ADH1B对肝细胞癌合并脉管侵犯患者的预后价值及肝癌生物学行为的影响

目的探讨乙醇脱氢酶1B(alcohol dehydrogenase 1B,ADH1B)分子在合并脉管侵犯的肝细胞癌(hepatocellular carcinoma with vascular invasion,VI-HCC)患者中的临床价值及对肝癌细胞生物学功能的影响。方法对VI-HCC组织进行RNA测序及GO、KEGG、GSEA、WGCNA等分析。采用免疫组织化学法检测组织中的ADH1B蛋白表达水平。采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线并运用log-rank检验分析不同ADH1B蛋白表达组患者的生存差异,单因素及多因素Cox回归模型分析影响VI-HCC患者术后预后的独立危险因素,Spearman检验分析ADH1B与AFP、Ki67的相关性。用过表达ADH1B及其阴性对照的慢病毒感染肝癌Huh7细胞以构建ADH1B过表达的稳转株,采用qRT-PCR法检测细胞中ADH1B mRNA的表达水平。采用EDU、平板克隆形成实验检测细胞的增殖能力,Transwell侵袭、迁移实验及划痕实验检测细胞的侵袭、迁移能力,流式细胞术检测细胞的凋亡能力。结果RNA测序结果发现VI-HCC根治术后预后不良的患者原发瘤呈代谢重编程特征。免疫组织化学结果显示VI-HCC的癌组织中ADH1B蛋白表达水平显著低于癌旁正常组织(P<0.001);预后良好组患者的ADH1B蛋白表达水平显著高于预后不良组(P<0.05);ADH1B低表达可缩短患者的无复发生存期(relapse-free survival,RFS)和总生存期(overall survival,OS)(均P<0.01);ADH1B表达水平与AFP、Ki67水平呈负相关趋势(均P<0.01)。Cox回归模型结果显示,ADH1B低表达是影响VI-HCC患者术后RFS和OS的独立危险因素。细胞学实验结果发现过表达ADH1B可抑制细胞的增殖、侵袭、迁移能力,促进其凋亡能力(均P<0.05)。结论肝脏代谢-解毒相关基因ADH1B在HCC中表达下调且其低表达缩短VI-HCC患者的RFS和OS,可能的机制是ADH1B抑制HCC细胞的增殖、侵袭和迁移的能力,促进HCC细胞的凋亡能力。

真武汤对慢性心力衰竭患者RASS系统活性及血清NT-proBNP、ADH水平影响的研究

目的分析真武汤对慢性心力衰竭患者RASS系统活性及血清NT-proBNP、ADH水平的影响。方法选取江西中医药大学第二附属医院2020年1月至2021年11月收治的150例慢性心力衰竭患者为研究对象,以随机数字表法将其分为治疗组和对照组,每组75例患者。对照组行常规西药治疗,治疗组则在对照组基础上加用真武汤治疗。对比两组临床疗效与治疗前后肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RASS系统)活性(肾素、血管紧张素Ⅱ、醛固酮),脑钠肽前体(NT-proBNP),血浆抗利尿激素(ADH)水平。结果两组治疗前RASS系统活性与血清NT-proBNP、ADH水平数据对比差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,治疗组临床总有效率高于对照组,且治疗后血清肾素、血管紧张素Ⅱ、醛固酮及血清NT-proBNP、ADH水平均低于对照组,组间对比差异均有统计学意义(P<0.05)。结论真武汤利于降低慢性心力衰竭患者RASS系统活性及血清NT-proBNP、ADH水平,提高临床治疗效果。

嗜鞣管囊酵母adh2基因克隆及其原核表达

通过对不同酵母乙醇脱氢酶Ⅱ基因的多重同源性分析比对,克隆出嗜鞣管囊酵母P-01(Pachysolen tan-nophilus)乙醇脱氢酶Ⅱ基因的一段长为340 bp的片段(EU570211).利用RACE技术,扩增出嗜鞣管囊酵母P-01adh2基因的全长ORF(1 056 bp).将基因与pMD18-T载体连接,验证后测序.经酶切、酶连到表达载体pET-20b并成功构建了基因的原核表达载体pET-20b-adh2,在E.coliBL21(DE3)中诱导表达出adh2重组蛋白,主要以包涵体的形式存在,预期大小约为35 kD.

基于Adh基因家族序列的牡丹组(Sect.MoutanDC.)种间关系

测定了牡丹组 7个种 10个野生居群共 10份样品的全部Adh1A、Adh1B和Adh2基因序列。结合前人已报道的牡丹野生种的Adh基因序列 ,以芍药组 (Sect .Paeonia)和北美芍药组 (Sect.Oneapia)的种作外类群 ,用PAUP (4 0b 4a)计算机程序构建了牡丹组全部 8个种的Adh1A、Adh1B和Adh2基因树 (最大简约树和邻接树 ) ,同时进行了Adh1A、Adh1B和Adh2基因序列的合并分析。结果表明 ,牡丹组的 8个种分为两个具有 90 %以上自展值支持的单系分支 ,分别对应Stern (194 6 )根据形态划分的革质花盘亚组 (Subsect .Vaginatae)和肉质花盘亚组 (Subsect.Delavayanae)。在革质花盘亚组内 ,本研究结果支持银屏牡丹 (Paeoniasuffruticosassp .yinpingmudan)和凤丹 (P .ostii)、紫斑牡丹 (P .rockii)和四川牡丹 (P .decomposita)以及矮牡丹 (P .jishanensis)和卵叶牡丹 (P .qiui)各种之间有更近的亲缘关系 ,但有关牡丹复合体 (P .suffruticosacomplex)内各种间更进一步的关系还有待进一步研究。根据Adh基因树并结合前人的结果对牡丹组的种间关系进行了详细的讨论。

米根霉乙醇脱氢酶(ADH)突变菌株的诱变选育

米根霉发酵生产L-乳酸过程中,由于丙酮酸在丙酮酸脱羧酶、乙醇脱氢酶(ADH)催化下生成乙醇,使得丙酮酸向乳酸转化的流量减少。采用亚硝基胍(NTG)诱变米根霉AS3．3462孢子液,诱变剂量为0．15 mg/ mL时,致死率为70%～80%。在含丙烯醇的YPD筛选培养基上筛选获得两株ADH活力降低的突变株mut-1和mut-2,检测突变株mut-1和mut-2的最大ADH活力分别为35．67和43．09U/mL,是原始菌株的41．63%和50．29%。发酵72h后,原始菌株的乙醇与乳酸浓度分别为28．9g/L和40．31g/L,而mut-1和mut-2突变株的乙醇产量分别为4．87g/L和6．56g/L,乳酸产量为54．45g/L和44．07g/L。在相同的发酵条件下,米根霉ADH突变株mut-1和mut-2对还原糖的利用速率高于出发菌株,其生物量积累亦高于出发菌株。

薏苡仁多糖不同组分对脾虚水湿不化模型大鼠血清VIP、ADH、ALD的影响

目的:研究薏苡仁多糖不同组分对脾虚水湿不化模型大鼠血清VIP、ADH、ALD的影响,探讨薏苡仁多糖改善机体水液代谢的作用机制。方法:采用高脂低蛋白饮食加力竭游泳法复制脾虚水湿不化大鼠模型,水负荷实验检测水负荷指数和6 h尿量,采用ELISA方法观察薏苡仁多糖不同组分对模型大鼠血清VIP、ADH、ALD的影响。结果:给药干预后,与模型组相比,各用药组大鼠水负荷指数明显降低(P<0.05),尿量明显增多(P<0.01);薏苡仁粗多糖组和薏苡仁多糖组分Ⅰ组大鼠血清VIP、ADH、ALD明显降低(P<0.05)。结论:薏苡仁多糖不同组分能改善脾虚水湿不化大鼠水液代谢功能,其中薏苡仁多糖组分Ⅰ作用最明显,其作用机理与降低血清VIP、ADH、ALD水平有关。

洛阳市汉族群体ADH2和ALDH2的基因多态性研究

为研究洛阳市汉族群体ADH2和ALDH2基因的多态性分布,应用聚合酶链反应-扩增片段长度多态性（PCR-APLP）分析法,对ADH2基因外显子3和ALDH2基因外显子12的特定片段同时进行特异性扩增,用非变性的聚丙烯酰胺垂直凝胶电泳和DNA银染方法判定基因型。ADH2＊1和ADH2＊2等位基因频率分别为42.86％和57.14％,ADH2＊1/＊1、＊1/＊2和＊2/＊2的基因型频率分别为22.86％、40.00％和37.14％;AL-DH2＊1和ALDH2＊2的等位基因频率分别为85.24％和14.76％,ALDH2＊1/＊1、＊1/＊2和＊2/＊2的基因型频率分别为71.43％、27.62％和0.95％。洛阳市汉族群体ADH2和ALDH2的等位基因频率和基因型频率不同于台湾人和上海人,ALDH2＊1/＊1基因型频率明显高于上海人和台湾人的。因而,洛阳市居民对酒精的耐受性比上海人和台湾人强。

阿特拉津降解菌ADH-2的分离、鉴定及其特性研究

从长期施用阿特拉津的玉米地中采集土样,通过富集培养的方法分离出一株能以阿特拉津为唯一碳、氮源生长的细菌ADH-2,结合生理生化特性及16S rRNA基因的相似性分析将其初步鉴定为节杆菌属(Arthrobacter sp.)。该菌在10h内对100mg.L-1阿特拉津的降解率为99.9%。外加氮源能促进菌株的生长,但对阿特拉津的降解有轻微的抑制作用。外加蔗糖和葡萄糖能显著促进菌株的生长,但对阿特拉津的降解表现出显著的抑制。而淀粉既能促进菌株的生长又能促进阿特拉津的降解。对其降解基因的初步研究显示,该菌含有trzN、atzB和atzC3个阿特拉津降解相关基因。通过与本实验室另外两株阿特拉津降解菌比较,菌株ADH-2具有更好的应用潜力。

限氧与通氧条件下米根霉ADH突变株的碳代谢特性

目的乙醇脱氢酶(ADH)是米根霉发酵生产L-乳酸代谢途径中的支路关键酶,选育米根霉ADH突变株,降低ADH活力,可以提高乳酸转化率。方法利用亚硝基胍(NTG)诱变米根霉As3.3462,在含丙烯醇的YPD选择培养基上筛选获得ADH突变株,研究了突变菌株在限氧与通氧条件下的乙醇、乳酸、ADH与L-乳酸脱氢酶(LDH)的特性。结果获得11株ADH突变株,其中mut-2突变株在通氧和限氧条件下对乳酸的转化率比出发菌株分别提高了84.6%和175%,而对乙醇的转化分别下降了39.5%和59.8%。mut-2突变株的最大ADH活力在通氧和限氧条件下均比出发菌株降低,而LDH活力在限氧条件下显著增加,通氧条件下变化不明显。结论氧气的供给对米根霉发酵产L-乳酸的产物组成比例影响很大,限氧发酵条件下ADH活力提高,乙醇积累。结果还表明,通过筛选米根霉ADH突变株,是获得L-乳酸高产菌株的一种简单快速的有效手段。

酿酒酵母ADH3基因的敲除

设计含有与酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)编码乙醇脱氢酶Ⅲ的ADH3基因ORF两侧序列同源的长引物,以质粒pUG6为模板进行PCR构建带有Cre/loxP系统的敲除组件。转化酿酒酵母YS3(Saccharomyces cerevisiae),并将质粒pSH65转入阳性克隆子。半乳糖诱导表达Cre酶切除Kanr基因,在YPD培养基中连续传代培养丢失pSH65质粒,在原ORF处留下一个loxP位点,获得ADH3单倍体缺陷型菌株。利用同样的方法再次敲除双倍体的另一个等位基因。最终获得ADH3双倍体基因缺陷型突变株YS3-ADH3。

基于形态性状及Adh1基因序列的芒与五节芒自然杂交现象研究

本研究通过对13份芒与五节芒17个形态性状及Adh1基因序列的分析,探讨了芒与五节芒的自然杂交现象。形态性状聚类分析结果表明,疑似杂交种AD431与五节芒类群(AA335和AD625)聚为一类,疑似杂交种AA343、AD431、AD628、AD607、AD633和AD606与芒类群(AD623、AD512、AD620、AD619和AD627)聚为一类。Adh1基因序列聚类分析结果表明,五节芒和芒的材料分别聚成2个明显分开的分支,所有的疑似杂交种中均检测到2种Adh1基因单倍型的存在,其中1个单倍型在系统树中与芒聚为一类,另1个单倍型与五节芒聚为一类。本研究的结果确证了AD431、AD431、AD628、AD607、AD633和AD606这6个疑似杂交种的真实性,证实了芒与五节芒种间确实存在自然杂交现象,为进一步阐明芒和五节芒的系统进化与亲缘关系提供了重要的理论依据。

基于Adh1基因分析高粱属的系统进化关系

高梁属中有重要的粮食作物和优良牧草,也有农业生产上的重要杂草。文章旨在进一步从分子水平阐明高梁属种间的系统进化关系,为有效利用种质资源进行分子育种改良作物品质提供理论依据,并明确检疫性杂草的分类地位。根据二色高粱(Sorghum bicolor)的Adh1全基因序列(GenBank登录号:AF050456)设计引物,扩增并测定黑高粱(S.almum)、假高粱(S.halepense)、丝克高粱(S.silk)和苏丹草(S.sudanense)共计8个植物材料约2 000 bp的Adh1基因部分序列,结合GenBank中其他24个Sorghum属的同源序列,以Cleistachne sorghoides的对应序列为外群,进行了高梁属的亲缘关系分析,用MP、ML和NJ法分别构建了分子进化树,得到了基本相同的拓扑结构。结果显示:(1)高梁属可明显分为三大支,一支是蒴柄高梁(Chaetosorghum)和异高梁(Heterosorghum)二个亚属,一支是优高梁亚属(Eusorghum),这两个分支包含2n=20、40,染色体较小的种类,另一分支包括拟高梁(Parasorghum)和有柄高梁(Stiposorghum)两个亚属,包含2n=10的种类和它们的多倍体近缘种,染色体相对较大;(2)S.almum的Adh1基因表现出明显的地理分化;(3)Parasorghum亚属的S.pur-pureosericeum和多色高粱(S.versicolor)、光高粱(S.nitidum)和S.leiocladum聚在一起,而该亚属中的S.mata-rankense、S.grande、S.timorense却与亚属Stiposorghum的种聚在一起,表现出更近的亲缘关系;(4)S.mac-rospermum和S.laxiflorum之间具有比其他高梁属种更近的亲缘关系。

ADH2,ALDH2和CYP4502E1遗传多态性与云南汉族酒依赖综合征患者的关联研究

背景:酒精依赖综合征,也称为酒精中毒或者酒精成瘾,与遗传、生理、心理、社会环境等诸多因素有关。目前的研究揭示,酒依赖是一种多因子控制的复杂疾病,由多个基因共同控制,并且是遗传因素与环境因素以一种极其复杂的方式相互作用下的产物,而超过一半的饮酒风险度由遗传因素决定。与酒精依赖有关的基因主要包括两大类:一类是药物代谢动力学基因,这类基因编码的蛋白质是乙醇在体内代谢的重要酶类,包括乙醇脱氢酶(alcohol deydrogenase,ADH)基因,乙醛脱氢酶(aldehyde dehydrogenase,ALDH)基因,细胞色素P450第2家族E亚系多肽1(cytochromeP450,family2,subfamilyE,polypeptide1,CYP2E1);另一类是药物效应动力学基因,这类基因编码的蛋白质与乙醇在大脑的蓄积及随后产生的一系列精神依赖密切相关,主要包括儿茶酚氧位甲基转移酶(catechol-O-methyltransferase,COMT)基因、多巴胺受体D2(dopamine receptor D2,DRD2)基因、5-羟色胺受体(5-hydroxytryptamine receotor,5-HTR)基因、γ-氨基丁酸A受体β3(γ-aminobutyric acid Areceptor β3,GABAAβ3)基因、多巴胺转运体(dopamine transporter,DAT)基因和μ阿片受体基因(Mu opioid receptor gene,OPRM1)。目的:研究ADH2,ALDH2和CYP4502E1基因多态性与云南汉族酒依赖患者的相关性。本课题对云南汉族酒依赖患者组和非酒依赖对照组人群的ADH2、ALDH2和CYP2E1三个乙醇代谢相关基因多态性进行研究,探讨云南汉族ADH2、ALDH2和CYP2E1基因多态性和酒依赖的相关性,旨在从分子遗传学角度探讨酒精依赖综合征的发病机制,寻找其发生的潜在危险因素,为进一步开展酒精依赖综合征的病因学以及遗传学研究寻找理论依据。方法:选择2006-20083a来云南省精神病医院酒精依赖治疗科住院治疗患者80例。入组标准:(1)年龄21-65a,性别不限,汉族;(2)符合《精神疾病的诊断及统计手册》(DSMIV)酒依赖诊断标准;(3)饮酒10a以上,每天饮酒二两以上(白酒)或六瓶啤酒以上。排除标准:(1)精神分裂症、心理障碍、强迫症或其他严重精神障碍病史;(2)其他药物滥用史或成瘾史(烟草除外);(3)精神疾病阳性家族史。以及来自昆明医学院第一附属医院体检中心100例健康体检者作为对照组,其民族、年龄与上述病例组相匹配,既往无精神病史及精神疾病阳性家族史。结果:酒依赖患者组和健康对照组相比较,ADH2基因座ADH2*1/ADH2*1、ADH2*1/ADH2*2、ADH2*2/ADH2*2三种基因型的分布无显著差异(P>0.05),ADH2*1和ADH2*2两种等位基因分布有差异(P<0.05),在健康对照组ADH2*2等位基因频率高于酒依赖患者组;ALDH2基因座基因型及等位基因分布均差异有统计学意义(P>0.05),在健康对照组ALDH2*1/*2基因型及ALDH2*2等位基因频率高于酒依赖患者组;CYP4502E1基因座c1/c1和c1/c2两种基因型的分布差异具有统计学意义(P<0.05),c1/c2基因型在酒依赖患者组升高;c1和c2两个等位基因分布差异有统计学意义(P<0.05),c2等位基因在酒依赖患者组频率升高。结论:ADH2*2和ALDH2*2等位基因对于酒依赖发病有保护作用,而c2等位基因在酒依赖的发生中起一定的作用。

从哮喘豚鼠血浆ADH和尿AQP-2的改变探讨肺主宣降的实质

目的:探讨肺气的宣降运动与水液代谢之间的相关性,揭示肺主宣降的实质。方法:豚鼠85只随机分为对照组(40只)和哮喘组(即肺失宣降组,采用卵蛋白致敏法造模,45只),Bradford法检测各组豚鼠尿AQP-2(水通道蛋白2)含量,放免法(RIA)检测血浆ADH(抗利尿激素)浓度。结果:与对照组相比,哮喘组豚鼠小便量显著减少(P<0.05)、血浆ADH及尿AQP-2均显著升高(P<0.05、P<0.01)。结论:肺气宣降运动实质包含对体内水液代谢的影响,其机制是哮喘(肺失宣降)状态下,ADH和AQP-2合成和释放量明显增多,抑制豚鼠体内水液代谢速度,并导致小便量减少。指示性摘要:本论文以哮喘豚鼠为研究对象,探讨肺气的宣降运动与水液代谢之间的相关性,揭示肺主宣降的实质,为中医多角度治疗肺系疾病提供实验依据。

乙醇脱氢酶(ADH)产酶菌株的选育

从食醋生产企业的醋醅中采集样品,以乙醇为唯一碳源,用碳酸钙透明圈平板法分离出185株菌株,然后以产酸量和耐乙醇能力为标准,瓶发酵选育出20株ADH产酶菌株；A5-2产酸量为49.85 g/L,耐乙醇能力强,A5-2的菌种形态学和16S rDNA序列分析初步鉴定为巴斯德醋酸杆菌（ Acetobacter pasteurianus）；A5-2乙醇脱氢酶酶学性质研究表明：最适作用温度和pH分别为45℃和pH 4.0,具有一定的耐热性和良好的耐酸碱性；A5-2乙醇脱氢酶粗酶制备条件为硫酸铵饱和度70%~80%,回收率84%。

基于AdH模型的美国内华达州塔基河洪水数值模拟

以美国内华达州塔基河为例,基于AdH模型建立了覆盖主槽和洪泛区的有限元数值模型,选取四种不同频率的洪水事件作为基础资料并对其洪水过程进行了模拟分析,探讨了输入参数对模拟结果的影响,并对AdH模型进行了率定和验证,进而分析了淹没面积和淹没体积与流量的关系。结果表明,主槽糙率系数的选取对洪水模拟结果的影响相对于洪泛区而言更为显著,是模型率定时应优先调整的参数;AdH模型完全可以再现洪水发展—消退的全过程,是一种有效的洪水预报模型;淹没面积和淹没体积与流量间的关系具有明显的反绳套规律。

饮酒及ADH2、ALDH2基因多态性与OSAHS的关系

目的探讨饮酒及乙醇脱氢酶2(ADH2)、乙醛脱氢酶2(ALDH2)基因多态性与阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(obstructive sleepapnea hypopnea syndrome,OSAHS)的关系。方法以2014年2月—2017年2月因打鼾在我院就诊并行多导睡眠呼吸监测的321例男性为研究对象,经多导睡眠呼吸监测后分为OSAHS组208例和非OSAHS组113例。回顾性统计研究对象一般资料;采用聚合酶链式反应-连接酶检测反应技术检测ADH2 Arg47His和ALDH2 Glu487Lys基因型,应用logistic回归分析评价OSAHS发病危险因素,并评价基因多态性与OSAHS病变程度的相关性。结果 OSAHS组颈围、腰围大于非OSAHS组,鼾龄长于非OSAHS组,体重指数、高血压病患病率、糖尿病患病率、平均收缩压、平均舒张压均高于非OSAHS组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。两组基因型和等位基因分布频率比较差异无统计学意义(χ~2=1.23,χ~2=2.37,P均>0.05);大量饮酒是OSAHS发病的危险因素(OR=1.022,95%CI=0.990,0.990);与携带ADH2(A/A)或ALDH2(G/G)基因型者比较,其他基因型者患OSAHS的危险性未增加(P>0.05)。结论大量饮酒与OSAHS的发病相关;ADH2、ALDH2基因多态性与OSAHS易感性无关;OSAHS严重程度与ADH2及ALDH2基因多态性无关联。

AS-PCR在ADH2、ALDH2基因多态型分析中的应用

[目的 ]为获得更为简便经济同时精确度足够高的酒精脱氢酶 2 (ADH2 )和乙醛脱氢酶 2 (ALDH2 )基因多态型测定的新方法。 [方法 ]建立并优化等位基因特异性PCR(allelespecific PCR ,AS PCR)方法 ,通过与经典PCR RFLP方法的分型结果相比较考察其可行性。 [结果 ]AS PCR方法对 60例DNA样本的ADH2、ALDH2基因的分型结果与PCR RFLP法完全一致 ,且简便快速 ,成本低 ,特异性和准确度也足够高。 [结论 ]AS PCR方法分析ADH2、ALDH2基因多态型优点明显 。

宣肺平喘、温阳利水法对肺心病急性加重期合并周围性水肿ADH的影响

目的通过多中心、随机、对照、平行、单盲临床研究,对宣肺平喘、温阳利水法治疗肺心病急性加重期合并周围性水肿疗效进行评价,并观察其对抗利尿激素(ADH)的影响。方法以肺心病急性发作期合并周围性水肿的患者为对象,随机分为两组。治疗组采用中西医结合方案治疗,对照组予以西医常规加安慰剂治疗,两组均治疗14d。比较两组疗效性指标与ADH值情况。结果治疗组在总体疗效、改善症状体征、纠正电解质紊乱、纠正酸碱失衡等方面优于对照组。两组治疗后均无明显副作用。同时治疗组在降低血清ADH水平方面优于对照组。结论针对肺心病急性发作期合并周围性水肿的中西医结合治疗可能具有提高总体疗效、改善症状体征、纠正电解质紊乱、纠正酸碱失衡优势,同时对ADH的分泌有一定的抑制作用,提示抑制ADH分泌可能是宣肺平喘、温阳利水法治疗肺心病急性加重期合并周围性水肿的部分机理。

‘南通小方柿’DkADH1基因遗传转化及功能分析

[目的]研究‘南通小方柿’(Diospyros kaki Linn.‘Nantongxiaofangshi’)乙醇脱氢酶基因DkADH1的功能,阐明其在柿果脱涩过程中的作用。[方法]构建了DkADH1基因植物双元表达载体,通过农杆菌介导法将该基因转入番茄中。以转基因和非转基因番茄株系的不同组织为材料,钨酸钠-钼酸钠比色法测定可溶性单宁含量,并用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测原花青素(PA)合成途径相关基因的表达情况。[结果]经PCR和RT-PCR检测,获得了3个转DkADH1基因番茄株系。过量表达DkADH1基因的转基因番茄植株的叶片、花、果实中可溶性单宁含量均显著低于非转基因番茄植株。qRTPCR显示:转基因植株不同组织中PA合成途径相关基因F3'5'H、LAR、MYB4和PAL的表达量与非转基因植株相比均显著下调。[结论]DkADH1能降低植物可溶性单宁的含量并抑制其生物合成途径相关基因的表达,与柿果脱涩密切相关。