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基于AMEL基因的绵羊性别鉴定技术
被引量:
8
1
作者
管峰
朱嵊
+1 位作者
刘军
张明洲
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2008年第3期906-907,共2页
[目的]探讨将牙釉蛋白(AMEL)基因用于绵羊性别鉴定的可行性。[方法]采用酚-氯仿法从湖羊的耳皮肤组织中提取基因组DNA。分别以公羊和母羊的DNA为模板,以AMEL引物和SRY引物进行PCR扩增。[结果]经扩增后母羊得到一条来自X染色体的270bp条...
[目的]探讨将牙釉蛋白(AMEL)基因用于绵羊性别鉴定的可行性。[方法]采用酚-氯仿法从湖羊的耳皮肤组织中提取基因组DNA。分别以公羊和母羊的DNA为模板,以AMEL引物和SRY引物进行PCR扩增。[结果]经扩增后母羊得到一条来自X染色体的270bp条带,而公羊则得到270和210 bp的两条带。两种方法对10份已知DNA样品检测结果与实际性别完全一致。PCR产物的电泳条带较为清晰,相同性别电泳条带数完全一致,而不同性别间电泳条带数和片段大小差异显著。AMEL引物扩增雌性个体DNA实际电泳条带数和理论条带数一致,而来自雄性结果却不一致,这可能与非特异性扩增有关。[结论]AMEL基因比SRY基因具有更高的灵敏性,可用于判定XY染色体动物的性别。
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关键词
amel
基因
SRY基因
绵羊
性别鉴定
下载PDF
职称材料
基于AMEL基因位点差异的水牛性别PCR鉴别方法
被引量:
2
2
作者
李婷婷
左二伟
+9 位作者
李孟琪
谢龙
杨欢
卢晟盛
陆阳清
许惠艳
李永国
陆之泽
杨小淦
卢克焕
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第8期1516-1521,共6页
【目的】建立检测不同性别水牛染色体AMEL基因位点差异的PCR鉴别方法,为水牛早期胚胎性别鉴定及水牛分离精子重分析提供简便可靠的检验手段。【方法】采用PCR扩增不同性别水牛染色体中的AMEL基因,Clone Manager 9.0软件分析序列差异,BLA...
【目的】建立检测不同性别水牛染色体AMEL基因位点差异的PCR鉴别方法,为水牛早期胚胎性别鉴定及水牛分离精子重分析提供简便可靠的检验手段。【方法】采用PCR扩增不同性别水牛染色体中的AMEL基因,Clone Manager 9.0软件分析序列差异,BLASTn程序分析基因同源性,MEGA 6.06软件构建系统发育进化树。【结果】以水牛血液基因组DNA为模板、amel B1为引物,引物退火温度60℃,公水牛可扩增出两条清晰条带,长度分别为376(AMEL-X基因)和304 bp(AMEL-Y基因);母水牛仅扩增出1条清晰条带,长度为376 bp(AMEL-X基因)。与AMEL-X基因相比,水牛AMEL-Y基因缺失155-226区域的72 bp,同时存在20个基因型多态位点。临床检测结果证实,基于AMEL基因的PCR鉴别结果与实际性别的吻合率达100%,amel B1引物的灵敏度为0.5 ng模板量。BLASTn比对分析结果显示,水牛AMEL-X和AMEL-Y基因与不同哺乳动物的对应序列存在高度保守性,其相似性均接近或高于90%,与牛存在最近的亲缘关系。【结论】AMEL基因在哺乳动物中高度保守,且在不同性别水牛中呈多态性特征,以其作为分子靶标建立的水牛性别PCR鉴定方法切实可行,为水牛早期胚胎性别鉴定及水牛分离精子重分析提供了一个更便捷、高效的检验手段。
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关键词
水牛
amel
基因
位点差异
PCR
性别鉴定
下载PDF
职称材料
牙釉质基因鉴定山羊性别的研究
被引量:
2
3
作者
唐纪伟
张志国
+2 位作者
高庆华
沈波
武延风
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2011年第4期162-165,共4页
根据牙釉质(amelogenin,AMEL)同源基因在山羊X、Y染色体上存在不同程度碱基缺失的特点,设计1对引物,对山羊血液基因组DNA混合样进行PCR扩增,将PCR产物纯化、克隆并测序;然后对46个山羊血液DNA样本(♀:22个,♂:24个)进行性别鉴定。结果显...
根据牙釉质(amelogenin,AMEL)同源基因在山羊X、Y染色体上存在不同程度碱基缺失的特点,设计1对引物,对山羊血液基因组DNA混合样进行PCR扩增,将PCR产物纯化、克隆并测序;然后对46个山羊血液DNA样本(♀:22个,♂:24个)进行性别鉴定。结果显示,雌性山羊样品经扩增只产生一条非特异性条带,雄性山羊样品产生一条非特异性条带和一条特异性条带;非特异性片段长度为349 bp,特异性片段为289 bp;46个山羊血液DNA样本鉴定结果与实际性别对比,雌性准确率为100%(22/22),雄性准确率为100%(24/24)。
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关键词
牙釉质基因
山羊
PCR
性别鉴定
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职称材料
基于牙釉质基因巢式PCR性别鉴定超微量DNA检测方法的建立
被引量:
1
4
作者
唐纪伟
高庆华
《塔里木大学学报》
2011年第2期24-27,共4页
实验根据山羊牙釉质(AMEL)基因序列设计巢式引物,用紫外分光仪检测基因组DNA的浓度,梯度稀释(10-2μg/μL、10-3μg/μL,10-4μg/μL,10-5μg/μL),巢式PCR扩增后琼脂糖凝胶电泳检测。结果表明,利用巢式PCR方法对10 pg量基因组DNA(约3...
实验根据山羊牙釉质(AMEL)基因序列设计巢式引物,用紫外分光仪检测基因组DNA的浓度,梯度稀释(10-2μg/μL、10-3μg/μL,10-4μg/μL,10-5μg/μL),巢式PCR扩增后琼脂糖凝胶电泳检测。结果表明,利用巢式PCR方法对10 pg量基因组DNA(约3个细胞)进行扩增,得到明显目的条带。巢式PCR扩增AMEL基因鉴定性别的方法具有较高的准确性和敏感性,超微量DNA检测方法对胚胎移植前性别鉴定及提高切割胚胎移植的成活率方面具有重要的意义。
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关键词
巢式PCR
超微量DNA
牙釉质基因1
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职称材料
题名
基于AMEL基因的绵羊性别鉴定技术
被引量:
8
1
作者
管峰
朱嵊
刘军
张明洲
机构
中国计量学院生命科学学院
出处
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2008年第3期906-907,共2页
基金
浙江省自然科学基金项目(Y305107)
中国计量学院基金项目(XZ0538)
文摘
[目的]探讨将牙釉蛋白(AMEL)基因用于绵羊性别鉴定的可行性。[方法]采用酚-氯仿法从湖羊的耳皮肤组织中提取基因组DNA。分别以公羊和母羊的DNA为模板,以AMEL引物和SRY引物进行PCR扩增。[结果]经扩增后母羊得到一条来自X染色体的270bp条带,而公羊则得到270和210 bp的两条带。两种方法对10份已知DNA样品检测结果与实际性别完全一致。PCR产物的电泳条带较为清晰,相同性别电泳条带数完全一致,而不同性别间电泳条带数和片段大小差异显著。AMEL引物扩增雌性个体DNA实际电泳条带数和理论条带数一致,而来自雄性结果却不一致,这可能与非特异性扩增有关。[结论]AMEL基因比SRY基因具有更高的灵敏性,可用于判定XY染色体动物的性别。
关键词
amel
基因
SRY基因
绵羊
性别鉴定
Keywords
amel gene
SRY
gene
Sheep
Sex identification
分类号
Q754 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
基于AMEL基因位点差异的水牛性别PCR鉴别方法
被引量:
2
2
作者
李婷婷
左二伟
李孟琪
谢龙
杨欢
卢晟盛
陆阳清
许惠艳
李永国
陆之泽
杨小淦
卢克焕
机构
广西大学广西高校动物繁殖与生物技术重点实验室
亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室
武鸣县水产畜牧兽医技术推广站
出处
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第8期1516-1521,共6页
基金
国家自然科学基金项目(31460601)
南宁市科学研究与技术开发计划项目(20125191)
文摘
【目的】建立检测不同性别水牛染色体AMEL基因位点差异的PCR鉴别方法,为水牛早期胚胎性别鉴定及水牛分离精子重分析提供简便可靠的检验手段。【方法】采用PCR扩增不同性别水牛染色体中的AMEL基因,Clone Manager 9.0软件分析序列差异,BLASTn程序分析基因同源性,MEGA 6.06软件构建系统发育进化树。【结果】以水牛血液基因组DNA为模板、amel B1为引物,引物退火温度60℃,公水牛可扩增出两条清晰条带,长度分别为376(AMEL-X基因)和304 bp(AMEL-Y基因);母水牛仅扩增出1条清晰条带,长度为376 bp(AMEL-X基因)。与AMEL-X基因相比,水牛AMEL-Y基因缺失155-226区域的72 bp,同时存在20个基因型多态位点。临床检测结果证实,基于AMEL基因的PCR鉴别结果与实际性别的吻合率达100%,amel B1引物的灵敏度为0.5 ng模板量。BLASTn比对分析结果显示,水牛AMEL-X和AMEL-Y基因与不同哺乳动物的对应序列存在高度保守性,其相似性均接近或高于90%,与牛存在最近的亲缘关系。【结论】AMEL基因在哺乳动物中高度保守,且在不同性别水牛中呈多态性特征,以其作为分子靶标建立的水牛性别PCR鉴定方法切实可行,为水牛早期胚胎性别鉴定及水牛分离精子重分析提供了一个更便捷、高效的检验手段。
关键词
水牛
amel
基因
位点差异
PCR
性别鉴定
Keywords
buffalo
amel gene
PCR
locu difference
PCR
sex identification
分类号
S823.83 [农业科学—畜牧学]
下载PDF
职称材料
题名
牙釉质基因鉴定山羊性别的研究
被引量:
2
3
作者
唐纪伟
张志国
高庆华
沈波
武延风
机构
塔里木大学生命科学学院
新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室
大连金弘基种畜有限公司
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2011年第4期162-165,共4页
基金
国家自然科学基金项目(30760170)
国家科技支撑计划课题子课题(2008BADB2B05-1-3)
文摘
根据牙釉质(amelogenin,AMEL)同源基因在山羊X、Y染色体上存在不同程度碱基缺失的特点,设计1对引物,对山羊血液基因组DNA混合样进行PCR扩增,将PCR产物纯化、克隆并测序;然后对46个山羊血液DNA样本(♀:22个,♂:24个)进行性别鉴定。结果显示,雌性山羊样品经扩增只产生一条非特异性条带,雄性山羊样品产生一条非特异性条带和一条特异性条带;非特异性片段长度为349 bp,特异性片段为289 bp;46个山羊血液DNA样本鉴定结果与实际性别对比,雌性准确率为100%(22/22),雄性准确率为100%(24/24)。
关键词
牙釉质基因
山羊
PCR
性别鉴定
Keywords
amel
ogenin(
amel
)
gene
goat
PCR
sex identification
分类号
Q344.2 [生物学—遗传学]
下载PDF
职称材料
题名
基于牙釉质基因巢式PCR性别鉴定超微量DNA检测方法的建立
被引量:
1
4
作者
唐纪伟
高庆华
机构
塔里木大学畜牧科技兵团重点实验室
出处
《塔里木大学学报》
2011年第2期24-27,共4页
基金
国家自然科学基金项目(30760170)
国家科技支撑计划课题子课题(2008BADB2B05-1-3)
文摘
实验根据山羊牙釉质(AMEL)基因序列设计巢式引物,用紫外分光仪检测基因组DNA的浓度,梯度稀释(10-2μg/μL、10-3μg/μL,10-4μg/μL,10-5μg/μL),巢式PCR扩增后琼脂糖凝胶电泳检测。结果表明,利用巢式PCR方法对10 pg量基因组DNA(约3个细胞)进行扩增,得到明显目的条带。巢式PCR扩增AMEL基因鉴定性别的方法具有较高的准确性和敏感性,超微量DNA检测方法对胚胎移植前性别鉴定及提高切割胚胎移植的成活率方面具有重要的意义。
关键词
巢式PCR
超微量DNA
牙釉质基因1
Keywords
Nested PCR
ultratrace DNA
amel gene
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于AMEL基因的绵羊性别鉴定技术
管峰
朱嵊
刘军
张明洲
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2008
8
下载PDF
职称材料
2
基于AMEL基因位点差异的水牛性别PCR鉴别方法
李婷婷
左二伟
李孟琪
谢龙
杨欢
卢晟盛
陆阳清
许惠艳
李永国
陆之泽
杨小淦
卢克焕
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015
2
下载PDF
职称材料
3
牙釉质基因鉴定山羊性别的研究
唐纪伟
张志国
高庆华
沈波
武延风
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2011
2
下载PDF
职称材料
4
基于牙釉质基因巢式PCR性别鉴定超微量DNA检测方法的建立
唐纪伟
高庆华
《塔里木大学学报》
2011
1
下载PDF
职称材料
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