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兔脂肪干细胞(ADSCs)与聚羟基乙酸/壳聚糖(PLGA/CS)支架材料生物相容性研究 被引量:6
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作者 李春波 王红 +5 位作者 陈增淦 陈统一 张峰 周建平 崔磊 尹静波 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期610-616,共7页
目的探讨兔脂肪来源于细胞(adipose-derived stemcells,ADSCs)作为种子细胞复合新型聚羟基乙酸(polylaetic-co—glycolicacid,PLGA)/壳聚糖(chitosan,CS)支架材料的生物相容性,为进一步构建组织工程化脂肪组织提供实验依据... 目的探讨兔脂肪来源于细胞(adipose-derived stemcells,ADSCs)作为种子细胞复合新型聚羟基乙酸(polylaetic-co—glycolicacid,PLGA)/壳聚糖(chitosan,CS)支架材料的生物相容性,为进一步构建组织工程化脂肪组织提供实验依据。方法取雄性新西兰大白兔腹股沟脂肪组织,I型胶原酶消化分离出ADSCs进行培养,贴壁细胞至3~5代,评价其多向分化能力。将干细胞收集重悬后,以l×10^7/mL的密度接种于多孔PLGA/CS支架,形成细胞一支架材料复合物。培养7天后,扫描电子显微镜观察细胞在支架材料上的黏附生长和基质分泌情况,评价细胞与支架材料的生物相容性;Dil荧光标记检测细胞在支架材料上的分布;Hochest33258检测细胞在支架上的生长情况。接种1和7天后,分别对细胞一材料复合物行AnnexinV/PI双染色法检测材料对细胞的毒性作用。用成脂诱导条件培养基诱导分化ADSCs及ADSCs支架材料复合物,7天后,尼罗红荧光染色液检测ADSCs在不同环境下的成脂分化能力。结果原代培养的ADSCs呈成纤维细胞样外观,在相应诱导条件下能够分化为脂肪细胞和骨细胞。细胞接种于PLGA/CS支架材料上第8天分裂增殖达到高峰,扫描电子显微镜下提示ADSCs在支架表面贴附生长良好,并向孔隙内壁充分延伸,细胞周围形成丰富的基质成分。活死双染结合共聚焦显微镜显示材料对细胞活性无影响,尼罗红染色可见成脂诱导后的ADSCs细胞质内有红色脂滴颗粒形成。结论多孔PLGA/CS支架与兔ADSCs具有良好的生物相容性,可作为构建组织工程脂肪组织的支架材料。 展开更多
关键词 脂肪干细胞(adscs) 生物相容性 组织工程 聚羟基乙醇(PLGA) 壳聚糖(CS)
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过表达miR-191抑制猪ADSCs向脂肪细胞分化 被引量:3
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作者 刘帅 仇杨 +4 位作者 董培越 何晶晶 程佳 米琳 杨公社 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期842-852,共11页
在脂肪组织发育过程中存在许多差异表达的microRNAs(miRNAs),而miR-191是从实验室前期Solexa测序结果中筛选出的差异表达miRNAs之一.本研究对不同物种miR-191的成熟及前体序列进行同源性分析,并检测其在猪不同发育阶段各组织中的表达情... 在脂肪组织发育过程中存在许多差异表达的microRNAs(miRNAs),而miR-191是从实验室前期Solexa测序结果中筛选出的差异表达miRNAs之一.本研究对不同物种miR-191的成熟及前体序列进行同源性分析,并检测其在猪不同发育阶段各组织中的表达情况,发现miR-191的成熟及前体序列在不同物种间都非常保守,通过real-time qPCR检测发现,miR-191在猪脂肪组织不同发育阶段呈高丰度差异表达,其与Solexa测序结果一致.为了更好地研究miR-191在脂肪细胞分化过程中的功能,通过基因克隆的方法,利用Ad-Easy体系,构建过表达miR-191的腺病毒载体,转染293A细胞,成功包装出重组miR-191腺病毒并能高效侵染猪脂肪基质细胞(adipose derived stromal cells,ADSCs).通过real-time qPCR检测表明,感染重组miR-191腺病毒后的ADSCs能大量表达miR-191;油红O染色可以观察到,过表达miR-191的猪ADSCs在诱导分化后与对照组相比,脂滴明显减少.进一步研究发现,miR-191过表达的猪ADSCs中,SREBP-1C(sterol regulatory element binding protein-1C)和LPL(lipoprotein lipase)的mRNA水平显著降低,脂解关键基因HSL(hormonesensitive lipase)和ATGL(adipose triglyceride lipase)mRNA水平显著升高.同时,Western印迹结果显示,过表达miR-191的猪ADSCs在诱导分化过程中,PPARγ(peroxisome proliferator-activated receptorγ)、C/EBPα(CCAAT/enhancer binding proteinα)和A-FABP(adipocyte fatty acid binding protein)的蛋白表达水平显著下调.实验表明,过表达miR-191抑制了猪ADSCs的分化过程.这为深入研究miR-191在猪ADSCs分化过程中的调控机制奠定基础. 展开更多
关键词 miR-191 重组腺病毒 猪脂肪基质细胞(adscs) 猪脂肪细胞分化
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ADSCs培养观察及rhBMP-2转染对其生长增殖的影响 被引量:1
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作者 杨在亮 张波 +2 位作者 周继红 黄宏 孙士锦 《重庆医学》 CAS CSCD 2008年第22期2580-2582,2637,2638,共5页
目的观察脂肪源性干细胞(ADSCs)体外生长规律,并探讨重组人骨形态发生蛋白(rhBMP-2)转染后ADSCs增殖变化情况。方法用酶消化法从1岁龄贵州小香猪腹壁脂肪组织中获取ADSCs,进行连续传代培养,倒置显微镜下观察其相关生长特性。用细胞消化... 目的观察脂肪源性干细胞(ADSCs)体外生长规律,并探讨重组人骨形态发生蛋白(rhBMP-2)转染后ADSCs增殖变化情况。方法用酶消化法从1岁龄贵州小香猪腹壁脂肪组织中获取ADSCs,进行连续传代培养,倒置显微镜下观察其相关生长特性。用细胞消化计数法和四唑盐比色法(MTT)对rhBMP-2转染ADSCs前后生长增殖情况进行比较,计算倍增时间,绘制生长曲线。结果传代后ADSCs增殖速度比原代有所增快,于第4~6代趋于稳定。细胞形态由多角形、圆形和不规则形逐渐向成纤维细胞样和梭形过渡。rhBMP-2转染后ADSCs群体倍增时间增加8~10h,但对ADSCs生长增殖无明显影响(P<0.05)。结论ADSCs在体外培养至4~6代可获得较稳定状态。并且ADSCs作为宿主细胞被转染rhBMP-2基因后未发生畸变及生长增殖明显改变,说明rhBMP-2基因修饰的ADSCs可以作为携带目的基因的种子细胞应用于再生医学研究。 展开更多
关键词 adscs 细胞培养 RHBMP-2 转染 生长增殖
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猪ADSCs的成脂分化及HH通路关键基因和脂肪转录因子的时序表达
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作者 范彩云 张运海 +4 位作者 王菊花 王尚 朱飞 赵男 程建波 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期541-546,共6页
为了探讨HH信号通路在脂肪细胞分化过程中的作用机制,以猪脂肪间充质干细胞(ADSCs)为材料,经成脂诱导后,利用油红O染色观察脂肪细胞的形态变化,并检测诱导分化不同时期HH信号通路关键基因Smo、Ptc1、Gli1、Gli2以及成脂关键转录因子C/EB... 为了探讨HH信号通路在脂肪细胞分化过程中的作用机制,以猪脂肪间充质干细胞(ADSCs)为材料,经成脂诱导后,利用油红O染色观察脂肪细胞的形态变化,并检测诱导分化不同时期HH信号通路关键基因Smo、Ptc1、Gli1、Gli2以及成脂关键转录因子C/EBPα、PPARγ的表达情况。结果显示,在ADSCs细胞成脂分化过程中,脂肪细胞的数量逐渐增加,脂滴变大;Smo、Gli1、Gli2基因从第4天开始随诱导天数的增加表达量逐渐降低,而Ptc1的变化趋势与之相反;且C/EBPα、PPARγ的表达从第4天开始逐渐增加。结果表明,ADSCs细胞成脂诱导第4天HH信号通路的活性被全面启动,且随诱导天数的增加其活性逐渐降低。 展开更多
关键词 adscs 成脂分化 HH信号通路 时序表达
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ADSCs干预治疗创伤性股骨颈骨折的可行性探讨
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作者 秦朝 司艳莉 +1 位作者 官立萍 郭伟 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期1228-1231,1235,共5页
目的:探讨脂肪间充质干细胞对临床上治疗创伤性股骨颈骨折的可行性。方法:采用脂肪间充质干细胞干预后进行HE染色观察创伤性股骨颈骨折大鼠骨折修复情况;免疫组化SP法检测创伤性股骨颈骨折大鼠骨折段组织血管内皮因子VEGF的表达情况;RT-... 目的:探讨脂肪间充质干细胞对临床上治疗创伤性股骨颈骨折的可行性。方法:采用脂肪间充质干细胞干预后进行HE染色观察创伤性股骨颈骨折大鼠骨折修复情况;免疫组化SP法检测创伤性股骨颈骨折大鼠骨折段组织血管内皮因子VEGF的表达情况;RT-q PCR检测创伤性股骨颈骨折大鼠骨折段组织血管内皮因子VEGF mRNA的表达情况。结果:ADSCs组相较于假手术组大鼠的骨愈合修复还有一定差距,但效果优于空白模型组。结论:脂肪间充质干细胞对骨组织细胞成骨修复起促进作用,利于创伤性股骨颈骨折大鼠的骨愈合。 展开更多
关键词 adscs 创伤性股骨颈骨折 VEGF
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ADSCs干预快速扩张兔皮肤中α-SMA表达的实验研究 被引量:1
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作者 郑坤坤 胡亚暖 +2 位作者 薄其涛 卢俊旭 杨彪炳 《中国美容医学》 CAS 2019年第2期88-90,共3页
目的:探究脂肪来源间充质干细胞(ADSCs)对快速扩张皮肤中反应挛缩的α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响,以及对成纤维细胞向肌成纤维细胞转化的影响。方法:选取健康新西兰大白兔肾周脂肪,分离提纯ADSCs并培养3代;建立兔扩张皮肤模型,... 目的:探究脂肪来源间充质干细胞(ADSCs)对快速扩张皮肤中反应挛缩的α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响,以及对成纤维细胞向肌成纤维细胞转化的影响。方法:选取健康新西兰大白兔肾周脂肪,分离提纯ADSCs并培养3代;建立兔扩张皮肤模型,在实验组兔扩张皮肤下注射适量ADSCs悬液进行干预,对照组注射了等量的不含血清的DMEM,按照快速扩张要求扩张;手术下获得两组兔扩张后皮肤并固定;制作切片HE染色后统计皮肤厚度,进行免疫组化染色后观察皮肤中s-SMA阳性率;将数据进行统计学分析得出结论。结果:经ADSCs干预的扩张兔皮肤与对照组相比,皮肤挛缩率更低,扩张皮肤的厚度较对照组厚,α-SMA阳性成纤维细胞率更低。结论:脂肪间充质干细胞可使扩张皮肤增厚,挛缩率降低,降低α-SMA表达,抑制肌成纤维细胞形成。ADSCs可协助提高皮瓣质量。 展开更多
关键词 adscs Α-SMA 快速扩张术 HE染色 皮肤挛缩率 免疫组化
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低氧条件对小鼠ADSCs膜片形成及其生物学特性的影响 被引量:1
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作者 周宇超 高晓彤 +3 位作者 刘向伟 谭乃文 魏洪波 宋应亮 《实用口腔医学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第3期292-296,共5页
目的:观察低氧条件对小鼠脂肪间充质干细胞(ADSCs)膜片生物学性能的影响。方法:分离培养C57/BL小鼠ADSCs并用Vit C法构建细胞膜片;氯化钴(CoCl_2)模拟体内低氧环境,q PCR和Western Blot检测HIF-1α表达;组织学染色、透射电镜观察膜片形... 目的:观察低氧条件对小鼠脂肪间充质干细胞(ADSCs)膜片生物学性能的影响。方法:分离培养C57/BL小鼠ADSCs并用Vit C法构建细胞膜片;氯化钴(CoCl_2)模拟体内低氧环境,q PCR和Western Blot检测HIF-1α表达;组织学染色、透射电镜观察膜片形成;q PCR检测ADSCs干性及膜片分泌功能相关基因的表达。结果:成功构建ADSCs膜片;HIF-1α的表达随CoCl_2浓度的升高而升高;低氧条件下,形成细胞膜片较薄,但膜片内细胞连接更紧密;低氧环境可增强ADSCs干性,促使ADSCs膜片合成更多黏附分子、分泌更多保护性生长因子。结论:低氧条件更利于ADSCs膜片构建、存活和生物学功能维持。 展开更多
关键词 脂肪间充质干细胞(adscs) 细胞膜片 低氧环境 氯化钴(CoCl2)
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ADSCs构建皮肤复合组织修复皮肤溃疡实验研究 被引量:2
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作者 陈阳 宋良萍 +2 位作者 察鹏飞 彭铮 何宇 《内蒙古医学杂志》 2018年第1期1-5,F0002,F0004,共7页
目的探索脂肪来源干细胞构建皮肤复合组织的方法及修复皮肤溃疡的效果。方法采用从人类包皮中分离出表皮细胞和成纤维细胞进行体外培养与鉴定,首先把成纤维细胞接种于牛胶原凝胶中培养生长构建活性真皮替代物,在裸鼠背部制做直径1cm全... 目的探索脂肪来源干细胞构建皮肤复合组织的方法及修复皮肤溃疡的效果。方法采用从人类包皮中分离出表皮细胞和成纤维细胞进行体外培养与鉴定,首先把成纤维细胞接种于牛胶原凝胶中培养生长构建活性真皮替代物,在裸鼠背部制做直径1cm全层皮肤缺损,将培养2周的活性真皮替代物移植于创面,观察其愈合情况;再接种表皮细胞于该活性真皮替代物中,经过气-液界面培养,表皮细胞成层并向基底上层分化形成表皮/真皮复合皮。取10 ml成人脂肪抽吸物,分离、培养和鉴定脂肪来源干细胞(ADSCs),将ADSCs作为种子细胞接种于牛胶原凝胶支架并行成脂诱导和扩增培养构建类"脂肪"组织,再把复合皮与所构建的"脂肪"组织按表皮、真皮、皮下脂肪的结构顺序"组合"培养以构建出具有多层结构的皮肤复合组织。在裸鼠背部两侧建立直径为10 mm的圆形皮肤创面模型,右侧(实验侧)创面缺损部位植入直径为10 mm的多层复合组织,左侧(对照侧)进行简单的创面包扎修复,观察两侧溃疡愈合速度和质量以及通过活检组织病理学检查比较各自的表皮、真皮、成纤维细胞、血管和脂肪组织再生情况。结果成纤维细胞接种于Ⅰ型牛胶原凝胶共同培养所构建的活性真皮替代物类似真皮,可修复皮肤缺损。在构建的活性真皮替代物上种植表皮细胞,经过气-液界面培养,表皮细胞成层分化,形成复合皮。从脂肪组织中可分离获取ADSCs,它具有多向分化潜能。ADSCs与Ⅰ型牛胶原凝胶支架在体内、外均可构建出脂肪样组织,复合皮与类"脂肪"组织参照正常皮肤结构顺序"组合"培养可构建出具有多层结构的皮肤复合组织。实验侧创面愈合率、肉芽组织厚度、真皮层厚度以及毛细血管密度显著高于对照侧。结论选择表皮细胞、成纤维细胞、脂肪来源干细胞(ADSCs)作为组织工程种子细胞,以牛胶原凝胶作为支架,能够构建出具有多层结构的皮肤复合组织,并可成功用于修复裸鼠背部皮肤全层组织缺损,具有提高愈合速度、增加愈合皮肤厚度的作用。 展开更多
关键词 脂肪来源干细胞(adscs) 构建 皮肤复合组织 修复 皮肤溃疡
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SOX9腺病毒过表达载体的构建及其对犬ADSCs向胰岛样细胞分化的影响
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作者 高登科 戴鹏秀 +5 位作者 范志新 张霞 阮晨梅 王璟璐 张欣珂 张翊华 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2021年第1期1-5,I0002,I0003,共7页
脂肪间充质干细胞(ADSCs)具有多向分化潜能,是治疗自身免疫损伤性糖尿病的理想种子细胞。SOX9是胰腺发育调控网络中的多潜能因子,其功能缺失可以导致胰腺发育不全和祖细胞池枯竭。但到目前为止,SOX9在ADSCs向胰岛样细胞分化过程中是否... 脂肪间充质干细胞(ADSCs)具有多向分化潜能,是治疗自身免疫损伤性糖尿病的理想种子细胞。SOX9是胰腺发育调控网络中的多潜能因子,其功能缺失可以导致胰腺发育不全和祖细胞池枯竭。但到目前为止,SOX9在ADSCs向胰岛样细胞分化过程中是否具有重要作用尚不完全清楚。本试验构建了腺病毒过表达重组载体pAdTrack-SOX9-AdEasy,并获得了具有感染性的腺病毒毒液,将其感染犬ADSCs,感染后4、7、10、13 d和16 d观察绿色荧光蛋白表达情况、细胞形态变化和胰岛β细胞发育相关基因的表达情况。结果显示,过表达SOX 9基因的腺病毒毒液感染犬ADSCs后,出现绿色荧光蛋白表达;并在第13天细胞开始出现聚集生长现象,在第16天出现多个似胰岛样细胞团;同时检测到SOX9可外源性刺激Pdx1、Ngn3、Mnx1、MafA、Nkx2.2、Nkx6.1、PCSK 1和PCSK 2等基因的内源性表达。表明SOX 9基因过表达腺病毒毒液可成功感染犬ADSCs,促进其向胰岛样细胞分化。 展开更多
关键词 SOX9基因 腺病毒过表达重组载体 adscs 胰岛样细胞
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ADSCs辅助脂肪移植在面部年轻化中的应用 被引量:1
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作者 张歌 《实用医药杂志》 2015年第11期1006-1007,共2页
脂肪移植已有100多年历史,自体脂肪移植以其无排异反应.无免疫原性,可在体内长期存活等优点备受广大求美者和医师的青睐,广泛应用于修复体表软组织缺损。随着脂肪移植应用范围的扩大其不足之处也逐渐显现出来,移植中心部位出现坏... 脂肪移植已有100多年历史,自体脂肪移植以其无排异反应.无免疫原性,可在体内长期存活等优点备受广大求美者和医师的青睐,广泛应用于修复体表软组织缺损。随着脂肪移植应用范围的扩大其不足之处也逐渐显现出来,移植中心部位出现坏死纤维化、液化、钙化等现象以及高吸收率(60%-70%),使脂肪移植受到一定的限制。 展开更多
关键词 adscs 脂肪移植 面部年轻化手术
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3D打印金属微孔支架填充PRP搭载ADSCS修复大节段骨缺损的护理措施 被引量:1
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作者 张桂红 蔡树鹏 《中国医药科学》 2022年第2期98-100,120,共4页
目的探讨3D打印金属微孔支架填充富血小板血浆(PRP)搭载脂肪来源干细胞(ADSCS)修复大节段骨缺损的围手术期护理措施。方法选取2019年1月至2020年6月广东省水电医院收治的100例大节段骨缺损患者进行研究,随机分为研究组(n=50)与对照组(n=... 目的探讨3D打印金属微孔支架填充富血小板血浆(PRP)搭载脂肪来源干细胞(ADSCS)修复大节段骨缺损的围手术期护理措施。方法选取2019年1月至2020年6月广东省水电医院收治的100例大节段骨缺损患者进行研究,随机分为研究组(n=50)与对照组(n=50)。对照组进行常规护理,研究组进行围手术期护理。比较两组干预3个月后的优良率、汉密顿抑郁量表(HAMD)评分、汉密顿焦虑量表(HAMA)评分、并发症发生率及骨愈合时间。结果干预后,研究组的优良率高于对照组(χ^(2)=4.330,P=0.037);研究组的HAMD评分低于干预前和对照组(t=25.284,P=0.000;t=8.465,P=0.000),HAMA评分低于干预前和对照组(t=17.219,P=0.000;t=7.027,P=0.000);研究组并发症总发生率低于对照组(χ^(2)=4.000,P=0.046);研究组的骨愈合时间短于对照组(t=5.306,P=0.000)。结论在3D打印金属微孔支架填充PRP搭载ADSCS修复大节段骨缺损中应用围手术期护理,可促进患者功能恢复及骨愈合,缓解焦虑、抑郁情绪,并减少术后并发症的发生。 展开更多
关键词 3D打印 PRP adscs 大节段骨缺损 围手术期护理 骨愈合
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负载BIO纳米胶束促进ADSCs对急性心肌梗死的治疗作用及其机制
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作者 杨向群 孔艳 +1 位作者 李威 李玉泉 《解剖学杂志》 CAS 2021年第S01期213-213,共1页
干细胞治疗心肌梗死受到广泛关注,其中脂肪来源干细胞(ADSCs)是一种较为理想的种子细胞,但移植后受梗死后微环境的攻击,细胞存留和存活率普遍较低。BIO((2'Z,3'E)-6-bromoindirubin-3'-oxime)是一种天然小分子物质,对H2O2... 干细胞治疗心肌梗死受到广泛关注,其中脂肪来源干细胞(ADSCs)是一种较为理想的种子细胞,但移植后受梗死后微环境的攻击,细胞存留和存活率普遍较低。BIO((2'Z,3'E)-6-bromoindirubin-3'-oxime)是一种天然小分子物质,对H2O2诱导的ADSCs和H9C2细胞损伤具有保护作用。本研究通过纳米材料构建药物缓释系统(BIO-N),Matrigel作为支架材料,探讨BIO-N、Matrigel与ADSCs联合治疗对大鼠急性心肌梗死的作用及可能机制。 展开更多
关键词 急性心肌梗死 药物缓释系统 脂肪来源干细胞 H9C2细胞 adscs 干细胞治疗 支架材料 MATRIGEL
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Hypoxic Condition Up-Regulates the Expression of Angiopoietin-2 in ADSCs
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作者 Lingxiao Ye Xiaoming Sun +1 位作者 Yuguang Zhang Ying Zhang 《Journal of Biomedical Science and Engineering》 2019年第2期77-84,共8页
Wound healing requires abundant nutrition and blood supply, thus angiogenesis is a vital stage in this process. Angiogenesis involves diverse kinds of immune cells, growth factors, cytokines and inhibitors. ADSCs, esp... Wound healing requires abundant nutrition and blood supply, thus angiogenesis is a vital stage in this process. Angiogenesis involves diverse kinds of immune cells, growth factors, cytokines and inhibitors. ADSCs, especially ADSCs cultured in hypoxic condition, are reported to be able to facilitate angiogenesis and promote wound healing process. Significant efforts have been made on the development of ADSCs-based therapies with wound-healing applications. Here the results showed that expression of Angiopoietin-2 (ANGPT2) in ADSCs was up-regulated in the hypoxic condition. 展开更多
关键词 adscs ANGPT2 ANGIOGENESIS WOUND HEALING
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重组腺相关病毒介导转化生长因子-β1基因修饰ADSCs成软骨细胞的研究 被引量:3
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作者 王兆杰 安荣泽 +3 位作者 袁小洪 齐新文 杨晋 刘凡凡 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1958-1958,共1页
我们通过应用重组腺相关病毒介导转化生长因子-β1(TGF-β1)基因转染脂肪间充质干细胞,观察转染基因的表达及软骨细胞基质糖胺聚糖和Ⅱ型胶原合成。
关键词 转化生长因子-Β1 重组腺相关病毒介导 成软骨细胞 adscs 基因修饰 脂肪间充质干细胞 软骨细胞基质 TGF-β
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Microvesicles(MIVs)secreted from adipose-derived stem cells(ADSCs)contain multiple microRNAs and promote the migration and invasion of endothelial cells 被引量:9
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作者 Bo Huang Lin-Feng Huang +9 位作者 Ling Zhao Zongyue Zeng Xi Wang Daigui Cao Lijuan Yang Zhenyu Ye Xian Chen Bin Liu Tong-Chuan He Xiaozhong Wang 《Genes & Diseases》 SCIE 2020年第2期225-234,共10页
Extracellular vesicles(EVs)such as microvesicles(MIVs)play an important role in intercellular communications.MIVs are small membrane vesicles sized 100e1000 nm in diameter that are released by many types of cells,such... Extracellular vesicles(EVs)such as microvesicles(MIVs)play an important role in intercellular communications.MIVs are small membrane vesicles sized 100e1000 nm in diameter that are released by many types of cells,such as mesenchymal stem cells(MSCs),tumor cells and adipose-derived stem cells(ADSC).As EVs can carry out autocrine and paracrine functions by controlling multiple cell processes,it is conceivable that EVs can be used as delivery vehicles for treating several clinical conditions,such as to improve cardiac angiogenesis after myocardial infarction(MI).Here,we seek to investigate whether ADSC-derived MIVs contain microRNAs that regulate angiogenesis and affect cell migration of endothelial cells.We first characterized the ADSC-derived MIVs and found that the MIVs had a size range of 100 e300 nm,and expressed the MIV marker protein Alix.We then analyzed the microRNAs in ADSCs and ADSC-derived MIVs and demonstrated that ADSC-derived MIVs selectively released a panel of microRNAs,several of which were related to angiogenesis,including two members of the let-7 family.Furthermore,we demonstrated that ADSC-derived MIVs promoted the cell migration and invasion of the HUVEC endothelial cells.The PKH26-labeled ADSC-derived MIVs were effectively uptaken into the cytoplasm of HUVEC cells.Collectively,our results demonstrate that the ADSC-derived MIVs can promote migration and invasion abilities of endothelial cells,suggesting pro-angiogenetic potential.Future studies should focus on investigating the roles and mechanisms through which ADSC-derived MIVs regulate angiogenesis. 展开更多
关键词 Adipose-derived stem cells(adscs) Angiogenesis Let-7 microRNA Microvesicle(MIV)
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3D bioprinting of integral ADSCs-NO hydrogel scaffolds to promote severe burn wound healing 被引量:9
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作者 Yu Wu Tangzhao Liang +7 位作者 Ying Hu Shihai Jiang Yuansen Luo Chang Liu Guo Wang Jing Zhang Tao Xu Lei Zhu 《Regenerative Biomaterials》 SCIE 2021年第3期1-10,共10页
Severe burns are challenging to heal and result in significant death throughout the world.Adiposederived mesenchymal stem cells(ADSCs)have emerged as a promising treatment for fullthickness burn healing but are impede... Severe burns are challenging to heal and result in significant death throughout the world.Adiposederived mesenchymal stem cells(ADSCs)have emerged as a promising treatment for fullthickness burn healing but are impeded by their low viability and efficiency after grafting in vivo.Nitric oxide(NO)is beneficial in promoting stem cell bioactivity,but whether it can function effectively in vivo is still largely unknown.In this study,we bioprinted an efficient biological scaffold loaded with ADSCs and NO(3D-ADSCs/NO)to evaluate its biological efficacy in promoting severe burn wound healing.The integral 3D-ADSCs/NO hydrogel scaffolds were constructed via 3D bioprinting.Our results shown that 3D-ADSCs/NO can enhance the migration and angiogenesis of Human Umbilical Vein Endothelial Cells(HUVECs).Burn wound healing experiments in mice revealed that 3D-ADSCs/NO accelerated the wound healing by promoting faster epithelialization and collagen deposition.Notably,immunohistochemistry of CD31 suggested an increase in neovascularization,supported by the upregulation of vascular endothelial growth factor(VEGF)mRNA in ADSCs in the 3D biosystem.These findings indicated that 3D-ADSC/NO hydrogel scaffold can promote severe burn wound healing through increased neovascularization via the VEGF signalling pathway.This scaffold may be considered a promising strategy for healing severe burns. 展开更多
关键词 3D bioprinting adscs nitric oxide ANGIOGENESIS severe burn wound healing
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microRNA-21靶向PDCD4/PTEN对大鼠ADSCs凋亡的抑制作用
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作者 张梦雨 刘玉梅 +3 位作者 石珂 孙莹莹 孟冰冰 张自强 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2021年第9期1767-1775,共9页
该研究探究miR-21对大鼠ADSCs凋亡的影响,为提高ADSCs移植存活率提供依据。该研究建立大鼠ADSCs体外凋亡模型,采用qRT-PCR检测miR-21的表达。在ADSCs中采用Lipofectamine 2000转染miR-21 mimics,qRT-PCR检测miR-21 mimics转染效率。CCK-... 该研究探究miR-21对大鼠ADSCs凋亡的影响,为提高ADSCs移植存活率提供依据。该研究建立大鼠ADSCs体外凋亡模型,采用qRT-PCR检测miR-21的表达。在ADSCs中采用Lipofectamine 2000转染miR-21 mimics,qRT-PCR检测miR-21 mimics转染效率。CCK-8、Hoechst 33258检测大鼠ADSCs过表达miR-21对细胞存活率的影响;Western blot检测大鼠ADSCs过表达miR-21后凋亡相关蛋白表达量。结果显示H2O2诱导细胞凋亡后,miR-21在ADSCs中的表达明显下调。大鼠ADSCs转染miR-21 mimics后,ADSCs中miR-21的表达量较对照组显著提高了7.4倍。与miR-21 scramble组相比,ADSCs过表达miR-21后,ADSCs存活率显著升高,促凋亡蛋白Caspase-3和Bax的表达量显著降低,而抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平明显升高。与对照组相比,miR-21过表达后,PDCD4和PTEN mRNA无显著变化,但PDCD4和PTEN蛋白表达明显下调。利用PDCD4 siRNA和Phen阻断PDCD4和PTEN的表达后,Caspase-3、Bax的表达水平显著降低,Bcl-2的表达水平显著升高。该研究得出miR-21通过靶向PDCD4/PTEN增强大鼠ADSCs对凋亡的抑制作用。 展开更多
关键词 adscs 凋亡 MICRORNA-21 PDCD4 PTEN
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ISL1基因腺病毒过表达载体的构建及其诱导犬ADSCs向胰岛样细胞分化
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作者 张霞 戴鹏秀 +6 位作者 高登科 阮晨梅 王璟璐 李佳锴 陈奕静 张露文 张翊华 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期1515-1521,共7页
构建腺病毒重组表达载体pADTrack-ISL1-AdEasy,经293A细胞的包装和扩增,获得具有感染性的重组腺病毒,将其按感染复数(MOI)=100感染犬脂肪间充质干细胞(adipose-derived mesenchymal stem cells,ADSCs),观察感染后4,7,10,13,16 d绿色荧... 构建腺病毒重组表达载体pADTrack-ISL1-AdEasy,经293A细胞的包装和扩增,获得具有感染性的重组腺病毒,将其按感染复数(MOI)=100感染犬脂肪间充质干细胞(adipose-derived mesenchymal stem cells,ADSCs),观察感染后4,7,10,13,16 d绿色荧光蛋白表达情况、细胞形态变化和胰岛β细胞发育相关基因的mRNA表达情况。结果显示,含ISL1基因的重组腺病毒感染犬ADSCs 48 h后,绿色荧光蛋白开始表达;13 d后犬ADSCs出现细胞形态变化,由梭形变为神经细胞样;qRT-PCR分析表明在犬ADSCs中过表达ISL1基因提高了PDX1、NGN3、MNX1、MAFA和NKX6.1基因的内源性表达。结果表明,含ISL1基因的重组腺病毒成功感染犬ADSCs,并可促进其向胰岛样前体细胞分化,具有进一步诱导形成胰岛样细胞的可能。 展开更多
关键词 ISL1基因 腺病毒载体 adscs 胰岛样细胞
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ADSCs促进缺血皮瓣成活的实验研究 被引量:1
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作者 朱海 郭冰玉 +2 位作者 回蔷 王洪一 陶凯 《中国美容整形外科杂志》 CAS 2022年第6期358-362,共5页
目的探究脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)对缺血皮瓣的影响效果及具体机制。方法自2020年10月至2021年4月,北部战区总医院烧伤整形科分离、培养、观察ADSCs,并对其表面免疫表型和成骨能力进行检测;建立大鼠缺血皮瓣模... 目的探究脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)对缺血皮瓣的影响效果及具体机制。方法自2020年10月至2021年4月,北部战区总医院烧伤整形科分离、培养、观察ADSCs,并对其表面免疫表型和成骨能力进行检测;建立大鼠缺血皮瓣模型,以大鼠背部中线为轴,于对称轴两侧相对应位置各设计一个形状、大小完全一致的1.2 cm×6.0 cm的矩形皮瓣;每只大鼠背部右侧皮瓣为实验组,左侧皮瓣为对照组,实验组术后即刻注射ADSCs,1次/d(0.1 ml/点,共0.4 ml),对照组注射等剂量生理盐水;对皮瓣进行大体观察和组织学观察及成活率计算;通过Western blot检测皮瓣内血管内皮生长因子(vescular endothelial growth factor,VEGF)和转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)生成量的差异;通过Elisa实验检测皮瓣内炎性因子肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)的表达情况。结果分离培养后的ADSCs传代后在光镜下呈长梭形并连接成片,流式细胞仪检测显示,细胞表面高表达CD73、CD90,不表达CD34、CD45。并且表现出良好的向骨组织分化的能力;术后大体观察显示,实验组皮瓣较对照组皮瓣坏死面积明显减少。对照组皮瓣总成活率为(32.20%±1.16%),实验组皮瓣总成活率为(63.42%±1.21%),组间比较差异有统计学意义,P<0.05;组织学染色结果显示,对照组皮瓣较实验组皮瓣组织层次结构更加不规整,组织内小血管数减少;Western blot实验的结果显示,实验组皮瓣较对照组皮瓣内VEGF和TGF-β1的含量明显增加;ELISA实验结果显示,实验组皮瓣较对照组皮瓣内炎性因子IL-6、TNF-α的含量有所减少。结论ADSCs可通过促进缺血皮瓣组织内VEGF和TGF-β1的表达而发挥促血管生成作用,进而增加皮瓣成活面积。ADSCs可以通过抑制缺血皮瓣组织内IL-6和TNF-α的表达而发挥抑制炎症、减少组织损伤的作用,进而增加皮瓣成活的面积。 展开更多
关键词 adscs 皮瓣 血管生成 炎症反应
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脂肪干细胞在肥胖症治疗中的研究进展
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作者 张全颖 杨阳 +3 位作者 王艳 陈玲俐 刘婉晴 李祥勇 《生命科学研究》 CAS 2024年第4期312-319,共8页
随着经济的不断发展和生活水平的提高,肥胖症的患病率正逐年显著升高。肥胖症不仅会引起机体能量代谢失衡,还会导致脂肪组织组成细胞的功能紊乱。脂肪干细胞(adipose-derived stemcell,ADSC)是形成脂肪组织的起源细胞,能够改变脂肪组织... 随着经济的不断发展和生活水平的提高,肥胖症的患病率正逐年显著升高。肥胖症不仅会引起机体能量代谢失衡,还会导致脂肪组织组成细胞的功能紊乱。脂肪干细胞(adipose-derived stemcell,ADSC)是形成脂肪组织的起源细胞,能够改变脂肪组织的重塑和功能,目前被认为可在肥胖症防治中发挥重要作用。为此,本文就ADSC的生物学特征、功能以及其在抗肥胖症中的作用机制进行综述,以期为肥胖症的临床防治研究提供新思路。 展开更多
关键词 脂肪干细胞(ADSC) 肥胖症 脂肪棕色化 脂肪炎症
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