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毛蕊异黄酮通过调节线粒体通路抑制胃癌AGS细胞的增殖、迁移和侵袭 被引量:1
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作者 李倩慧 平仙娥 《广州中医药大学学报》 CAS 2023年第6期1482-1487,共6页
【目的】探讨毛蕊异黄酮对人胃癌AGS细胞的增殖、迁移和侵袭机制。【方法】培养人胃癌细胞系AGS,使用毛蕊异黄酮或/和MHY1485[哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)激活剂]处理胃癌细胞,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖能力,Transwell... 【目的】探讨毛蕊异黄酮对人胃癌AGS细胞的增殖、迁移和侵袭机制。【方法】培养人胃癌细胞系AGS,使用毛蕊异黄酮或/和MHY1485[哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)激活剂]处理胃癌细胞,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖能力,Transwell法检测细胞迁移、侵袭能力,JC-1免疫荧光染色法检测线粒体膜电位变化,Western Blot法检测自噬关键蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)-Ⅰ、LC3-Ⅱ、Beclin-1、磷酸化mTOR(p-mTOR)蛋白表达。【结果】毛蕊异黄酮抑制AGS细胞的增殖与迁移、侵袭能力,上调线粒体膜电位,促进细胞自噬发生,下调Beclin-1与LC3-Ⅱ的表达,抑制p-mTOR的表达。MHY1485共处理部分逆转毛蕊异黄酮对AGS细胞增殖、迁移、侵袭的抑制。【结论】毛蕊异黄酮可通过抑制p-mTOR表达,促进AGS细胞自噬发生,进而抑制AGS细胞的增殖、迁移与侵袭。 展开更多
关键词 毛蕊异黄酮 胃癌 细胞增殖 细胞迁移 细胞侵袭 线粒体膜电位 ags细胞系
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NO对胃癌细胞系AGS增殖的影响 被引量:4
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作者 桑建荣 陈永昌 +1 位作者 邵根宝 黄晓佳 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2010年第2期166-170,共5页
背景与目的:一氧化氮(nitric oxide,NO)参与机体内的多种生理和病理反应,它作为重要的生物介质在肿瘤发生、发展和死亡中的作用已成为肿瘤研究的热点。本实验通过研究NO供体硝普钠(sodium nitroprusside,SNP)对胃癌细胞系AGS的作用,探... 背景与目的:一氧化氮(nitric oxide,NO)参与机体内的多种生理和病理反应,它作为重要的生物介质在肿瘤发生、发展和死亡中的作用已成为肿瘤研究的热点。本实验通过研究NO供体硝普钠(sodium nitroprusside,SNP)对胃癌细胞系AGS的作用,探讨NO对胃癌细胞生长增殖的影响。方法:应用MTT法评价SNP对细胞生长的抑制,流式细胞术检测细胞周期的变化,RT-PCR检测增殖细胞核抗原(PCNA)和caspase-3的mRNA基因表达,Westernblot检测PCNA和caspase-3蛋白的表达。结果:SNP可剂量依赖性地抑制AGS细胞的生长,100、500、1000、1500、2000μmol/L SNP处理24h,细胞生长抑制率分别为(2.02±2.96)%、(10.82±2.21)%、(18.95±3.35)%、(26.88±2.54)%、(42.57±1.27)%;SNP可以使细胞周期发生变化,与对照组比较100、500、1000、1500、2000μmol/LSNP处理24h,S期细胞分别减少2.29%、7.8%、11.34%、20.49%、23.6%,G0/G1期细胞分别增加3.33%、9.3%、13.46%、21.37%、24.73%(P<0.05);随着SNP剂量增加和作用时间延长,PCNAmRNA和蛋白表达逐渐降低;caspase-3mRNA表达无改变,但caspase-3酶原被裂解活化。结论:NO能抑制AGS细胞的生长和增殖,诱导细胞的凋亡,其作用呈显著的浓度依赖性。 展开更多
关键词 胃肿瘤 一氧化氮 ags细胞 增殖
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不同疾病来源幽门螺杆菌菌株对人胃癌细胞系AGS基质金属蛋白酶表达影响的比较研究 被引量:4
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作者 王继恒 刘文忠 +3 位作者 韩跃华 童菊芳 朱红音 李恩灵 《胃肠病学》 2006年第11期657-662,共6页
背景:幽门螺杆菌(H.pylori)是胃癌的Ⅰ类致癌原,但H.pylori感染与胃癌发生的分子机制仍不明了。目的:在体外观察不同疾病来源的H.pylori菌株对人胃癌细胞系AGS基质金属蛋白酶(MMPs)表达的影响是否存在差异。方法:将AGS细胞分别与... 背景:幽门螺杆菌(H.pylori)是胃癌的Ⅰ类致癌原,但H.pylori感染与胃癌发生的分子机制仍不明了。目的:在体外观察不同疾病来源的H.pylori菌株对人胃癌细胞系AGS基质金属蛋白酶(MMPs)表达的影响是否存在差异。方法:将AGS细胞分别与5株分离自胃癌和5株分离自轻度非萎缩性胃炎患者的H.pylori共培养,以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测MMP-2、MMP-7和MMP-9 mRNA和蛋白的表达,以肠道致病性大肠杆菌作为细菌对照。结果:胃炎H.pylori菌株和大肠杆菌基本不影响AGS细胞MMP-2、MMP-7和MMP-9 mRNA和蛋白的表达,而所有胃癌菌株均能上调MMP-2、MMP-7和MMP-9 mRNA和蛋白的表达。结论:分离自胃癌和胃炎患者的H.pylori菌株对AGS细胞MMP-2、MMP-7和MMP-9表达的影响有所不同,说明不同疾病来源的H.pylori菌株在促细胞恶变能力上存在差异。 展开更多
关键词 螺杆菌 幽门 细胞系/ags 基质金属蛋白酶类
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ω-3多不饱和脂肪酸对人胃腺癌细胞系AGS的作用 被引量:3
4
作者 王曙逢 赵志浩 +3 位作者 刘竹君 王光辉 高锟 李幼芬 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期190-194,共5页
目的探讨ω-3多不饱和脂肪酸对人胃腺癌AGS细胞生长增殖的作用和可能的机制。方法以不同浓度梯度的DHA、EPA作用于体外培养的AGS细胞和人微血管内皮细胞HMEC-1,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)观察细胞增殖抑制率,使用流式细胞仪检测细胞周期变... 目的探讨ω-3多不饱和脂肪酸对人胃腺癌AGS细胞生长增殖的作用和可能的机制。方法以不同浓度梯度的DHA、EPA作用于体外培养的AGS细胞和人微血管内皮细胞HMEC-1,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)观察细胞增殖抑制率,使用流式细胞仪检测细胞周期变化,采用Western blot分析细胞线粒体呼吸链膜蛋白复合体Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ表达变化。结果 DHA和EPA对胃腺癌AGS细胞增殖具有明显抑制作用,该抑制作用呈现明显的剂量时间依赖效应的特点(P<0.05),在相同的浓度梯度下,DHA的抑制作用强于EPA(P<0.05)。倒置显微镜下DHA作用后观察到AGS细胞明显皱缩,细胞的贴壁能力明显减弱。流式细胞仪检测显示,DHA、EPA干预后AGS细胞的DNA合成前期(G0/G1期)细胞分布比例明显增加,DNA合成期(S期)细胞分布比例明显减少(P<0.05)。Western blot分析可见,DHA干预AGS细胞24h和48h后,与对照组比较,AGS线粒体呼吸链膜蛋白复合体Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ表达灰度值显著下降,而且随着作用时间延长,复合体表达灰度值下降愈明显(P<0.05)。DHA对人微血管内皮细胞的生长增殖、细胞形态和线粒体呼吸链膜蛋白复合体无明显影响(P>0.05)。结论ω-3多不饱和脂肪酸可选择性有效地抑制人胃腺癌AGS细胞的生长增殖。该作用可能是通过阻滞AGS细胞于G0/G1期和抑制AGS细胞能量代谢来实现的。 展开更多
关键词 Ω-3多不饱和脂肪酸 人胃腺癌细胞系 ags
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不同疾病来源的幽门螺杆菌菌株对AGS细胞动力学的影响 被引量:1
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作者 王继恒 韩跃华 +2 位作者 刘文忠 童菊芳 萧树东 《胃肠病学》 2004年第2期86-89,共4页
背景:体内外研究发现,幽门螺杆菌(H.pylori)感染可促进胃黏膜上皮细胞增殖或触发细胞凋亡,从而引起细胞动力学改变,而菌株的差异可导致不同的结果。目的:通过体外实验观察不同疾病来源的H.pylori菌株对人胃癌细胞株AGS的细胞活力、细胞... 背景:体内外研究发现,幽门螺杆菌(H.pylori)感染可促进胃黏膜上皮细胞增殖或触发细胞凋亡,从而引起细胞动力学改变,而菌株的差异可导致不同的结果。目的:通过体外实验观察不同疾病来源的H.pylori菌株对人胃癌细胞株AGS的细胞活力、细胞凋亡和细胞周期的影响,以确定不同疾病来源H.pylori菌株的细胞毒性是否存在差异。方法:采用聚合酶链反应(PCR)鉴定分离自胃癌和胃炎患者的H.pylori菌株的毒力基因和相关亚型。将AGS细胞分别与H.pylori菌株共培养,采用四唑蓝(MTT)比色法检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期。结果:cagA、vacA、iceA和babA2基因和相关亚型在胃癌和胃炎H.pylori菌株中呈均匀分布。不同菌株抑制AGS细胞活力和促进细胞凋亡的能力虽有强弱差别,但胃癌菌株与胃炎菌株之间不存在整体上的差别。多数H.pylori菌株能抑制AGS细胞周期的G1/S期转换。结论:不同H.pylori菌株对共培养的AGS细胞动力学的影响存在差异,但胃癌菌株与胃炎菌株的细胞毒性无整体上的差别。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 ags细胞 细胞动力学 脱噬作用 细胞周期 聚合酶链反应
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三叶因子-2过表达对胃癌细胞株AGS增殖的影响 被引量:2
6
作者 司艺玲 张金英 赵亚力 《解放军医学院学报》 CAS 2016年第6期621-624,共4页
目的探讨三叶因子-2(trefoil factor family 2,TFF2)瞬时过表达对胃癌细胞增殖的影响及其机制。方法以真核表达质粒pcDNA3.1-Tff2转染AGS细胞,通过Western blot检测TFF2蛋白的表达,采用CCK-8检测细胞增殖能力的变化,Annexin V/PI法检测... 目的探讨三叶因子-2(trefoil factor family 2,TFF2)瞬时过表达对胃癌细胞增殖的影响及其机制。方法以真核表达质粒pcDNA3.1-Tff2转染AGS细胞,通过Western blot检测TFF2蛋白的表达,采用CCK-8检测细胞增殖能力的变化,Annexin V/PI法检测其凋亡。结果 pcDNA3.1-Tff2转染AGS细胞后TFF2蛋白表达水平较pc DNA3.1空质粒对照组升高5倍以上,pc DNA3.1-Tff2转染组AGS细胞增殖受到明显抑制,CCK-8实验96 hOD_(490nm)吸光度值较pc DNA3.1空质粒组显著下降(0.296 vs 2.108,P<0.01),凋亡率显著升高[(15.1%±1.21%)vs(5.49%±0.32%),P<0.01]。结论 TFF2在胃癌细胞中过表达可抑制其增殖并促进其凋亡,补充外源性TFF2可能成为一种有效抑制胃癌进展的治疗途径。 展开更多
关键词 三叶因子-2 胃癌细胞株ags 胃癌
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幽门螺杆菌对AGS细胞蛋白激酶C同工酶表达的影响 被引量:1
7
作者 姜媛媛 李建生 +2 位作者 何利华 孟凡亮 张建中 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2007年第3期280-283,共4页
目的研究PKC同工酶在H.pylori感染引起胃癌发生中起作用。方法将幽门螺杆菌和人胃上皮腺癌细胞系AGS细胞共培养(细菌∶细胞=200∶1),在幽门螺杆菌攻击AGS细胞后的0h、0.5h、1h、4h、6h、12h、24h时间点分别提取AGS细胞的总RNA,同时提取... 目的研究PKC同工酶在H.pylori感染引起胃癌发生中起作用。方法将幽门螺杆菌和人胃上皮腺癌细胞系AGS细胞共培养(细菌∶细胞=200∶1),在幽门螺杆菌攻击AGS细胞后的0h、0.5h、1h、4h、6h、12h、24h时间点分别提取AGS细胞的总RNA,同时提取相对应时间点平行培养的未受幽门螺杆菌攻击的AGS细胞的总RNA作为对照组,以Beta-actin为内参照,应用Taq-Man实时荧光定量RT-PCR技术研究这些样品的PKC同工酶的mRNA变化情况。结果与对照组相比,PKCε、PKCγ、PKCι、PKCζ、PKCα mRNA水平呈现增高趋势;PKCθ mRNA水平呈现持续下降趋势;PKCδ mRNA水平与对照组呈现一致表达趋势。结论H.pylori可能通过上调具有肿瘤增殖活性的PKCα、ε、γ、ι、ζ,下调了具有凋亡活性的PKCθ,参与H.pylori引起胃癌的发生过程。H.pylori对PKCδ mRNA水平没有影响。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 蛋白激酶C 胃癌 ags细胞 TaqMan实时荧光定量RT-PCR
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稳定表达miR-218的AGS细胞系的建立
8
作者 高采平 龙思泽 李良平 《实用医院临床杂志》 2013年第6期23-26,共4页
目的构建稳定表达miR-218的AGS细胞系。方法合成miR-218的前体cDNA,并将其插入到pRNAiCMV3.2 miR真核表达载体上。用脂质体Lipofectamine 2000介导重组质粒导入AGS细胞。用含G418的培养基筛选稳定表达miR-218的细胞株,并用TaqMan定量PC... 目的构建稳定表达miR-218的AGS细胞系。方法合成miR-218的前体cDNA,并将其插入到pRNAiCMV3.2 miR真核表达载体上。用脂质体Lipofectamine 2000介导重组质粒导入AGS细胞。用含G418的培养基筛选稳定表达miR-218的细胞株,并用TaqMan定量PCR方法鉴定稳转细胞株的稳定性。结果分离培养出稳定高表达miR-218的单克隆细胞株。结论该实验成功建立了稳定表达miR-218的AGS细胞系,从而为今后研究miR-218的功能提供实验基础。 展开更多
关键词 MIR-218 稳转细胞系 ags 胃癌
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四嗪二甲酰胺诱导人胃癌AGS、SGC7901细胞系凋亡及其分子机制的实验研究
9
作者 吕亚萍 周永列 +3 位作者 胡惟孝 邱莲女 饶国武 王文松 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期1105-1113,共9页
目的:观察四嗪二甲酰胺(ZGDHu-1)体外抑制胃癌细胞株 AGS 和 SGC7901增殖并诱导细胞凋亡及其作用机制。方法:将不同浓度的 ZGDHu-1与 AGS 和 SGC7901细胞在体外培养,用台盼蓝染色、SRB 法、5′-溴-2′脱氧尿苷(Brdu)-ELISA 法观察 ZGDH... 目的:观察四嗪二甲酰胺(ZGDHu-1)体外抑制胃癌细胞株 AGS 和 SGC7901增殖并诱导细胞凋亡及其作用机制。方法:将不同浓度的 ZGDHu-1与 AGS 和 SGC7901细胞在体外培养,用台盼蓝染色、SRB 法、5′-溴-2′脱氧尿苷(Brdu)-ELISA 法观察 ZGDHu-1对 AGS 和 SGC7901细胞增殖的抑制作用;用细胞形态学、DNA 凝胶电泳、DNA 含量及细胞周期分析、Annexin-V/PI 双标记、Hoechst33258荧光染色等技术检测细胞凋亡。用流式细胞术观察经 ZGDHu-1作用后 AGS 和SGC7901细胞 bcl-2、bax、P53蛋白质和 P38MAPK 和 Stat3磷酸化表达的变化的表达改变。结果:ZGDHu-1能抑制 AGS和 SGC7901细胞增殖和活力,呈现作用时间和剂量的量效关系。AGS 和 SGC7901细胞与 ZGDHu-1作用后,大部分细胞阻滞于 G_2-M 期;出现典型的细胞肜态改变,DNA 片断化,亚 G1峰检出并显著增加,Annexin-V+/PI-表达升高,Ho-echst33258荧光染色后出现凋亡细胞的特征性改变等均证实 ZGDHu-1能诱导 AGS 和 SGC7901细胞凋亡。AGS 和SGC7901细胞经不同浓度的 ZGDHu-1体外培养后,bcl-2蛋白有所下调,但主要是上调 bax 和 P53蛋白,导致 bax/bcl-2比值明显增高,均并呈现剂量依赖性;磷酸化 P38MAPK 表达增强,而磷酸化 Stat3表达降低。结论:ZGDHu-1通过诱导细胞凋亡抑制 AGS 和 SGC7901细胞增殖,其机制可能与上调 bax 和 P53的表达,增强 P38MAPK 的磷酸化和抑制 STAT3的活化有关。 展开更多
关键词 四嗪二甲酰胺 胃癌 细胞株 ags和SGC7901 增殖 细胞凋亡
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STR分型法鉴定人SW-13、293T及AGS细胞系种内及种间污染
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作者 刘国娟 蔡伟文 +1 位作者 林峻 陈鲤群 《临床医学研究与实践》 2017年第10期1-4,共4页
目的检测研究所使用的人肾上腺皮质癌细胞SW-13、人胚肾细胞293T及人胃癌细胞AGS 3种细胞系污染情况,并探索短串联重复序列(short tandem repeat,STR)分型方法检测人类细胞系污染的可靠性。方法人类基因组上的微卫星位点携带着大量STR,... 目的检测研究所使用的人肾上腺皮质癌细胞SW-13、人胚肾细胞293T及人胃癌细胞AGS 3种细胞系污染情况,并探索短串联重复序列(short tandem repeat,STR)分型方法检测人类细胞系污染的可靠性。方法人类基因组上的微卫星位点携带着大量STR,每个STR核心序列的重复次数随个体不同存在差异,作为一种DNA标记使得细胞系在DNA水平上具有个性化。通过荧光聚合酶链式反应体系扩增STR位点,检测的数据与DSMZ细胞库进行匹配以对细胞系进行鉴别。结果比对得出SW-13基本匹配,其中20个STR基因位点中只有TH01位点的两个等位基因重复数为7和8,与DSMZ细胞库中此等位基因重复数7和7有差异,其余均一致在可接受范围内。细胞系293T、AGS等位基因的重复数与DSMZ细胞库完全匹配。结论 STR分型检测方法被ATCC、DSMZ等权威机构推崇,且此研究采用20位点检测法涵盖ATCC-9位点及中检院-16位点检测法,该法权威可靠。本所3种细胞系遗传稳定,均无种内或种间污染。 展开更多
关键词 STR分型 人SW-13、293T及ags 细胞系交叉污染
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Effects of Root Extracts from <i>Panax ginseng</i>C. A. Meyer (Araliaceae) of Different Ages on K562 Cells
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作者 Xunan Lyu Yizhen Zhang +3 位作者 Qing Mu Zhou Cheng Jiakuan Chen Wenju Zhang 《American Journal of Plant Sciences》 2013年第6期1291-1296,共6页
It is well accepted in China that elder ginsengs have more bioactivity and value than younger ones. However, there is little research about the comparison of beneficial effects of ginsengs with different ages. In this... It is well accepted in China that elder ginsengs have more bioactivity and value than younger ones. However, there is little research about the comparison of beneficial effects of ginsengs with different ages. In this study, ginseng root extracts (GRE) were extracted from ginsengs of 5, 8, 12, 14, and 16 years old, respectively, using 55% ethanol and their effects on human leukemic K562 cells within 48 hours were tested by using Cell Counting Kit-8. The results show that there are significant increases in the cell viability of all the GRE groups compared with Control group within 32 hours. Furthermore, the growth curves of GRE groups were obviously distinct from each other. The cell viability of 5-year-old and 8-year-old GRE groups kept a rapid increase while that of 16-year-old GRE group showed a strong fluctuation within 28 hours. Our results demonstrate that root extracts from ginsengs of different ages contain different bioactivity constituents and have different effects on cell. 展开更多
关键词 PANAX GINSENG Root Extracts ages K562 cell line
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miR-106a通过调控PI3K/PDK1/AKT蛋白通路调节胃癌细胞生物学行为的研究
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作者 李琦 黄广智 +3 位作者 李亚军 武斌虎 肖茜 阮彩莲 《解剖学研究》 CAS 2024年第2期132-138,共7页
目的探讨miR-106a对胃癌细胞生物学行为的影响及其作用机制。方法选取AGS人胃癌细胞系,经培养后分为27个样本。所有样本随机分为miR-106a inhibitor、miR-mimic、miR-NC共计3组,分别给予miR-106a抑制剂、miR-106a模拟物及安慰剂干预。... 目的探讨miR-106a对胃癌细胞生物学行为的影响及其作用机制。方法选取AGS人胃癌细胞系,经培养后分为27个样本。所有样本随机分为miR-106a inhibitor、miR-mimic、miR-NC共计3组,分别给予miR-106a抑制剂、miR-106a模拟物及安慰剂干预。观察各组细胞存活率、细胞周期、细胞侵袭、迁移及caspase活性、Bax、Bcl-2、Casepase-3蛋白相对表达量、p85β、p-PDK1、p-AKT蛋白相对表达量。结果与miR-NC组比较,miR-106a inhibitor组AGS细胞活性降低[(分别为15.01±0.97)、(69.82±2.31)%](P<0.01);miR-106a mimics组AGS细胞G0/G1期细胞比例降低(P<0.05)(分别为17.33±1.04、58.24±0.82),G2/M和S期细胞比例升高(分别为50.11±1.12、35.64±1.07和31.56±0.92、9.24±0.25);miR-106a inhibitor组AGS细胞G0/G1期细胞比例升高(分别为78.43±1.12、58.24±0.82)(P<0.05),G2/M和S期细胞比例降低(分别为33.65±0.99、35.64±1.07和19.78±0.84、9.24±0.25)(P<0.01)。与miR-NC相比,miR-106a mimics组AGS细胞的迁移、侵袭能力增强,miR-106a inhibitor组AGS细胞的迁移、侵袭能力减弱(P<0.01);与miR-NC相比,miR-106a mimics组AGS细胞caspase-3、caspase-8、caspase-9活性降低,miR-106a inhibitor组AGS细胞caspase-3、caspase-8、caspase-9活性升高(P<0.05);miR-NC相比,miR-106a mimics组AGS细胞Bax(分别为0.69±0.07、1.48±0.15)、Casepase-3蛋白(分别为0.37±0.04、0.91±0.09)相对表达量降低,Bcl-2蛋白相对表达量升高(分别为1.53±0.12、0.94±0.09),miR-106a inhibitor组AGS细胞Bax(分别为2.07±0.21、1.48±0.15)、Casepase-3蛋白(分别为1.23±0.12、0.91±0.09)相对表达量升高,Bcl-2蛋白相对表达量降低(P<0.05)(分别为0.65±0.07、0.94±0.09);与miR-NC相比,miR-106a mimics组AGS细胞p85β(分别为1.24±0.12、0.94±0.09)、p-PDK1(分别为2.13±0.23、1.01±0.10)、p-AKT蛋白(分别为1.14±0.11、0.72±0.06)相对表达量升高,miR-106a inhibitor组AGS细胞p85β(分别为0.69±0.07、0.94±0.09)、p-PDK1(分别为0.75±0.07、1.01±0.10)、p-AKT(分别为0.53±0.05、0.72±0.06)相对表达量降低(P<0.05)。结论miRNA-106a表达能通过调控宫颈癌细胞PI3K/PDK1/AKT蛋白通路调控其细胞生物学行为,包括降低癌细胞活力、迁移和侵袭,诱导癌细胞细胞周期停滞,抑制miRNA-106a表达可能是胃癌患者治疗的新靶点之一。 展开更多
关键词 ags人胃癌细胞系 miR-106a 磷脂酰肌醇激酶 磷酸肌醇依赖性蛋白激酶-1 蛋白激酶B 癌细胞生物学行为
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杂交3倍体泥鳅鳍细胞系染色体组构成研究
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作者 郭文轩 周子昱 +4 位作者 马可馨 杨悦瑶 李逸帆 李雅娟 周贺 《安徽农业科学》 CAS 2024年第18期67-70,77,共5页
通过天然4倍体(4n=100)和2倍体(2n=50)泥鳅杂交创制不同子代杂交组合(4n♀×2n♂、2n♀×4n♂)。以传代20次的杂交3倍体泥鳅鳍细胞系为材料,采用常规冷滴片法制备染色体标本,通过吉姆萨染色确定数目及核型;通过银染法及CMA_3/DA... 通过天然4倍体(4n=100)和2倍体(2n=50)泥鳅杂交创制不同子代杂交组合(4n♀×2n♂、2n♀×4n♂)。以传代20次的杂交3倍体泥鳅鳍细胞系为材料,采用常规冷滴片法制备染色体标本,通过吉姆萨染色确定数目及核型;通过银染法及CMA_3/DA/DAPI三重荧光染色技术对其进行带型分析。结果显示:正反交3倍体鳍细胞系的染色体分裂相数目为3n=75,核型公式15m+6sm+54t,NF=96;正反交3倍体泥鳅鳍细胞系的染色体分裂相中显示有3个银染点,均位于第1组中部着丝粒染色体(M1)短臂的端部区域;正反交3倍体泥鳅鳍细胞的染色体中期分裂相中显示有3个CMA_3荧光信号点,均位于M1区域。研究表明:杂交3倍体泥鳅鳍细胞经细胞培养传代20次后的染色体组成未发生改变,其染色体数目、核型和带型与3倍体泥鳅其他体细胞结果一致。 展开更多
关键词 杂交3倍体泥鳅 鳍细胞系 核型分析 银染 CMA_3/DA/DAPI
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内源性大麻素2-AG促进HSP70基因的热应激表达 被引量:1
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作者 吴娟 屈明玥 +2 位作者 张伟 王登高 王颖莹 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第15期1458-1461,共4页
目的探讨内源性大麻素对热应激反应是否存在调控作用,及其可能的受体调控机制。方法以不同浓度(10-7、10-6、10-5mol/L)内源性大麻素2-AG(2-Arachidonylglycerol)预处理大鼠胶质瘤C6细胞1h,热刺激(42℃水浴)1h,通过RT-PCR及Western blo... 目的探讨内源性大麻素对热应激反应是否存在调控作用,及其可能的受体调控机制。方法以不同浓度(10-7、10-6、10-5mol/L)内源性大麻素2-AG(2-Arachidonylglycerol)预处理大鼠胶质瘤C6细胞1h,热刺激(42℃水浴)1h,通过RT-PCR及Western blot检测热休克蛋白70(heat shock protein70,HSP70)的mRNA及蛋白表达水平;同时观察特异性受体拮抗剂AM251或AM630的拮抗效应,探讨信号通路机制。结果内源性大麻素2-AG可显著促进热刺激处理的C6细胞HSP70基因及蛋白的表达,该调控效应由CB1介导。结论一定浓度的内源性大麻素2-AG对热刺激处理的C6细胞内HSP70基因的表达有明显促进效应,表明2-AG对细胞热应激反应可能具有一定的调控能力;同时,在C6细胞内,该调控效应主要由CB1介导。 展开更多
关键词 内源性大麻素2-ag 神经胶质瘤C6细胞株 热应激反应 HSP70 大麻素受体CB1
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AMPK对过氧化氢诱导细胞衰老的阻遏研究
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作者 陈翠 龚蕾 +1 位作者 徐晢 汪小波 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期2255-2264,共10页
【目的】构建稳定表达腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine 5′-monophosphate-activated protein kinase,AMPK)/AMPK-T172D的NIH3T3细胞株,探讨AMPK对过氧化氢(hydrogen peroxide,H 2O 2)诱导的细胞衰老的影响。【方法】采用PCR扩增AMPK基因... 【目的】构建稳定表达腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine 5′-monophosphate-activated protein kinase,AMPK)/AMPK-T172D的NIH3T3细胞株,探讨AMPK对过氧化氢(hydrogen peroxide,H 2O 2)诱导的细胞衰老的影响。【方法】采用PCR扩增AMPK基因及其突变形式AMPK-T172D,将其克隆至慢病毒载体pLVX-IRES-Puro中,构建pLVX-IRES-AMPK/AMPK-T172D重组质粒并进行双酶切验证。将构建好的重组质粒包装成慢病毒,感染NIH3T3细胞,并利用嘌呤霉素筛选获得NIH3T3稳转细胞株。采用实时荧光定量PCR及Western blotting检测稳转细胞株中AMPK的mRNA和蛋白表达情况。利用8.8 mmol/L H 2O 2处理AMPK/AMPK-T172D过表达NIH3T3细胞株,培养2 d后,采用衰老相关β-半乳糖苷酶(senescence-associated-β-galactosidase,SA-β-Gal)染色检测细胞衰老情况,利用实时荧光定量PCR检测p 53、p 21及IL-6基因的表达情况。【结果】双酶切验证结果显示,pLVX-IRES-AMPK/AMPK-T172D表达质粒构建成功。实时荧光定量PCR和Western blotting结果显示,与对照组相比,AMPK/AMPK-T172过表达的NIH3T3细胞中AMPK和AMPK-T172D mRNA和蛋白表达水平均极显著或显著升高(P<0.01;P<0.05),肉毒碱棕榈酰转移酶1(carnitine palmitoyltransferase-1,CPT-1)和脂肪酸合酶(fatty acid synthase,FAS)mRNA表达水平显著或极显著升高(P<0.05;P<0.01),SA-β-Gal细胞阳性率极显著降低(P<0.01);p 53、p 21和IL-6基因mRNA表达水平显著或极显著降低(P<0.05;P<0.01)。【结论】试验成功获得AMPK/AMPK-T172D过表达NIH3T3稳转细胞株,激活AMPK能降低H 2O 2诱导的衰老细胞中SA-β-Gal细胞阳性率和衰老相关因子p53、p21和IL-6的表达。试验结果为研究AMPK在衰老中的作用、可能的分子机制及抗衰老治疗策略提供依据。 展开更多
关键词 AMPK基因 持续激活型 稳转细胞株 NIH3T3细胞 衰老
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补肾、健脾、益气、活血法对衰老细胞周期基因表达的调控作用 被引量:20
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作者 陈方敏 赵伟康 +2 位作者 徐品初 黎志萍 姚明忠 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期837-840,共4页
目的:比较补肾、健脾、益气、活血法对衰老细胞周期基因表达的调控作用。方法:采用上述4种不同的含药血清对衰老的人胚肺二倍体成纤维细胞2BS细胞株进行处理,通过细胞寿命实验、流式细胞仪、RT-PCR、Western blot方法研究不同中药对衰... 目的:比较补肾、健脾、益气、活血法对衰老细胞周期基因表达的调控作用。方法:采用上述4种不同的含药血清对衰老的人胚肺二倍体成纤维细胞2BS细胞株进行处理,通过细胞寿命实验、流式细胞仪、RT-PCR、Western blot方法研究不同中药对衰老细胞周期及其相关基因(P16^(INK4)、Cyclin D1及PCNA)的mRNA转录和蛋白表达的影响。结果:补肾、益气中药对衰老细胞周期有一定的促进作用,并可下调衰老细胞增殖抑制基因P16和周期蛋白Cyclin D1的mRNA/蛋白表达;上调细胞周期促进增殖基因PCNAmRNA/蛋白的表达。而健脾、活血中药对细胞周期及其相关基因和蛋白表达的作用不明显。结论:补肾、益气方药对细胞周期有促进作用,其中的作用可能是通过促进P16途径的基因表达来实现。 展开更多
关键词 补肾 健脾 益气 活血 衰老 细胞周期 基因表达 调控作用
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天然二倍体和四倍体泥鳅鳍细胞系染色体组构成研究 被引量:4
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作者 李雅娟 隋燚 +4 位作者 赵睿 李霞 周贺 刘博 马海艳 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期83-88,共6页
对传代20次的天然二倍体和天然四倍体泥鳅鳍细胞系进行染色体标本制备,并对其染色体核型、Ag-NORs及CMA3/DA/DAPI三重荧光染色等进行研究。结果显示,1二倍体泥鳅鳍组织培养细胞的染色体数目为2n=50,核型公式为:2n=10m+4sm+36t,NF=64;四... 对传代20次的天然二倍体和天然四倍体泥鳅鳍细胞系进行染色体标本制备,并对其染色体核型、Ag-NORs及CMA3/DA/DAPI三重荧光染色等进行研究。结果显示,1二倍体泥鳅鳍组织培养细胞的染色体数目为2n=50,核型公式为:2n=10m+4sm+36t,NF=64;四倍体泥鳅鳍组织培养细胞的染色体数目为4n=100,核型公式为:4n=20m+8sm+72t,NF=128。2天然二倍体泥鳅鳍培养的细胞中期染色体分裂相有2个Ag-NORs,天然四倍体泥鳅鳍培养的细胞中期染色体分裂相有4个Ag-NORs,均位于第1对中部着丝粒染色体(M1)的末端。3天然二倍体泥鳅鳍培养的细胞染色体中期分裂相中CMA3阳性位点为2个,天然四倍体泥鳅鳍培养的细胞染色体中期分裂相中CMA3阳性位点为4个;均位于核仁组织区,即第1对中部着丝粒染色体(M1)的末端。结果表明,天然二倍体和四倍体泥鳅鳍培养细胞制备的染色体数目、核型和带型与体细胞一致。 展开更多
关键词 泥鳅 二倍体 四倍体 细胞系 染色体组 ag-NORS CMA3/DA/DAPI
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不同月龄大鼠脑室下区胶质细胞源性神经营养因子受体α_1的表达
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作者 曾水林 刘方舟 +4 位作者 杨宁 雷志年 王磊 朱建宝 李涛 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期604-607,共4页
目的:观察胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)受体α1(Glial cell line-derived growth factor recepterα1, GFR-α1)在1、3、8、12月龄大鼠脑室下区(SVZ)中的表达。方法:取不同月龄大鼠SVZ行冰冻切片,采用GFRα1多克隆抗体结合5′-BrdU... 目的:观察胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)受体α1(Glial cell line-derived growth factor recepterα1, GFR-α1)在1、3、8、12月龄大鼠脑室下区(SVZ)中的表达。方法:取不同月龄大鼠SVZ行冰冻切片,采用GFRα1多克隆抗体结合5′-BrdU单克隆抗体免疫组织化学单标与双标的方法染色。结果:在不同年龄大鼠SVZ可见GFR-α1、BrdU单标与双标细胞,但主要分布在SVZ前部的背外侧部分。随着年龄的增长,3种标记细胞的数量逐渐减少,且12月龄组的减少更明显。结论:GDNF可能通过GFR-α1参与调节哺乳动物脑内SVZ细胞的增殖和分化。随着年龄的增加,GFR-α1表达逐渐减少,SVZ细胞增殖、分化的能力亦减弱。 展开更多
关键词 脑室下区 胶质细胞源性神经营养因子受体α1 年龄 大鼠
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汉防己甲素对人单核细胞样细胞系U937的影响
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作者 舒丹毅 唐军民 +1 位作者 张晓明 唐岩 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 1996年第4期430-434,510,共6页
本文报导中药汉防己甲素(tetrandrine,Tet)对人单核细胞样细胞系U937的形态、细胞化学特性以及增殖分化的影响。经浓度为5×10-3mg/ml的Tet作用5天后,U937细胞的形态、细胞化学特性接近于... 本文报导中药汉防己甲素(tetrandrine,Tet)对人单核细胞样细胞系U937的形态、细胞化学特性以及增殖分化的影响。经浓度为5×10-3mg/ml的Tet作用5天后,U937细胞的形态、细胞化学特性接近于单核/巨噬细胞。3H-TdR掺入证明Tet对U937细胞的DNA合成有抑制作用。银染核仁组织者区(Ag-NOR)显示细胞核内Ag-NOR计数亦明显下降。 展开更多
关键词 汉防己甲素 U937细胞系 ~3H-TdR掺入 细胞化学 核仁组织者区相关嗜银蛋白
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联合抑制环氧合酶-2与5-脂氧合酶对胃癌细胞增殖凋亡的影响 被引量:5
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作者 陈浩莉 邹来玉 +3 位作者 李建英 王小众 陈治新 黄月红 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2007年第4期323-331,共9页
目的:通过单独及联合应用选择性COX-2抑制剂尼关舒利和5-LOX抑制剂AA861处理胃癌细胞系AGS,比较各实验组的增殖凋亡率,探讨联合抑制COX-2和5-LOX两条通路对胃癌细胞系AGS增殖凋亡的影响.方法:AGS细胞在含100 mL/L小牛血清+100 kU/L青... 目的:通过单独及联合应用选择性COX-2抑制剂尼关舒利和5-LOX抑制剂AA861处理胃癌细胞系AGS,比较各实验组的增殖凋亡率,探讨联合抑制COX-2和5-LOX两条通路对胃癌细胞系AGS增殖凋亡的影响.方法:AGS细胞在含100 mL/L小牛血清+100 kU/L青、链霉素的RPMI1640培养基中培养,取对数生长期细胞做为实验组.以相差显微镜观察药物处理前后的细胞形态改变:设立AA861(25,50,100μmol/L)组,尼美舒利(50,100,200μmol/L)组,及AA861联合尼美舒利处理组(50μmol/L AA861+100μmol/L尼美舒利),用四氮唑蓝(MTT)法在24,48,72 h测量细胞吸光度,以此检测单用及联用AA861与尼美舒利对细胞生长增殖的影响:实验通过脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)和吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)染色法检测细胞凋亡率,以DNA-LADDER法观察凋亡.结果:相差显微镜观察,药物处理组细胞与对照组相比,形态发生明显改变.MTT显示,除尼美舒利200μmol/L的24,48 h处理组及AA861 25μmol/L的24 h处理组外,尼美舒利和AA861基本呈时间、剂量依赖性抑制AGS细胞增殖.TUNEL染色法表明,尼美舒利或AA861处理组的细胞凋亡率随着剂量的增加而升高,药物处理48 h后,MTT法表明,细胞增殖在AA861组和尼美舒利组与两药联用组间相比差异显著(0.240±0.002 vs 0.207±0.001,P<0.01:0.211±0.002 vs 0.207±0.001, P<0.05);TUNEL染色法表明,单药组与两药联用组细胞凋亡率相比差异明显(AA861组: 18.67%±0.03%.尼美舒利组:20.94%±0.48% vs两药联用组:23.76%±0.92%,P<0.01):AO/ EB染色法也同时表明,细胞凋亡单药组与两药联用组相比差异明显(AA861组:18.17%±0.28%、尼美舒利组:19.35%±0.74% vs两药联用组:23.78%±0.04%,P<0.01).DNA琼脂糖凝胶电泳法显示,两药联合处理AGS细胞组与单药处理组比较,癌细胞增殖被抑制,凋亡明显增加.结论:COX-2抑制剂尼美舒利和5-LOX抑制剂AA861对胃癌AGS细胞的增殖抑制以及促凋亡作用基本呈时间浓度依赖性.联用尼关舒利和AA861抑制COX-2与5-LOX两条通路,与单独抑制其中一条通路比较,能更有效抑制胃癌细胞增殖,促进凋亡. 展开更多
关键词 环氧合酶-2 5-脂氯合酶 联合抑制 ags细胞 增殖 凋亡
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