Apelin receptor(APJ)拮抗剂F13A对小鼠抑郁样行为的影响及起效时间

目的:明确apelin receptor(APJ)拮抗剂F13A对小鼠抑郁样行为的影响及起效时间。方法:实验小鼠随机分成对照组(Control),F13A组(F13A)和氯胺酮组(ketamine),每组9只,对照组小鼠腹腔注射生理盐水(10 ml/kg,ip)+侧脑室注射生理盐水(每职1μl,i.c.v),F13A组小鼠腹腔注射生理盐水(10 ml/kg,ip)+侧脑室注射F13A(6μg/μl,i.c.v),氯胺酮组小鼠腹腔注射氯胺酮(10 ml/kg,2 mg/ml,ip)+侧脑室注射生理盐水(1μl,i.c.v);实验分三批进行,第一批实验在注射后30 min,进行第一次强迫游泳测试(FST1),FST1后24 h进行第二次强迫游泳测试(FST2);第二批实验在注射后30 min进行第一次自发活动测试(LMT1),LMT1前24 h进行自发活动习惯化,LMT1后24 h进行第二次自发活动测试(LMT2);第三批实验注射后30 min进行FST1,FST1前24 h进行强迫游泳应激(FSS),FST1后24 h进行第二次强迫游泳测试(FST2)。结果:与对照组比较,在无FSS时,氯胺酮组小鼠不动时间显著性减少(P﹤0.01),而F13A组小鼠无明显变化;在FST2中,F13A组小鼠不动时间显著性增加(P﹤0.01),而氯胺酮组小鼠无显著性差异;在LMT1和LMT2中各组小鼠活动度均无显著性差异;在经历FSS后,在FST1中氯胺酮组、F13A组小鼠不动时间均显著性减少(P﹤0.01);在FST2中,F13A组小鼠的不动时间显著性减少(P﹤0.05),而氯胺酮组小鼠无显著性差异(P>0.05)。结论:APJ受体拮抗剂F13A在强迫游泳测试中发挥快速起效(30 min)且持久作用(24 h)的抗抑郁样潜力,并且这种作用可能与应激有关。

大鼠心肌APJ受体及caveolin-1/ERK1/2表达的年龄变化研究

目的apelin是新发现的内源性肽,其受体是G蛋白偶联受体APJ,该实验比较不同年龄大鼠心肌APJ受体及信号分子caveolin-1/ERK1/2的表达差异。方法采用West-ern blot方法观察胎鼠、乳鼠、成年鼠、老龄鼠等不同年龄阶段心肌组织APJ受体、ERK1/2、pERK1/2、caveolin-1的表达及其增龄性变化。结果随年龄增长APJ受体、caveolin-1表达增加,ERK1/2及pERK1/2随年龄增长表达减少。结论APJ受体及其caveolin-1/ERK1/2途径可能与心脏的生长发育、衰老过程有关。

全反式维甲酸调节高血压大鼠肾脏AT_1/APJ受体表达平衡

目的探讨全反式维甲酸(atRA)对自发性高血压大鼠(SHR)肾脏血管紧张素1型受体(AT1)及其类似物APJ受体表达的影响。方法采用12wk♂SHR及其同源对照WKY大鼠,经腹腔注射atRA,为期1mon。分别用实时荧光定量PCR与免疫印迹技术测定atRA治疗后SHR肾脏组织AT1和APJ受体的表达情况。结果与WKY对照组相比,SHR肾脏组织中AT1受体mRNA和蛋白水平明显升高,APJ受体表达则出现下调(P均<0·01)。而atRA治疗后SHR肾脏AT1受体表达降低,APJ表达则得到回升,同时伴有血压下降(P均<0·05)。结论长期atRA治疗可调节SHR大鼠肾脏组织中AT1/APJ受体表达的平衡,提示转录调节剂atRA很可能对人类高血压病防治具有一定价值。

Apelin-APJ系统研究进展

Apelins是由同一基因编码的具有不同分子结构的一组内源性活性肽,该类肽通过作用于7次跨膜的G蛋白偶联受体APJ而参与心血管功能、体液平衡、神经系统功能、胰岛素敏感性、摄食与饮水行为控制等多种生理与病理状态的调节,apelin-APJ系统有望成为心衰、高血压等心血管疾病以及肥胖相关疾病的治疗靶点。

Apelin/APJ系统与血管发生

Apelin/APJ系统是一种新型G蛋白偶联受体系统,在人与动物的多种组织中广泛表达。Apelin/APJ系统可影响哺乳动物的许多生物学特性,包括神经内分泌系统、心血管系统等。血管发生是指在已有血管的基础上依赖于内皮细胞,以出芽方式增殖、迁移并相互联结形成血管内膜腔,最终形成新血管的过程。血管发生在血管生理和病理条件下发挥着重要的作用,文章就近年来Apelin在血管发生研究方面所取得的进展做一综述。

胎盘及脐血管中Apelin、ApJ和AT1R表达的研究

目的探讨新的血管活性肽Apelin及其受体ApJ蛋白在人胎盘及脐带血管组织中的表达及定位,并与血管紧张素型Ⅱ1型受体(AT1R)蛋白的表达部位相比较。方法收集10例妊娠37～41周妇女(晚孕组)的胎盘组织及5例脐带血管,采用免疫组织化学(免疫组化)方法进行Apelin、ApJ及AT1R蛋白的表达及定位分析。结果(1)人胎盘组织中存在Apelin、ApJ及AT1R蛋白的表达。Apelin及其受体ApJ蛋白主要定位于胎盘滋养细胞及血管内皮细胞,部分绒毛间质细胞中有ApJ蛋白的表达。(2)Apelin-36蛋白及受体APJ蛋白在脐静脉为阳性表达,动脉血管内皮细胞为弱阳性表达,在血管内皮细胞周围的平滑肌细胞中也可见到APJ蛋白的阳性表达。(3)AT1蛋白主要表达于脐静脉血管内皮细胞,而脐动脉血管中仅有少数血管内皮细胞可见到弱阳性染色。结论胎盘及脐血管组织中,Apelin/ApJ受体作为相对独立的自分泌和旁分泌调节机制对妊娠期胎盘血管系统功能的调节可能有一定的作用。

Apelin/APJ系统与心血管系统相关性研究进展

Apelin作为一种新近发现的心血管调节物质,是血管紧张素II1型受体相关蛋白的内源性配体。Apelin/APJ系统在心血管系统中分布广泛,具有扩张血管、降血压,增强心肌收缩力,抑制心肌细胞肥大、纤维化、自噬,促进血管生成等保护作用,参与心力衰竭、冠心病,高血压,心房纤颤等多种疾病的病理生理过程,因此Apelin/APJ系统与心血管系统相关性日益受到人们的重视。

Apelin/APJ系统:动脉粥样硬化治疗新靶点

动脉粥样硬化性(As)疾病已成为人类死亡的首要病因。Apelin/APJ受体广泛存在于心血管系统,参与多种心血管疾病的发生发展。Apelin/APJ系统对动脉粥样硬化作用的研究提示,Apelin对动脉粥样硬化的发生发展具有双重作用。一方面,Apelin可促进血管平滑肌细胞、内皮细胞增殖和迁移,诱导单核细胞向内皮细胞黏附,还可促进血管新生,影响As斑块的稳定性。另一方面,Apelin可拮抗AngⅡ的作用,调控细胞内脂代谢,减少内皮细胞活性氧的产生和细胞衰老,防止巨噬细胞转化为泡沫细胞,对已形成As斑块具有一定的稳定作用,还可以抑制血小板活化,减少动脉粥样硬化并发症的发生。同时,作为保护或损伤机体的双刃剑,自噬可能是Apelin作用于动脉粥样硬化的重要靶点之一。本文从以上几个方面对Apelin/APJ系统与动脉粥样硬化的研究进行总结分析,探讨Apelin/APJ受体成为预防或治疗动脉粥样硬化靶点的可能性。

Apelin在能量平衡中的作用

新发现的生物活性肽apelin是APJ受体的天然配体,广泛分布于中枢系统和外周组织。研究表明apelin具有广泛的生理作用。该文总结了近几年来关于apelin在摄食、消化、体液平衡、肥胖和糖代谢等方面所取得的最新进展,并结合本实验室的工作,提出了今后的发展趋势。

心血管活性肽Apelin生物学功能研究进展

G蛋白偶联受体是指一大类与G蛋白偶联并参与和介导细胞外信号传递的跨膜蛋白,信号传导过程中与受体偶联的物质称为配体,对于不清楚内源性配体物质的G蛋白偶联受体称为孤儿G蛋白偶联受体。血管紧张素受体样受体是一种孤儿G蛋白偶联受体。其内源性配体Apelin新近从牛胃抽提液中被分离出来,现发现apelin的功能涉及心血管系统,中枢神经系统,免疫系统等。Apelin在血管紧张素Ⅰ转化酶的同源酶血管紧张素Ⅰ转化酶2的作用下有活性形式转变成无活性的形式。现对apelin在心血管系统以及以其它众多生物学功能研究进展作一综述。

Apelin系统的生物学特性及其作用机制

血管紧张素受体AT-1相关的受体蛋白(APJ)是G蛋白耦联受体(GPCRs)成员之一。APJ及其内源性配体Apelin(APJ endogenous ligand)在中枢和外周广泛分布,在心血管系统、内分泌系统及免疫系统等都有重要的的生物学效应。Apelin系统已经成为新药研制非常有意义的靶点。

代谢综合征大鼠主动脉Apelin及其受体的表达及意义

目的观察代谢综合征(MS)大鼠主动脉Apelin及其受体(APJ)的表达变化。方法16只雄性SD大鼠按随机数字表法均分为对照组和MS组,每组8只。MS组采用高果糖饲料(60%)喂养,对照组采用常规饲料喂养,喂养周期为10周。采用Masson染色法检测血管胶原沉积情况,酶联免疫吸附法检测大鼠血清和主动脉组织Apelin含量,免疫组化法检测大鼠主动脉组织APJ的表达。结果高果糖饮食可成功诱导高血压、高三酰甘油(TG)血症和高血糖等特征的代谢综合征模型,MS组大鼠主动脉胶原沉积明显,血清Apelin浓度和主动脉组织Apelin/APJ表达较对照组明显下调(P<0.05)。结论MS大鼠主动脉发生重构,Apelin/APJ表达下调。提示Apelin可能为新的血管保护因子。

Elabela/APJ在子痫前期胎盘组织中的表达及其临床意义

目的分析Elabela及其受体APJ在子痫前期(PE)孕妇胎盘组织中的表达、定位及血浆Elabela的分泌情况,并探讨其临床意义。方法选取2018年9月至2019年3月在成都市妇女儿童中心医院剖宫产分娩的20例PE患者为研究对象(PE组),另选取同期择期行剖宫产术的足月健康孕妇20例为对照组。术前收集两组孕妇的血浆标本,分娩后立即取胎盘组织标本。采用免疫组织化学法检测Elabela、APJ蛋白在胎盘组织中的定位,采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测Elabela、APJ mRNA在胎盘组织中的表达水平,采用ELISA检测两组孕妇外周血液循环中Elabela的分泌情况。结果Elabela主要表达于胎盘滋养层细胞中,PE组阳性染色较对照组弱[(2.18±0.37)分vs.(7.11±0.60)分,P<0.05];APJ主要表达于胎盘滋养层细胞及血管内皮细胞中,PE组阳性染色亦较对照组弱[(2.96±0.61)分vs.(8.10±0.82)分,P<0.05];PE组孕妇Elabela mRNA相对表达水平稍高于对照组,差异无统计学意义(1.78±2.01 vs.1.07±1.21,P>0.05);PE组孕妇APJ mRNA相对表达水平明显高于对照组(3.47±3.86 vs.1.19±0.46,P<0.05);PE组孕妇血浆Elabela表达水平明显低于对照组[(8.42±0.63)ng/mL vs.(11.12±0.41)ng/mL,P<0.05]。结论PE孕妇胎盘组织中Elabela及其受体APJ蛋白表达水平明显低于健康孕妇,且均定位在与PE发生密切相关的胎盘滋养层细胞中,Elabela/APJ可能参与了PE的发生、发展。

载G蛋白偶联受体APJ的磷脂纳米盘的研制

以G蛋白偶联受体APJ(即血管紧张素受体AT1相关的受体蛋白)、膜骨架蛋白(MSP)和磷脂为原料制备载APJ磷脂纳米盘。考察了不同投料比(APJ∶MSP分别为1∶2、1∶4和1∶8)和加入Bio-BEADs树脂(聚苯乙烯二乙烯基苯树脂)后4℃孵育时间(2、4和6 h)对APJ组装入磷脂纳米盘的效率和单体比例的影响。结果表明,APJ∶MSP采用1∶4,加入Bio-BEADs后4℃孵育2 h,所得的APJ磷脂纳米盘直径约10 nm,高度约5 nm。组装入该磷脂纳米盘的APJ仍具有与其拮抗剂ML221结合的能力,提示磷脂纳米盘能保留APJ的生物活性。

Elabela在子痫前期胎盘中的表达及其意义

目的探讨Elabela在子痫前期胎盘中的表达情况及其意义。方法在武警后勤学院附属医院产科收集2016年12月至2018年3月子痫前期产妇34例(子痫前期组)及健康产妇40名(对照组),检测胎盘中Elabela与APJ受体mRNA相对表达水平和蛋白表达情况,细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)磷酸化水平,并对Elabela、APJ受体、活化的ERK1/2与血压的关系进行相关性分析。结果与对照组比较,子痫前期组胎盘中Elabela和APJ受体mRNA相对表达水平降低(P<0.05);免疫组化结果显示Elabela和APJ受体在胎盘中的表达部位基本一致,主要表达于滋养层细胞和蜕膜细胞,散在表达于血管内皮细胞,主要表达部位为细胞浆和细胞膜;相比于对照组,Elabela在子痫前期组中蛋白表达降低(12.13±1.93比15.95±2.08,P=0.002),APJ受体在子痫前期组的蛋白表达也是降低的(9.22±1.56比14.57±4.17,P=0.009);两组之间ERK1/2总蛋白表达水平差异无统计学意义(对照组1.18±0.18比子痫前期组0.85±0.10,P=0.09),而相比于对照组,子痫前期组中ERK1/2活化水平明显升高(1.10±0.17比0.47±0.11,P=0.03)。Pearson相关分析结果显示Elabela mRNA水平与收缩压、舒张压呈负相关(r=-0.46,P=0.01;r=-0.44,P=0.01);APJ受体mRNA水平与收缩压、舒张压呈负相关(r=-0.47,P=0.006;r=-0.45,P=0.01);ERK1/2活化水平与收缩压呈正相关(r=0.45,P=0.04),与舒张压相关性无统计学意义(r=0.31,P=0.17)。结论 Elabela可能在胎盘发育、血管形成方面起着积极的作用,它的表达下调引起滋养层细胞浸润不足和随后的螺旋动脉重塑障碍,可能是子痫前期发病的因素之一。

Apelin研究进展

Apelin是孤独G蛋白偶联受体APJ的内源性配体,在组织中分布广泛,具有降低血压、增强心肌收缩力、调节水盐平衡、促进垂体激素释放及调节免疫等多种生物学效应。最近的研究表明,apelin是一种脂肪细胞因子,其表达与肥胖明显相关,可抑制高血糖刺激的胰岛素分泌。因此,apelin是一种重要的生理调节肽。

目血康胶囊联合羟苯磺酸钙胶囊治疗糖尿病视网膜病变临床研究

目的:探讨目血康胶囊联合羟苯磺酸钙胶囊对糖尿病视网膜病变患者血清瘦素(Leptin)、血管内皮生长因子(VEGF)、孤儿G蛋白偶联受体APJ的天然配体(Apelin)水平的影响。方法:选取糖尿病视网膜病变患者104例,按随机数字表法分为研究组和对照组各52例。对照组给予羟苯磺酸钙胶囊治疗,研究组在对照组基础上联合目血康胶囊治疗,观察2组平均视力、Leptin、VEGF、Apelin水平以及眼动脉舒张末期血流速度(Edv)、收缩期峰值血流速度(Psv)、阻力指数(RI)、搏动指数(PI)变化。结果:治疗后,2组视力均得到提升,研究组高于对照组(P<0.05);2组血清中Leptin、VEGF、Apelin含量及眼部RI、PI指标均降低,且研究组低于对照组(P<0.05);2组Edv、Psv升高,且研究组高于对照组(P<0.05)。结论:目血康胶囊联合羟苯磺酸钙可有效改善糖尿病视网膜病变患者眼部视力状态,降低血液中Leptin、VEGF、Apelin因子含量,提升眼动脉血流动力学水平。