儿童急性髓性白血病M2型AML1/ETO融合mRNA检测及其临床意义

目的 研究AML1/ETO融合mRNA在儿童急性髓性白血病M2型中的表达及其对残留白血病监测及预后的指导意义。方法 通过逆转录酶 /聚合酶链反应 (RT PCR)方法扩增M2型患者的AML1/ETO融合mRNA ,并结合临床资料综合分析。结果 3 6例AMLM2中 2 7例AML1/ETO融合基因阳性 ,占 75 %;RT PCR方法阳性率明显高于染色体分析 ;AML1/ETO融合基因阳性病人缓解率 ( 74 %)高于阴性病人 ( 5 6%) ;通过AML1/ETO融合mRNA的检测可监测体内残留白血病情况 ,AML1/ETO阳性病人经治疗后转阴并持续阴性者预后好 ;而持续阳性者预后差 ;由阴性转阳性者可预示复发。结论 RT PCR检测AML1/ETO融合mRNA为更敏感的细胞遗传学诊断方法 ,定期检查可以监测体内微小残留白血病 ,为治疗、预后判断提供了有效手段。

AML1/ETO融合转录子在白血病患者化疗及骨髓移植后的追踪观察

利用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)技术分别检测 4 9例初治病人及 12例化疗、8例BMT后病人不同时期骨髓细胞AML1/ETOmRNA的表达。结果显示 :①AML1/ETOmRNA可表达于AML M2 ,AML M4及MDS RAEB T中 ;② 9例病人化疗后、5例Allo BMT及 1例Auto PBSCT后RT PCR结果分别转为阴性并处于持续完全缓解状态 ,2例化疗病人由阴性转为阳性而后复发 ,1例化疗病人持续弱阳性后转阳性并复发。 2例Allo BMT病人移植后持续阳性并分别死于复发及GVHD。研究结果提示 ,化疗及骨髓移植可以使RT PCRAML1/ETOmRNA转为阴性 ;由阴性转阳性或持续阳性可能预示复发 。

实时定量RT—PCR方法监测急性髓系白血病患者造血干细胞移植后AML1-ETO融合基因mRNA水平的临床意义

目的评价实时定量RT—PCR（Q—PCR）方法监测AML1-ETO（＋）急性髓系白血病（AML）患者异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）后AML1-ETOmRNA水平的表达及其临床意义。方法采用基于TagMan探针的Q—PCR技术检测17例AML1-ETO（＋）AML患者allo—HSCT后不同时间骨髓标本AML1-ETOmRNA的表达。AML1-ETOmRNA水平以内参基因abl进行归一化。采用荧光原位杂交（FISH）法评估HSCT后是否达到细胞遗传学完全缓解（CCyR）。结果Q—PCR实验可重复敏感度为5个拷贝。在16例CCyR患者中，1例死于移植物抗宿主病（GVHD），1例死于感染，其余14例中位随访时间为268（70～811）d，HSCT后1个月（＋1月）AML1-ETO中位水平0（0～0．740），＋2月为0．026（0～2．900），＋3月为0．039（0～3．300）。移植时间超过12个月的5例患者中，中位随访685（385～811）d，4例仍呈AML1-ETO阳性，中位值0．078（0．003～0．120）。1例复发患者＋1月为0，＋2月为9．800，＋3月为5．600，＋110d血液学复发，AML1-ETOmRNA为390．000，＋382d死亡。结论1年内AML1-ETO持续低水平阳性不一定预示复发；对AMIJ1—ETO（＋）AML患者HSCT后定期动态监测AML1-ETO水平十分必要。

AML1/ETO阳性急性髓系白血病患者galectin-3的表达及临床意义

目的探讨AML1/ETO阳性急性髓系白血病(AML1/ETO+AML)患者半乳凝集素3(galectin-3,gal-3)表达及其临床意义。方法采用实时定量RT-PCR(RQ-PCR)法检测53例AML1/ETO+AML患者骨髓单个核细胞中gal-3mRNA表达水平,ELISA法检测患者外周血gal-3蛋白水平,分析gal-3mRNA表达与疾病预后的相关性。结果 (1)gal-3mRNA及蛋白在初诊AML1/ETO+AML患者中呈高表达(P<0.001),初诊患者gal-3mRNA与蛋白表达呈正相关(r=0.732,P<0.001),疾病完全缓解期外周血gal-3蛋白表达量下降(P<0.001);(2)初诊时gal-3mRNA表达水平越高,患者白细胞数量越低(P=0.014),CD34表达和附加染色体异常的比例越高(P=0.001,P=0.026);(3)gal-3mRNA高表达组与低表达组在完全缓解(CR)、部分缓解(PR)、诱导期死亡(即早期死亡)率上无明显差异(P>0.05),但两组患者在复发率上差异有统计学意义(P=0.029);(4)gal-3mRNA高表达组患者中位总生存率(OS)及无病生存率(DFS)均较低表达组缩短(P=0.007,P=0.015),累积复发率增高(P=0.045),但累积死亡率无明显差异(P>0.05)。Cox风险比例模型提示gal-3mRNA是影响AML1/ETO+AML患者OS及DFS的独立指标。结论骨髓gal-3mRNA有可能成为AML1/ETO+AML患者评估预后及指导治疗的重要参考指标。

两例急性髓系白血病伴t(6;21;8)(p22;q22;q22)复杂易位患者的临床与实验室研究

目的探讨2例急性髓系白血病(AML)伴 t(6;21;8)(p22;q22;q22)复杂易位患者的临床及实验室特点。方法骨髓细胞经短期24h 培养后按常规方法制备染色体标本,R 显带进行核型分析;双色双融合 AML1/ETO 探针进行丝裂间期及中期荧光原位杂交(FISH)检测 AML1/ETO 融合信号;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测 AML1/ETO 融合基因转录本;综合分析临床特征。结果2例患者常规细胞遗传学分析显示均存在 t(6;21;8)(p22;q22;q22),间期和中期 FISH 证实了核型结果;RT-PCR 检测到 AML1/ETO 融合基因转录本;尽管2例患者均诊断为 AML-M_2,但二者的免疫表型和治疗反应不同。结论 t(6;21;8)(p22;q22;q22)是一种少见的 t(8;21)(q22;q22)的复杂变异易位,还需要更多的病例以明确其临床特征和预后价值。