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趋磁细菌AMB-1对小鼠的生物相容性探究
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作者 马晓雅 陈昌友 +2 位作者 宋涛 马洁 袁伟 《中国医学前沿杂志(电子版)》 CSCD 北大核心 2024年第4期46-54,共9页
目的在体外和体内条件下探究趋磁细菌AMB-1对BALB/c小鼠的生物相容性。方法透射电镜观察AMB-1形貌特征;显微镜拍摄AMB-1在血清中的运动,Image J计算运动速度;乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)检测AMB-1对小鼠乳腺癌细胞4T1和成纤... 目的在体外和体内条件下探究趋磁细菌AMB-1对BALB/c小鼠的生物相容性。方法透射电镜观察AMB-1形貌特征;显微镜拍摄AMB-1在血清中的运动,Image J计算运动速度;乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)检测AMB-1对小鼠乳腺癌细胞4T1和成纤维细胞L929细胞毒性;流式细胞术评价AMB-1对BALB/c小鼠骨髓来源树突细胞成熟影响;改良寇氏法计算出AMB-1对BALB/c小鼠的半数致死剂量;普鲁士蓝染色BALB/c小鼠心、肝、脾、肺、肾脏器观察AMB-1在小鼠体内的分布情况;流式细胞术检测AMB-1对BALB/c小鼠脾脏树突细胞的影响;检测小鼠BALB/c血生化指标评估其安全性;苏木精-伊红染色BALB/c小鼠心、肝、脾、肺、肾脏器,观察其组织形态变化。结果37℃条件下,AMB-1在血清中可保持运动至少120 min;AMB-1菌量超过3.3×10^(6)个时,对小鼠乳腺癌细胞4T1和成纤维细胞L929具有毒性,随菌量增加,毒性越大;AMB-1可促进骨髓来源树突细胞CD86^(+)、CD80^(+)双阳细胞的比例增大。AMB-1对BALB/c小鼠半数致死剂量为2.59×10^(10)个。AMB-1对小鼠脾脏树突细胞成熟的影响随着时间延长逐渐减弱;血生化指标在正常范围内;小鼠主要脏器无明显组织形态学变化。结论趋磁细菌AMB-1具有良好生物相容性,在体内不会引发严重免疫炎症等不良反应,具有体内应用潜能。 展开更多
关键词 趋磁细菌amb-1 生物相容性 细胞毒性 半数致死剂量
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液体深层培养趋磁细菌AMB-1的生长及产磁能力 被引量:1
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作者 龙瑞敏 谢茂彬 王士斌 《华侨大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2013年第4期415-421,共7页
采用液体深层培养法培养趋磁细菌AMB-1,考察装瓶量、铁源种类及浓度、碳源种类及浓度、氮源种类及浓度、混合碳源比例共8个因素对AMB-1生长和产磁能力的影响.研究结果表明:AMB-1能够稳定生长并合成磁小体,但是碳源种类及氮源种类对AMB-... 采用液体深层培养法培养趋磁细菌AMB-1,考察装瓶量、铁源种类及浓度、碳源种类及浓度、氮源种类及浓度、混合碳源比例共8个因素对AMB-1生长和产磁能力的影响.研究结果表明:AMB-1能够稳定生长并合成磁小体,但是碳源种类及氮源种类对AMB-1的生长影响较为明显;除琥珀酸外,AMB-1无法利用酒石酸、乙酸钠和柠檬酸作为单一碳源,而硝酸钠为最佳氮源. 展开更多
关键词 液体深层培养 amb-1 生物量 磁小体
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铁因素对趋磁螺菌AMB-1磁小体形成及其相关基因表达的影响 被引量:1
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作者 唐丽娟 陈永 +3 位作者 付新华 陈小丽 纪国强 王小柯 《潍坊医学院学报》 2011年第2期129-132,共4页
目的 观察铁(Fe3+)对趋磁螺菌AMB-1磁小体形成及相关基因表达的影响,为优化磁小体最适生长条件和探讨磁小体形成机制提供实验依据.方法 驯化的无磁性AMB-1接种到有Fe3+或无Fe3+培养基中培养,测定Cmag值和透射电镜研究磁小体形成,qR... 目的 观察铁(Fe3+)对趋磁螺菌AMB-1磁小体形成及相关基因表达的影响,为优化磁小体最适生长条件和探讨磁小体形成机制提供实验依据.方法 驯化的无磁性AMB-1接种到有Fe3+或无Fe3+培养基中培养,测定Cmag值和透射电镜研究磁小体形成,qRT-PCR检测磁小体相关基因mms13,mms6和magA表达.结果 在好氧条件下,有Fe3+培养的AMB-1 Cmag值增长明显,磁小体呈短链状排列;无Fe3+培养AMB-1无磁小体;有Fe3+比无Fe3+培养细胞mms13上调表达,magA下调表达.微氧条件下,有Fe3+比无Fe3+培养的AMB-1 Cmag值明显增高,磁小体颗粒较大,magA上调表达.结论 铁因素促进趋磁螺菌AMB-1磁小体形成,并明显影响mms13和magA基因表达. 展开更多
关键词 趋磁螺菌amb-1 磁小体 基因表达
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氧因素对趋磁螺菌AMB-1磁小体形成及其相关基因表达的影响 被引量:1
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作者 陈小丽 纪国强 +4 位作者 孔登 付新华 陈永 邢秋翠 王小柯 《潍坊医学院学报》 2012年第1期21-25,共5页
目的 观察氧因素对趋磁螺菌AMB-1生长量、磁小体形成及其相关基因表达的影响,为确定磁小体合成最适条件和研究磁小体形成机制提供实验依据.方法 在地磁有铁条件下,AMB-1经培养驯化接种,分别置于好氧和微好氧条件下培养.定时取样检测菌液... 目的 观察氧因素对趋磁螺菌AMB-1生长量、磁小体形成及其相关基因表达的影响,为确定磁小体合成最适条件和研究磁小体形成机制提供实验依据.方法 在地磁有铁条件下,AMB-1经培养驯化接种,分别置于好氧和微好氧条件下培养.定时取样检测菌液OD600和Cmag值来研究细胞生长量和磁性增长量;用透射电镜观察16h菌样的磁小体形态;qRT-PCR检测磁小体相关基因mms13,magA和mms6的表达.结果 有铁微氧种子转至好氧条件培养12h后,其OD600值较对照组显著升高,2.5h后Cmag值明显降低,磁小体链短而疏松.16h菌样mms13,magA,mms6基因表达无明显差异.有铁好氧种子转至微氧条件培养14h后,其OD600值较对照组显著降低,10h后Cmag值显著增高,磁小体呈紧密的长链分布,16h菌样mms13基因表达量增加6倍,magA和mms6明显增高.结论 好氧条件有利于AMB-1细胞的生长,微氧条件促进磁小体的形成,并明显影响mms13,magA和mms6基因表达. 展开更多
关键词 趋磁螺菌amb-1 氧因素 磁小体 基因表达
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趋磁菌AMB-1超氧化物歧化酶Fe-SOD在大肠杆菌中的表达及生理活性研究
5
作者 王齐磊 李相前 +1 位作者 徐琳寓 薛业敏 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期184-191,共8页
超氧化物歧化酶(SOD)可以减轻超阳阴离子O_2^-对细胞的毒害作用,提高菌体的抗氧化能力,从而改善菌株的生理状态。利用PCR技术,将趋磁菌AMB-1的超氧化物歧化酶基因fesod克隆至原核表达载体pET-20b(+),并在E.coli BL21(DE3)有效表达。重... 超氧化物歧化酶(SOD)可以减轻超阳阴离子O_2^-对细胞的毒害作用,提高菌体的抗氧化能力,从而改善菌株的生理状态。利用PCR技术,将趋磁菌AMB-1的超氧化物歧化酶基因fesod克隆至原核表达载体pET-20b(+),并在E.coli BL21(DE3)有效表达。重组菌株BL21(DE3)/(pET-20b-fesod-histag)在0.6 mmol/L IPTG诱导浓度下进行发酵培养,在生长前期2-14 h生长速率优于对照组E.coli BL21(DE3)/(pET-20b)。通过亲和层析柱纯化后,重组酶蛋白纯度达电泳均一,超氧化物歧化酶fesod活性最适作用温度为25℃,在25℃和45℃下酶热稳定较好,pH4.2-8.2之间酶活力稳定。趋磁菌AMB-1来源的Fe-SOD作为一种抗氧化酶,在大肠杆菌中的有效表达从一定程度上改善了宿主菌的生长情况。 展开更多
关键词 超氧化物歧化酶(SOD) 克隆表达 生理活性 酶学性质 趋磁菌amb-1
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Recover vigorous cells of Magnetospirillum magneticum AMB-1 by capillary magnetic separation 被引量:2
6
作者 李金华 葛欣 +2 位作者 张小葵 陈冠军 潘永信 《Chinese Journal of Oceanology and Limnology》 SCIE CAS CSCD 2010年第4期826-831,共6页
Cultivable magnetotactic bacteria(MTB) in laboratory can provide sufficient samples for molecular microbiological and magnetic studies.However,a cold-stored MTB strain,such as Magnetospirillum magneticum AMB-1,often l... Cultivable magnetotactic bacteria(MTB) in laboratory can provide sufficient samples for molecular microbiological and magnetic studies.However,a cold-stored MTB strain,such as Magnetospirillum magneticum AMB-1,often loses its ability to synthesize magnetosomes and consequently fails to sense the external magnetic field.It is therefore important to quickly recover vigorous bacteria cells that highly capable of magnetosome producing.In this study,a modified capillary magnetic separation system was designed to recover a deteriorating strain of Magnetospirillum magneticum AMB-1 that long-term cold-stored in a refrigerator.The results show that all cells obtained after a 3-cycle treatment were vigorous and had the ability to produce magnetosomes.Moreover,the 3rd-cycle recovered cells were able to form more magnetosome crystals.Compared with the colony formation method,this new method is time-saving,easily operated,and more efficient for recovering vigorous MTB cells. 展开更多
关键词 细菌细胞 细胞活力 AMB 毛细管 磁分离 分子微生物学 山地车 趋磁细菌
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Metamorphosis of Magnetospirillum magneticum AMB-1 cells 被引量:1
7
作者 张风丽 张葵 +3 位作者 赵三军 肖天 Michel DENIS 吴龙飞 《Chinese Journal of Oceanology and Limnology》 SCIE CAS CSCD 2010年第2期304-309,共6页
Magnetospirillum magneticum strain AMB-1 belongs to the family of magnetotactic bacteria. It possesses a magnetosome chain aligning, with the assistance of cytoskeleton filaments MamK, along the long axis of the spira... Magnetospirillum magneticum strain AMB-1 belongs to the family of magnetotactic bacteria. It possesses a magnetosome chain aligning, with the assistance of cytoskeleton filaments MamK, along the long axis of the spiral cells. Most fresh M. magneticum AMB-1 cells exhibit spiral morphology. In addition, other cell shapes such as curved and spherical were also observed in this organism. Interestingly, the spherical cell shape increased steadily with prolonged incubation time. As the actin-like cytoskeleton protein MreB is involved in maintenance of cell shapes in rod-shaped bacteria such as Escherichia coli and Bacillus subtilis, the correlation between MreB protein levels and cell shape was investigated in this study. Immunoblotting analysis showed that the quantity of MreB decreased when the cell shape changed along with incubation time. As an internal control, the quantity of MamA was not obviously changed under the same conditions. Cell shape directs cell-wall synthesis during growth and division. MreB is required for maintaining the cell shape. Thus, MreB might play an essential role in maintaining the spiral shape of M. magneticum AMB-1 cells. 展开更多
关键词 细胞骨架蛋白 磁悬浮 变态 枯草芽孢杆菌 细胞形态 免疫印迹分析 培养时间 AMB
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趋磁细菌Magnetospirillum magneticum AMB-1全细胞和纯化磁小体的磁学比较研究 被引量:10
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作者 李金华 潘永信 +4 位作者 刘青松 秦华峰 邓成龙 车仁超 杨新安 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第21期3345-3351,共7页
趋磁细菌磁小体化石是湖泊海洋沉积物的重要磁性载体和古环境替代性指标.对纯培养趋磁细菌Magnetospirillum magneticum AMB-1的全细胞样品和纯化磁小体样品的磁学和电子显微镜分析结果表明:AMB-1合成的磁小体是单畴磁铁矿,它们在胞内... 趋磁细菌磁小体化石是湖泊海洋沉积物的重要磁性载体和古环境替代性指标.对纯培养趋磁细菌Magnetospirillum magneticum AMB-1的全细胞样品和纯化磁小体样品的磁学和电子显微镜分析结果表明:AMB-1合成的磁小体是单畴磁铁矿,它们在胞内呈片段状的单链排列(由3~5条短链组成).全细胞和纯化磁小体样品之间的磁学性质的显著差异主要由静磁相互作用(与磁小体的空间排列有关)造成.对于全细胞样品,链内磁小体间的静磁相互作用强,而链间的静磁相互作用弱,其δ比值为3.0;对于纯化磁小体样品,磁小体链的坍塌聚集导致链间和颗粒间的静磁相互作用都明显增强,导致样品的矫顽力降低,δ比值降至1.5.这些结果对于认识磁小体化石的古地磁学和环境磁学意义以及拓展磁小体在生物材料方面的应用具有参考价值. 展开更多
关键词 趋磁细菌amb-1 纯化磁小体 磁滞回线 一阶反转曲线(FORC) Verwey转换 Moskowitz检验
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趋磁细菌AMB-1生物矿化相关蛋白Mms6参与磁小体的合成 被引量:2
9
作者 王宽 葛欣 +1 位作者 刘巍峰 陈冠军 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期187-192,共6页
【目的】研究趋磁细菌AMB-1生物矿化相关蛋白Mms6与磁小体合成的关系。【方法】在液体静置培养条件和好氧条件下对AMB-1进行培养,分析基因mms6在不同培养条件下转录水平的变化;对基因mms6进行基因敲除,分析突变株的生长和产磁变化。【... 【目的】研究趋磁细菌AMB-1生物矿化相关蛋白Mms6与磁小体合成的关系。【方法】在液体静置培养条件和好氧条件下对AMB-1进行培养,分析基因mms6在不同培养条件下转录水平的变化;对基因mms6进行基因敲除,分析突变株的生长和产磁变化。【结果】基因mms6的转录水平随着磁小体的合成逐渐升高;mms6的突变导致菌株在液体静置培养条件下趋磁性降低约50%,但不会影响菌株的生长水平。【结论】基因mms6参与了趋磁细菌AMB-1胞内磁小体的合成。 展开更多
关键词 趋磁细菌amb-1 生物矿化 Mms6 磁小体
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A comparative study of magnetic properties between whole cells and isolated magnetosomes of Magnetospirillum magneticum AMB-1 被引量:3
10
作者 LI JinHua PAN YongXin +4 位作者 LIU QingSong QIN HuaFeng DENG ChengLong CHE RenChao YANG XinAn 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2010年第1期38-44,共7页
The magnetic properties of magnetosome magnetite are of interdisciplinary interest because magnetosomes are potential carriers of natural remanent magnetization and paleoenvironment, as well as novel nano-biomaterials... The magnetic properties of magnetosome magnetite are of interdisciplinary interest because magnetosomes are potential carriers of natural remanent magnetization and paleoenvironment, as well as novel nano-biomaterials in biotechnological and biomedical applications. We carried out magnetic and electron transmission microscopy analyses of fresh Magnetospirillum magneticum AMB-1 whole cells and isolated magnetosomes. Results revealed that AMB-1 synthesized single-domain magnetite magneto-somes, which are arranged in the form of linear fragmental chain. The distinct differences of magnetic properties between these two samples can be faithfully interpreted in terms of spatial arrangement of magnetosomes and magnetostatic interaction. For the whole cells, the strong intra-chain interactions and weak inter-chain interactions generate behaviors of non-interacting uniaxial single-domain particles. Its δ-ratio is 3.0 and passes the Moskowitz test. In contrast, the isolated magnetosome sample has reduced values of coercivity and δ-ratio (1.5), due to increasing three-dimensional magnetostatic interactions and collapse of magneto-some chains. These observations provide useful insights into applications of the biogenic magnetite (magnetosomes) in magnetic nano-materials and magnetofossils in the paleomagnetic and environmental magnetism. 展开更多
关键词 磁悬浮 细胞 磁特性 弱相互作用 生物医学应用 纳米生物技术 磁性纳米材料 生物材料
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ScFv(3G11)-mms13融合基因克隆及表达载体构建
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作者 纪国强 邢秋翠 +2 位作者 孔登 付新华 王小柯 《潍坊医学院学报》 2013年第3期168-170,211,共4页
目的通过重叠延伸拼接PCR(SOE-PCR)技术克隆融合基因ScFv(3G11)-mms13并构建融合蛋白表达载体pET30a(+)-ScFv(3G11)-mms13,为重组制备肿瘤靶向细菌磁小体提供转基因载体。方法根据mms13基因和ScFv(3G11)基因的序列,设计以PCR引物,以克... 目的通过重叠延伸拼接PCR(SOE-PCR)技术克隆融合基因ScFv(3G11)-mms13并构建融合蛋白表达载体pET30a(+)-ScFv(3G11)-mms13,为重组制备肿瘤靶向细菌磁小体提供转基因载体。方法根据mms13基因和ScFv(3G11)基因的序列,设计以PCR引物,以克隆载体pMD18-mms13和pMD18-ScFv为模板,采用SOE-PCR技术构建融合基因ScFv-Linker-mms13。进而将融合基因ScFv-mms13与pET30a(+)连接构建重组表达载体pET30a(+)-ScFv-mms13,测序后应用软件DNAMAN进行分析。结果应用重叠延伸拼接PCR方法构建融合基因ScFv-linker-mms13(1158bp),然后通过克隆技术得到重组质粒pMD18-ScFvmms13。将融合基因ScFv-Linker-mms13插入到pET30a(+)构建了重组表达载体pET30a(+)-ScFv-mms13;菌落PCR、酶切、DNA测序鉴定结果均表明目的片段准确地插入到表达载体中。结论通过SOE-PCR技术扩增了预先设计的长达1158bp的融合基因片段ScFv-Linker-mms13,并成功构建了重组质粒pMD18-ScFv-mms13及重组表达载体pET30a(+)-ScFv-mms13,为磁小体用于肿瘤靶向治疗研究提供了实验材料。 展开更多
关键词 amb-1 mms13 单链抗体 重叠延伸拼接PCR 融合基因
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黄芪对小鼠骨髓细胞增殖和白细胞介素-1的影响 被引量:8
12
作者 王广丽 邱世翠 +1 位作者 李淑珍 柏学莲 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 2002年第16期27-28,共2页
目的 :观察黄芪对小鼠造血功能和IL - 1产生的影响。方法 :用 10 0 %黄芪浸出液给小白鼠连续灌胃10d ,1次 /d ,检测小鼠骨髓细胞增殖反应和IL - 1的产生。结果 :黄芪组对以上两项免疫学指标均有明显的增强作用 ,均与对照组相比有非常显... 目的 :观察黄芪对小鼠造血功能和IL - 1产生的影响。方法 :用 10 0 %黄芪浸出液给小白鼠连续灌胃10d ,1次 /d ,检测小鼠骨髓细胞增殖反应和IL - 1的产生。结果 :黄芪组对以上两项免疫学指标均有明显的增强作用 ,均与对照组相比有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。结论 :黄芪可促进小鼠骨髓细胞增殖反应和IL - 展开更多
关键词 黄芪 小鼠 骨髓细胞增殖 白细胞介素-1
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1%申嗪霉素悬浮剂防治苹果斑点落叶病田间药效试验报告 被引量:1
13
作者 许贺晓 田双双 《现代园艺》 2012年第14期157-157,共1页
为验证1%申嗪霉素悬浮剂对苹果斑点落叶病的防治效果及合理施用剂量和安全性,为生产上大面积推广提供科学依据,特进行此试验。
关键词 1%申嗪霉素悬浮剂 苹果斑点落叶病 防治
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高磁性与无磁性趋磁细菌的获得及磁小体释放技术研究 被引量:1
14
作者 张宇红 肖天 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期1-4,10,共5页
利用特殊的磁富集传代法获得高磁性和无磁性AMB-1菌株。通过透射电子显微镜(TEM)观察和Cmag值测定,对这两种菌株进行了验证。优选了条件,使高磁性AMB-1菌株在培养192 h后出现自溶现象,磁小体从细胞内释放出来。
关键词 amb-1 纳米磁小体 磁小体释放
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趋磁螺菌中磁小体链装配相关基因及其功能
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作者 解春兰 郑平 潘卫东 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期610-615,共6页
趋磁细菌(MTB)依赖于体内磁小体结构在磁场中取向,多个磁小体以一定的组织形式排列是形成菌体内生物磁罗盘的重要环节.多数趋磁细菌中磁小体成链排列,有效增加了细胞磁偶极矩,从而使菌体表现出在环境磁场中定向的能力.趋磁螺菌M.magneti... 趋磁细菌(MTB)依赖于体内磁小体结构在磁场中取向,多个磁小体以一定的组织形式排列是形成菌体内生物磁罗盘的重要环节.多数趋磁细菌中磁小体成链排列,有效增加了细胞磁偶极矩,从而使菌体表现出在环境磁场中定向的能力.趋磁螺菌M.magneticum AMB-1和M.gryphiswaldense MSR-1中磁小体均沿细胞长轴形成一条磁小体链.通过对相关基因突变体表型的研究,结合对磁小体链形成过程的实时动态观察,人们已初步了解MamJ、MamK和MamA等基因在磁小体链装配和维护过程中的功能.本文介绍了近年来趋磁螺菌磁小体链装配过程中重要功能性基因的研究进展,并重点分析了AMB-1和MSR-1中磁小体链装配的差异. 展开更多
关键词 趋磁螺菌amb-1和MSR-1 磁小体链 MamJ MamK MamA
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趋磁细菌的电化学活性研究
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作者 吴冉冉 田晓春 +3 位作者 吴慎剑 刘源岗 姜艳霞 赵峰 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1730-1736,共7页
采用循环伏安和计时电流等电化学手段研究了趋磁细菌(Magnetospirillum magneticum AMB-1)的电化学活性.通过对比不同培养条件下的循环伏安曲线可知,培养3 d时的菌体具有较强的电化学活性,其氧化峰出现在0.1 V处,还原峰出现在-0.2 V处;... 采用循环伏安和计时电流等电化学手段研究了趋磁细菌(Magnetospirillum magneticum AMB-1)的电化学活性.通过对比不同培养条件下的循环伏安曲线可知,培养3 d时的菌体具有较强的电化学活性,其氧化峰出现在0.1 V处,还原峰出现在-0.2 V处;溶解氧能够改变氧化峰的峰电位(0 V),并形成新的还原峰(-0.3 V);磁小体的生成则严重抑制趋磁细菌的胞外电子传递过程.实验结果表明,磁小体的形成与趋磁细菌的胞外电子传递有关. 展开更多
关键词 趋磁细菌 磁小体 生物矿化 电化学活性 循环伏安法
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