＣＴＨ）能够拮抗阿片的镇痛作用，然而其机制尚未阐明。本实验用辐射热─甩尾法测定痛阈，ｓｃｍｕ型阿片受体高选择性激动剂──羟甲芬太尼（０．８μｇ·ｋｇ－１），引起明显的镇痛效应，然后ｉｃｖＡＣＴＨ。发现小剂量的ＡＣＴＨ（１５．６～２５０ｎｇ）即可剂量依赖性抑制羟甲芬太尼的镇痛效应，其最大抑制率为７７．３％，半数有效量为１０７ｎｇ。单独注射ＡＣＴＨ２５０ｎｇ对基础病阈无影响。结果提示，ＡＣＴＨ在ｍｕ型阿片受体介导的镇痛中起重要作用。

注射ACTH对断奶母猪卵泡促黄体素受体表达及卵泡液中类固醇激素合成的影响

[目的]为了探讨应激对断奶母猪繁殖障碍的影响机制,本试验以促肾上腺皮质激素(ACTH)注射所致的应激模型来研究应激对断奶母猪卵泡液中类固醇激素合成及卵泡促黄体素受体表达的影响。[方法]对10头苏淮断奶母猪进行颈静脉插管手术,随机均分为对照组与ACTH处理组(n=5)。手术第3天开始以每次间隔8 h给ACTH处理组母猪注射ACTH(1 IU·kg-1),对照组母猪注射生理盐水,连续注射7 d。利用ELISA方法检测受试母猪卵泡液中类固醇激素及血浆中皮质醇的含量变化;利用荧光定量PCR测定胆固醇侧链裂解酶(CYP11A1)、17α-羟化酶(CYP17A1)、芳香化酶(CYP19A1)、类固醇激素合成急性期调节蛋白(St AR)、3β羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)、促黄体素受体(LHR)等基因的表达;利用免疫组化法检测CYP17A1、CYP19A1、LHR和3β-HSD蛋白的表达。[结果]人工注射ACTH后40%的受试母猪出现排卵障碍;其血浆中皮质醇的含量极显著升高(P<0.01);母猪卵泡液中雌二醇、雄烯二酮含量均显著下降(P<0.05);CYP17A1、CYP19A1、LHR和3β-HSD基因表达量降低,其编码的蛋白CYP17A1、CYP19A1、LHR和3β-HSD表达量也明显下降。[结论]ACTH注射所致应激过程中,受试母猪的皮质醇含量升高可导致类固醇合成酶的基因、蛋白表达量明显下降,从而影响类固醇激素的合成及卵泡的发育。类固醇激素合成降低及LHR的低表达影响断奶母猪的正常排卵。

ACTH受体在糖尿病及高血压病患者外周血单个核细胞上的表达

采用放射配体测定法，检测了糖尿病及高血压患者外周血单个核细胞表面ACTH受体表达。结果显示：糖尿病患者外周血单个核细胞ACTH受体表达明显高于健康对照组（P＜0．05），但其外周血中ACTH水平与健康对照组比较并无明显变化（P＞0.05）；高血压患者外周血单个核细胞ACTH受体表达与健康对照组比较无明显增加，外周血中ACTH含量则明显高于健康对照组（P＜0.05）。提示：ACTH受体与ACTH含量在疾病中的变化并非完全一致，在糖尿病中ACTH受体表达的上升，可能更具有病理学意义。

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试谈有机化学课堂教学的导入原则和方法化学教研室（０４６０００）王雁章课堂教学的导入是指课堂教学的开头，它起着酝酿情绪、提示内容、带入环境的作用。一个好的导入可以抓住学生的心弦，引起学生的求知欲望，调动学生的积极主动性，加强师生间的双边活动，从而为课堂...

股骨距解剖与X线初步观察

本文通过对股骨距的解剖及Ｘ线观察，结合１２１份Ｘ线片分析，初步研究了股骨距的解剖及Ｘ线表现，结合文献讨论了其力学及临床意义。Ｘ线下可有三种形态，并观察到小儿的股骨距Ｘ线像。