山东泰安地区致病性猪沙门菌氨基糖苷类耐药基因aph(3)′-Ⅱa的PCR扩增与序列分析

目的研究沙门菌对氨基糖苷类抗生素的耐药性并分析其耐药基因aph(3′)-Ⅱa的序列。方法对19株致病性猪沙门菌的氨基糖苷类抗生素耐药性进行检测;对其质粒上的aph(3′)-Ⅱa基因进行PCR扩增,选取其中任意一株(WWS171)的PCR阳性产物进行耐药基因aph(3′)-Ⅱa的序列分析。结果沙门菌对氨基糖苷类抗生素产生了广泛的耐药性,耐药率达100%;耐药基因aph(3′)-Ⅱa经PCR扩增后在13株沙门菌的质粒上出现582bp的特异性产物,与药敏试验结果的阳性符合率为68.4%,具有较高的检出率;与GenBank上发表的AF078924.1、AF188331.1、AY333434.1、AY598820.1、DQ842000.1的耐药基因aph(3′)-Ⅱa的序列完全相同。结论aph(3′)-Ⅱa的PCR检测对氨基糖苷类抗生素耐药性具有较高的特异性,aph(3′)-Ⅱa基因是决定本试验中临床分离株氨基糖苷类抗生素耐药的主要基因,为氨基糖苷类抗生素耐药性的分子流行病学监测提供了依据。

基于积因子赋权重APH农业科技进步水平的评价研究——以黑龙江省为例

为明确黑龙江省农业科技进步水平发展动态及其现状,利用文献调查法及德尔菲法构建农业科技进步水平评价体系,通过积因子赋权重层次分析法,对1986—2011年间黑龙江省农业科技进步水平进行综合评价分析。结果表明:1986—2011年黑龙江省农业科技进步水平呈明显上升趋势,1986年仅为2.5分,2011年达到96.9分,年均得分为51分,年均增长为3.78分。黑龙江农业科技进步水平发展态势良好,农业科技进步水平已达较高层次。

高耐庆大霉素肠球菌多重耐药性与aac （6′）-aph（2＂）基因的相关性研究

目的 探讨aac（6′）-aph（2＂）基因与高耐庆大霉素肠球菌（high-level gentamicin-resistant Enterococcus,HLGRE）多重耐药的相关性.方法 收集8年间临床分离肠球菌,MIC法检测HLGRE及其多重耐药情况；采用PCR-RFLP法检测随机抽样的100株HLGRE和60株非HLGRE中aac（6′）-aph （2＂）基因的分布情况.结果 共分离1615株肠球菌,其中屎肠球菌879株（54.4％）,粪肠球菌631株（39.1％）,其他肠球菌105株（6.5％）；HLGRE 1132株,其中HLGRE屎肠球菌748株（66.1％）,HLGRE 粪肠球菌384株（33.9％）.各标本中分离的肠球菌以尿液中最多,占62.1％.主要分布于干疗科（15.2％）、移植科（12.0％）、肾内科（10.7％）.HLGRE屎肠球菌对奎奴普汀-达福普汀、万古霉素、替考拉宁的耐药率均为0.0％,对利奈唑胺耐药率仅为2.0％,对其他抗生素耐药率均在77.0％以上；HLGRE粪肠球菌对利奈唑胺、万古霉素、替考拉宁的耐药率均为0.0％,对青霉素、氨苄西林的耐药率低于40.0％,对四环素、庆大霉素、高浓度庆大霉素、奎奴普汀-达福普汀的耐药率均为100.0％.随机抽取的100株HLGRE中aac（6′）-aph（2＂）基因检测的阳性率为97.0％（97株）,aac（6′）-aph（2＂）基因同HLGRE有较好的相关性（r=0.6822,P＜0.05）.PCR产物经克隆测序与GeneBank的序列99％～100％一致.结论 HLGRE较非HLGRE分离率高且多重耐药现象严重.aac（6′）-aph（2＂）基因与HLGRE之间具有较好的相关性.

实时荧光定量RT-PCR检测鹿源致病性大肠杆菌aphA基因mRNA表达水平

从临床分离的20株鹿源耐氨基糖苷类药物大肠杆菌中选取2株高度耐药菌,4株中度耐药菌和1株低度耐药菌,利用实时荧光定量RT-PCR方法检测编码磷酸转移酶aphA基因mRNA的表达水平。结果表明,2株高度耐药株Ct值(Cycle threshold,即反应管内荧光信号到达设定域值时所经历的循环数)最小,平均为23.40,但这2株之间Ct值也存在着差异;4株中度耐药株之间差异不大,Ct值平均为27.20;而1株低度耐药株Ct值最大,为31.53。这说明不同耐药程度的7株菌在mRNA表达水平上存在差异,且aphA基因的转录、表达水平与耐药水平成正相关。

中药复方制剂连黄对沙门氏菌耐药基因aph(3′)-Ⅱa mRNA表达水平的影响

通过研究中药复方制剂连黄对沙门氏菌耐药基因aph(3)′-Ⅱa的mRNA表达水平的影响,从而深入探讨连黄降低沙门氏菌对氨基糖苷类药物的耐药性作用机理。采用竞争性RT-PCR法定量分析了连黄作用前后的沙门氏菌耐药基因aph(3)′-Ⅱa的mRNA表达水平。结果表明,连黄作用后的沙门氏菌耐药基因aph(3)′-Ⅱa的mRNA表达量降低,进而降低了沙门氏菌对氨基糖苷类药物的耐药性。

基于APH法的高校课程思政教学质量评价体系构建

目前各院校各专业已普遍开始了“课程思政”的教学改革,而课程思政教学质量评价有助于课程思政教学形成闭环,具有重要的现实价值。本文在对课程思政教学质量评价存在问题分析的基础上,提出遵循多元评价主体的评价理念,以层次分析法(APH法)从教学内容评价、教学目标评价、教学方法评价、教学效果评价、师生互动评价等方面来构建课程思政教学的质量评价指标体系,进而为我国课程思政教学质量的科学评价提供有效的量化工具。

基于APH法的地方政府招商引资绩效评价体系研究

地方政府在招商引资中起到引导作用,想要更好的推进招商引资工作就必须通过构建科学、合理的绩效评价体系对招商引资工作进行监督把关,促进该项工作的实施。文章将地方政府招商引资工作作为研究对象,以加强投资环境建设为着眼点,运用层次分析法进行绩效评价体系研究。

基于APH-PCA的应急调度系统多目标优化方法研究

本文讨论在"路径最短"、"运输费用最少"、"物品完好率最大"和"道路拥堵率最小"的目标下应急资源的调度问题。根据应急网络多权重的特点,采用层次分析和主成分分析相结合的方法,将多目标问题转化为最短路径算法可用的单目标网络权值,从而得到应急资源调度的最优路径,并且通过算例证明了该方法的可行性。方法简单、实用,为在多目标下进行应急调度的路径选择提供了新的方法和思路。

新时期中埃蓝色伙伴关系构建——基于SWOT-APH分析法

在全球海洋治理和21世纪海上丝绸之路倡议的大背景下,我国提出与其他国家建立开放包容、具体务实、互利共赢的蓝色伙伴关系,这有利于我国与其他国家开展海洋资源开发与合作,共同打造海洋命运共同体。埃及作为“一带一路”的重要节点国家,构建中埃两国蓝色伙伴关系,尤其是发展中埃两国蓝色经济伙伴关系显得尤其重要。有必要引入SWOT分析法对中埃蓝色伙伴关系构建中的优势、劣势、机会、威胁等因素进行分析,由于SWOT分析作为定性研究不能将各因素的权重进行准确的定位,因此继续引入APH分析法将SWOT中各因素进行权重排序,并将各个要素的权重画成战略四边形确定两国应采取SO型战略,据此得到中埃两国在蓝色伙伴关系构建中的具体实施路径。

水稻第6染色体S5区重叠群构建、基因注释与OS-APH的克隆分析

以通过图位克隆所获得的Cosm id克隆R2 I19序列信息为基础,构建了一个长为586 kb的粳稻第6染色体S5座位的BAC重叠群(JS5-BC)。通过生物信息学方法,对JS5-BC进行了基因注释,确定该区域含有46个基因位点。经功能预测,JS5-BC重叠群中存在3个主要的基因家族,分别是木葡聚糖岩藻糖基转移酶、脂酶和黄素氧化还原酶。JS5-BC中注释基因的一个显著特点是功能相关基因密集存在,如与植物细胞壁的合成代谢相关的3个基因、与呼吸链能量代谢的黄素氧化还原酶的4个基因等都是如此。为了验证基因注释的可靠性,克隆了广亲和品种Cp17品种的OSAPH基因的cDNA,并检测了该基因的表达模式,为注释基因提供了分子证据。

浅议APH法在地理学中的应用

随着科学技术的发展，地理学的方法论问题已成为现代地理学的一个重要研究内容。本文通过具体的课题研究初步探讨了APH法在地理学中的应用前景。

澳麦APH系统粉流面食特性及应用

通过对澳麦APH各系统粉流进行各种面食制作(面包、饺子、面条),以确定适合制作何种食品以及各粉流制作各种面食时的特点,为综合利用澳麦提供必要的依据。

白桦脂醇对老年痴呆模型大鼠海马神经元APH-1及PEN-2表达的影响

[目的]探讨白桦脂醇在老年痴呆大鼠中的干预作用及可能机制,为探索老年痴呆治疗提供新的可能。[方法]选用健康成年SD大鼠,随机分为对照组、模型组、白桦脂醇低剂量组和高剂量组,每组12只,连续灌胃给药3个月后进行相关指标检测,采用Morris水迷宫实验观测大鼠空间学习记忆能力,采用双荧光素酶报告基因系统检测γ分泌酶活性,采用实时定量-聚合酶链反应(RT-PCR)法和蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测中前咽缺陷蛋白-1(APH-1)、缺氧诱导因子-1(HIF-1)、早老蛋白增强子-2(PEN-2)和环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)表达水平。[结果]水迷宫检测结果发现白桦脂醇能明显改善模型大鼠认知功能障碍;双荧光素酶报告基因系统检测结果显示白桦脂醇可以抑制γ分泌酶活性;RT-PCR法和Western Blot法检测结果显示白桦脂醇可以抑制PEN-2和CREB表达,但对APH-1和HIF-1表达无明显影响。[结论]白桦脂醇可以显著改善老年痴呆模型大鼠的行为学,提高学习记忆能力和空间认知能力,显著降低老年痴呆模型大鼠PEN-2相关基因及蛋白的作用,但对APH-1相关基因及蛋白则无明显影响。

基于APH法的水稻区域产量旱灾保险费率厘定研究——以四川省为例

四川省作为我国粮食主产区,水稻是其最重要的粮食作物,旱灾又是对水稻影响最大的自然灾害。水稻区域产量旱灾保险在缓解水稻旱灾风险影响中意义重大,而费率厘定是开展保险的前提。本文采用四川省1987年～2007年的水稻生产和旱灾相关统计数据,运用实际历史产量法(APH)在将水稻旱灾风险的单产时序值分离出来的基础上,进行了水稻区域产量旱灾保险的纯费率厘定,得出在90%和100%的保障水平下,保险纯费率分别为0.23%和0.31%。最后,对本文结论的政策性含义进行了阐述。

葡萄球菌耐药基因aph的LAMP检测方法研究

随着抗生素大量而广泛的使用,细菌的耐药性已成为世界范围内关注的问题,对细菌携带耐药基因的检测已成为生物安全调查评估的新途径。本实验应用PCR方法扩增新霉素耐药基因aph,将其克隆于p EASY-T1载体并测序。通过Genbank同源性比较,在aph基因保守区设计了一套环介导等温扩增(LAMP)特异性引物,通过对LAMP反应体系和反应条件的优化,建立了耐新霉素aph基因的LAMP检测方法,其最佳工作条件为:甜菜碱浓度为0.8 mol/L,Mg2+浓度为20 mmol/L,反应温度63℃,时间50 min。此方法可在60 min左右完成对aph基因的检测,特异性好。应用系列稀释的aph基因质粒进行敏感性检测比较,结果表明aph基因的LAMP检测灵敏度与PCR相当,检测限约20个拷贝。对38株葡萄球菌分离株的aph基因的LAMP检测表明,aph基因阳性携带率为84.2%。

水轮发电机组故障监测系统互感器选型优化设计

建设和运维成本低以及安全可靠是水电站水轮发电机组追求的目标。基于APH方法设计和优化水轮发电机组故障监测系统方案,通过设置监测系统多个属性,建立方案中互感器选择的层次分析因素矩阵模型,对系统中互感器的功效做出全面的综合评价,选择最优的互感器,并以此量化得到最优的机组故障监测系统方案。

基于协同过滤的大学生就业推荐算法研究

面对当前严峻的就业形势,提出一种基于加权余弦相似度和ALS模型的招聘推荐算法,采用APH层次分析法评估用户画像与招聘信息之间的权重关系,利用加权的余弦相似度算法对其进行评分,运用Spark ML的ALS算法对相似度矩阵进行训练,建立用户-招聘信息的推荐模型。经过实验验证,提出的招聘推荐模型在招聘信息匹配及推荐准确性方面表现出较好的效果,这一研究成果可为解决大学生就业难题提供新方法和新方向。

四川省成都市数字乡村建设水平评价指标体系构建研究

农业农村现代化是建设农业强国的必要条件,数字乡村建设是推进农业农村现代化的重要手段。构建客观科学的数字乡村建设水平评价指标体系,对推进数字乡村建设成果评价具有重要意义。文章在已有研究的基础上,结合四川省成都市数字乡村建设的实际情况和现实需求,构建了包含数字基建、数字产业、数字治理以及数字惠民4项一级指标、20项二级指标的数字乡村建设水平评价指标体系,并以国家数字乡村试点县成都市大邑县为实证对象,对其数字乡村建设水平综合评价,分析存在的问题并提出具体建议。

基于AHP和百度API的铁路遗产活化利用与乡村聚落发展研究——以滇越铁路昆宜段乡村站点为例

随着滇越铁路的逐步停运,滇越铁路逐渐从一条活跃的交通线路转变为具有重要历史文化价值的铁路遗产。以往对滇越铁路的研究更注重对铁路遗产进行保护而往往忽略了铁路遗产与周边乡村聚落的联系。选取综合条件较好的滇越铁路昆明至宜良段13个乡村站点和县级行政辖区内的乡村聚落为研究对象,首先通过实地调研建立站点本体价值评价体系,运用层次分析法评价得出13个乡村站点本体价值,其次调用百度API运算站点周边乡村聚落驾车至站点的相关信息并建立OD矩阵,比较计算得出滇越铁路昆明至宜良段开通后站点周边具有影响优势的乡村聚落数量,用熵权法计算站点乡村聚落数量权重,最后比较站点本体价值权重—优势乡村聚落数量权重的相关关系。结果表明,滇越铁路的停运导致站点与乡村聚落的发展存在不平衡的状态,从而提出乡村站点活化利用优化策略、沿线乡村聚落发展建议,为铁路遗产的再利用和铁路遗产沿线乡村聚落发展提供借鉴意义。