目的研究人脑胶质瘤中含血小板结合蛋白基序的解聚素金属4(ADAMTS4)蛋白酶和ADAMTS5蛋白酶的表达及其与胶质瘤病理分级之间的关系。方法采用免疫组化Envision二步法检测ADAMTS4及ADAMTS5蛋白酶在44例不同级别脑胶质瘤、11例瘤周脑组织...目的研究人脑胶质瘤中含血小板结合蛋白基序的解聚素金属4(ADAMTS4)蛋白酶和ADAMTS5蛋白酶的表达及其与胶质瘤病理分级之间的关系。方法采用免疫组化Envision二步法检测ADAMTS4及ADAMTS5蛋白酶在44例不同级别脑胶质瘤、11例瘤周脑组织中的表达,计算阳性细胞百分率,并通过Image Pro Plusversion 6.0(IPP)图像分析软件测量计算其平均光密度(MOD)值。结果 (1)ADAMTS4和ADAMTS5蛋白酶在瘤周脑组织中不表达或极低表达,而在胶质瘤组织中高表达,为棕黄色,主要表达定位于细胞外基质及细胞质中,两组差异有统计学意义(P<0.05)。进一步研究显示,其蛋白表达量随着肿瘤级别的升高而升高,WHO分级中低级别、高级别间差异有统计学意义(P<0.05)。(2)ADAMTS4与ADAMTS5蛋白酶在胶质瘤中表达呈正相关性(χ~2=5.614,r=0.357,P<0.05)。结论(1)ADAMTS4、ADAMTS5蛋白表达量随着胶质瘤级别的升高而升高,提示了ADAMTS4及ADAMTS5蛋白酶在胶质瘤的进展、侵袭中发挥着重要作用。(2)ADAMTS4与ADAMTS5蛋白表达呈正相关性,揭示了在胶质瘤的发生发展中这两种蛋白酶可能互相协同,两者的过表达共同促进了胶质瘤的侵袭。展开更多
背景:目前对骨关节患者滑膜、关节软骨中相关降解酶的研究较多,对关节液中相关因子的检测亦有报道,但有关不同病变分期相关因子表达情况的报道较少,且其与病变程度相关性研究报道亦相对较少。目的:检测不同分期骨关节炎患者关节液中细...背景:目前对骨关节患者滑膜、关节软骨中相关降解酶的研究较多,对关节液中相关因子的检测亦有报道,但有关不同病变分期相关因子表达情况的报道较少,且其与病变程度相关性研究报道亦相对较少。目的:检测不同分期骨关节炎患者关节液中细胞外调节蛋白激酶、基质金属蛋白酶13和人类含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶4/5(a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin-like motifs,ADAMTS4/5)的表达。方法:选择2016年10月至2017年12月在石河子大学医学院第一附属医院骨科行关节镜手术的骨关节炎患者94例,根据临床症状与K-L X射线分级分为早期组(n=27)、中期组(n=32)、晚期组(n=35);选择行截肢的健康患者、单纯膝外伤行关节镜检查者及自愿参与试验的门诊体检者10例,作为对照组。采集4组受试者关节液,采用荧光定量PCR法和ELISA法检测细胞外调节蛋白激酶、基质金属蛋白酶13和ADAMTS4/5的表达情况。试验经石河子大学医学院第一附属医院医学伦理委员会批准,批准号:2017-052-01。结果与结论:①荧光定量PCR检测:早、中、晚期组的各基因表达均高于对照组(P<0.001),早、中、晚期组的细胞外调节蛋白激酶、基质金属蛋白酶13基因表达呈逐渐上升趋势(P<0.01),早期组ADAMTS4/5基因表达高于中、晚期组(P<0.01);②ELISA检测:早、中、晚期组的关节液中各因子表达均高于对照组(P<0.001),早、中、晚期组的细胞外调节蛋白激酶、基质金属蛋白酶13表达呈逐渐上升趋势(P<0.01),早期组ADAMTS4/5表达高于中、晚期组(P<0.01);③相关性分析:细胞外调节蛋白激酶与基质金属蛋白酶13表达水平呈正相关关系(P<0.01),ADAMTS4与ADAMTS5表达呈正相关关系(P<0.01),ADAMTS4、ADAMTS5与细胞外调节蛋白激酶、基质金属蛋白酶13表达水平呈负相关关系(P<0.05);④结果表明:细胞外调节蛋白激酶、基质金属蛋白酶13及ADAMTS4/5的表达与膝骨性关节炎临床症状较为密切,研究这些因子在骨性关节炎不同分期中的分子机制,有望为临床诊断及预后判定提供一定的依据。展开更多
目的探讨含Ⅰ型血小板反应蛋白的解聚素金属蛋白酶5(a disintegrin and metalloprotease with thrombospondinmotifs 5,ADAMTS-5)蛋白在食管癌组织中的表达,对食管癌细胞增殖及迁移能力的影响,并分析其对患者预后影响的临床意义。方法...目的探讨含Ⅰ型血小板反应蛋白的解聚素金属蛋白酶5(a disintegrin and metalloprotease with thrombospondinmotifs 5,ADAMTS-5)蛋白在食管癌组织中的表达,对食管癌细胞增殖及迁移能力的影响,并分析其对患者预后影响的临床意义。方法选取正常食管上皮细胞株(HEEC)和4株食管鳞状细胞癌细胞株(TE1、TE10、TE11以及Eca109),采用蛋白质印迹法检测ADAMTS-5蛋白在细胞内的表达。通过RNA干扰技术在食管鳞状细胞癌细胞株TE10中转染ADAMTS-5-shRNA和Neg-shRNA后采用蛋白质印迹法检测ADAMTS-5蛋白的表达,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、划痕实验检测干扰ADAMTS-5表达对TE10细胞增殖以及迁移的影响。采用免疫组化法检测2009-04-15-2012-11-20南通大学附属医院97例食管鳞癌组织中ADAMTS-5蛋白的表达,分析其表达与患者临床病理特征及预后的关系。结果在食管鳞癌细胞株TE1、TE10、TE11和Eca109中ADAMTS-5蛋白相对表达量分别为2.10±0.06、5.70±0.21、4.50±0.32和4.60±0.39,明显高于食管正常上皮细胞株HEEC蛋白相对表达量(1.10±0.07),其中在TE10中的表达强度最高。使用小干扰技术转染TE10细胞株48h后,蛋白质印迹法检测结果显示,以GAPDH为内参照,未处理组、阴性对照组和干扰组的ADAMTS-5蛋白相对表达量分别为1.00±0.05、1.10±0.09和0.50±0.07,干扰组蛋白表达相比阴性对照组(P<0.001)和未处理组(P<0.001)明显下降;MTT法检测结果显示,转染72h后,未处理组、阴性对照组和干扰组的增殖率分别为(100.00±10.02)%、(98.04±9.80)%和(72.19±12.24)%,干扰组相比阴性对照组(P<0.001)和未处理组(P<0.001)细胞增殖明显抑制;在划痕24h后,干扰组迁移率为(46.34±1.27)%,而阴性对照组为(73.17±1.54)%,干扰组迁移能力明显抑制,t=40.33,P<0.001;ADAMTS-5蛋白表达在97例食管鳞癌组织中的阳性率为59.79%(58/97),明显高于癌旁组织的28.87%(28/97),与分化程度、淋巴结转移、临床分期和浸润深度相关(P<0.05),而与性别、年龄无关(P>0.05)。58例阳性患者的中位生存时间为32.45个月,39例阴性患者的中位生存时间为42.3个月,差异有统计学意义,χ~2=8.399,P=0.004。Cox回归多因素分析显示,ADAMTS-5表达是判断食管鳞癌预后的重要因素,χ~2=5.429,P=0.020。结论 ADAMTS-5蛋白在食管鳞癌细胞和组织中高表达,能促进肿瘤细胞的增殖和迁移能力,并影响食管鳞癌患者的预后。ADAMTS-5有望成为食管鳞癌的生物标志物、评价预后的指标和治疗的新靶点。展开更多
文摘目的研究人脑胶质瘤中含血小板结合蛋白基序的解聚素金属4(ADAMTS4)蛋白酶和ADAMTS5蛋白酶的表达及其与胶质瘤病理分级之间的关系。方法采用免疫组化Envision二步法检测ADAMTS4及ADAMTS5蛋白酶在44例不同级别脑胶质瘤、11例瘤周脑组织中的表达,计算阳性细胞百分率,并通过Image Pro Plusversion 6.0(IPP)图像分析软件测量计算其平均光密度(MOD)值。结果 (1)ADAMTS4和ADAMTS5蛋白酶在瘤周脑组织中不表达或极低表达,而在胶质瘤组织中高表达,为棕黄色,主要表达定位于细胞外基质及细胞质中,两组差异有统计学意义(P<0.05)。进一步研究显示,其蛋白表达量随着肿瘤级别的升高而升高,WHO分级中低级别、高级别间差异有统计学意义(P<0.05)。(2)ADAMTS4与ADAMTS5蛋白酶在胶质瘤中表达呈正相关性(χ~2=5.614,r=0.357,P<0.05)。结论(1)ADAMTS4、ADAMTS5蛋白表达量随着胶质瘤级别的升高而升高,提示了ADAMTS4及ADAMTS5蛋白酶在胶质瘤的进展、侵袭中发挥着重要作用。(2)ADAMTS4与ADAMTS5蛋白表达呈正相关性,揭示了在胶质瘤的发生发展中这两种蛋白酶可能互相协同,两者的过表达共同促进了胶质瘤的侵袭。
文摘背景:目前对骨关节患者滑膜、关节软骨中相关降解酶的研究较多,对关节液中相关因子的检测亦有报道,但有关不同病变分期相关因子表达情况的报道较少,且其与病变程度相关性研究报道亦相对较少。目的:检测不同分期骨关节炎患者关节液中细胞外调节蛋白激酶、基质金属蛋白酶13和人类含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶4/5(a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin-like motifs,ADAMTS4/5)的表达。方法:选择2016年10月至2017年12月在石河子大学医学院第一附属医院骨科行关节镜手术的骨关节炎患者94例,根据临床症状与K-L X射线分级分为早期组(n=27)、中期组(n=32)、晚期组(n=35);选择行截肢的健康患者、单纯膝外伤行关节镜检查者及自愿参与试验的门诊体检者10例,作为对照组。采集4组受试者关节液,采用荧光定量PCR法和ELISA法检测细胞外调节蛋白激酶、基质金属蛋白酶13和ADAMTS4/5的表达情况。试验经石河子大学医学院第一附属医院医学伦理委员会批准,批准号:2017-052-01。结果与结论:①荧光定量PCR检测:早、中、晚期组的各基因表达均高于对照组(P<0.001),早、中、晚期组的细胞外调节蛋白激酶、基质金属蛋白酶13基因表达呈逐渐上升趋势(P<0.01),早期组ADAMTS4/5基因表达高于中、晚期组(P<0.01);②ELISA检测:早、中、晚期组的关节液中各因子表达均高于对照组(P<0.001),早、中、晚期组的细胞外调节蛋白激酶、基质金属蛋白酶13表达呈逐渐上升趋势(P<0.01),早期组ADAMTS4/5表达高于中、晚期组(P<0.01);③相关性分析:细胞外调节蛋白激酶与基质金属蛋白酶13表达水平呈正相关关系(P<0.01),ADAMTS4与ADAMTS5表达呈正相关关系(P<0.01),ADAMTS4、ADAMTS5与细胞外调节蛋白激酶、基质金属蛋白酶13表达水平呈负相关关系(P<0.05);④结果表明:细胞外调节蛋白激酶、基质金属蛋白酶13及ADAMTS4/5的表达与膝骨性关节炎临床症状较为密切,研究这些因子在骨性关节炎不同分期中的分子机制,有望为临床诊断及预后判定提供一定的依据。
文摘目的探讨含Ⅰ型血小板反应蛋白的解聚素金属蛋白酶5(a disintegrin and metalloprotease with thrombospondinmotifs 5,ADAMTS-5)蛋白在食管癌组织中的表达,对食管癌细胞增殖及迁移能力的影响,并分析其对患者预后影响的临床意义。方法选取正常食管上皮细胞株(HEEC)和4株食管鳞状细胞癌细胞株(TE1、TE10、TE11以及Eca109),采用蛋白质印迹法检测ADAMTS-5蛋白在细胞内的表达。通过RNA干扰技术在食管鳞状细胞癌细胞株TE10中转染ADAMTS-5-shRNA和Neg-shRNA后采用蛋白质印迹法检测ADAMTS-5蛋白的表达,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、划痕实验检测干扰ADAMTS-5表达对TE10细胞增殖以及迁移的影响。采用免疫组化法检测2009-04-15-2012-11-20南通大学附属医院97例食管鳞癌组织中ADAMTS-5蛋白的表达,分析其表达与患者临床病理特征及预后的关系。结果在食管鳞癌细胞株TE1、TE10、TE11和Eca109中ADAMTS-5蛋白相对表达量分别为2.10±0.06、5.70±0.21、4.50±0.32和4.60±0.39,明显高于食管正常上皮细胞株HEEC蛋白相对表达量(1.10±0.07),其中在TE10中的表达强度最高。使用小干扰技术转染TE10细胞株48h后,蛋白质印迹法检测结果显示,以GAPDH为内参照,未处理组、阴性对照组和干扰组的ADAMTS-5蛋白相对表达量分别为1.00±0.05、1.10±0.09和0.50±0.07,干扰组蛋白表达相比阴性对照组(P<0.001)和未处理组(P<0.001)明显下降;MTT法检测结果显示,转染72h后,未处理组、阴性对照组和干扰组的增殖率分别为(100.00±10.02)%、(98.04±9.80)%和(72.19±12.24)%,干扰组相比阴性对照组(P<0.001)和未处理组(P<0.001)细胞增殖明显抑制;在划痕24h后,干扰组迁移率为(46.34±1.27)%,而阴性对照组为(73.17±1.54)%,干扰组迁移能力明显抑制,t=40.33,P<0.001;ADAMTS-5蛋白表达在97例食管鳞癌组织中的阳性率为59.79%(58/97),明显高于癌旁组织的28.87%(28/97),与分化程度、淋巴结转移、临床分期和浸润深度相关(P<0.05),而与性别、年龄无关(P>0.05)。58例阳性患者的中位生存时间为32.45个月,39例阴性患者的中位生存时间为42.3个月,差异有统计学意义,χ~2=8.399,P=0.004。Cox回归多因素分析显示,ADAMTS-5表达是判断食管鳞癌预后的重要因素,χ~2=5.429,P=0.020。结论 ADAMTS-5蛋白在食管鳞癌细胞和组织中高表达,能促进肿瘤细胞的增殖和迁移能力,并影响食管鳞癌患者的预后。ADAMTS-5有望成为食管鳞癌的生物标志物、评价预后的指标和治疗的新靶点。
