甲基硝基亚硝基胍对哈萨克族正常食管上皮细胞LRRFIP1、ALDH1L1基因甲基化及其表达的影响

目的探讨N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)对哈萨克族(哈族)正常食管上皮细胞LRRFIP1、ALDH1L1基因甲基化及其表达的影响。方法将体外培养的哈族正常食管上皮细胞暴露于含0、0.75、1.5、3μg/mL MNNG的培养基中24 h,分别为对照组、0.75μg/mL组、1.50μg/mL组、3.00μg/mL组。用甲基化特异性聚合酶链(MSP)法检测LRRFIP1、ALDH1L1基因甲基化状态,用RT-PCR和Western Blot法检测LRRFIP1、ALDH1L1基因mRNA和蛋白表达。结果与对照组比较,各浓度组细胞LRRFIP1基因甲基化状态没有改变;各组细胞LRRFIP1基因mRNA表达水平分别为(1.021±0.237)、(2.828±0.350)、(1.453±0.179)、(1.952±0.223);与对照组比较,0.75μg/mL组和3.00μg/mL组表达均升高,差异均具有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,1.50μg/mL和3.00μg/mL组LRRFIP1蛋白表达水平均升高,分别为(4.233±0.048)、(4.519±0.033)、(5.377±0.057),差异有统计学意义(P<0.05);高浓度组细胞ALDH1L1基因有从部分甲基化向完全甲基化转变的趋势,各组ALDH1L1基因mRNA表达水平分别为(1.023±0.254)、(5.046±0.603)、(2.259±0.030)、(7.616±1.910),与对照组比较各浓度组均升高,差异均具有统计学意义(P<0.05);各组细胞ALDH1L1蛋白表达水平分别为(0.725±0.014)、(0.913±0.033)、(1.142±0.010)、(1.334±0.047),与对照组比较各浓度组均升高,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 MNNG可促进哈族正常食管上皮细胞ALDH1L1基因甲基化及LRRFIP1、ALDH1L1表达的升高。

新疆哈萨克族食管癌患者ALDH1L1基因甲基化及其与预后的关系

目的:探讨新疆哈萨克族食管癌患者ALDH1L1基因甲基化状态及其与食管癌发生及预后之间的关系。方法:采用联合亚硫酸氢钠限制性内切酶分析(COBRA)法检测28例哈萨克族食管癌及癌旁组织标本中ALDH1L1基因启动子区甲基化状况,建立Cox回归模型分析临床病理指标、ALDH1L1基因甲基化水平等因素与预后的关系。结果:28例哈族食管癌患者癌组织和癌旁正常组织的ALDH1L1基因启动子甲基化率分别为71.43%和39.28%,差异有统计学意义(P<0.05)。预后因素分析表明肿瘤浸润程度、TNM分期、淋巴结转移、癌组织ALDH1L1基因甲基化水平是影响哈萨克族食管癌预后的独立危险因素。癌组织ALDH1L1基因无甲基化患者术后生存时间长于完全甲基化患者(P<0.05)。结论:癌组织ALDH1L1基因启动子区甲基化状态与新疆哈萨克族食管癌的发生及预后有关。

星形胶质细胞报告基因小鼠定义成年小鼠脑皮质内星形胶质细胞亚群

虽然一直以来被认为是同质细胞群,不同脑区的星形胶质细胞在其生理特性方面却仍表现出差异,例如间隙连接偶联、谷氨酸摄取动力学和细胞内Ca2^+响应。最近的体内RNA谱进一步证明成人CNS中星形胶质细胞的分子异质性。星形胶质细胞异质性不仅存在于区域间,还存在于区域内。尽管皮质层的特征性层状组织和用于(天体)胶质细胞生成的多个径向神经胶质祖细胞来源,但成人大脑皮质中星形胶质细胞亚群的分子特征和功能特性基本上仍未定义。我们使用两个星形胶质细胞报告小鼠系:eaat2-tdTomato和Bac aldh1l1-eGFP,在皮质内鉴定tdT-eGFP+、tdTlow e GFP+和tdThigh eGFP+星形胶质细胞亚群(以大约1∶7∶2的比例)。tdT-eGFP+星形胶质细胞群选择性地定位于Ⅰ～Ⅱ层,并显示增加的静息膜电位和膜电阻,但降低钾通道Kir4.1的功能表达。我们还通过荧光激活细胞分选(FACS)分离个体星形胶质细胞亚群,并通过RNA-seq检测它们的转录组差异。我们发现tdT-eGFP+星形胶质细胞的全基因组转录谱与tdTlow e GFP+和tdThigh eGFP+星形胶质细胞的全基因组转录谱完全不同。特别地是一些在例如mog、mobp、Iba1和pdgfrα这样的神经胶质细胞中特异性表达的非星形胶质细胞基因,我们也在tdT-eGFP+星形胶质细胞中观察到其表达水平的升高。总体而言,我们的研究揭示了成人皮质星形胶质细胞亚群之间的分子差异,为了解其在成人皮质中的独特功能揭示了新的亮点。