茵陈蒿汤对ANIT诱导的急性肝损伤的保护作用

目的:探讨茵陈蒿汤对ANIT急性肝损伤模型的保护作用,并初步探讨其对肝细胞摄取、转化、排泄胆红素的影响,揭示利胆退黄的作用机理,为后续实验建立中医阳黄证黄疸动物模型奠定基础。方法:采用α-异硫氰酸萘酯(ANIT)灌胃诱导大鼠急性肝损伤,观察大鼠ALP,ALT,AST,γ-GT活性及T-BIL,D-BIL,β-G和MDA含量,评价茵陈蒿汤保肝作用。结果:茵陈蒿汤低剂量组能使肝损伤生化指标明显改善,具有显著的保肝作用,而高、中剂量组保肝作用不明显。结论:茵陈蒿汤具有保肝利胆退黄的作用,其机理可能与降低肝细胞β-G、MDA含量,促进胆红素代谢,降低脂质过氧化物含量有关。

退黄合剂对ANIT致胆汁淤积性肝损伤的保护作用及机制研究

目的观察退黄合剂对异硫氰酸-1-萘酯(ANIT)诱导的胆汁淤积性肝损伤的保护作用。方法 SD大鼠随机分成5组,即空白对照组,ANIT模型组,退黄合剂低、中、高剂量组,大鼠在ANIT处理48 h后被处死,检测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)和碱性磷酸酶(ALP)活性及总胆红素(TBIL)和直接胆红素(DBIL)含量;肝组织做组织切片HE染色;分析肝组织中SOD和MPO活性;酶联免疫法分析肝组织中巨噬细胞炎性蛋白(MIP)-2生成;免疫印迹法检测细胞间黏附分子(ICAM)-1表达。结果与空白对照组相比,模型组ALT、AST、ALP、DBIL、TBIL、MPO和MIP-2显著增高(P<0.01),肝脏病理病变明显,肝组织ICAM-1表达上调;与模型组相比,退黄合剂呈剂量依赖地降低ALT、AST、ALP、DBIL、TBIL、MPO和MIP-2,减轻肝脏病变,下调ICAM-1的表达(P<0.05或P<0.01)。结论退黄合剂能保护ANIT诱导的胆汁淤积性肝损伤,其作用机制可能与抑制MIP-2和ICAM-1,减少中性粒细胞浸润,减轻炎症性肝脏损伤有关。

退黄合剂对ANIT诱发肝内胆汁淤积大鼠的影响

目的 观察退黄合剂对 ANIT 诱发肝内胆汁淤积大鼠的影响。方法 采用化学物质 ANIT 复制肝内胆汁淤积大鼠模型并观察退黄合剂对大鼠肝内胆汁淤积时血清、肝组织指标变化的影响并与赤丹退黄颗粒作对照。结果 退黄合剂和赤丹退黄颗粒能显著改善大鼠血清 ALT、TBIL、DBIL 以及肝组织内皮素-1(ET-1)、钠-钾-ATP 酶等指标(P<0.01),退黄合剂大剂量在某些方面优于赤丹退黄颗粒(P<0.05)。结论 退黄合剂退黄效果肯定,其作用机制可能与降低 ET-1 的含量、升高钠-钾-ATP 酶的活性,从而改善肝脏微循环,抗肝损伤有关。

民族药马蹄金提取物对D-GlaN、TAA、ANIT所致小鼠化学性肝损伤的药理作用研究

目的 :观察马蹄金对D 半乳糖胺 (D GlaN)、硫代乙酰胺 (TAA)、异硫氰酸 1 萘酯(ANIT)所致小鼠肝损伤的防治作用。方法 :以联苯双酯作阳性对照 ,用不同肝毒剂造成小鼠急性肝损伤 ,分别测定动物血清相关指标及肝脏病理切片 (D GlaN组 ) ,用t检验法比较各组间差异。结果 :马蹄金各剂量组 (32 5g·kg- 1、 16 3g·kg- 1及 8 2g·kg- 1)可降低因AN IT所致胆汁郁积型黄疸小鼠升高的血清总胆红素 (Tbil)及血清转氨酶 (ALT及AST) ;明显降低因TAA所致肝损伤小鼠的ALT (P <0 0 1) ;明显降低因D GlaN所致肝损伤小鼠的ALT及AST (P <0 0 5及P <0 0 1) ,亦明显降低肝组织中甘油三酯 (TG)含量 (P <0 0 5 ) ,病理检查显示给药组小鼠肝脏损伤程度较模型组明显减轻。结论 :马蹄金对以上不同肝损伤模型 ,有一定的防治作用 ,似为该药的功效及应用提供了实验依据。

消黄去疸汤对ANIT诱导的胆汁淤积性肝损伤大鼠的保护作用

目的:探讨消黄去疸汤改善胆汁淤积性肝损伤的疗效。方法:将28只SD大鼠按随机数字表法分为空白组(NOM)、模型组(MOD)、熊去氧胆酸组(UDCA)和消黄去疸汤组(XHQD),每组7只,各组大鼠每天给予相应药物灌胃1次,连续7 d。至第5天时,除NOM组外,其余各组大鼠予以α-萘异硫氰酸酯(ANIT)灌胃诱导胆汁淤积性肝损伤模型。监测大鼠90 min胆汁流量,计算各组大鼠肝脏指数,HE染色观察大鼠肝脏组织病理变化,透射电镜观察肝细胞超微结构,全自动生化仪检测血清中碱性磷酸酶(ALP)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、总胆红素(TBil)、直接胆红素(DBil)与总胆汁酸(TBA)含量,Elisa法检测大鼠肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、还原性谷胱甘肽(GSH)与丙二醛(MDA)的含量。采用qRT-PCR法测定大鼠肝组织中TNF-α、IL-1β以及IL-6 mRNA的表达。结果:与NOM组比较,MOD组大鼠在各个时间段胆汁流量降低,AST、ALT、ALP、γ-GT含量增加,肝脏指数升高,DBil、TBil、TBA水平升高,SOD活性及GSH、MDA水平降低,TNF-α、IL-1β以及IL-6 mRNA水平升高,差异均具有统计学意义(P<0.01)。与MOD组大鼠比较,UDCA组大鼠15、30、75、90 min时间段胆汁流量升高,XHQD组大鼠各个时间段胆汁流量均升高,UDCA与XHQD组大鼠AST、ALT、ALP、γ-GT含量减少,肝脏指数降低,DBil、TBil、TBA水平降低,SOD活性及GSH水平降低、MDA水平升高,SOD活性及GSH水平降低、MDA水平升高,TNF-α、IL-1β以及IL-6 mRNA水平降低,差异均具有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论:消黄去疸汤对胆汁淤积型肝损伤大鼠具有明显的保护作用,其作用机制可能是调节氧化应激及炎症反应。

痰热清注射液对ANIT诱导大鼠急性肝损伤的防护作用

目的探讨痰热清注射液对ANIT诱导大鼠急性肝损伤的影响。方法采用α-异硫氰酸萘酯(ANIT)灌胃诱导大鼠急性肝损伤,检测大鼠血清ALT、AST、TBA、TBIL、DBIL和IBIL水平,HE染色观察肝组织病理变化。结果痰热清注射液各剂量组均可明显降低ALT、AST、TBIL、DBIL和IBIL水平;痰热清注射液中、低剂量组均可明显降低TBA水平;痰热清注射液各剂量组能明显改善肝细胞组织坏死损伤。结论痰热清注射液对ANIT诱导的大鼠急性肝损伤具有保护作用。

三叶青提取物抗ANIT所致小鼠肝损伤作用的研究

目的研究三叶青提取物对α-异硫氰酸萘酯(ANIT)所致肝损伤小鼠的保护作用。方法 2017年1月~2018年2月选择60只小鼠并随机分为6组,分别为对照组、联苯双酯阳性药物组、模型组、三叶青提取物低、中、高剂量组[(1.0、2.0、4.0)g/kg]。采用灌胃ANIT的方式复制急性黄疸型肝炎模型,造模48 h后测其血清中ALT、AST、TBA、TBIL、TNF-α的含量;检测肝组织匀浆中SOD、MDA、GSH-Px的水平。结果三叶青提取物各剂量组均可显著降低TBIL和TNF-α水平(P<0.05),中、高剂量组可以降低血清中ALT、AST、TBA、TBIL、TNF-α含量(P<0.05),各剂量组均显著降低MDA含量,中、高剂量组可显著提高SOD活性(P<0.05),而GSH-Px水平无显著变化。结论三叶青提取物对ANIT所致小鼠肝损伤有一定的保护作用,其保护作用可能与减轻炎症因子产生、促进总胆红素的代谢、降低脂质过氧化程度有关。

复方赶黄草对ANIT致大鼠胆汁淤积性肝损伤的影响及作用机制研究

目的:探讨复方赶黄草对α-萘异硫氰酸酯(ANIT)致大鼠胆汁淤积性肝损伤的影响及作用机制。方法:SD大鼠随机分为5组,分别为正常对照组、模型组、优思弗阳性药物组及复方赶黄草低、中、高剂量组。实验动物在造模后48 h处死,检测各组血清中总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、总胆汁酸(TBA)、碱性磷酸酯酶(ALP)、丙氨酸氨基转氨酶(ALT)、门冬氨酸氨基转氨酶(AST)等指标;观察肝组织病理学改变;通过实时荧光定量-聚合酶链反应(qPCR)检测肝脏胆酸代谢通路相关基因mRNA的表达,包括牛磺胆酸钠协同转运蛋白(Ntcp)、胆盐出口泵(Bsep)及多药耐药相关蛋白2、3(Mrp2、Mrp3)和多药耐药蛋白1a、1b(Mdr1a、1b)mRNA。结果:与模型组比较,复方赶黄草能显著降低模型大鼠血清中TBIL、DBIL、TBA、ALP、ALT、AST水平(P<0.01或0.05);明显改善肝脏组织病理学;显著上调Mrp2、Mrp3、Mdr1b mRNA表达(P<0.01或P<0.05)。结论:复方赶黄草对胆汁淤积性肝损伤具有保护作用,其作用机制可能是与调节肝脏中与胆汁酸排泄及外排外源性化学物质相关基因的表达有关。

小叶黑柴胡茎叶总黄酮对ANIT所致肝内胆汁淤积大鼠的影响

目的观察小叶黑柴茎叶胡总黄酮(TFA)对ANIT所致肝内胆汁淤积大鼠的影响。方法采用化学物质α-萘异硫氰酸酯(α-naphthyl isothiocy,ANIT)复制肝内胆汁淤积大鼠模型,灌胃(ig)给药7d后,腹腔注射10%乌拉坦溶液麻醉大鼠,开腹分离总胆管,引流胆汁,记录每小时胆汁流量;观察TFA对大鼠肝内胆汁淤积时血清、肝组织指标变化的影响并与尤思弗胶囊作对照。结果与模型组相比,经TFA预防性治疗后,胆汁淤积大鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TBIL)、谷酰胺转肽酶(GGT)的活力明显降低(P<0.01),肝组织Na+,K+-ATP酶活性明显提高(P<0.01),TFA能明显提高胆汁淤积大鼠的胆汁流量(P<0.01);TFA高剂量在利胆、提高肝组织Na+,K+-ATP酶活性、降低血清TBIL、ALP活力方面优于尤思弗胶囊组。结论 TFA治疗胆汁淤积疗效确切,具有很好的临床应用前景,能开发成新一代治疗胆汁淤积的中成药。

裸茎金腰逆转ANIT 致小鼠IC 型肝损伤有效部位的筛选探究

目的筛选特色裸茎金腰Chrysosplenium nudicaule Bunge(亚吉玛)逆转ANIT致小鼠肝内胆汁淤积(IC)型肝损伤的有效部位。方法灌胃ANIT的橄榄油溶液诱导小鼠急性IC,测定小鼠血清中生化指标谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆汁酸(TBA)、直接胆红素(DBIL)和总胆红素(TBIL)的水平;RT-PCR法测定各极性部位对小鼠肝组织中小异源二聚体伴侣(SHP)、Na^(+)-牛磺胆酸转运体(NTCP)mRNA的表达的影响。结果与模型组比较,乙酸乙酯部位(EAP)和正丁醇部位(BAP)高剂量组(4.0 g/kg)能降低小鼠血清中ALT、AST、ALP、TBA、DBIL、TBIL水平(P<0.05,P<0.01),且能上调小鼠肝组织SHP、NTCP mRNA的表达(P<0.05,P<0.01)。结论乙酸乙酯和正丁醇萃取部位为裸茎金腰逆转小鼠急性IC的活性部位。

基于Anite SAS的TD-LTE IOT测试系统开发

对基于Anite9000的SAS测试系统进行了全面的介绍。首先介绍了SAS测试的必要性和基本内容,接着阐述了如何使用SAS测试系统实现TD-LTE的测试,最后对SAS的优点进行了分析。

是德科技完成对Anite的收购

是德科技公司(NYSE:KEYS)日前宣布已经完成对Anite的收购行动。Anite是业界领先的无线研发软件解决方案供应商。是德科技通过支付大约6亿美元现金将其收入麾下,旨在支持是德科技发展无线业务并扩充软件产品的战略。是德科技总裁兼首席执行官Ron Nersesian表示:"收购Anite可以增强是德科技在无线领域中的实力,同时帮助我们进一步扩充软件产品种类,以推动我们更顺利地过渡为面向软件的解决方案公司。双方的实力经过整合之后可以形成很好的互补。

藏药波棱瓜子总木脂素对ANIT诱导的小鼠肝损伤的保护作用及机制研究

目的 探讨波棱瓜子总木脂素(TLHPS)对α-萘异硫氰酸酯(ANIT)诱导的小鼠肝内胆汁淤积(intrahepatic cholestasis,IC)型肝损伤的保护作用及其作用机制。方法 将70只小鼠随机分为正常组、模型组、联苯双酯组、TLHPS各剂量组,各组连续给药7 d,在第5天给药2 h后,除正常组灌胃橄榄油溶液外,其余各组小鼠给予ANIT溶液造模。之后按照原剂量继续给药,造模48 h后,对各组小鼠进行摘眼球采血,并摘取肝脏。检测各组小鼠血清中肝功能指标谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、直接胆红素(DBIL)、总胆红素(TBIL)、总胆汁酸(TBA);炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)及肝脏抗氧化应激因子谷胱甘肽(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT);采用HE染色检测肝脏病理变化;Western Blot法检测小鼠肝组织中NLRP3、TLR-2、TLR-4、NF-κB、JNK、p38、MyD88、IL-1β蛋白表达水平。结果 与正常组比较,模型组肝脏受损情况严重,ALT、AST、ALP酶活力明显升高(P<0.01),DBIL、TBIL、TBA、MDA、TNF-α、MCP-1含量明显升高(P<0.01),CAT、GSH-PX、SOD酶活性明显降低(P<0.01),NLRP3、TLR-2、TLR-4、NF-κB、JNK、p38、MyD88、IL-1β蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。与模型组比较,联苯双酯组及TLHPS各给药组ALT、AST、ALP酶活力明显降低(P<0.01),DBIL、TBIL、TBA、MDA、TNF-α、MCP-1含量明显降低(P<0.01),CAT、GSH-PX、SOD酶活性明显升高(P<0.05,P<0.01),NLRP3、TLR-2、TLR-4、NF-κB、JNK、p38、MyD88、IL-1β蛋白表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01)。与联苯双酯组比较,TLHPS(0.4 g·kg^(-1))组ALT、AST、ALP、TBA、TBIL、DBIL含量明显升高(P<0.05,P<0.01),TLHPS各给药组SOD含量明显降低(P<0.01),TLHPS(0.05 g·kg^(-1))给药组JNK、p38、IL-1β蛋白表达水平明显上调(P<0.05,P<0.01),TLHPS(0.4、0.2、0.1 g·kg^(-1))给药组NF-κB蛋白表达明显上调(P<0.05,P<0.01),其余各组差异均无统计学意义。病理切片显示TLHPS能改善肝脏受损情况。结论 TLHPS对IC型肝损伤存在保护作用,其作用机制可能通过调控TLR4/MyD88/NF-κB、NLRP3及JNK/p38MAPK通路,从而抑制炎症反应及改善小鼠肝脏氧化应激损伤有关。

ANIT诱发大鼠肝内胆汁淤积的动态病理变化观察

目的:观察ANIT诱发大鼠胆汁淤积模型肝组织病理动态变化特点。方法:一次性给予100 mg.kg-1ANIT复制大鼠肝内胆汁淤积模型;于造模后24,48,72,96 h分4批杀鼠取材,观测大鼠肝组织病理学变化。结果:与赋形剂组比较,24 h模型组大鼠肝组织汇管区、小叶周边可见新生小胆管样上皮细胞,少量炎性细胞浸润及脂肪变,有少量胶原纤维沉积;48 h时胆管上皮细胞增生明显,呈花环状,可见少量肝细胞的坏死灶,炎性细胞浸润增多,汇管区扩大,增生胆管周围胶原沉积增加;72h时胆管上皮细胞增生范围增大,细胞扁平形,管腔宽大,外周基底膜及胶原纤维层增厚;96 h脂肪变减少,胶原纤维增生减少,增生的小胆管样上皮细胞范围开始缩小。结论:一次性给予ANIT诱发的肝内胆汁淤积大鼠模型病变表现为急性肝内胆汁淤积、肝细胞损伤及胶原纤维沉积,随着时间的延长其病理变化呈现先加重后逐渐恢复的趋势。

ANIT诱发大鼠肝内胆汁淤积的肝肾功能动态变化研究

目的观察ANIT诱发大鼠胆汁淤积形成过程中模型肝、肾功能动态变化特点。方法一次性给予100mg/kg体重ANIT复制大鼠肝内胆汁淤积模型;于造模后24h、48h、72h、96h分4批杀鼠取材,观测大鼠一般状况,肝、肾功能。结果与赋形剂组比较,模型组大鼠的体重都有不同程度的降低;肝重,肝指数呈增高的动态变化;脾重,脾指数先增高后降低的动态变化;血清AlB含量在24、48、72h维持在较低水平,到造模96h又恢复至接近正常水平;GLO、TP、CHO含量造模后无明显变化;TBil、TBA含量,ALT、AST活性在造模24h和72时呈明显增高的动态变化(P<0.01),在造模48h和96h时接近正常水平;ALP、GGT在造模后有显著增高(P<0.01),96h时数值降低;LDH活性在造模后显著下降(P<0.01),96h时升高至正常水平;BUN含量在造模后24h时有所下降,随后逐渐增高接近正常水平;CRE含量在48h,72h时显著增高(P<0.01),96h时接近恢复正常。结论①ANIT所诱发的肝内胆汁淤积大鼠模型病变表现为急性肝内胆汁淤积,肝细胞损伤。②血清TBil、TBA含量,ALT、AST活性的特殊变化提示有2次致损可能。

消黄去疸汤对胆汁淤积性肝损伤大鼠肠物理屏障及Th17/Treg平衡的影响

目的 探讨消黄去疸汤对胆汁淤积性肝损伤大鼠肠黏膜屏障及免疫的作用机制。方法 48只大鼠随机分为空白组、模型组(0.075 g/kg α-萘异硫氰酸酯)、熊去氧胆酸组(0.06 g/kg)和消黄去疸汤低、中、高剂量组(5.62、11.23、22.47 g/kg),每组8只。HE染色观察肝组织病理变化,比色法检测血清ALT、AST、TBIL、TBA水平,RT-qPCR与Western blot法检测肝组织RORγt、Foxp3 mRNA及蛋白表达,以及肠组织ZO-1、occludin、claudin-3、Jam-3 mRNA及蛋白表达,流式细胞仪检测脾脏Th17、Treg细胞百分率。结果 模型组大鼠肝细胞形态脂质样沉积,脂肪样变性,汇管区周围有结缔组织增生,伴随炎性细胞浸润;各给药组均能改善肝组织病理损伤,且高剂量组更为明显。与空白组比较,模型组血清ALT、AST、TBIL、TBA水平升高(P<0.01),肝组织RORγt mRNA及蛋白表达升高(P<0.01),Foxp3 mRNA及蛋白表达降低(P<0.01),肠组织ZO-1、occludin、claudin-3、Jam-3 mRNA及蛋白表达降低(P<0.01),脾脏Th17细胞百分率升高(P<0.01),Treg细胞百分率降低(P<0.01);与模型组比较,熊去氧胆酸组和消黄去疸汤各剂量组血清ALT、AST、TBIL、TBA水平降低(P<0.01),肝组织RORγt mRNA及蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),Foxp3 mRNA及蛋白表达升高(P<0.01),肠组织ZO-1、occludin、claudin-3、Jam-3 mRNA及蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01),脾脏Th17细胞百分率降低(P<0.01),Treg细胞百分率升高(P<0.01)。结论 消黄去疸汤可有效缓解胆汁淤积性肝损伤,其机制可能与改善肠道黏膜屏障及调节Th17/Treg免疫平衡有关。

桂枝通过调控FXR通路改善ANIT诱导的肝内胆汁淤积大鼠模型的机制研究

研究桂枝通过调控法尼醇X受体(farnesoid X receptor,FXR)通路改善α-萘异硫氰酸酯(ANIT)诱导大鼠肝内胆汁淤积的作用及机制。将40只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、熊去氧胆酸(UDCA)组(60 mg·kg-1)、桂枝60 mg·kg-1治疗组、桂枝20 mg·kg-1治疗组5组,每组8只。除正常组和模型组外,其余各组按对应浓度连续水溶液0. 005 m L·g-1体质量灌胃,每天1次,灌胃7 d;除正常对照组外,其余各组于灌胃第5天予100 mg·kg-1ANIT灌胃造模,每天1次,灌胃3 d。末次给药24 h后腹主动脉取血,检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBi L)、总胆汁酸(TBA)水平;取大鼠肝脏组织1. 5~2 cm,经10%甲醛固定,进行石蜡包埋切片,并行HE染色,免疫组化(IHC)分析FXR的表达;取大鼠肝脏组织提取RNA及蛋白,检测FXR mRNA表达及FXR下游分别与胆汁酸合成、解毒、转运相关的SHP,UGT2B4,BSEP蛋白的表达情况。结果表明,与正常组比较,模型组血清ALT,AST,TBi L,TBA的水平升高(P<0. 01),肝脏损伤严重,FXR蛋白和mRNA表达降低,SHP,UGT2B4,BSEP蛋白表达均降低(P<0. 05,P<0. 01);与模型组比较,药物组能在不同程度上降低血清ALT,AST,TBi L,TBA水平(P<0. 05,P<0. 01),改善肝脏组织损伤,增加FXR蛋白灰度值,促进FXR mRNA和FXR,SHP,BSEP和UGT2B4蛋白的表达(P <0. 05,P <0. 01)。桂枝可以缓解ANIT诱导的肝内胆汁淤积,减轻肝细胞损伤,降低血清ALT,AST,TBi L,TBA水平。其机制可能是通过FXR-SHP,FXR-UGT2B4,FXR-BSEP信号通路来进行干预。故而,在肝内胆汁淤积的发病过程中,可以尝试在桂枝改善肝内胆汁淤积方面做更进一步的探索和尝试,为临床治疗肝内胆汁淤积提供有效药物。

禾叶风毛菊醇提物对ANIT所致小鼠肝损伤的保护作用

目的观察禾叶风毛菊醇提物对α-异硫氰酸萘酯(ANIT)所致肝损伤小鼠的保护作用。方法将60只小鼠随机分为6组,分别为正常组、联苯双酯组、模型组、禾叶风毛菊醇提物低、中、高剂量组(1.0,2.0,4.0 g·kg-1)。采用灌胃ANIT花生油溶液的方式复制肝损伤模型,造模48h后眼静脉丛取血,测其血清中的丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、胆汁酸(TBA)、总胆红素(TBIL)、肿瘤坏死因子(TNF-α)的含量;剖取3份肝脏分别用于检测肝组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量,分析对TNF-αmRNA表达的影响,观察肝组织病理形态学变化。结果与模型组相比,禾叶风毛菊醇提物各剂量组均可显著降低肝损伤小鼠血清中ALT、AST、TBA、TBIL的含量(P<0.05,P<0.01);禾叶风毛菊醇提物中、高剂量组可显著降低肝损伤小鼠血清中TNF-α的含量(P<0.05,P<0.01)。禾叶风毛菊醇提物低、高剂量组可使肝损伤小鼠肝匀浆中SOD水平显著升高,MDA水平显著下降(P<0.01);中剂量组仅对MDA水平有显著影响(P<0.01);各剂量组对GSH-Px水平无显著影响。中、高剂量组均能影响肝损伤小鼠TNF-αmRNA的表达。病理切片结果显示禾叶风毛菊醇提物各剂量组对肝组织的病理变化均有改善作用。结论禾叶风毛菊醇提物对ANIT所致小鼠肝损伤有一定的保护作用,其保护作用可能与提高清除氧自由基能力,降低脂质过氧化程度以及减轻炎症反应有关。

洪连对ANIT所致肝损伤小鼠的保护作用

目的:研究洪连对α-异硫氰酸萘酯(ANIT)所致黄疸型肝损伤小鼠的保护作用,并探讨其作用机制。方法:采用灌胃ANIT(100 mg·kg-1)花生油溶液造成小鼠急性肝损伤模型,连续给药7 d,末次给药1 h后取血、肝脏,检测血清中谷氨酸-丙酮酸转氨酶(ALT),天门冬氨酸转氨酶(AST),总胆汁酸(TBA),总胆红素(TBIL)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量;检测肝组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量,PCR检测肝组织中TNF-αmRNA的表达量,苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织病理变化。结果:与模型组比较,洪连(1.0,2.0,4.0 g·kg-1)可显著降低肝损伤小鼠血清ALT,AST,TBIL和TNF-α的水平和肝匀浆中MDA含量,同时显著升高小鼠肝匀浆中GSH-Px的含量,洪连(2.0,4.0 g·kg-1)可显著降低肝损伤小鼠血清TBA的水平和显著升高肝匀浆中SOD含量(P<0.01),洪连(1.0 g·kg-1)组TBA,SOD含量与模型组比较无统计学差异。洪连提取物各剂量组均可显著降低肝组织中TNF-αmRNA相对表达量(P<0.01)。病理切片显示洪连(2.0,4.0 g·kg-1)组能显著改善肝组织的病理变化。结论:洪连对ANIT所致小鼠黄疸型肝损伤有保护作用。

护肝片对ANIT诱导的胆汁淤积大鼠的保肝利胆作用及其机制探讨

目的:探讨护肝片对α-萘异硫氰酸酯(ANIT)诱导的胆汁淤积大鼠的保肝利胆作用及其可能机制。方法:SD大鼠120只,雌雄各半,随机分为对照组、模型组、熊去氧胆酸(UDCA,30 mg/kg)组及护肝片低、中、高剂量(5、10、20 mg/kg)组,每组20只。除对照组外,其他各组大鼠灌胃给予40 mg/kg ANIT油溶液,连续14 d,诱导胆汁淤积模型。第15天起,各组灌胃给予相应药物干预,连续7 d。末次给药后,取血,分离肝脏组织。生化分析仪检测血清总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、总胆汁酸(TBA)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)水平;HE染色后光镜下观察肝组织形态学变化;PCR检测肝组织钠离子依赖型牛磺胆酸协同转运蛋白(Ntcp)、胆盐外排泵(Bsep)、多药耐药相关蛋白2(Mrp2)、多药耐药相关蛋白3(Mrp3)的mRNA表达;ELISA和免疫组化检测肝组织Ntcp、Bsep、Mrp2、Mrp3的蛋白表达。结果:①与对照组相比,模型组TBIL、DBIL、TBA、ALT、AST、ALP水平显著升高(P<0.05);与模型组相比,UDCA组及护肝片各剂量组TBIL、DBIL、TBA、ALT、AST、ALP水平明显降低(P<0.05)。护肝片对血清生化指标的影响呈剂量依赖性(P<0.05),高剂量组最为显著。②与对照组相比,模型组大鼠肝细胞和胆管上皮细胞坏死,且伴有大量炎症细胞浸润;与模型组相比,各药物治疗组的肝损伤程度均有不同程度减轻,UDCA组及护肝片高剂量组作用更为显著。③与对照组相比,模型组大鼠肝脏Ntcp、Bsep、Mrp2的mRNA表达水平显著降低(P<0.05),而Mrp3 mRNA表达水平显著升高(P<0.05);与模型组相比,UDCA组及护肝片各剂量组Ntcp、Bsep、Mrp2的mRNA表达水平明显升高(P<0.05),Mrp3 mRNA表达水平明显降低(P<0.05)。护肝片高剂量组Ntcp、Bsep、Mrp2的mRNA表达水平高于低、中剂量组(P<0.05),Mrp3 mRNA表达水平低于低、中剂量组(P<0.05)。④ELISA检测蛋白表达含量,免疫组化检测蛋白阳性表达并进行综合评分。结果显示,与对照组相比,模型组大鼠肝脏Ntcp、Bsep、Mrp2蛋白表达水平显著降低(P<0.05),Mrp3蛋白表达水平升高(P<0.05);与模型组相比,UDCA组及护肝片各剂量组Ntcp、Bsep、Mrp2蛋白表达水平明显升高(P<0.05),Mrp3蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。护肝片高剂量组Ntcp、Bsep、Mrp2蛋白表达水平高于低、中剂量组(P<0.05),Mrp3蛋白表达水平低于低、中剂量组(P<0.05)。结论:护肝片对ANIT诱导的胆汁淤积大鼠具有保肝利胆效应,且呈剂量依赖性,其作用机制与上调肝脏Ntcp、Bsep、Mrp2表达,降低Mrp3表达有关。